韓歡勝，張金友，王金濤，王 雪

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 動物科技學(xué)院，黑龍江 大慶 163319）

狐貍是珍貴毛皮動物，其皮是制裘的高級原料，目前狐皮已成為世界裘皮三大支柱之一。藍(lán)狐是狐貍的一個優(yōu)良品種，我國從20世紀(jì)80年代開始引進(jìn)養(yǎng)殖，經(jīng)過近40年的發(fā)展，藍(lán)狐已成為國內(nèi)養(yǎng)殖規(guī)模最大的品種。

在經(jīng)濟(jì)動物養(yǎng)殖行業(yè)中藍(lán)狐養(yǎng)殖具有重要的地位，在我國已形成健全的產(chǎn)業(yè)鏈，為國民經(jīng)濟(jì)創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟(jì)效益，已成為特種養(yǎng)殖行業(yè)的重要組成部分。但繁殖成活率低一直制約著該行業(yè)經(jīng)濟(jì)效益的增長，亟需解決。繁殖成活率低與母狐年齡、營養(yǎng)、疫病、母性、內(nèi)分泌、光照、社會地位等因素有關(guān)［1-3］。狐是季節(jié)性長日照發(fā)情動物，繁殖期激素水平變化較大。在繁殖季節(jié)末期往往因生殖激素水平低下導(dǎo)致泌乳量少，進(jìn)而引起產(chǎn)仔率低、死亡率高等相關(guān)繁殖問題。因此，激素水平成為影響藍(lán)狐繁殖成活率的重要因素之一［4］。目前，對藍(lán)狐正常妊娠生殖激素水平的相關(guān)研究甚少。因此，本研究對繁殖季節(jié)發(fā)情盛期輸精正常妊娠母狐的生殖激素水平進(jìn)行了測定和分析，為判定正常妊娠生殖激素水平范圍和應(yīng)用外源激素進(jìn)行生殖調(diào)控提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選用發(fā)情盛期在3月中旬—4月初，輸精且已妊娠的藍(lán)狐。2018年哈爾濱華隆飼料有限公司提供11只，2020年黑龍江肇源農(nóng)場狐貉養(yǎng)殖小區(qū)提供15只，分2次采集血樣，測定血液中生殖激素濃度。

1.2 采樣及測定項目

藍(lán)狐保定后，在后腿內(nèi)側(cè)血管進(jìn)行采血。分別在妊娠第1（即第2次輸精時），20，35，50天采集血液3～5 mL，用離心機(jī)離心，分離血清，用移液槍將上清液放在EP管中，-20℃保存。送北京北方生物科技研究所對促卵泡素（FSH）、促黃體生成素（LH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）和催乳素（PRL）進(jìn)行檢測。

1.3 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

采用SPSS22.0和Excel軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。組間采用單因素方差分析，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 藍(lán)狐血液中生殖激素濃度

見表1。

表1 藍(lán)狐血液中生殖激素濃度測定結(jié)果

2.2 藍(lán)狐血液中FSH、LH動態(tài)變化

見圖1。

圖1 藍(lán)狐血液中FSH、LH動態(tài)變化

圖1結(jié)合表1可知：FSH濃度在藍(lán)狐妊娠期總體呈現(xiàn)先下降后趨于平穩(wěn)的態(tài)勢；妊娠第1天達(dá)到最高值（2.67±0.38）mIU/mL，第20天下降到最低值（1.87±0.46）mIU/mL；20～50 d盡管有小幅度上升，但妊娠20，35，50天兩兩比較均差異不顯著（P＞0.05）。LH水平在妊娠期總體呈階梯式下降的趨勢，前期下降快，后期下降緩慢；妊娠1～20 d下降速度較快，從（10.15±2.93）mIU/mL至（8.25±1.57）mIU/mL；20～35 d LH變化趨于平緩（P＞0.05）；35～50 d也較為平緩（P＜0.05）。這表明FSH和LH在妊娠期1～20 d下降較快，之后基本保持在恒定水平。

2.3 藍(lán)狐血液中E2動態(tài)變化

見圖2。

圖2 藍(lán)狐血液中E2動態(tài)變化

圖2結(jié)合表1可知：E2濃度在藍(lán)狐妊娠1～20 d下降了29.53%，20～35 d期間下降了14.12%，35～50 d下降了58.69%，4個日期E2濃度兩兩比較均差異極顯著（P＜0.01）。這表明藍(lán)狐發(fā)情盛期輸精正常妊娠E2濃度在妊娠期呈明顯的下降趨勢。

2.4 藍(lán)狐血液中P動態(tài)變化

見圖3。圖3結(jié)合表1可知：P濃度在藍(lán)狐妊娠1～20 d下降了21.62%，差異顯著（P＜0.05）；妊娠20～50 d期間下降速度較快，其中20～35 d下降了77.01%，35～50 d下降了85%，兩兩比較均差異極顯著（P＜0.01）。這表明藍(lán)狐發(fā)情盛期輸精正常妊娠P濃度在妊娠期呈明顯的下降趨勢。

2.5 藍(lán)狐血液中PRL動態(tài)變化

圖4結(jié)合表1可知：PRL濃度在藍(lán)狐妊娠1～20 d、35～50 d上升速度較快，兩階段分別上升18.01%和19.77%，第20，35天與第1，50天均差異極顯著（P＜0.01）；20～35 d保持恒定水平，差異不顯著（P＞0.05）。這表明藍(lán)狐發(fā)情盛期輸精正常妊娠PRL妊娠期呈階梯式增長。

圖4 藍(lán)狐血液中PRL動態(tài)變化

3 討論

雌性動物繁殖是一個復(fù)雜的過程，卵子發(fā)生、卵泡發(fā)育、排卵，以及發(fā)情、受精、妊娠、分娩等周期性生理變化都受各種生殖激素協(xié)同作用。大多數(shù)野生動物發(fā)情排卵呈現(xiàn)出明顯的季節(jié)性，排卵的啟動主要與環(huán)境因素、光照種類和照射的時間有關(guān)，光照時間改變時刺激下丘腦釋放促性腺激素釋放因子，后者促進(jìn)垂體釋放FSH和LH，導(dǎo)致濾泡增殖并釋放雌激素，雌激素又通過神經(jīng)元支配動物出現(xiàn)發(fā)情排卵和交配行為［2］。

狐貍屬于長日照單次發(fā)情動物，繁殖也呈現(xiàn)出明顯的季節(jié)性。藍(lán)狐發(fā)情排卵啟動是在春分前后，光照由短日照向長日照過渡時發(fā)生。狐貍又是多胎動物，卵泡發(fā)育、排卵是連續(xù)性的，此時卵泡發(fā)育和排卵主要由FSH、LH和E2協(xié)同作用。本試驗中，妊娠第1天（即第2次輸精時）FSH、LH和E2水平最高，證實此時藍(lán)狐正處于卵泡發(fā)育和排卵的高峰期，本試驗結(jié)果與理論相符。

PRL主要功能是促進(jìn)乳腺的增生、乳汁的生成和排乳［5］。在非哺乳期PRL水平較低，分娩前PRL快速升高。另外，過多的PRL可抑制FSH及LH的分泌，這與本試驗研究相符。

大多數(shù)哺乳動物，如牛胚胎著床后一般妊娠第23天羊膜囊擴(kuò)展，與母體建立起緊密聯(lián)系［5］，此時起主要作用的激素應(yīng)是P。理論上妊娠期P水平是一個先升高后降低的過程，但本試驗結(jié)果顯示妊娠第1天的P水平卻高于第20天，沒有逐漸升高的趨勢，出現(xiàn)了一種有違常理的現(xiàn)象。其原因可能有：（1）激素檢測有誤，但本試驗同時測定5種生殖激素濃度，其他激素水平正常，激素檢測有誤可能性小；（2）狐貍屬于季節(jié)性單次發(fā)情動物，可能激素調(diào)控與常年發(fā)情動物有所差別，激素協(xié)同作用，關(guān)系復(fù)雜；（3）狐貍是多胎動物，卵泡發(fā)育、排卵、成熟是一個連續(xù)的過程，藍(lán)狐發(fā)情期內(nèi)一般連續(xù)3～4次輸精，實際生產(chǎn)中一般把第2次輸精時計為妊娠第1天，此時輸精后有的卵子已受精，有的卵子還處于發(fā)育成熟階段。卵子的發(fā)育、成熟階段雌激素起主要調(diào)控作用，而P要在雌激素作用下才能發(fā)揮其作用，且P對垂體LH的分泌有反饋作用，P達(dá)到一定水平時可以抑制動物的發(fā)情與排卵。本試驗妊娠第1天實際上仍有一些卵子在發(fā)育、成熟，但此時處于排卵后期，激素的協(xié)同作用應(yīng)是抑制藍(lán)狐的發(fā)情與排卵，起主要抑制作用的應(yīng)是P，可能此時期P水平高與妊娠第1天判定的時間有關(guān)。今后有待對妊娠1～20 d的激素水平進(jìn)行進(jìn)一步的檢測研究。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)果表明，在藍(lán)狐發(fā)情盛期輸精正常妊娠時生殖激素FSH和LH在1～20 d下降速度較快，之后基本保持在恒定水平；在整個妊娠期E2和P均呈明顯的下降趨勢，而PRL呈階梯式增長趨勢。本試驗結(jié)果可為判定藍(lán)狐妊娠期生殖激素水平的正常變動范圍和應(yīng)用外源激素進(jìn)行生殖調(diào)控提供參考依據(jù)。