杜文靜　李靜

摘 要 以茶多酚成品為試驗(yàn)原材料，采用兩種大孔樹(shù)脂對(duì)同種茶多酚成品進(jìn)行兒茶素單體提取，再用乙醇作為解離劑對(duì)比;在同種樹(shù)脂的條件下用不同酒精濃度進(jìn)行解離比較的對(duì)比，獲得兒茶素的最佳樹(shù)脂提取法的提取條件。結(jié)果表明，使用AB-8大孔樹(shù)脂，在85%的乙醇濃度為解離劑的條件下，對(duì)同種茶多酚成品提取兒茶素的含量最多。

關(guān)鍵詞 兒茶素;茶多酚;大孔樹(shù)脂;吸附;解離

中圖分類(lèi)號(hào)：TS272.51 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.06.004

兒茶素又稱(chēng)兒茶精、茶單寧，是茶葉中的主要成分，天然的兒茶素主要有6種單體，分別為表兒茶素、兒茶素、表沒(méi)食子兒茶素、沒(méi)食子兒茶素、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯、表兒茶素沒(méi)食子酸酯[1-2]。兒茶素由于其抗氧化性及清除自由基的功能而日益受到人們的重視，具有抗氧化、抗癌、抗衰老和降脂降壓等作用，在醫(yī)藥領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用，主要用于生產(chǎn)抗腫瘤藥物、心血管保健藥物、抗病毒制劑、抗糖尿病及肥胖癥保健藥品等[3]。提取茶葉中的這些重要活性化學(xué)物質(zhì)有著重要意義。目前我國(guó)對(duì)于提取兒茶素的主要來(lái)源是茶葉，方法主要有溶劑萃取法、離子沉淀法和柱色譜分離法[4-6]。

本研究改進(jìn)傳統(tǒng)的兒茶素提取工藝，采用樹(shù)脂法提取純兒茶素。以綠茶提取物——茶粉樣品為原料，經(jīng)浸提、大孔吸附樹(shù)脂吸附洗脫，最后經(jīng)乙醇解離烘干得單體，用樹(shù)脂法進(jìn)行兒茶素提取。研究不同濃度乙醇對(duì)于樹(shù)脂提取兒茶素是否有影響;并用兩種樹(shù)脂進(jìn)行比較，樹(shù)脂的吸附能力對(duì)于兒茶素提取含量進(jìn)行比較。區(qū)別于其他傳統(tǒng)方法，本研究對(duì)于提取的兒茶素沒(méi)有污染，沒(méi)有重金屬殘留。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠(chǎng)）、KD-80三孔電熱恒溫水槽（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）、GZX-9140MBE電熱鼓風(fēng)干燥機(jī)（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司）、自制填充管、CP214電子天平（奧豪斯儀器有限公司）、紫外分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司UV-6100S）、CTFD-10S抽真空器（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）、SE602FZH電子天平[奧豪斯儀器（上海）有限公司]。

甲醇、乙醇、丙醇、乙酸乙酯、蒸餾水等。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

干茶葉，品種為都勻毛尖，采于貴州省都勻市;茶多酚，購(gòu)于好再來(lái)天然植物館;D101大孔樹(shù)脂，購(gòu)于慧贏(yíng)實(shí)驗(yàn)廠(chǎng)家;AB-8大孔樹(shù)脂，購(gòu)于天津市凱威化工有限公司。

1.3 方法

1.3.1 大孔樹(shù)脂篩選

1）取材。稱(chēng)取14組茶多酚，每組茶多酚均為2 g，分別溶于50 mL水。2）加熱。放入水浴鍋加熱，水溫恒定在75 ℃。3）冷卻。材料溶液冷卻至常溫。4）樹(shù)脂吸附。將茶多酚溶液分別倒入裝有D101樹(shù)脂和AB-8樹(shù)脂的燒杯中[7-9]，靜置10 min;將有吸附樹(shù)脂和茶多酚的混合溶液倒入自制的填充柱中進(jìn)行過(guò)濾，濾干。5）解離。將40 mL濃度為35%、45%、55%、65%、75%、85%和95%乙醇，分別倒入7支填充柱中進(jìn)行解離，重復(fù)3次。6）測(cè)OD。取2 mL解離液用紫外光分光光度計(jì)在210 nm、270 nm和280 nm處測(cè)吸光度。7）濃縮干燥。將解離液用蒸發(fā)儀抽真空濃縮，濃縮液放到干燥箱內(nèi)干燥12 h。

1.3.2 不同浸提劑提取兒茶素

按照上述步驟取材后，在75 ℃的恒溫水浴鍋中浸提30 min，然后取出，待溶液冷卻至常溫，使用樹(shù)脂吸附及過(guò)濾，用40 mL的浸提劑水、50%甲醇、50%乙醇、50%丙醇和乙酸乙酯，分別倒入5支填充柱中進(jìn)行解離，重復(fù)3次。最后測(cè)OD值、濃縮干燥。

1.3.3 不同原料提取兒茶素

稱(chēng)取一組20 g干茶葉和一組2 g的茶多酚成品，分別溶于50 mL溫度為75 ℃的水中恒溫浸提后冷卻，樹(shù)脂吸附、過(guò)濾，將濃度85%乙醇40 mL倒入填充柱中進(jìn)行解離，重復(fù)2～3次，使兒茶素充分解離，最后測(cè)OD值、濃縮干燥。

1.4 兒茶素提取質(zhì)量

將解離液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀抽真空濃縮5倍，濃縮液放入烘干箱60 ℃烘干12 h，用電子天平稱(chēng)量，得到兒茶素提取質(zhì)量。

2 結(jié)果與分析

2.1 大孔樹(shù)脂篩選結(jié)果

在D101大孔樹(shù)脂中不同濃度梯度乙醇對(duì)提取兒茶素的結(jié)果如圖1所示。根據(jù)圖1可知，不同乙醇濃度對(duì)兒茶素提取會(huì)有不同的影響。乙醇濃度在75%時(shí)對(duì)于吸附在樹(shù)脂上的兒茶素解離的較充分，提取最多。

在A(yíng)B-8大孔樹(shù)脂中不同濃度梯度乙醇對(duì)提取兒茶素的結(jié)果如圖2所示。根據(jù)圖2可知，AB-8大孔樹(shù)脂對(duì)兒茶素的提取量在乙醇濃度為35%～85%時(shí)隨濃度升高提取量升高，在乙醇濃度為85%提取量最高，提取效果最好，乙醇濃度大于85%提取量降低。

2.2 不同溶劑對(duì)干茶葉提取兒茶素的結(jié)果

不同浸提劑條件下，干茶葉提取兒茶素的結(jié)果見(jiàn)表1。根據(jù)表1可知，不同溶劑對(duì)兒茶素提取量不同，乙醇的提取量最高。

2.3 不同原料對(duì)兒茶素提取的影響

干茶葉和茶多酚成品提取兒茶素含量見(jiàn)表2。根據(jù)表2可知，不同原料對(duì)兒茶素提取有不同的影響，干茶葉提取兒茶素比茶多酚提取量高。

3 結(jié)論與討論

1）在D101大孔樹(shù)脂實(shí)驗(yàn)中，兒茶素提取在乙醇濃度75%時(shí)最多。而AB-8大孔樹(shù)脂提取的最佳條件和D101大孔樹(shù)脂的不同。AB-8大孔樹(shù)脂對(duì)兒茶素的提取率在乙醇濃度為35%～85%會(huì)隨濃度升高提取量升高。該大孔樹(shù)脂乙醇濃度為85%時(shí)提取的兒茶素量是最高的。乙醇是作為解離劑，在85%的時(shí)候?qū)τ谖皆跇?shù)脂上的兒茶素解離較充分，提取效果最好。且圖2直觀(guān)的呈現(xiàn)兒茶素提取量與乙醇濃度間的關(guān)系，乙醇濃度為35%～85%時(shí)，兒茶素提取量與乙醇濃度呈正比關(guān);乙醇濃度為85%～95%時(shí)，茶素提取量與乙醇濃度呈反比關(guān)系。

2）根據(jù)相似相溶的原理，應(yīng)是乙酸乙酯對(duì)于兒茶素的選擇性最強(qiáng)，但其提取兒茶素的得率最低。乙醇的得率最高，這是由于乙醇的羥基與兒茶素及茶多酚分子中含有的酚羥基能形成氫鍵而具有良好的溶解性，而且天然狀態(tài)的兒茶素與茶多酚往往以氫鍵與蛋白質(zhì)、多糖等大分子物質(zhì)結(jié)合成復(fù)合物形式存在，乙醇溶液具有斷裂氫鍵的能力，有利于使締合態(tài)的兒茶素及茶多酚游離出來(lái)。

3）在干茶和茶多酚兩種原料提取兒茶素的實(shí)驗(yàn)中，干茶葉的提取率比茶多酚的提取率高。

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（責(zé)任編輯：劉 昀）