李宇寧，張凱明，李 林，杜詩儀，吳春賢，鄭桃林，熊 鈺，張文華

腦卒中是臨床常見的急危重癥，主要是由于腦部血管突然破裂或因血管阻塞導致大腦血流供應不足引起腦組織損傷的一類疾病[1]，病人常具有頭痛及運動功能障礙等臨床癥狀，甚至引起神經功能和認知障礙，嚴重影響生活質量[2]。經顱直流電刺激(transcranial direct current stimulation，tDCS)是一種非侵入性腦刺激技術，利用低強度、恒定的微直流電作用于大腦皮質，有利于腦卒中病人運動神經功能恢復[3]。丹紅注射液主要用于治療心血管疾病和腦血管疾病(如腦卒中)，藥理作用包括抗炎、抗氧化、抗凝、降血脂、抗凋亡、血管擴張和促進血管生成等，對改善腦卒中病人運動功能障礙具有較好的臨床療效[4]。Hong等[5]研究顯示，腦血管疾病中低氧誘導因子-1(HIF-1)與其他促血管生成因子協(xié)同參與血管形成的過程。有研究顯示，血管內皮生長因子(VEGF)及腦源性神經生長因子(BDNF)通過影響血管生成因子的遷移、分泌、功能，從而調控血管生成，促進腦卒中病人血流供應恢復[6]。本研究觀察tDCS聯(lián)合丹紅注射液對腦卒中病人運動功能恢復及血清低氧誘導因子-1α(HIF-1α)、VEGF及BDNF水平的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2018年1月—2020年1月中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九二一醫(yī)院收治的腦卒中病人107例，年齡(58.4±11.1)歲，男58例，女49例，體質指數(shù)(24.1±4.1)kg/m2。納入標準：符合腦卒中診斷標準；病程<3個月；未接受任何運動康復方面的治療。排除標準：妊娠或哺乳期婦女；頭部外傷或手術史病人；存在其他嚴重器官功能不全；合并其他運動功能性障礙疾病病人。本研究經醫(yī)院倫理委員會審核批準，病人或家屬同意參與本研究，均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 tDCS 采用Neuroconn型經顱直流電刺激儀(Neurocare公司生產，德國)，選擇單通道直流電流電極片，電流強度為1 000～2 000 μA。陽極電極置于病灶側中央前回運動皮層的顱骨表面，陰極電極置于顱骨對側。tDCS治療每日1次，每次30 min，每周5次，療程為4周。

1.2.2 丹紅注射液 丹紅注射液(菏澤步長制藥有限公司生產，國藥準字Z20026866)40 mL加入5%葡萄糖注射液500 mL中靜脈輸注，每日1次，療程為4周。

1.3 觀察指標

1.3.1 運動功能評估 兩名神經內科醫(yī)師于研究前6個月接受系統(tǒng)培訓，于研究開始時進行一致性評價，結果顯示一致性較好(Kappa值=0.87)。由兩名醫(yī)師分別采用Fugl-Meyer評分(Fugl-Meyer Assessment，F(xiàn)MA)與改良Barthel指數(shù)量表(MBIS)評定腦卒中病人運動功能。

1.3.2 HIF-1α、VEGF及BNDF表達 分別于治療前、治療4周后抽取病人靜脈血5 mL，采用離心機(Optima XPN-100，BECNMAN，美國)，4 ℃條件下，以3 500 r/min離心10 min，取上清液。使用人HIF-1α酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)試劑盒(R&D Systems公司生產，美國)、人VEGF試劑盒(R&D Systems公司生產，美國)及人BNDF ELISA試劑盒(R&D Systems公司生產，美國)定量檢測外周血HIF-1α、VEGF及BNDF表達。

2 結 果

2.1 治療前后血清HIF-1 α、VEGF及BDNF表達比較 治療后，病人血清HIF-1α水平較治療前降低，VEGF及BDNF水平較治療前升高(P<0.01)。詳見表1。

表1 治療前后血清HIF-1 α、VEGF 及BDNF表達比較(±s) 單位：pg/mL

2.2 治療前后FMA及MBIS評分比較 治療后，病人FMA及MBIS評分較治療前升高(P<0.01)。詳見表 2。

表2 治療前后FMA及MBIS評分比較(±s) 單位：分

2.3 血清HIF-1α、VEGF和BDNF表達與FMA、MBIS評分的相關性分析 病人血清HIF-1α表達與FMA、MBIS評分呈負相關(r=-0.517，P<0.01；r=-0.494，P<0.01)；血清VEGF、BDNF表達與FMA評分呈正相關(r=0.474，P<0.05；r=0.504，P<0.01)，與MBIS評分呈正相關(r=0.461，P<0.05；r=0.583，P<0.01)；VEGF表達與BDNF表達呈正相關(r=0.485，P<0.05)。詳見表 3。

表3 血清HIF-1α、VEGF和BDNF表達與FMA、MBIS相關性分析(r值)

3 討 論

腦卒中是神經內科的臨床常見病，隨著社會經濟生活的發(fā)展，近年來發(fā)病率逐年增高，發(fā)病年齡趨于年輕化，如何促進腦卒中病人日常生活能力的恢復成為研究的重點[7]。tDCS具有操作簡便、便于攜帶等優(yōu)點，在腦卒中病人運動能力康復的過程中應用廣泛[8]。

丹紅注射液主要是由丹參、紅花組成，具有活血化瘀、通脈舒絡的功能，可用于瘀血閉阻所致胸痹及中風的治療[9]。有研究表明，病人發(fā)生腦卒中后，大腦因血流供應不足，局部缺氧增加HIF-1α表達，上調VEGF表達從而促進血管形成[10]。本研究納入的病人采用tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療后血清HIF-1α水平較治療前降低，而VEGF及BDNF水平較治療前升高。血清HIF-1α水平降低提示采用tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療后，病人大腦血供得到一定程度的改善；VEGF高水平提示tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療，可持續(xù)升高血清VEGF表達，促進病人大腦血流供應恢復；BDNF是體內含量較多的營養(yǎng)因子，具有維持和促進神經元發(fā)育分化與生長再生的作用[11]。病人血清BDNF水平較治療前提高，提示tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療后可升高BDNF水平，促進病人神經元修復。

FMA及MBIS是評估腦卒中病人運動功能的指標[12]。本研究治療后運動功能相關評分FMA及MBIS較治療前升高(P<0.05)，提示運動功能評分較治療前好轉。血清HIF-1α含量與FMA、MBIS呈負相關，提示大腦缺氧狀態(tài)與腦卒中病人運動功能有關，大腦缺氧越嚴重，病人運動功能障礙越嚴重，可改善腦卒中病人大腦缺氧狀態(tài)，有利于運動功能恢復。VEGF與BDNF呈正相關，提示tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療可有效提高腦卒中病人VEGF及BDNF表達水平，且VEGF與BDNF在一定的細胞通路下相互聯(lián)系。血清VEGF、BDNF含量與FMA、MBIS均呈正相關，提示tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療后可能通過上調VEGF、BDNF表達促進血管生成、營養(yǎng)神經元，從而改善病人大腦缺氧狀態(tài)，加速運動功能康復。

綜上所述，tDCS聯(lián)合丹紅注射液可有效降低腦卒中病人HIF-1α水平，提高VEGF及BDNF表達，有助于緩解大腦缺氧狀態(tài)，并促進病人運動功能的康復。tDCS聯(lián)合丹紅注射液的治療方式操作簡便、療效較好。