李曉瀟 黎璇 黃繼杰 莫庸 李清霞 李夢(mèng) 黎旭 李月清 黃麗娟 陽(yáng)秀英

【摘要】 目的 探究丹皮-蒲公英及其配伍對(duì)慢性應(yīng)激小鼠胃腸動(dòng)力的影響。

方法 將70只小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組和丹皮、蒲公英及其不同配伍組共7個(gè)組。除正常對(duì)照組外，其余組采用不可預(yù)知的多種應(yīng)激方式造模28 d復(fù)制小鼠胃腸動(dòng)力障礙性模型。造模第15天起，模型組和正常對(duì)照組給予生理鹽水，其他各組分別相應(yīng)給予丹皮、蒲公英及其兩者不同配伍的提取液進(jìn)行小鼠灌胃處理，1次/d，給藥2周后測(cè)定小鼠胃殘留率和小腸推進(jìn)率。

結(jié)果 與正常對(duì)照組相比，模型組小腸推進(jìn)率明顯降低（P<0.05），蒲公英組、丹皮∶蒲公英=1∶2組的小腸推進(jìn)率明顯增高（P<0.01），丹皮組、丹皮∶蒲公英=1∶1組、丹皮∶蒲公英=2∶1組小腸推進(jìn)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;與模型組比較，各組小腸推進(jìn)率均明顯升高（P<0.05或0.01）;丹皮配伍蒲公英組小腸推進(jìn)率均明顯高于丹皮組（P<0.05或0.01）;丹皮∶蒲公英=1∶1組、丹皮∶蒲公英=2∶1組小腸推進(jìn)率明顯低于蒲公英組（P<0.05）。胃殘留率各組均低于模型組，但組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

結(jié)論 蒲公英、丹皮對(duì)應(yīng)激性胃腸動(dòng)力障礙均具有促進(jìn)作用，丹皮和蒲公英合適配伍能更好地改善胃腸動(dòng)力障礙。

【關(guān)鍵詞】 丹皮;蒲公英;慢性應(yīng)激;胃腸動(dòng)力

中圖分類號(hào)：R285.5?? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A?? DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.04.002

Effect of cortex moutan and dandelion and their compatibility on gastrointestinal motility in chronic stress mice

[HJ1*2][HJ]

LI Xiaoxiao1， LI Xuan1， HUANG Jijie1， MO Yong1， LI Qingxia1， LI Meng1， LI Xu1， LI Yueqing1， HUANG Lijuan2， YANG Xiuying2

（1. School of Clinical Medicine， 2.Department of Physiology， Youjiang Medical University for Nationalities， Baise 533000， Guangxi， China）

[HJ2][HJ]

【Abstract】 Objective To investigate the effects of cortex moutan and dandelion and their compatibility on gastrointestinal motility in chronic stress mice.

Methods 70 mice were randomly divided into 7 groups： normal control group， model group， cortex moutan group， dandelion group， and their different compatibility groups. In addition to the normal control group， models in the other groups were cultured for 28 days by various unpredictable multiple stress methods to replicate the model of gastrointestinal dyskinesia in mice. From the 15th day of the model culturing， the model group and the normal control group were given normal saline， and the other groups were correspondingly given the extracts of cortex moutan， dandelion and different compatibility of them once a day for gavage treatment of mice. In addition， gastric residual rate and small intestinal propulsion rate were measured after two weeks of administration.

Results Compared with the normal group， the small intestinal propulsion rate of the model group significantly decreased （P < 0.05）， the small intestinal propulsion rates of the dandelion group and 1 ∶ 2 group （the ratio of cortex moutan to dandelion） significantly increased （P < 0.01）. There was no statistically significant difference of the small intestinal propulsion rates between the cortex moutan group， the 1 ∶1 group （the ratio of cortex moutan to dandelion） and the 2 ∶ 1 group （the ratio of cortex moutan to dandelion） （P > 0.05）. Compared with the model group， the small intestinal propulsion rate significantly increased in each group （P < 0.05 or 0.01）. The small intestinal propulsion rates of the cortex moutan to dandelion compatibility groups significantly higher than that of the cortex moutan group （P < 0.05 or 0.01）. The small intestinal propulsion rates of the 1 ∶ 1 group and 2 ∶ 1 group were significantly lower than that of the dandelion group （P < 0.05）. The gastric residual rate was lower in each group than in the model group， but difference between groups was not statistically significant（P > 0.05）.

Conclusion Dandelion and cortex moutan can promote the stress gastrointestinal motility disorder， and the proper compatibility of cortex moutan and dandelion can improve the gastrointestinal motility disorder.

【Key words】 cortex moutan; dandelion; chronic stress; gastrointestinal motility

隨著科技的進(jìn)步和社會(huì)的發(fā)展，人們的生活、學(xué)習(xí)和工作壓力隨之增大，加上不正常的作息和不規(guī)律的飲食常常導(dǎo)致胃腸功能紊亂，出現(xiàn)腹痛、腹脹、腹瀉以及消化不良等癥狀。傳統(tǒng)中醫(yī)藥在調(diào)治胃腸疾病方面有著悠久的歷史和良好的療效。蒲公英味苦、甘，性寒，歸肝、胃二經(jīng)，具有清熱解毒、消腫和胃、疏通氣機(jī)之功效;現(xiàn)代研究表明，蒲公英具有抑菌抗炎、抗腫瘤、促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)等作用[1～3]。丹皮為毛茛科植物牡丹干燥根皮，具有清熱涼血、活血化瘀的功效，是一味常用的配伍藥。藥理學(xué)研究表明，丹皮具有抗炎、抑菌、抗氧化、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能、保護(hù)心血管等多種作用[4～6]。《本草綱目》記載，丹皮配伍大黃等藥具有消除腸道運(yùn)動(dòng)障礙等功效。有民間將蒲公英和丹皮合用治療消化不良、腹脹、腹痛等胃腸功能紊亂性疾病。因此，本研究通過(guò)建立應(yīng)激性胃腸功能障礙性模型，旨在探討丹皮、蒲公英及其不同比例的配伍對(duì)胃腸動(dòng)力的調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

6周齡清潔級(jí)昆明種小鼠70只，雌雄不拘，體重（25±2）g，由右江民族醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK桂2017-0003。

1.2 藥品

蒲公英（黃岡金貴中藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司，批號(hào)：D7070101）、丹皮（安徽廣和中藥股份有限公司，批號(hào)：170704）、活性碳末（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20160916）。

1.3 儀器

生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（BL-420F，成都泰盟軟件有限公司）、電子天平（型號(hào)：ARII40/C，上海奧毫斯公司生產(chǎn)）。

1.4 蒲公英和丹皮提取液的制備[7～8]

取200 g蒲公英，加蒸餾水2000 mL浸泡1 h，文火煮沸1 h后過(guò)濾。藥渣再加蒸餾水2000 mL二次煎煮，煮沸1 h后過(guò)濾，兩次濾液合并，于沸騰水浴濃縮至200 mL，使每mL含有1 g原藥材的藥液，即1 g/mL。牡丹皮煮法同蒲公英。分裝保存于冰箱備用。兩者混合液分別按不同的比例混合。

1.5 造模與分組

取70只小鼠按體重隨機(jī)分為正常對(duì)照組（生理鹽水）、丹皮組、蒲公英組、丹皮∶蒲公英=1∶1組、丹皮∶蒲公英=1∶2組、丹皮∶蒲公英=2∶1組和模型組。除正常對(duì)照組外，其他各組參考文獻(xiàn)資料并加以改進(jìn)，應(yīng)用多種不可預(yù)知的應(yīng)激刺激造模[9～10]。應(yīng)激方式包括禁食24 h，禁水12 h，強(qiáng)迫游泳10 min，夾尾15 min，電刺激足底（電壓30 V，每次10 s，間隔15 s，重復(fù)3次），倒置懸掛15 min、墊料潮濕飼養(yǎng)24 h等制備應(yīng)激動(dòng)物模型。每天隨機(jī)選取上述刺激中的任意一種，相鄰兩天的刺激不重復(fù)，連續(xù)刺激28 d，各種刺激方法平均使用4次。于刺激第15天起，各組按以下相應(yīng)的藥液灌胃給藥：正常對(duì)照組和模型組給予生理鹽水（0.1 mL/10 g），蒲公英組給予蒲公英提取液（10 g/kg）、丹皮組給予丹皮提取液（10 g/kg）、各組蒲公英-丹皮配伍給予相應(yīng)的配伍提取液（10 g/kg），1次/d，共14 d。造模期間，觀察小鼠的一般情況，包括毛發(fā)、體重、食欲、活動(dòng)等變化并與對(duì)照組比較。末次給藥后，通過(guò)胃殘留率和小腸推進(jìn)率檢測(cè)來(lái)綜合評(píng)價(jià)造模結(jié)果。

1.6 碳末懸液的制備

將5 g活性碳末放入100 mL蒸餾水中，攪拌均勻，使之溶解，靜置12 h，制成5%碳末混懸液。

1.7 指標(biāo)檢測(cè)

最后一次灌胃給藥前，小鼠禁食12 h，末次給藥30 min 后，按20 mL/kg灌服5%碳末懸液。20 min后處死小鼠，剖開(kāi)腹腔，結(jié)扎胃幽門和賁門，取出胃并稱胃全重和胃凈重。根據(jù)下列公式計(jì)算胃殘留率：胃內(nèi)容物殘留率（%）=（胃全重量-胃凈重量）/碳末懸液重量×100%。同時(shí)取幽門至回盲部小腸，并測(cè)量小腸總長(zhǎng)度和碳末推進(jìn)距離，計(jì)算碳末推進(jìn)百分比。碳末推進(jìn)率（%）= 碳末在小腸內(nèi)推進(jìn)距離/小腸總長(zhǎng)度×100%。最終以胃內(nèi)容物殘留率、碳末推進(jìn)率分別作為胃排空速度、小腸推進(jìn)速度的評(píng)價(jià)指標(biāo)。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 20.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，各組數(shù)據(jù)以（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析（LSD法），檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2 結(jié)? 果

2.1 各組小腸推進(jìn)率的比較

與正常對(duì)照組比較，模型組小腸推進(jìn)率明顯降低（P<0.01），蒲公英組和丹皮∶蒲公英=1∶2組小腸推進(jìn)率明顯增高（P<0.01），丹皮組、丹皮∶蒲公英=1∶1組、丹皮∶蒲公英=2∶1組小腸推進(jìn)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組比較，各組小腸推進(jìn)率均明顯增高（P<0.05或0.01）。丹皮配伍蒲公英組小腸推進(jìn)率均明顯高于丹皮組（P<0.05或0.01）;丹皮∶蒲公英=1∶1組、丹皮∶蒲公英=2∶1組小腸推進(jìn)率明顯低于蒲公英組（P<0.05）;丹皮∶蒲公英=1∶2組小腸推進(jìn)率與蒲公英組相當(dāng)。結(jié)果見(jiàn)圖1。

2.2 各組胃殘留率的比較

與模型組比較，各組胃殘留率有所降低，但各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)果見(jiàn)圖2。

3 討? 論

隨著胃腸動(dòng)力研究方法學(xué)的發(fā)展和胃腸動(dòng)力生理及神經(jīng)病理研究的深入，功能性消化不良（functional dyspepsia，F(xiàn)D）的發(fā)生被認(rèn)為與胃腸動(dòng)力障礙、腸道菌群失調(diào)、內(nèi)臟高敏感、免疫功能的改變以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能活動(dòng)發(fā)生改變等多個(gè)因素密切相關(guān)[6]，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)被認(rèn)為是其他因素變化的基礎(chǔ)，因此，精神狀態(tài)和心理因素被認(rèn)為在該類疾病發(fā)病中起著非常重要的作用。

本實(shí)驗(yàn)?zāi)M現(xiàn)實(shí)生活中情緒因素引發(fā)心身疾病的過(guò)程，通過(guò)不可預(yù)知的慢性應(yīng)激刺激，復(fù)制小鼠應(yīng)激性胃腸功能障礙模型。結(jié)果顯示：模型組小腸推進(jìn)率明顯低于正常對(duì)照組，說(shuō)明慢性應(yīng)激對(duì)小腸動(dòng)力產(chǎn)生明顯的抑制效應(yīng)，同時(shí)也說(shuō)明應(yīng)激性胃腸動(dòng)力障礙模型制備成功。經(jīng)丹皮、蒲公英及其兩者配伍治療后，小腸推進(jìn)率均明顯高于模型組，且丹皮組、丹皮∶蒲公英=1∶1組、丹皮∶蒲公英=2∶1組與正常對(duì)照組相比小腸推進(jìn)率無(wú)明顯差異，而蒲公英組和丹皮∶蒲公英=1∶2組小腸推進(jìn)率明顯高于正常對(duì)照組，說(shuō)明蒲公英、丹皮及其不同比例的配伍均可明顯提高小腸動(dòng)力的效應(yīng)，同時(shí)也表明合理比例的丹皮-蒲公英配伍能較好地改善應(yīng)激所致的胃腸動(dòng)力障礙性疾病，而蒲公英含量過(guò)多又會(huì)引起胃腸動(dòng)力功能亢進(jìn)的現(xiàn)象。蒲公英組小腸推進(jìn)率明顯高于丹皮及其與蒲公英的配伍組，說(shuō)明蒲公英促進(jìn)小腸動(dòng)力效應(yīng)明顯高于丹皮，同時(shí)也說(shuō)明丹皮配伍沒(méi)有協(xié)同蒲公英增強(qiáng)胃腸動(dòng)力效應(yīng)，而是有效降低蒲公英促動(dòng)力效應(yīng)，兩者共同調(diào)節(jié)使胃腸運(yùn)動(dòng)功能趨于恢復(fù)正常。

胃腸運(yùn)動(dòng)主要受自主神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)在神經(jīng)系統(tǒng)的共同調(diào)節(jié)。當(dāng)外源性應(yīng)激刺激作用于機(jī)體時(shí)，可能通過(guò)腦-腸軸改變胃腸激素的釋放，引起胃腸激素水平的異常，擾亂了胃腸運(yùn)動(dòng)的正常節(jié)律及其生理功能，從而導(dǎo)致胃腸感覺(jué)、運(yùn)動(dòng)的變化[6，9]。中醫(yī)藥在治療胃腸動(dòng)力障礙疾病的機(jī)制雖然尚不完全清楚，但目前認(rèn)為可能與調(diào)節(jié)胃腸激素、胃腸道微循環(huán)以及胃腸神經(jīng)功能等有關(guān)[11]。蒲公英、丹皮的化學(xué)成分復(fù)雜，兩者均含有黃酮類、甾醇類、酚酸類、香豆素類等多種化合物，同時(shí)丹皮還有酚苷類、單萜及其苷類[2，5]等?，F(xiàn)代藥理研究表明，蒲公英的促胃腸動(dòng)力作用與其化學(xué)成分阿魏酸和齊墩果酸密切相關(guān)[12]。本實(shí)驗(yàn)水提取液成分復(fù)雜多樣，其促動(dòng)力效應(yīng)成分及作用機(jī)制雖然復(fù)雜且不肯定，但是同樣取得理想的實(shí)驗(yàn)效果，且這種用藥方法更加方便而且實(shí)用，易于推廣使用。中醫(yī)擅于從整體出發(fā)，主張辨證論治，標(biāo)本兼治，治療效果得到大家的青睞和肯定。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蒲公英、丹皮對(duì)應(yīng)激性胃腸動(dòng)力障礙均具有促進(jìn)作用，丹皮配伍蒲公英降低了蒲公英促動(dòng)力效應(yīng)，兩者合適的配伍能更好地調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)、改善胃腸功能。蒲公英和丹皮的化學(xué)、藥理、機(jī)理、制劑等基礎(chǔ)和應(yīng)用研究雖然取得了一定的成果，但是其作用機(jī)制仍有待更進(jìn)一步的研究。

參考文獻(xiàn)

[1] ?張玉立，劉同亭，賈愛(ài)芹.中藥蒲公英對(duì)消化系統(tǒng)疾病的作用進(jìn)展[J].中華消化病與影像雜志（電子版），2018，8（2）：83-86.

[2] ?屠國(guó)昌.蒲公英化學(xué)成分、藥理作用和臨床應(yīng)用[J].海峽藥學(xué)，2012，24（5）：33-35.

[3] ?王一婷.蒲公英根化學(xué)成分及其抗氧化活性研究[D].延吉：延邊大學(xué)，2018.

[4] ?WANG Z Q，HE C N，PENG Y，et al.Origins，phytochemistry，pharmacology，analytical methods and safety of cortex moutan （Paeonia suffruticosa andrew）：a systematic review[J].Molecules，2017，22（6）：E946.

[5] ?翟春梅，孟祥瑛，付敬菊，等.牡丹皮的現(xiàn)代藥學(xué)研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息，2020，37（1）：109-114.

[6] ?許樹(shù)長(zhǎng)，孫會(huì)會(huì).胃腸動(dòng)力障礙與功能性疾病的診治進(jìn)展[J].上海醫(yī)學(xué)，2017，40（12）：720-722.

[7] ?梁桂英，付艷萍，欒添.蒲公英水提液對(duì)小鼠抗疲勞作用的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（33）：20402-20403.

[8] ?陳玉杰.蒲公英水提物對(duì)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（8）：205-208.

[9] ?肖政華，譚芊任，崔峻松，等.慢性應(yīng)激對(duì)小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)及血清GAS、MTL的影響[J].貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2018，40（1）：23-26.

[10] 鄧娜，藺曉源，易健，等.四磨湯有效成分對(duì)慢性應(yīng)激小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的影響[J].世界中醫(yī)藥，2013，8（7）：731-733.

[11] 郭彬彬，于慶生，沈毅，等.中醫(yī)藥對(duì)應(yīng)激性胃腸動(dòng)力障礙的治療研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥臨床雜志，2018，30（3）：578-581.

[12] 吳艷玲，樸惠善.蒲公英的促進(jìn)胃腸動(dòng)力活性有效部位及化學(xué)成分研究[J].延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào)，2005，28（1）：23-25.

（收稿日期：2020-06-28 修回日期：2020-12-16）

（編輯：潘明志）

基金項(xiàng)目：2017年廣西壯族自治區(qū)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃立項(xiàng)項(xiàng)目（201710599060）

作者簡(jiǎn)介：李曉瀟，女，在讀本科生。E-mail：841719807@qq.com

通信作者：黃麗娟。E-mail：huanglj36@163.com

[本文引用格式]李曉瀟，黎璇，黃繼杰，等.丹皮-蒲公英及其配伍對(duì)慢性應(yīng)激小鼠胃腸動(dòng)力的影響[J].右江醫(yī)學(xué)，2021，49（4）：246-249.