王亞飛 張振軍 宋長亮 張磊

[摘要]目的 研究miR-141-3p介導(dǎo)Yes相關(guān)蛋白1（YAP1）基因表達(dá)對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移和化療敏感性的影響及其作用機(jī)制。方法 收集50例晚期NSCLC及癌旁組織標(biāo)本，采用定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測組織中miR-141-3p和YAP1表達(dá)量。選擇NSCLC細(xì)胞株，設(shè)計(jì)miR-141-3p inhibitor和siRNA-YAP1，將細(xì)胞分為Blank組、miR-141-3p mimic組、miR-141-3p inhibitor組、YAP1 vector組、siRNA-YAP1組和miR-141-3p mimic+siRNA-YAP1組。取對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板，加10 mg/L順鉑置37 ℃、體積分?jǐn)?shù)0.05 CO2條件下培養(yǎng);觀察細(xì)胞遷移、侵襲、耐藥性的變化，并檢測miR-141-3p、YAP1、TGF-β信號(hào)通路相關(guān)蛋白TGF-β和Smad2表達(dá)。結(jié)果 與癌旁組織相比，晚期NSCLC中miR-141-3p和YAP1呈高表達(dá)（t=23.19、17.32，P均<0.05）。過表達(dá)miR-141-3p或YAP1能夠降低TGF-β和Smad2表達(dá)，促進(jìn)癌細(xì)胞侵襲遷移，降低順鉑處理后細(xì)胞存活率（Tukeys檢驗(yàn)，P均<0.05）;而沉默miR-141-3p或YAP1能夠提高TGF-β和Smad2表達(dá)，抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲，提高順鉑處理后細(xì)胞存活率（Tukeys檢驗(yàn)，P均<0.05;F=82.670～181.000，P均<0.05）。結(jié)論 miR-141-3p下調(diào)可能通過抑制YAP1基因表達(dá)激活TGF-β信號(hào)通路，進(jìn)而調(diào)控晚期NSCLC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移和化療敏感性。

[關(guān)鍵詞]癌，非小細(xì)胞肺;微RNAs;RNA干擾;TGF-β信號(hào)通路;腫瘤侵潤;腫瘤轉(zhuǎn)移;輻射耐受性;抗藥性，腫瘤

[中圖分類號(hào)]R730.26;R342.2

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[文章編號(hào)]2096-5532（2021）02-0228-06

[ABSTRACT]Objective To investigate the effect of the gene expression of Yes-associated protein 1 （YAP1） mediated by miR-141-3p on the invasion， migration， and chemosensitivity of advanced non-small cell lung cancer （NSCLC） cells. ?MethodsAdvanced NSCLC and adjacent tissue samples were collected from 50 patients， and quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction was used to measure the expression of miR-141-3p and YAP1. NSCLC cell line was selected， and miR-141-3p inhibitor and siRNA-YAP1 were designed. The cells were divided into blank group， miR-141-3p mimic group， miR-141-3p inhibitor group， YAP1 vector group， siRNA-YAP1 group， and miR-141-3p mimic+siRNA-YAP1 group. The cells in the logarithmic growth phase were inoculated on a 96-well plate and cultured with 10 mg/L cisplatin at 37 ℃ and a volume fraction of CO2 of 0.05; the changes in cell migration， invasion， and drug resistance were observed， and the expression of miR-141-3p， YAP1， and proteins related to the TGF-β signaling pathway （TGF-β and Smad2） was measured. ?Results Compared with the adjacent tissue， the advanced NSCLC tissue showed high expression of miR-141-3p and YAP1 （t=23.19，17.32;P<0.05）. Overexpression of miR-141-3p or YAP1 reduced the expression of TGF-β and Smad2， promoted the invasion and migration of cancer cells， and reduced cell viability after cisplatin treatment （Tukeys test， P<0.05）， while silencing of miR-141-3p or YAP1 increased the expression of TGF-β and Smad2， inhibited the migration and invasion of cancer cells， and increased cell viability after cisplatin treatment （Tukeys test， P<0.05;F=82.670-181.000，P<0.05）.?Conclusion Downregulation of miR-141-3p may regulate the invasion， migration， and chemosensitivity of advanced NSCLC cells by inhibiting the expression of the YAP1 gene and activating the TGF-β signaling pathway.

[KEY WORDS]carcinoma， non-small-cell lung; microRNAs; RNA interference; TGF-β signaling pathway; neoplasm invasiveness; neoplasm metastasis; radiation tolerance; drug resistance， neoplasm

肺癌病死率位居惡性腫瘤的首位，多數(shù)病人確診時(shí)已是晚期失去手術(shù)機(jī)會(huì)，其預(yù)后極差，多歸因于目前缺乏有效的早期診斷途徑[1-4]。晚期非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）病人多采用以化療為主的治療方案[5-6]。值得注意的是腫瘤治療效果與病人個(gè)體化特征密切相關(guān)，即便同一種治療方案應(yīng)用于有著相似臨床診斷、臨床分期及藥物種類和劑量的不同患癌個(gè)體，亦可能產(chǎn)生不同反應(yīng)?；熋舾行砸殉蔀楹饬炕熜Ч闹饕笜?biāo)[4]，而耐藥性在治療過程中很常見。微小RNA（microRNA）是一類非編碼RNA，可通過調(diào)節(jié)特定基因的表達(dá)，參與腫瘤發(fā)展進(jìn)程[7]。近年來的研究表明，microRNA在肺癌的發(fā)展、診療、放化療敏感性等方面均發(fā)揮著重要作用[8-9]。例如，miR-141已被證實(shí)可作為NSCLC潛在的診斷標(biāo)志物[10-11];miR-141-3p在對(duì)化療有效的NSCLC病人中呈低表達(dá)[12]。但目前關(guān)于miR-141-3p是否參與晚期NSCLC治療過程中化療敏感性機(jī)制的研究未見報(bào)道。本研究以體外實(shí)驗(yàn)方式，采用細(xì)胞轉(zhuǎn)染探究miR-141-3p在NSCLC細(xì)胞系的表達(dá)，并探討其對(duì)晚期NSCLC化療敏感性的影響及其作用機(jī)制，為逆轉(zhuǎn)肺癌化療耐藥性提供臨床依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 試劑和儀器 NSCLC細(xì)胞株A549（中國科學(xué)院腫瘤研究所）;順鉑（北京沃凱生物科技有限公司）;miR-141-3p模擬物（miR-141-3p mimic）、miR-141-3p抑制物（miR-141-3p inhibitor）、Yes相關(guān)蛋白1載體（YAP1 vector）、YAP1沉默表達(dá)（siRNA-YAP1）質(zhì)粒和PCR引物（上海吉瑪公司）;Matrigel膠（上海玉博生物科技有限公司）;倒置顯微鏡（Leica公司，德國）;CCK8試劑（上海翊圣生物科技有限公司）;Trizol試劑（北京百奧森泰生物技術(shù)有限公司）;兩步法實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）試劑盒（上海聯(lián)邁生物工程有限公司）;Western blot抗體（Abcam，UK）;ECL發(fā)光液（上海七海復(fù)泰生物科技有限公司）;雙熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒（翌圣生物科技（上海）有限公司）。

1.1.2 研究對(duì)象 2016年6月—2018年6月，選擇邯鄲市中心醫(yī)院不能手術(shù)的50例晚期NSCLC病人作為研究對(duì)象，術(shù)前均未接受放化療及免疫治療。其中男34例，女16例，年齡為22～71歲，平均年齡（54.12±6.67）歲。所有病例均經(jīng)CT引導(dǎo)下經(jīng)皮肺穿刺或支氣管鏡下黏膜活檢，并經(jīng)病理證實(shí)為晚期NSCLC。同時(shí)，以24例手術(shù)切除的肺癌病人的癌旁正常肺組織（距病灶5 cm）為對(duì)照組。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與分組處理 收集NSCLC細(xì)胞株A549置于Kaighns F-12K培養(yǎng)基（補(bǔ)加有體積分?jǐn)?shù)0.10胎牛血清（FBS）和青霉素/鏈霉素/真菌素），接種于24孔板，每孔500 μL，置于37 ℃、含體積分?jǐn)?shù)0.05 CO2、100%濕度培養(yǎng)箱中孵育。根據(jù)細(xì)胞生長情況，每隔2～3 d傳代1次。將細(xì)胞分為6組：Blank組（A組，不做任何處理），miR-141-3p mimic組（B組，轉(zhuǎn)染miR-141-3p過表達(dá)質(zhì)粒），miR-141-3p inhibitor組（C組，轉(zhuǎn)染miR-141-3p inhibitor質(zhì)粒），YAP1 vector組（D組，轉(zhuǎn)染YAP1過表達(dá)質(zhì)粒），siRNA-YAP1組（E組，轉(zhuǎn)染siRNA-YAP1質(zhì)粒），miR-141-3p mimic+siRNA-YAP1組（F組，共轉(zhuǎn)染miR-141-3p inhibitor質(zhì)粒和YAP1過表達(dá)質(zhì)粒）。均采用Lipofectamine Transfection Reagent 2000（Invitrogen）介導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)染。

1.2.2 qRT-PCR檢測 轉(zhuǎn)染48 h后，收集各組細(xì)胞，Trizol法提取細(xì)胞總RNA，并測定濃度和純度（組織檢測步驟同細(xì)胞檢測）。按照qRT-PCR試劑盒說明書操作，置于PCR擴(kuò)增儀，將樣品RNA反轉(zhuǎn)為cDNA，并進(jìn)行qRT-PCR擴(kuò)增。將基因上下游引物稀釋，加入PCR擴(kuò)增體系，滅菌ddH2O補(bǔ)足至20 μL。目的基因以GADPH為內(nèi)參照，使用實(shí)時(shí)PCR檢測系統(tǒng)平臺(tái)進(jìn)行檢測。取Ct值，采用相對(duì)定量法計(jì)算，用2-△△Ct表示各目的基因相對(duì)表達(dá)量。每個(gè)實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次，取其均值。

1.2.3 雙熒光素酶報(bào)告檢測 使用生物學(xué)預(yù)測網(wǎng)站進(jìn)行miR-141-3p和YAP1的結(jié)合位點(diǎn)分析?？寺U(kuò)增YAP1的3UTR區(qū)到pmirGLO雙熒光素酶報(bào)告基因載體上，并命名為pWt-YAP1。同時(shí)構(gòu)建pMut-YAP1載體，mimic-NC組與miR-141-3p mimic組分別與熒光素酶報(bào)告載體共轉(zhuǎn)染NSCLC細(xì)胞株A549，采用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒檢測熒光強(qiáng)度。

1.2.4 Transwell實(shí)驗(yàn) 在各組轉(zhuǎn)染48 h后細(xì)胞板內(nèi)，每孔上室加200 μL細(xì)胞懸液，下室加800 μL含有體積分?jǐn)?shù)0.20 FBS的條件培養(yǎng)基。37 ℃培養(yǎng)箱孵育20～24 h。取出Transwell板，1 g/L甲紫溶液染色。晾干后用倒置顯微鏡隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)視野的細(xì)胞，并取平均值。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.5 劃痕實(shí)驗(yàn) 用Marker筆在6孔板背后均勻畫橫線（間距0.5～1.0 cm），橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。加入各組轉(zhuǎn)染48 h后的細(xì)胞，過夜培養(yǎng)，待細(xì)胞均勻鋪滿容器底面。次日用槍頭沿直尺劃痕。用PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞，加入無血清培養(yǎng)基。放入37 ℃、體積分?jǐn)?shù)0.05 CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。取樣拍照。

1.2.6 CCK8檢測 使用體積分?jǐn)?shù)0.10 FBS培養(yǎng)基配制成不同濃度的順鉑溶液，4 ℃儲(chǔ)存?zhèn)溆?。取?duì)數(shù)生長期的細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板，置37 ℃、體積分?jǐn)?shù)0.05 CO2條件下培養(yǎng)，取10 mg/L順鉑，加入96孔板中，設(shè)3個(gè)復(fù)孔。設(shè)置空白對(duì)照。48 h后，每孔加新配制的CCK8試劑10 μL，繼續(xù)孵育4 h，終止培養(yǎng)，小心吸去培養(yǎng)液。在酶聯(lián)免疫檢測儀上測定各孔450 nm波長處吸光度（A）。細(xì)胞存活率=實(shí)驗(yàn)組A值/對(duì)照組A值×100%。

1.2.7 Western blot檢測 收集轉(zhuǎn)染培養(yǎng)48 h后的各組細(xì)胞，以PBS洗滌后重懸。離心取上清，加入RIPA裂解液，輕搖重懸后，冰上孵育30 min，4 ℃、12 000 r/min離心10 min，取上清液，即為細(xì)胞總蛋白。應(yīng)用碧云天BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白質(zhì)濃度。取20 μg細(xì)胞總蛋白用100 g/L的SDS-PAGE凝膠電泳分離蛋白質(zhì)，隨后濕法轉(zhuǎn)膜，使用50 g/L的脫脂奶粉封閉1.5 h。按照抗體說明書稀釋相應(yīng)抗體于一抗稀釋液中。實(shí)驗(yàn)所用的一抗如下：一抗兔抗人YAP1、一抗兔抗人TGF-β、一抗兔抗人Smad2及一抗兔抗人GAPDH多克隆抗體。加入相應(yīng)HRP標(biāo)記的二抗羊抗兔IgG抗體，在室溫下反應(yīng)2 h，ECL發(fā)光液顯色，并曝光成像。采用Quanity One軟件進(jìn)行蛋白條帶灰度分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以x2±s表示，兩組均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用Tukeys檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié) 果

2.1 晚期NSCLC組織miR-141-3p和YAP1表達(dá)

通過對(duì)50例晚期NSCLC組織及24例癌旁組織的qRT-PCR檢測結(jié)果顯示，與癌旁組織比較，癌組織中miR-141-3p和YAP1表達(dá)均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=23.19、17.32，P均<0.05）。見圖1。

2.2 miR-141-3p對(duì)YAP1基因表達(dá)的調(diào)控

為研究miR-141-3p在NSCLC細(xì)胞中的靶向關(guān)系，通過生物學(xué)網(wǎng)站對(duì)其進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，miR-141-3p和YAP1存在結(jié)合位點(diǎn)。雙熒光素酶報(bào)告基因預(yù)測結(jié)果顯示，與mimic-NC組相比較，YAP1野生型3UTR的熒光素酶活性能被miR-141-3p抑制（t=7.643，P<0.05），而對(duì)YAP1突變型3UTR的熒光素酶活性沒有影響（P>0.05）。說明miR-141-3p能特異性結(jié)合YAP1的3UTR區(qū)并在轉(zhuǎn)錄后水平下調(diào)FANCM基因表達(dá)。見圖2。

差異有顯著意義（F=116.8，P<0.05）。與Blank組相比，miR-141-3p mimic組YAP1基因表達(dá)上升（Tukeys檢驗(yàn)，P<0.05），miR-141-3p inhibitor組YAP1基因表達(dá)下降（Tukeys檢驗(yàn)，P<0.05）。說明miR-141-3p表達(dá)能夠調(diào)控YAP1表達(dá)。見圖3。

2.4 miR-141-3p對(duì)晚期NSCLC細(xì)胞的增殖、遷移和耐藥性的影響

結(jié)果顯示，各組NSCLC細(xì)胞的增殖、遷移和耐藥性比較，差異有顯著意義（F=82.670～181.000，P均<0.05）。與Blank組相比，miR-141-3p mimic組和YAP1 vector組癌細(xì)胞侵襲、遷移能力明顯增強(qiáng)，順鉑處理后細(xì)胞存活率明顯增加，差異有顯著意義（Tukeys檢驗(yàn)，P均<0.05）;而miR-141-3p inhibitor組和siRNA-YAP1組癌細(xì)胞侵襲、遷移能力明顯減弱，順鉑處理后細(xì)胞存活率明顯降低，差異有顯著性（Tukeys檢驗(yàn)，P均<0.05）。Blank組和miR-141-3p mimic+siRNA-YAP1組各指標(biāo)無顯著差異（P>0.05）。說明miR-141-3p inhibitor+pcDNA-YAP1組逆轉(zhuǎn)了這一趨勢。見圖4、5。

2.5 miR-141-3p對(duì)TGF-β信號(hào)通路相關(guān)蛋白影響

Western blot檢測結(jié)果顯示，各組TGF-β信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=159.800、125.3000，P均<0.05）。與Blank組相比，miR-141-3p mimic組和YAP1 vector組TGF-β和Smad2表達(dá)水平明顯下降，而miR-141-3p inhibitor組和siRNA-YAP1組TGF-β表達(dá)水平明顯提高，差異有顯著性（Tukeys檢驗(yàn)，P均<0.05）。Blank組和miR-141-3p mimic+siRNA-YAP1組各項(xiàng)指標(biāo)差異無顯著性（均P>0.05）。見圖6。

3 討 論

microRNA已被證實(shí)在人類腫瘤的抗放化療機(jī)制中發(fā)揮重要作用。例如，LIU等[13]在其研究中利用microRNA分子譜分析法篩選與LASS2相關(guān)的microRNA，以為鑒別化療耐藥和化療敏感性提供依據(jù)，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-93抑制劑可增強(qiáng)si-LASS2轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞的化學(xué)敏感性。LANG等[14]報(bào)道，采用miR-24靶向沉默S100A8基因可提高子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇的化療敏感性。劉娜等[15]在其研究中利用慢病毒表達(dá)載體轉(zhuǎn)染卵巢癌細(xì)胞株，構(gòu)建miR-200a表達(dá)上調(diào)模型，并結(jié)合MTT實(shí)驗(yàn)、PCR和免疫印跡檢測發(fā)現(xiàn)miR-200a可能通過調(diào)控耐藥相關(guān)ABC家族基因如ABCB3、ABCC1、ABCC2、ABCC3和ABCG2的表達(dá)，增加卵巢癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇的敏感性。肖悅等[16]通過構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)miR-18a的白血病細(xì)胞轉(zhuǎn)染模型，發(fā)現(xiàn)miR-18a能夠通過靶定ATM調(diào)節(jié)白血病細(xì)胞HL-60對(duì)VP-16和VCR化療敏感性。鑒于microRNA能在基因編碼水平上反映腫瘤的耐藥性機(jī)制[17-19]，那么通過構(gòu)建特定表達(dá)干預(yù)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染模型，可有助于探究特定microRNA與腫瘤耐藥性的關(guān)聯(lián)及其作用機(jī)制。

在本研究前期，我們通過生物信息學(xué)方法篩選出晚期NSCLC過表達(dá)基因miR-141-3p，且在線生物學(xué)預(yù)測軟件報(bào)道m(xù)iR-141-3p調(diào)控YAP1，YAP1在晚期NSCLC亦高表達(dá)，因此推測miR-141-3p通過調(diào)控YAP1影響晚期NSCLC。本研究首先通過qRT-PCR驗(yàn)證組織中miR-141-3p和YAP1的表達(dá)。結(jié)果顯示，與癌旁組織相比，晚期NSCLC中miR-141-3p和YAP1呈高表達(dá)。進(jìn)而，我們通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染分為不同干預(yù)組別，探討了miR-141-3p對(duì)YAP1的調(diào)控關(guān)系，結(jié)果顯示，過表達(dá)miR-141-3p能夠促進(jìn)YAP1基因和蛋白的表達(dá)，沉默miR-141-3p能夠抑制YAP1基因和蛋白的表達(dá)，說明miR-141-3p的表達(dá)能夠調(diào)控YAP1的表達(dá)。進(jìn)一步研究結(jié)果表明，通過轉(zhuǎn)染miR-141-3p mimic或YAP1vector，相比Blank組，過表達(dá)miR-141-3p或YAP1能夠抑制TGF-β和Smad2表達(dá)，促進(jìn)癌細(xì)胞侵襲遷移，增加細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥性。而通過miR-141-3pinhibitor或si-YAP1轉(zhuǎn)染處理，則顯示沉默miR-141-3p或YAP1能夠提高TGF-β和Smad2表達(dá)，抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲，降低細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥性。與此同時(shí)，Blank組和miR-141-3p mimic+siRNA-YAP1組各項(xiàng)指標(biāo)無顯著差異，提示后者逆轉(zhuǎn)了這種趨勢。這說明miR-141-3p能夠通過YAP1促進(jìn)晚期NSCLC細(xì)胞的增殖、遷移和耐藥。

基于以上實(shí)驗(yàn)探究，我們推測，miR-141-3p下調(diào)可能通過抑制YAP1基因表達(dá)，激活TGF-β信號(hào)通路，進(jìn)而調(diào)控晚期NSCLC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移和化療敏感性。值得注意的是，TGF-β家族是一類功能復(fù)雜的細(xì)胞因子，可廣泛參與各種病理生理過程，介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的分化與增殖[20-22]。TGF-β信號(hào)通路相關(guān)蛋白如Smad2，亦參與人類腫瘤進(jìn)程，與乳癌、肺癌等發(fā)生發(fā)展相關(guān)[23-24]。TGF-β信號(hào)通路及其相關(guān)蛋白組成腫瘤抑制通路，介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞生長，并且可激活一系列信號(hào)通路如MAPK、ERK等信號(hào)通路[25-26]。本研究中，miR-141-3p下調(diào)及YAP1基因表達(dá)抑制促進(jìn)了TGF-β和Smad2表達(dá)的提升，進(jìn)而激活TGF-β信號(hào)通路，對(duì)于降低順鉑耐藥性具有重要作用。既往研究已報(bào)道TGF-β信號(hào)通路與化療耐藥有關(guān)，并可通過調(diào)控TGF-β信號(hào)通路抑制腫瘤耐藥[27]。孫彩霞等[28]報(bào)道，轉(zhuǎn)染miR-141模擬物可降低卵巢癌細(xì)胞株SKOV-3和ES-2細(xì)胞對(duì)卡鉑的敏感性，提示檢測miR-141表達(dá)水平在預(yù)測卵巢癌對(duì)卡鉑敏感性、評(píng)估病人預(yù)后及其合理指導(dǎo)綜合治療等方面的臨床意義。

綜上所述，本文結(jié)果顯示，miR-141-3p下調(diào)可能通過抑制YAP1基因表達(dá)，激活TGF-β信號(hào)通路，進(jìn)而調(diào)控晚期NSCLC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移和化療敏感性。本研究可為人類探討NSCLC耐藥機(jī)制提供新途徑，microRNA與NSCLC耐藥間的相關(guān)性將為逆轉(zhuǎn)其耐藥性提供一種全新的思路和策略。然而，本研究僅在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中初步探究miR-141-3p對(duì)NSCLC影響的作用機(jī)制，是否存在其他潛在靶點(diǎn)及其作用機(jī)制均未可知，其將為今后研究的主要方向，進(jìn)而為NSCLC的診治提供分子生物學(xué)依據(jù)。

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（本文編輯 于國藝）