柳國鎖，祁燕蓉，田 雪

寧夏賀蘭縣農業(yè)農村局，寧夏銀川 750000

0 引言

牛病毒性腹瀉?。˙ovine viral diamhe，BVD）是由牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral diamhe virus BVDV）引起的一種以能夠感染牛、山羊、綿羊、豬等家畜動物，還能夠引起駱駝、鹿等其他野生動物感染的疾病，臨床上該病原以感染牛最為常見[1，2]。目前，BVD依舊是危害世界養(yǎng)牛業(yè)的重大經濟性疾病和免疫抑制性疾病。該病可直接導致牛群的繁殖和生產性能低下，間接增加牛呼吸道疾病和消化道疾病的損失和防控難度[3，4]。BVDV可通過持續(xù)感染的胎牛在牛群中永久性傳播[5]?；贐VD在寧夏地區(qū)的流行現(xiàn)狀和危害，推動規(guī)模奶牛場開展該病的凈化是緊迫且長期的工作，對寧夏奶業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。寧夏地區(qū)多個規(guī)?；膛鐾ㄟ^檢測淘汰持續(xù)感染的牛只，免疫保護牛群減少新持續(xù)感染牛只出現(xiàn)的策略，有效的控制和凈化了該病。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

BVDV抗原檢測試劑盒、BVDV抗原快速檢測卡，均購自美國愛德士公司；酶標儀，購自美國Biotek公司；恒溫培養(yǎng)箱，購自寧波海曙賽福實驗儀器廠；可調單道移液槍、多道移液槍，均購自美國Thermo公司。

1.2 方法

采集寧夏地區(qū)3家規(guī)模奶牛場共4507份青年牛和成母牛血液樣品，血樣送實驗室離心分離，血清-20℃凍存?zhèn)溆?，用于BVDV抗原檢測試劑盒檢測；新生犢牛出生1個月內采集耳組織，用于BVDV抗原快速檢測卡牛場現(xiàn)場檢測；檢測范圍為全群檢測。具體試驗操作步驟按試劑盒、檢測卡說明書進行。

1.3 結果判定

BVDV抗原檢測試劑盒：檢測計算樣品的校正OD值。被檢樣品的S-N值≤0.300，判為BVD抗原陰性；被檢樣品的S-N值＞0.300，判為BVDV抗原陽性。

抗原快速檢測卡：滴加樣品后15～30min后讀取結果。試紙條的一端只出現(xiàn)紅色的對照線，則檢測結果為陰性；試紙條對照線和檢測線都為紅色，則為抗原陽性；只出現(xiàn)檢測線，未出現(xiàn)對照線，檢測結果無效。

2 結果與分析

寧夏地區(qū)部分規(guī)模奶牛場青年牛、成年牛和犢牛BVDV抗原檢測結果見表1、2。

表1 寧夏地區(qū)部分規(guī)模奶牛場青年牛、成年牛BVDV抗原檢測結果

用牛病毒性腹瀉抗原檢測試劑盒、檢測卡檢測BVDV，從表1、2可以看出3家規(guī)模奶牛場都出現(xiàn)了BVDV抗原陽性牛，說明寧夏地區(qū)這3家規(guī)模奶牛場的成年牛和犢牛都存在不同程度的感染。雖然抗原陽性率不高，但這些持續(xù)感染的牛常年排毒，是牛群中的傳染源，危害極大。

3 BVD 的凈化、控制

3.1 全群監(jiān)測并淘汰陽性牛

對寧夏地區(qū)部分規(guī)模化奶牛場進行普檢。采集的4507份血清檢出BVDV抗原陽性牛共26份；對1051頭剛出生的犢?，F(xiàn)場檢測，檢出陽性犢牛共6份；檢出的陽性牛只21天后復檢，陽性牛一律淘汰。

3.2 調整BVD疫苗免疫程序、進行抗體監(jiān)測

接種BVD疫苗，有利于BVD的控制，特別是在牛群密集且往來頻繁的寧夏地區(qū)，清除現(xiàn)有感染的同時使牛群對新傳入的BVDV保持抵抗力，有助于防止新持續(xù)感染牛的產生。接種疫苗的目的是為了讓繁殖牛在配種前形成保護力，避免BVDV感染母牛，避免懷孕母牛流產和阻止在母牛體內形成持續(xù)感染的胎兒，持續(xù)感染的犢牛的出現(xiàn)（PI牛）是主要的傳染源[6，7]。BVD 預防和控制的核心是減少持續(xù)感染牛的出現(xiàn)，持續(xù)感染牛的出現(xiàn)多為懷孕母牛懷孕期間接觸了BVDV。因此，要加強懷孕母牛免疫，來減少流產，避免PI牛的出現(xiàn)，同時可增強初乳中的母源抗體來增加犢牛抵抗力[8]。用牛病毒性腹瀉抗體試劑盒檢測免疫后的抗體水平，對抗體水平低的牛群加強免疫，免疫程序見表3。

表2 寧夏地區(qū)部分規(guī)模奶牛場犢牛BVDV抗原檢測結果

表3 調整前后的BVD免疫程序

3.3 自繁自養(yǎng)，加強綜合防控

BVD可以水平傳播和垂直傳播，在BVD的防控凈化階段，奶牛場要提倡自繁自養(yǎng)、只出不進，做好生物安全綜合防控措施，防止外來的傳染源。如需必要引進奶牛，必須經過檢驗合格后才能引進，引進的牛只必須單獨隔離飼養(yǎng)，檢驗合格后才能混群飼養(yǎng)。無論是否免疫，都要結合生產各環(huán)節(jié)做好生物安全措施，構建BVDV環(huán)境衛(wèi)生控制體系，阻斷BVDV傳播途徑，維持牛場凈化后BVDV非感染狀態(tài)（圖1）。

圖1 凈化方案與路線

4 小結

BVDV感染造成的巨大的經濟損失，需要采取有效的防控凈化措施，控制與凈化的首要步驟都是發(fā)現(xiàn)持續(xù)感染（PI）牛。然后根據(jù)本地本場的牛群密度和感染率來制定防控措施，在牛群密度低，感染率低的地區(qū)可采取“檢疫-淘汰”的方式來凈化牛群；牛群密度高、感染率高的地區(qū)，采取“免疫-檢疫—淘汰”是比較可行的策略；血清陽性率較高的地區(qū)，要做好抗原的持續(xù)檢測，持續(xù)免疫措施，來淘汰減少PI牛的出現(xiàn)以及做好綜合性生物安全安保體系，維持BVDV的凈化狀態(tài)，避免新發(fā)BVD牛的出現(xiàn)。