曹紅娣

（常州市金壇區(qū)種植業(yè)技術(shù)推廣中心，常州 213200）

菜瓜是葫蘆科黃瓜屬甜瓜種的一個(gè)變種，為夏秋季節(jié)重要的果菜，生食酥脆，汁水豐盈，風(fēng)味獨(dú)特，是很好的消暑解渴瓜果。菜瓜是一種爬地栽培的瓜果，生長極為迅速，田間枝繁葉茂、不透氣，易出現(xiàn)病蟲害，故在其種植過程中常需施用農(nóng)藥進(jìn)行病蟲害防治。施用農(nóng)藥雖然可有效防治病蟲害，但也給菜瓜帶來了農(nóng)藥殘留。因此，快速、準(zhǔn)確地測定菜瓜中的農(nóng)藥殘留具有重要意義。同時(shí)，由于菜瓜樣品中含有一些糖、脂肪、色素等內(nèi)源性大分子雜質(zhì)，在經(jīng)過QuEChERS前處理后可能還有殘留，這會對目標(biāo)物的測定造成干擾。而凝膠滲透色譜（GPC）是基于體積排阻的分離原理，能有效去除大分子雜質(zhì)干擾物，降低樣品基質(zhì)帶來的背景影響[1]。為此，筆者擬采用QuEChERS分散固相萃取、乙腈提取、大體積進(jìn)樣，再經(jīng)GPC凈化后與GCMS儀器聯(lián)用實(shí)現(xiàn)自動化檢測，建立一種新的、可同時(shí)測定菜瓜中9種農(nóng)藥殘留的檢測方法?，F(xiàn)將相關(guān)研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

實(shí)驗(yàn)儀器：在線凝膠滲透色譜-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀GPC-GCMS-TQ8040（日本島津公司），氮?dú)獯蹈蓛x（美國organomation公司），電子天平（余姚金諾天平），冷凍離心機(jī)（德國eppendorf公司），高速冷凍離心機(jī)（美國Thermo公司），微型漩渦混合儀（金壇頂新），高速組織勻漿機(jī)（德國IKA公司）。

實(shí)驗(yàn)試劑：乙腈、丙酮和環(huán)己烷（均為色譜純，上海安譜），提取包（內(nèi)含4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉，上海安譜），凈化管（內(nèi)含900 mg硫酸鎂和150 mg PSA，上海安譜），9種農(nóng)藥（乙烯菌核利、毒死蜱、三唑酮、水胺硫磷、腐霉利、三唑磷、異菌脲、甲氰菊酯、氰戊菊酯）標(biāo)準(zhǔn)溶液[濃度為1 000 mg/L，購于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心(天津) ]，檢測樣品來源于江蘇省常州市金壇區(qū)各鄉(xiāng)鎮(zhèn)生產(chǎn)基地。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品的前處理

稱取10.00 g勻漿過的樣品，放入50 mL塑料離心管中，加入10 mL乙腈、提取包，旋上離心管蓋，劇烈震蕩1 min后于4 200 r/min下離心5 min，吸取上清液到凈化管中，渦旋混勻1 min，于4 200 r/min下離心5 min，吸取上清液過0.22 μm微孔濾膜，用于色譜-質(zhì)譜測定。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液的配制：分別移取9種標(biāo)準(zhǔn)溶液，用丙酮稀釋配成10 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液。

基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制：分別移取混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，用丙酮逐級稀釋配成5、10、50、100、500μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。按1.2.1樣品的前處理方法得到的菜瓜基質(zhì)溶液，經(jīng)氮?dú)獯蹈?，分別加入1 mL上述混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液復(fù)溶，過微孔濾膜，得到5、10、50、100、500μg/L的系列菜瓜基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（該溶液現(xiàn)配現(xiàn)用）。

1.2.3 儀器實(shí)驗(yàn)條件

GPC條件：CLNpak EV-200凝膠滲透色譜柱（2 mm×150 mm）；紫外檢測，波長為210 nm；流動相為丙酮∶環(huán)己烷混合溶液（3∶7），流速為0.1 mL/min，進(jìn)樣量為20 μL。

色譜條件：惰性熔融石英毛細(xì)管柱（5 m×0.53 mm），DB-5 ms預(yù)柱（5 m×0.25 mm×0.25 μm），DB-5 ms分析柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；載氣為氦氣（純度99.999%），恒線速度模式，流速為1.75 mL/min；柱溫箱升溫程序?yàn)槌跏紲囟?2.0 ℃，保持5.0 min，以8.0 ℃/min的速度升到300.0 ℃，保持7.75 min，分析時(shí)間約40.0 min；PTV進(jìn)樣口升溫程序?yàn)槌跏紲囟?20 ℃，保持5 min，以100 ℃/min迅速升溫到250 ℃，保持33.7 min，不分流進(jìn)樣。

質(zhì)譜條件：電子轟擊電離源EI，碰撞能量為70 eV；碰撞氣為氬氣（純度99.999%）；離子源溫度為230 ℃，接口溫度為300 ℃；溶劑延遲時(shí)間為9 min；采集方式為MRM。

2 結(jié)果與分析

2.1 新檢測方法的線性關(guān)系、檢出限和定量限

對5～500 μg/L的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測定，采用1.2.3的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行分析，以得到的各農(nóng)藥殘留對應(yīng)的定量離子的色譜峰面積為縱坐標(biāo)（y），以對應(yīng)的各農(nóng)藥殘留的濃度為橫坐標(biāo)（x），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得線性關(guān)系。由表1可知，9種農(nóng)藥在5～500 μg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（r）在0.999 0～0.999 9之間。以樣品中組分在儀器上產(chǎn)生的3倍信噪比（S/N）所對應(yīng)的組分濃度為本方法的檢出限（LOD），9種農(nóng)藥的檢出限（LOD）為0.08～0.53 μg/L；以樣品中組分在儀器上產(chǎn)生的10倍信噪比（S/N）所對應(yīng)的組分濃度為本方法的定量限（LOQ），9種農(nóng)藥的定量限（LOQ）為0.25～1.78 μg/L。

表1 9種農(nóng)藥的線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限

2.2 添加回收試驗(yàn)

稱取菜瓜樣品6份，添加5個(gè)水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)水平重復(fù)6次，進(jìn)行回收率和精密度測定。樣品采用1.2.2的方法進(jìn)行前處理，按1.2.3的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行分析。由表2可知，在樣品中添加5個(gè)水平后，9種農(nóng)藥的回收率在71%～103%之間，精密度在1.8%～7.5%之間。

表2 菜瓜樣品中添加5個(gè)濃度水平后9種農(nóng)藥的回收率和精密度(n=6)

2.3 新測定方法的具體應(yīng)用

在金壇區(qū)各鄉(xiāng)鎮(zhèn)基地隨機(jī)抽檢菜瓜樣品30份，按照1.2的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行處理測定，上述9種農(nóng)藥均未檢出。

3 結(jié) 論

采用在線凝膠滲透色譜-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，按照GB 23200.113-2018中QuEChERS前處理法，建立了一種新的菜瓜農(nóng)藥殘留檢測方法。采用該檢測方法可同時(shí)測定菜瓜中9種常見農(nóng)藥的殘留，結(jié)果表明，9種農(nóng)藥在5～500 μg/L范圍內(nèi)呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，回收率和精密度均能滿足測定的要求。該檢測方法操作簡便、快速、準(zhǔn)度高，適合菜瓜中9種農(nóng)藥殘留的同時(shí)測定。