侯兵兵,趙紅麗，王玉曉

臨床進行血常規(guī)檢測時，發(fā)生乙二胺四乙酸(EDTA)依賴性血小板聚集導致血小板假性減少的現(xiàn)象時有發(fā)生，常規(guī)解決辦法為采集枸櫞酸抗凝血或稀釋標本對血小板重新檢測，患者均需再次采集標本。武警河北總隊醫(yī)院檢驗科對1例出現(xiàn)血小板聚集引起血小板假性減少患者，采取一種新型檢測方法，無需重新采集標本即可得到準確的血小板計數(shù)結果。

1 臨床資料

1.1 一般資料 患者，女，53歲，因“發(fā)熱，咳嗽，體溫38.1 ℃”于2019-04-20至武警河北總隊醫(yī)院就診，診斷為“上呼吸道感染”，使用EDTA-K2真空采血管(上海碧迪醫(yī)療器械有限公司)采集靜脈血3 ml進行血常規(guī)檢查。采用全自動血細胞分析儀(SysmexXE-2100)進行血常規(guī)檢測時，儀器出現(xiàn)異常報警，信息顯示“血小板聚集、血小板分布異常、血液凝集”。血涂片瑞-吉姆薩染色鏡檢結果：大量血小板成團聚集(圖1A )，確定為EDTA依賴性假性血小板減少。

圖1 EDTA-K2抗凝血加入阿米卡星前后的血涂片

1.2 方法 筆者參考相關文獻[1-3] ，取患者原始EDTA-K2抗凝血標本1 ml于EP管中，然后加入阿米卡星(成都天臺山制藥有限公司)6.5 mg，混勻后放入37 ℃水浴箱孵育120 min，采用全自動血細胞分析儀和牛鮑計數(shù)板同時對加入阿米卡星的EDTA-K2抗凝血的血小板含量進行檢測，并將加入阿米卡星后的EDTA-K2抗凝血進行推片、瑞-吉姆薩染色后鏡檢。

1.3 結果 記錄采用牛鮑計數(shù)板對加入阿米卡星后的EDTA-K2抗凝血的血小板計數(shù)，結果為274×109/L；全自動血細胞分析儀上血小板檢測結果為268×109/L，并且儀器未出現(xiàn)報警信息；血涂片鏡檢結果：可見血小板形態(tài)正常呈單個散在分布且未見血小板聚集現(xiàn)象(圖1B)，根據(jù)血涂片估算血小板數(shù)量方法[4](PLT=一個油鏡視野中PLT平均數(shù)×15×109/L)，得出血小板估算值為270×109/L。綜合以上結果可確定，加入阿米卡星后全自動血細胞分析儀測得血小板結果準確。

2 討 論

乙二胺四乙酸依賴性血小板減少癥(ethyenediamine tetra-acetic aciddependent pseudothrombocytopenia，EDTA-PTCP)是由于EDTA 誘導血小板發(fā)生聚集，使血細胞分析儀在檢測時出現(xiàn)血小板假性減少的現(xiàn)象，發(fā)生率為0.07%～2.00%[2]。Gowland 等[5]于1969年首次報道，國內外均有相關報道[6，7]。當出現(xiàn)此類情況時，若不糾正，容易造成誤診，嚴重時可能發(fā)生醫(yī)療事故。筆者查閱相關文獻發(fā)現(xiàn)，多項研究認為，氨基糖苷類藥物(如阿米卡星)可以在不影響其他血細胞形態(tài)的前提下，既可抑制EDTA誘導血小板發(fā)生聚集，又可以使已經(jīng)發(fā)生聚集的血小板解聚[2,8,9]。因此，本研究采用阿米卡星嘗試對聚集血小板進行解聚，結果顯示標本在阿米卡星處理后儀器檢測結果、鏡下血小板估計值及牛鮑計數(shù)板計數(shù)結果相符合，與文獻[2]報道一致。

EDTA-PTCP的產(chǎn)生機制和原因主要包括兩方面：(1)在EDTA誘導下或修飾下導致血小板表面表達的某些抗原或受體(如GPⅠa/Ⅱa、GPⅡb /Ⅲa、磷脂、纖維蛋白受體等)的結構發(fā)生改變，導致與體內某些抗體或物質發(fā)生反應，從而發(fā)生血小板聚集現(xiàn)象[2，3]。(2)體內某些抗體在EDTA 誘導或修飾下與血小板膜表面抗原(如GPⅡb 與GPⅢa)或磷脂發(fā)生抗原抗體反應，從而發(fā)生血小板聚集[1]。而阿米卡星可抑制血小板發(fā)生聚集或者使已經(jīng)發(fā)生聚集的血小板解聚的原因可能是：阿米卡星可影響血小板表面糖蛋白(如CD62p、CD63、GMPI40等)表達從而抑制血小板活化[1]。血液中阿米卡星濃度越高對血小板的活化抑制作用越強，聚集的血小板解聚時間越短[7]。 值得注意的是，筆者在查閱文獻過程中未發(fā)現(xiàn)阿米卡星對血常規(guī)其他項目(白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白等)檢測準確性有影響的報道。因此，筆者認為，簽發(fā)EDTA-PTCP患者血常規(guī)報告時，最好將原始標本(除血小板相應項目外)與加入阿米卡星后測得的血小板相應檢測參數(shù)進行綜合報告，并在報告單上備注“血小板EDTA拮抗，結果已糾正”等提示性文字，最后簽發(fā)報告。

在檢驗中，當遇到血小板聚集導致血小板計數(shù)假性減少情況時，一般會采取重新采集枸櫞酸抗凝血或采集稀釋模式末梢血標本重新檢測等方法進行糾正，也有報道稱草酸鉀/氟化鈉抗凝血也可測得準確的血小板計數(shù)[1]。但是這些方法均需要重新采集標本。另外，對枸櫞酸鈉、EDTA、肝素、草酸鉀/氟化鈉等多種抗凝藥依賴性假性血小板減少情況的報道[9]，此時患者可能需要3次或者更多次采血。本研究采用阿米卡星將聚集的血小板重新解聚，無需重新采集標本仍可得到準確結果，建議臨床推廣。