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干擾素調(diào)節(jié)因子1通過調(diào)控細(xì)胞焦亡參與小鼠肝臟缺血再灌注損傷

2021-06-04 06:59劉鈺王朝陽李世朋胡莎莎楊爽蔡金貞張國梁
天津醫(yī)藥 2021年5期
關(guān)鍵詞:焦亡陽性細(xì)胞孵育

劉鈺,王朝陽,李世朋,胡莎莎,楊爽,蔡金貞,張國梁△

肝缺血再灌注損傷(liver ischemia-reperfusion injury,LIRI)是肝臟切除、移植等手術(shù)過程中出現(xiàn)肝損傷和肝移植術(shù)后移植物功能障礙的主要原因[1]。了解LIRI的具體機(jī)制將有助于減少肝移植術(shù)后各種并發(fā)癥的發(fā)生,進(jìn)一步改善患者的預(yù)后[2]。干擾素調(diào)節(jié)因子-1(interferon regulatory factor-1,IRF-1)參與調(diào)節(jié)對(duì)病原體和同種抗原的炎癥反應(yīng),已被證實(shí)參與了缺血再灌注(IR)損傷的發(fā)生[3]。腎小管急性IR損傷時(shí)IRF-1表達(dá)上調(diào),進(jìn)而激活促炎細(xì)胞因子和趨化因子的表達(dá),引發(fā)一系列炎癥反應(yīng)[3]。細(xì)胞焦亡作為一種程序性死亡形式越來越受到人們重視,其機(jī)制、形態(tài)學(xué)變化及生化特征均有別于其他死亡形式,主要表現(xiàn)為病原體刺激下激活半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1和Caspase-4/5/11,以及裂解gasdermin D(GSDMD)和促炎細(xì)胞因子的釋放[4],同時(shí)伴有細(xì)胞腫脹,細(xì)胞膜孔形成[5]。目前IRF-1在LIRI中的研究尚少見報(bào)道。本文主要探討LIRI中IRF-1及細(xì)胞焦亡指標(biāo)的變化,同時(shí)觀察敲低或過表達(dá)IRF-1對(duì)細(xì)胞焦亡的影響及其可能機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料 無特定病原體(SPF)級(jí)健康雄性C57BL/6小鼠24只,體質(zhì)量(24±3)g,8~10周齡,購于北京華阜康生物科技股份有限公司。小鼠正常肝AML12細(xì)胞系購于中科院上海細(xì)胞庫。IRF-1小干擾RNA(siRNA)及陰性對(duì)照siRNA購于廣州銳博公司,IRF-1 siRNA靶序列:5'-CCAAGACATG?GAAGGCAAA-3'。過表達(dá)IRF-1腺病毒(IRF-1引物上游5'-ATGCCAATCACTCGAATGCG-3',下 游5'-CTATGGTG?CACAAGGAATGGC-3')及空載腺病毒購于漢恒生物。DMEM/F12培養(yǎng)基、胎牛血清和胰蛋白酶購于美國Gibco公司。Caspase-1和Cleaved-Caspase-1抗體購于英國Abcam公司。兔抗鼠IRF-1、GSDMD一抗購于武漢ABclonal公司,GAPDH抗體購于武漢Elabscience公司,辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的羊抗兔二抗購于美國CST公司。原位缺口末端標(biāo)記(TUNEL)檢測(cè)試劑盒購自德國Roche公司。白細(xì)胞介素(IL)-1β酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)試劑盒購于聯(lián)科生物公司。乳酸脫氫酶(LDH)細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒購于上海碧云天公司。細(xì)胞缺氧模型培養(yǎng)箱購于美國billups-rothenber公司,F(xiàn)ACSCalibur流式細(xì)胞儀購于美國BD Biosciences公司。透射電子顯微鏡購于上海日立高新技術(shù)公司。

1.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

1.2.1 小鼠肝缺血再灌注模型建立及分組 依照參考文獻(xiàn)[6]建模。采用隨機(jī)數(shù)字表法將24只C57BL/6小鼠分為4組,分別為假手術(shù)(Sham)組,IR 2、6、12 h組,每組6只。術(shù)前8 h禁食,自由飲水。腹腔注射1%戊巴比妥鈉(50 mg/kg),麻醉后經(jīng)腹部正中切開約3 cm,暴露腹腔肝臟,IR 2、6、12 h組血管夾夾閉肝中葉、左葉脈管(門靜脈、動(dòng)脈與膽道),實(shí)現(xiàn)70%肝臟缺血。缺血時(shí)觀察肝缺血葉(左、中葉)顏色是否變白,與肝右葉紅潤是否形成鮮明的對(duì)比。夾閉60 min后恢復(fù)血供,觀察肝缺血葉顏色是否恢復(fù),再灌注時(shí)間依次為2、6、12 h。Sham組僅做開腹、游離第一肝門后關(guān)腹處理。

1.2.2 小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶及IL-1β水平檢測(cè) 再灌注結(jié)束后經(jīng)下腔靜脈取血1 mL,靜置1 h,4 000 r/min離心15 min,留取血清。采用動(dòng)物專用全自動(dòng)生化儀mindray BS-240VET(南京貝登醫(yī)療有限公司)檢測(cè)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)水平,ELISA法檢測(cè)血清IL-1β水平。

1.2.3 蘇木精-伊紅(HE)染色觀察肝組織病理變化 采血結(jié)束后處死小鼠,分離缺血側(cè)肝組織后放入4%多聚甲醛固定24 h,再經(jīng)梯度乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟包埋后以4μm厚度制成石蠟切片。常規(guī)HE染色后觀察肝臟病理學(xué)變化,并根據(jù)Suzuki’s評(píng)分[2]對(duì)結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。肝缺血再灌注損傷包括竇狀充血、肝細(xì)胞質(zhì)空泡化、實(shí)質(zhì)壞死。其中,充血或空泡化:無(0分)、輕微(1分)、輕度(2分)、中度(3分)、重度(4分);壞死分級(jí):無細(xì)胞壞死(0分)、單細(xì)胞壞死(1分)、<30%壞死(2分)、30%~60%壞死(3分)、>60%壞死(4分)。

1.2.4 免疫組織化學(xué)染色觀察肝臟IRF-1表達(dá) 肝組織石蠟切片脫蠟、水化,檸檬酸鈉進(jìn)行抗原修復(fù)后在3%H2O2中孵育以封閉過氧化物酶。用IRF-1一抗(1∶200)于4℃孵育過夜,次日與HRP結(jié)合的二抗孵育后二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色,鏡下觀察。

1.2.5 TUNEL染色檢測(cè)小鼠肝臟凋亡和焦亡變化 石蠟切片進(jìn)行常規(guī)脫蠟、水化,蛋白酶K消化處理,滴加TUNEL反應(yīng)混合液,置于濕盒內(nèi),37℃避光孵育60 min。滴加DAPI溶液染核2 min。在熒光顯微鏡下觀察并記錄組織切片肝細(xì)胞總數(shù)和TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)。

1.2.6 透射電鏡察細(xì)胞形態(tài)變化 肝組織切片經(jīng)2.5%戊二醛中固定后再經(jīng)2%四氧化鋨二次固定,制成超薄切片并染色后用透射電鏡觀察細(xì)胞膜、核膜成孔和線粒體腫大現(xiàn)象。

1.2.7 Western blot檢測(cè)IRF-1、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1及GSDMD蛋白表達(dá) 取20 mg肝組織置于200μL RIPA裂解液中勻漿處理,待充分其裂解后于4℃、4 000 r/min離心15 min,留取上清,BCA法測(cè)蛋白濃度。20μg/孔上樣行SDSPAGE,轉(zhuǎn)至PVDF膜,用5%脫脂牛奶室溫封閉1 h,加一抗(IRF-1、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、GSDMD、GAPDH,均為1∶1 000稀釋)于4℃孵育過夜,TBST洗膜后用HRP標(biāo)記的羊抗兔二抗(1∶2 500稀釋)室溫孵育90 min,混合等體積化學(xué)發(fā)光液與PVDF膜反應(yīng),曝光顯影后記錄目的蛋白和內(nèi)參蛋白的光密度(OD)值并計(jì)算相對(duì)表達(dá)量。

1.3 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

1.3.1 AML12細(xì)胞缺氧復(fù)氧(模擬IR)模型的建立 將AML12細(xì)胞接種于6孔板,每孔細(xì)胞接種數(shù)量約為3×105個(gè),待細(xì)胞密度達(dá)到50%時(shí)分為4組,分別為空載體+IR組(轉(zhuǎn)染空載腺病毒)、過表達(dá)IRF-1+IR組(轉(zhuǎn)染過表達(dá)IRF-1的腺病毒)、NC+IR組(轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照siRNA)和IRF-1 siRNA+IR組(轉(zhuǎn)染沉默IRF-1表達(dá)的siRNA)。之后將細(xì)胞放入37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)36 h,移去培養(yǎng)基,換Hank’s液后放入缺氧箱模擬缺血缺氧處理,缺氧箱內(nèi)O2體積分?jǐn)?shù)<1%。1 h后各孔換DMEM/F12培養(yǎng)基后繼續(xù)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 h以模擬再灌注處理。

1.3.2 透射電鏡觀察AML12細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化及Western blot檢測(cè)IRF-1、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1及GSDMD蛋白的表達(dá) 4組細(xì)胞分組處理結(jié)束后分別按照1.2.6和1.2.7的方法觀察細(xì)胞形態(tài)變化和檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)。

1.3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞焦亡 取NC+IR組與IRF-1 siRNA+IR組細(xì)胞(每組約1×106個(gè)細(xì)胞),預(yù)冷PBS洗滌后懸浮于1 mL結(jié)合緩沖液中。每組取100μL細(xì)胞,再分別加入5μL膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素(Annexin V-FITC)和碘化丙啶(PI)。室溫下避光孵育10 min后采用FACSCalibur流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞焦亡變化。因細(xì)胞焦亡時(shí),細(xì)胞膜上的氣孔打開,Annexin V-FITC進(jìn)入細(xì)胞,與膜內(nèi)磷脂酰絲氨酸結(jié)合染色,而PI也可通過氣孔進(jìn)入焦亡細(xì)胞與DNA結(jié)合使其染色,故Annexin V-FITC/PI雙陽的晚期凋亡細(xì)胞也可認(rèn)為是焦亡細(xì)胞。

1.3.4 酶標(biāo)法檢測(cè)相對(duì)LDH釋放 在96孔板上設(shè)置NC+IR孔、IRF-1 siRNA+IR孔、樣品對(duì)照孔、背景空白對(duì)照孔及樣品最大酶活性對(duì)照孔。檢測(cè)前1 h,在樣品最大酶活性對(duì)照孔中加入LDH釋放試劑,反復(fù)吹打混勻并繼續(xù)在培養(yǎng)箱中孵育。1 h后將96孔板以1 000 r/min離心2 min。各孔分別取等量上清液加入至新96孔板中,酶標(biāo)儀檢測(cè)各組490 nm處的OD值,計(jì)算LDH相對(duì)釋放量,相對(duì)釋放量=(OD實(shí)驗(yàn)組-對(duì)照組)/(OD最大酶活性組-對(duì)照組)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用GraphPad Prism 8.0.2進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,Shapiro-Wilk test對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,2組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),多組間比較采用單因素方差分析,組間多重比較采用Tukey法。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組小鼠血清ALT、AST及IL-1β變化 與Sham組相比,IR各組血清ALT、AST水平均有明顯升高,IR2~12 h內(nèi)隨時(shí)間延長升高,在12 h達(dá)到峰值(P<0.05)。與Sham組相比,IR2 h組血清IL-1β水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,IR6 h和IR12 h組血清IL-1β水平高于Sham組,見表1。

Tab.1 Comparison of serum levels of ALT,AST and IL-1βbetween four groups of mice表1 各組小鼠血清ALT、AST和IL-1β水平比較(n=6,±s)

Tab.1 Comparison of serum levels of ALT,AST and IL-1βbetween four groups of mice表1 各組小鼠血清ALT、AST和IL-1β水平比較(n=6,±s)

**P<0.01;a與Sham組比較,b與IR2 h組比較,c與IR6 h組比較,P<0.05

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2.2 4組小鼠肝臟病理改變 小鼠肝臟經(jīng)IR處理后肝組織損傷明顯加重,與Sham組相比,IR各組肝板排列紊亂,肝細(xì)胞腫脹、片狀壞死,肝竇變窄,紅細(xì)胞淤積增多,隨再灌注時(shí)間延長(2~12 h)而損傷加重,見圖1。IR各組Suzuki’s評(píng)分均較Sham組升高,IR6 h、12 h組較2 h組也有明顯升高(P<0.05),見圖2。

2.3 4組小鼠肝細(xì)胞IRF-1表達(dá)情況 免疫組化染色示IRF-1主要定位于細(xì)胞質(zhì),陽性細(xì)胞呈深棕色。Sham組未見IRF-1陽性細(xì)胞,IR2 h后可見少量陽性細(xì)胞,6 h后IRF-1陽性細(xì)胞數(shù)增多,呈現(xiàn)片狀深棕色染色,IR12 h后IRF-1陽性細(xì)胞有所減少,見圖3。

Fig.1 Changes of liver pathology in each group(HE staining,×200)圖1 各組小鼠肝臟病理學(xué)改變(HE染色,×200)

Fig.2 Comparison of liver Suzuki’s scores between the four groups圖2 4組小鼠肝臟Suzuki’s評(píng)分比較

Fig.3 Changes of IRF-1 expression in liver of mice in each group(immumohistochemical staining,×200)圖3 各組小鼠肝臟IRF-1表達(dá)變化(免疫組化染色,×200)

2.4 4組肝臟TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)比較 與Sham組相比,小鼠肝臟細(xì)胞在IR過程中TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)增加,在6 h內(nèi)達(dá)到峰值(P<0.05),見圖4、5。

2.5 肝組織和AML12細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化 透射電鏡下可見,Sham組肝臟細(xì)胞形態(tài)大體正常,IR2~12 h后肝細(xì)胞均出現(xiàn)不同程度的核膜損傷和線粒體腫脹,見圖6。在AML12細(xì)胞中,與NC+IR組比較,IRF-1 siRNA+IR組細(xì)胞膜和核膜成孔或破裂減少,線粒體腫脹數(shù)量下降,細(xì)胞損傷減輕,見圖7。

Fig.4 Results of TUNEL staining of liver cells in each group(×200)圖4 各組小鼠肝臟細(xì)胞TUNEL染色結(jié)果(×200)

Fig.5 Comparison of liver apoptosis and pyroptosis cells of mice in each group(×200)圖5 各組小鼠肝臟細(xì)胞凋亡和焦亡率比較(×200)

2.6 小鼠肝組織與AML12細(xì)胞中IRF-1、Caspase-1和GSDMD蛋白表達(dá)情況 肝組織:與Sham組相比,IR6 h和12 h組IRF-1、Caspase-1和GSDMD表達(dá)均明顯升高(P<0.05),見圖8、9。AML12細(xì)胞:過表達(dá)IRF-1+IR組與空載體+IR組相比,伴隨IRF-1的表達(dá)增高,GSDMD和Cleaved-Caspase-1也隨之明顯增高(均P<0.05),見圖10、11。而敲低IRF-1表達(dá)后與對(duì)照組相比,Caspase-1和GSDMD蛋白表達(dá)均減少(均P<0.05),見圖12、13。IRF-1可通過影響Caspase-1與GSDMD的表達(dá)和Cleaved-Caspase-1片段的生成調(diào)控焦亡。

2.7 沉默IRF-1表達(dá)后AML12細(xì)胞焦亡率和LDH釋放量變化 與NC+IR組相比,IRF-1 siRNA+IR組細(xì)胞焦亡率下降,LDH釋放量減少約20%,見圖14、表2。

Fig.6 Morphological changes of liver tissue in four groups under transmission electron microscope圖6 透射電鏡下4組小鼠肝組織形態(tài)變化

Fig.7 Morphological changes of AML12 cells in four groups observed under transmission electron microscopy圖7 透射電鏡下2組AML12細(xì)胞形態(tài)變化

Fig.8 The expressions of IRF-1,Caspase-1 and GSDMD in liver of mice detected by Western blot assay圖8 Western blot檢測(cè)各組小鼠肝臟IRF-1,Caspase-1和GSDMD表達(dá)

Fig.9 Comparison of IRF-1,Caspase-1 and GSDMD in liver of mice between the four groups圖9 各組小鼠肝臟IRF-1,Caspase-1和GSDMD表達(dá)比較

Fig.10 The expressions of IRF-1,Cleaved-Caspase-1 and GSDMD proteins in the overexpressed IRF-1+IR group and the vector+IR group圖10 Western blot檢測(cè)過表達(dá)IRF-1+IR組與空載體+IR組細(xì)胞IRF-1、Cleaved-Caspase-1和GSDMD表達(dá)

Fig.11 Comparison of IRF-1,Cleaved-Caspase-1 and GSDMD expression levels between the overexpressed IRF-1+IR group and vector+IR group圖11 過表達(dá)IRF-1+IR組與空載體+IR組細(xì)胞IRF-1、Cleaved-Caspase-1和GSDMD蛋白表達(dá)水平比較

Fig.12 The expressions of IRF-1,Caspase-1 and GSDMD proteins in the IRF-1 siRNA+IR group and NC+IR group圖12 Western blot檢測(cè)過表達(dá)IRF-1 siRNA+IR組與NC+IR組細(xì)胞IRF-1、Caspase-1和GSDMD表達(dá)

Fig.13 Comparison of IRF-1,Caspase-1 and GSDMD expressionlevels between the IRF-1 siRNA+IR group and NC+IR group圖13 IRF-1 siRNA+IR組與NC+IR組細(xì)胞IRF-1、Caspase-1和GSDMD蛋白表達(dá)水平比較

Fig.14 Flow cytometry of AML12 cells in IRF-1 siRNA+IR group and NC+IR group圖14 IRF-1 siRNA+IR組與NC+IR組的AML12細(xì)胞流式圖

Tab.2 Comparison of cell apoptosis rate and LDH relative release level between IRF-1 siRNA+IR group and NC+IR group表2 IRF-1 siRNA+IR組與NC+IR組細(xì)胞焦亡率和LDH相對(duì)釋放水平比較 (n=6,±s)

*P<0.05,**P<0.01

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3 討論

LIRI是肝切除、移植后供體肝功能障礙的主要原因[1]。LIRI過程中涉及的因素及機(jī)制包括細(xì)胞內(nèi)鈣超載、氧化應(yīng)激、線粒體、中性粒細(xì)胞和肝枯否細(xì)胞(KCs)、細(xì)胞因子和趨化因子等[7]。IRF-1作為一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子在IR損傷過程中起到重要作用[7]。正常細(xì)胞中IRF-1處于低表達(dá)或無活性狀態(tài),受到干擾素(IFN)刺激后表達(dá)增加,調(diào)控下游炎性細(xì)胞因子表達(dá),還可抑制腫瘤形成和細(xì)胞生長[8-9]。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)小鼠肝臟IR模型中IRF-1表達(dá)增高,參與了下游炎性因子的產(chǎn)生。

焦亡是一種Caspase-1依賴性的細(xì)胞程序性死亡形式,其主要特點(diǎn)是快速的DNA片段化、細(xì)胞膜破裂和促炎因子的產(chǎn)生。經(jīng)典通路中炎性小體的激活是重要的一步,其可激活Caspase-1,活化的Caspase-1可對(duì)GSDMD進(jìn)行切割,形成的GSDMD-N端與細(xì)胞膜磷脂蛋白結(jié)合形成孔洞,還可將IL-1β和IL-18前體切割成有活性的IL-1β和IL-18,與其他促炎因子一起經(jīng)孔洞釋放到胞外,造成炎癥反應(yīng)[10-14]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與Sham組相比,小鼠IR6 h和12 h后肝臟IRF-1、Caspase-1和GSDMD蛋白表達(dá)明顯增高,血清ALT、AST和IL-1β水平也有顯著升高,同時(shí)TUNEL染色發(fā)現(xiàn)小鼠肝臟IR后損傷加重,細(xì)胞凋亡增多,同時(shí)伴有核膜成孔和線粒體腫脹,說明焦亡參與小鼠LIRI,促進(jìn)炎癥反應(yīng),加重了肝臟損傷。

本研究發(fā)現(xiàn)小鼠肝臟IR 2~12 h后IRF-1、Caspase-1、GSDMD均有不同程度升高,表明這幾個(gè)指標(biāo)可能存在關(guān)聯(lián)。有文獻(xiàn)報(bào)道IRF-1可通過激活Caspase-1促進(jìn)腦脊髓炎(EAE)和多發(fā)性硬化癥(MS)中少突膠質(zhì)細(xì)胞的焦亡[15]。另有研究證實(shí)Caspase-1基因含有IRF-1結(jié)合元件(IRE),IFN刺激少突膠質(zhì)祖細(xì)胞后,如果缺少IRF-1的存在,無法激活Caspase-1[16]。而小鼠IRF-1基因敲除后能減弱Caspase-1激活和凋亡相關(guān)微粒蛋白(ASC)在內(nèi)的焦亡小體的形成并減少下游高遷移率族蛋白1(HMGB1)、IL-1β釋放[17-19]。結(jié)合本研究結(jié)果,筆者推測(cè)肝組織缺血再灌注過程中IRF-1可能通過激活Caspase-1調(diào)控焦亡加重肝細(xì)胞損傷。

為驗(yàn)證IRF-1是否對(duì)焦亡產(chǎn)生影響,在體外實(shí)驗(yàn)中對(duì)AML12細(xì)胞感染空載腺病毒和過表達(dá)IRF-1的腺病毒后進(jìn)行模擬小鼠肝臟缺血再灌注(缺氧復(fù)氧)處理,結(jié)果顯示過表達(dá)IRF-1后伴隨IRF-1的表達(dá)升高,GSDMD和Cleaved-Caspase-1也隨之增高,說明IRF-1表達(dá)增多后促使Caspase-1被切割,形成大量的Cleaved-Caspase-1片段,即IRF-1通過調(diào)控AML12細(xì)胞缺氧復(fù)氧過程中Caspase-1的激活影響細(xì)胞焦亡。

與此同時(shí),本研究通過siRNA實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),與NC+IR組相比,IRF-1 siRNA+IR組AML12細(xì)胞Caspase-1和GSDMD隨IRF-1表達(dá)下調(diào)也相應(yīng)減少,細(xì)胞上清LDH的釋放量下降;同時(shí)流式結(jié)果顯示,伴隨IRF-1的下調(diào),細(xì)胞焦亡率下降,形態(tài)學(xué)顯示細(xì)胞膜和核膜成孔減少,核膜完整性損傷減輕,線粒體腫脹數(shù)量減少,上述結(jié)果提示下調(diào)IRF-1表達(dá)能影響Caspase-1和GSDMD的表達(dá),從而減少細(xì)胞膜的破裂或膜上氣孔的形成,減少細(xì)胞焦亡。

綜上所述,IRF-1可通過調(diào)節(jié)Caspase-1的轉(zhuǎn)錄或激活和GSDMD的表達(dá)以及IL-1β的釋放調(diào)控焦亡,進(jìn)而參與小鼠LIRI,可能為減輕肝切除和移植過程中的損傷提供新的見解。

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