白海軍，李志江*

（1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)體育教研部，黑龍江 大慶 163000；2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)食品學(xué)院，黑龍江 大慶 163000）

現(xiàn)今社會(huì)節(jié)奏的不斷加快，高負(fù)荷的腦力與體力勞動(dòng)者易出現(xiàn)疲勞癥狀，致使工作效率降低乃至威脅身心健康，研究表明通過(guò)適當(dāng)補(bǔ)充抗疲勞外源活性物質(zhì)，是一種方便、靈活的延緩疲勞手段[1-2]。目前已發(fā)現(xiàn)大量具有抗疲勞活性的物質(zhì)，諸如多糖、多肽、植物多酚等，它們?cè)诰邆淇寡趸钚缘耐瑫r(shí)還兼具抗疲勞作用，因而不斷有學(xué)者根據(jù)疲勞產(chǎn)生的“自由基理論”嘗試建立抗氧化能力與抗疲勞作用之間的聯(lián)系[3]，為抗疲勞功能產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。牛磺酸作為功能性飲品的常見(jiàn)配料，已被大量研究證實(shí)能通過(guò)提高超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活力、降低肝組織丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，減輕活性氧自由基對(duì)機(jī)體產(chǎn)生的氧化損傷，從而達(dá)到緩解疲勞的功效[4]。隨著蛋白質(zhì)工業(yè)技術(shù)的不斷發(fā)展，水解蛋白日益成為國(guó)內(nèi)外功能性食品的重要配料，其生物利用率高并含有大量可調(diào)節(jié)機(jī)體生理功能的抗氧化活性肽[5-6]，能夠有效抑制生物大分子過(guò)氧化反應(yīng)并清除體內(nèi)自由基[7]，且能提高抗氧化酶活性、緩解疲勞[8]。張玉萍等[9]研究發(fā)現(xiàn)水解大豆蛋白在增強(qiáng)大鼠耐力的同時(shí)，還能夠降低疲勞小鼠的血乳酸含量，驗(yàn)證了其具有抗疲勞活性。此外，劉晶等[10]認(rèn)為具有抗疲勞作用的抗氧化物質(zhì)之間存在協(xié)同作用，這種協(xié)同作用有利于增強(qiáng)抗疲勞功效。楊曉等[11]也發(fā)現(xiàn)大豆肽和?；撬峄旌现髮?duì)小鼠的抗疲勞效果優(yōu)于大豆肽單體。

活性物質(zhì)功效的評(píng)判通常需要建立動(dòng)物學(xué)模型，目前水解大豆蛋白單體與牛磺酸單體的抗氧化活性與抗疲勞活性已被大量研究證實(shí)[12-13]，由于建立動(dòng)物學(xué)模型實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)、操作繁瑣、成本較高，所以該方法不適用于兩種或多種活性物質(zhì)協(xié)同作用的功能性評(píng)價(jià)的初篩。因此，本實(shí)驗(yàn)擬選取商業(yè)水解蛋白以及?；撬釂误w復(fù)配?；撬?水解大豆蛋白（taurine-hydrolyzed soybean protein composite，TSPC），通過(guò)體外抗氧化實(shí)驗(yàn)對(duì)配方進(jìn)行初期篩分，并通過(guò)大鼠運(yùn)動(dòng)性疲勞模型以及相關(guān)血液生化指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，從而更好地為抗疲勞補(bǔ)充劑協(xié)同作用的后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究提供理論依據(jù)，以期為抗疲勞類產(chǎn)品的制備及活性評(píng)價(jià)提供思路。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

SPF級(jí)SD種8 周齡雄性健康大鼠50 只（使用許可證號(hào)： SYXK（黑）2016-004），個(gè)體質(zhì)量約（220±20）g， 購(gòu)自東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，飼養(yǎng)期間給予嚙齒類動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料及自由飲水，飼養(yǎng)環(huán)境條件：恒定相對(duì)濕度55%、室溫（25±1）℃。

水解大豆蛋白（hydrolyzed soybean protein，HSP）、大豆分離蛋白（soy protein isolate，SPI） 山東禹王集團(tuán)有限公司；?；撬帷⑧彵饺?北京百靈 威科技有限公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH） 美國(guó)Sigma 公司；生化指標(biāo)檢測(cè)試劑盒 上海碧云天生物技術(shù)有限公司；其他試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

UV-2600紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 日本島津公司；FC酶標(biāo)儀 美國(guó)賽默飛世爾科技公司；磁力攪拌器 德國(guó)IKA公司；大鼠跑臺(tái) 北京智鼠多寶生物科技有限責(zé)任公司。

1.3 方法

1.3.1 HSP的水解度測(cè)定

HSP的水解度采用三氯乙酸（trichloroacetic acid，TCA）沉淀法進(jìn)行分析[14]，根據(jù)TCA沉淀蛋白的特性，以可溶性氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)表征水解度，將1 mg/mL HSP或SPI溶液與質(zhì)量分?jǐn)?shù)10% TCA等體積充分混合后，在6000×g條件下離心15 min，并用凱氏定氮法測(cè)定沉淀中的氮質(zhì)量?？扇苄缘|(zhì)量分?jǐn)?shù)按公式（1）計(jì)算。

式中：m0表示SPI中TCA-沉淀氮質(zhì)量/mg；m1表示HSP中TCA-沉淀氮質(zhì)量/mg；mT為SPI中的總氮質(zhì)量/mg。

1.3.2 TSPC的制備

在室溫下準(zhǔn)確稱取牛磺酸和HS P并用去離子水稀釋，控制HSP的質(zhì)量濃度為0.5 g/L，并使?；撬崤cHSP的質(zhì)量濃度比分別為1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50，以0.5 g/L HSP和0.5 g/L SPI溶液為對(duì)照組，在200 r/min下磁力攪拌20 min使樣品充分混合，最后在3000 r/min條件下均質(zhì)2 min。

1.3.3 TSPC、SPI體外抗氧化性的測(cè)定

1.3.3.1 DPPH自由基清除能力的測(cè)定

參考蔡俊等[15]的方法并稍加修改，用無(wú)水乙醇配制質(zhì)量濃度為50 μg/mL的DPPH溶液，用移液槍吸取DPPH溶液1.5 mL、TSPC或SPI 25 μL置于96 孔平板，充分 振蕩混勻后于25 ℃恒溫暗箱中孵育30 min，以無(wú)水乙醇代替DPPH溶液作為對(duì)照，測(cè)定517 nm波長(zhǎng)處的吸光度， 按公式（2）計(jì)算DPPH自由基清除率。

1.3.3.2 超氧陰離子自由基清除能力的測(cè)定

參考馬詩(shī)文等[16]的方法，取TSPC或SPI 200 μL與5.76 mL的Tris-HCl緩沖液（50 mmol/L、pH 8.2）充分振蕩混勻，于25 ℃孵育10 min后加入40 μL鄰苯三酚（25 mmol/L），隨后每隔1 min測(cè)定320 nm波長(zhǎng)處的吸光度，作吸光度隨時(shí)間變化的回歸方程，方程斜率即為自氧化速率（ΔA1），以蒸餾水為對(duì)空白對(duì)照（回歸方程斜率ΔA0），超氧陰離子自由基清除率按公式（3）計(jì)算。

1.3.3.3 抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力的測(cè)定

參照吳瑕等[17]的方法并稍作修改。將1 mL TSPC或SPI、3 mL 0.02 mol/L硫代巴比妥酸溶液和17 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)7.5%三氯乙酸-鹽酸溶液充分混合并沸水浴30 min，冷卻至室溫后取樣并與20 mL氯仿混合，3000 r/min離心15 min后取上清液，測(cè)定其在532 nm波長(zhǎng)處的吸光度（A532nm），以每升脂質(zhì)氧化樣品溶液中丙二醛的質(zhì)量表示硫代巴比妥酸反應(yīng)物（thiobarbituric acid reactive species，TBARS）值，具體按式（4）計(jì)算。

式中：V為樣品溶液的體積（1 mL）。

1.3.4 TSPC抗疲勞實(shí)驗(yàn)

1.3.4.1 運(yùn)動(dòng)性疲勞大鼠模型的建立

參考陳艷華等[18]的方法，選取健康雄性SD種大鼠50 只并隨機(jī)分為5 組，設(shè)立對(duì)照組以及疲勞模型組，再根據(jù)TSPC體外抗氧化活性的差異設(shè)立?；撬岣撸ˋ組，1∶10）、中（B組，1∶20）、低（C組，1∶30）劑量組。除正常對(duì)照組外，其余大鼠進(jìn)行持續(xù)20 min的跑臺(tái)適應(yīng)性訓(xùn)練5 d，跑臺(tái)速率由12 m/min逐漸提升至24 m/min。從第6天起，跑臺(tái)速率控制在24 m/min持續(xù)40 min，運(yùn)動(dòng)負(fù)荷強(qiáng)度相當(dāng)于60%～70%的最大攝氧量，每6 d休息1 d，7 d為一個(gè)周期，約21 d后大鼠出現(xiàn)行典型運(yùn)動(dòng)性疲勞行為學(xué)異常狀況，如動(dòng)作遲緩、鼠毛稀疏、食欲減退等，視為造模成功，采取灌胃法給予大鼠TSPC溶液，正常組及模型組給予生理鹽水，每次灌胃3 mL/只，持續(xù)訓(xùn)練15 d直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。

1.3.4.2 跑臺(tái)耐力實(shí)驗(yàn)

跑臺(tái)耐力實(shí)驗(yàn)實(shí)施胃飼的最后一天，跑臺(tái)速率控制在32 m/min，使其運(yùn)動(dòng)負(fù)荷強(qiáng)度高于90%的最大攝氧量。在大鼠跑步過(guò)程中采用電刺激以保持其持續(xù)的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度，當(dāng)大鼠不能維持跑步狀態(tài)時(shí)，允許其休息2 min，控制累計(jì) 休息時(shí)間10 min，在累計(jì)休息時(shí)間超過(guò)10 min后，連續(xù)刺激仍無(wú)法保持強(qiáng)度的狀態(tài)記為力竭，并記錄總運(yùn)動(dòng)時(shí)間。

1.3.4.3 生化指標(biāo)檢測(cè)方法

最后一組跑臺(tái)耐力實(shí)驗(yàn)結(jié)束后立即處死大鼠，眼球取血并將采集到的新鮮血液于4 ℃靜置1 h后，在3000 r/min 條件下分離15 min取上層血清，乳酸（lactic acid，LA）濃度、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）濃度、SOD活力、GSH-Px活力、過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）活力和丙二醛（malondialdehyde，MDA）濃度嚴(yán)格按照試劑盒操作說(shuō)明測(cè)定，剩余血清保存于-70 ℃超低溫冰箱中備用。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

應(yīng)用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，多樣本平均值間比較采用單因素方差分析檢驗(yàn)，各組間多重比較采用最小顯著性差異（least significant difference，LSD）法，水迷宮數(shù)據(jù)采用重復(fù)設(shè)計(jì)性方差分析，P＜0.05為差異有顯著性。采用Origin 2017軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同配比對(duì)TSPC體外抗氧化活性的影響

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)DPPH自由基清除能力、超氧自由基清除能力以及抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力對(duì)TSPC進(jìn)行綜合評(píng)判。根據(jù)TCA法測(cè)定HSP水解度為（35.32±1.23）%，并可以發(fā)現(xiàn)HSP的體外抗氧化指標(biāo)均高于未處理的SPI。

圖 1 TSPC對(duì)DPPH自由基清除作用Fig. 1 Scavenging effect of TSPC on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical

DPPH自由基清除能力是一種被用于評(píng)判物質(zhì)是抗氧化活性的指標(biāo)，DPPH的乙醇溶液呈藍(lán)紫色，在517 nm波長(zhǎng)處具有最大吸收峰，具有自由基清除能力的物質(zhì)所提供的電子會(huì)與DPPH結(jié)合從而使其褪色。如圖1所示，5 種配比的TSPC均具有DPPH自由基清除能力，并與?；撬嵩谌芤褐兴嫉谋壤收嚓P(guān)，SPI的DPPH自由基清除能力相對(duì)較低。當(dāng)牛磺酸與HSP質(zhì)量濃度比為1∶10時(shí)，復(fù)合體系對(duì)DPPH自由基的清除能力最大（75.8%）。

超氧陰離子自由基具有極強(qiáng)的生物毒性，清除超氧陰離子自由基的能力可用來(lái)判斷被測(cè)物的抗氧化能力，在本實(shí)驗(yàn)中鄰苯三酚自氧化形成的超氧陰離子自由基 有色產(chǎn)物的濃度與320 nm波長(zhǎng)處的吸光度呈線性關(guān)系。如圖2所示，當(dāng)?；撬崤cHSP質(zhì)量濃度比低于1∶20時(shí)，超氧陰離子自由基清除率隨HSP比例增加呈上升趨勢(shì)；當(dāng)質(zhì)量濃度比超過(guò)1∶20后呈平穩(wěn)趨勢(shì)，質(zhì)量濃度比達(dá)到1∶20時(shí)超氧陰離子自由基清除率最大，達(dá)到71.4%。

圖 2 TSPC對(duì)超氧陰離子自由基清除作用Fig. 2 Scavenging effect of TSPC on superoxide anion radical

圖 3 TSPC抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力Fig. 3 Anti-lipid peroxidation capacity of TSPC

抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力可以通過(guò)TBARS法測(cè)定，其原理是脂質(zhì)氧化的重要終產(chǎn)物MDA可與硫代巴比妥酸發(fā)生顏色反應(yīng)，并在532 nm波長(zhǎng)處具有最大吸收，吸光度越低說(shuō)明抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力越強(qiáng)。如圖3所示，SPI與水解SPI的抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力相對(duì)較弱，隨著?；撬崤cHSP質(zhì)量濃度比增加，TBARS值逐漸降低，質(zhì)量濃度比低于1∶30時(shí)TBARS值與對(duì)照HSP組無(wú)顯著差異（P＞0.05），當(dāng)質(zhì)量濃度比超過(guò)1∶30后TBARS值顯著降低（P＜0.05），質(zhì)量濃度比達(dá)到1∶10時(shí)抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力最強(qiáng)。

根據(jù)上述體外抗氧化指標(biāo)的綜合分析，最終選取1∶10（A組）、1∶20（B組）、1∶30（C組）3 種質(zhì)量濃度比對(duì)TSPC進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，從耐力跑臺(tái)以及體內(nèi)生化指標(biāo)共同探究TSPC抗氧化活性與抗疲勞功能的關(guān)系。

2.2 TSPC抗疲勞實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 大鼠力竭跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)時(shí)間

運(yùn)動(dòng)耐力的時(shí)間能客觀機(jī)體的疲勞程度，是評(píng)判實(shí)驗(yàn)樣本抗疲勞功效最直觀的指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1，與對(duì)照組相比，模型組的運(yùn)動(dòng)時(shí)間顯著縮短（P＜0.05），說(shuō)明模型組出現(xiàn)了疲勞癥狀，經(jīng)過(guò)15 d胃飼后，A、B、C組的運(yùn)動(dòng)時(shí)間與模型組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＜0.05），分別提升了61.2%、55.8%、37.4%，A組運(yùn)動(dòng)時(shí)間最長(zhǎng)，C組運(yùn)動(dòng)時(shí)間最短，但A、B兩組間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表 1 TSPC對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)間及血清LA、BUN濃度的影響Table 1 Effect of TSPC on exercise endurance time and serum LA and BUN concentrations in rats

2.2.2 大鼠血清LA、BUN濃度

通過(guò)對(duì)血清中LA和BUN濃度可判斷大鼠在運(yùn)動(dòng)后的疲勞程度及恢復(fù)狀況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。經(jīng)各劑量組飼喂后，與模型組相比，C、B、A組使大鼠體內(nèi)LA濃度分別降低了4.07%、7.94%、15.39%，C組與模型組相比不能使LA濃度顯著降低，A、B組能夠顯著降低LA濃度 （P＜0.05），且A組降低LA濃度的能力最佳，但仍與對(duì)照組具有差異。模型組的BUN濃度與對(duì)照組相比具有顯著差異（P＜0.05），與模型組相比劑量組均能顯著降低BUN濃度（P＜0.05），A組效果最佳，降低了20.79%，

綜上，表明TSPC能夠一定程度上通過(guò)減少LA積累、降低BUN濃度，達(dá)到相應(yīng)的緩解疲勞作用。

2.2.3 大鼠體內(nèi)抗氧化活性

?；撬岷虷SP都能參與機(jī)體的抗氧化生物進(jìn)程，一般可通過(guò)增強(qiáng)SOD、GSH-Px和CAT活性，減少因機(jī)體由自由基的過(guò)量堆積和清除過(guò)緩而誘發(fā)的加速衰老、癌癥等一系列疾病的可能，由于測(cè)定血液和組織中自由基水平比較困難，而檢測(cè)血液和組織中抗氧化酶則比較容易，可由此來(lái)間接反映機(jī)體內(nèi)自由基累積水平[19-23]。

表 2 TSPC對(duì)大鼠血清SOD、GSH-Px、CAT活力和MDA濃度的影響Table 2 Effect of TSPC on serum SOD, GSH-Px and CAT activity and MDA concentration in rats

SOD廣泛存在于機(jī)體細(xì)胞中，是超氧陰離子自由基的唯一底酶，主要通過(guò)催化超氧陰離子自由基產(chǎn)生歧化反應(yīng)，從而清除體內(nèi)產(chǎn)生的活性氧自由基并保護(hù)細(xì)胞膜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能的完整性[24]。由表2可知，模型組中SOD的活力顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），C組未能對(duì)SOD的活力產(chǎn)生顯著影響（P＞0.05），A、B組的SOD活力與模型組相比差異顯著（P＜0.05），分別提高了30.23%、22.76%。

由表2可知，模型組中GSH-Px的活力顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），與模型組相比，3 組TSPC均能夠顯著提高GSH-Px活力（P＜0.05），B、C兩組間GSH-Px活力無(wú)顯著性差異（P＞0.05），A、B兩組與對(duì)照組相比GSH-Px活力無(wú)顯著差異（P＞0.05），說(shuō)明A、B兩組均能使大鼠機(jī)體內(nèi)GSH-Px活力達(dá)到正常水平，與模型組相比，A組的提高效果最為明顯，約提高了17.97%。由表2可知，CAT活力在運(yùn)動(dòng)性疲勞造模后顯著降低（P＜0.05）， C組的TSPC可使CAT活力恢復(fù)至對(duì)照組水平，且A、B組能將CAT活力顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

當(dāng)體內(nèi)MDA濃度超過(guò)機(jī)體代謝能力時(shí)，自由基便會(huì)誘導(dǎo)不飽和脂肪酸形成脂質(zhì)過(guò)氧化物，并導(dǎo)致細(xì)胞與組織的氧化損傷，因此MDA濃度也是一種用以評(píng)估由自由基導(dǎo)致體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化程度的有效指標(biāo)[25]。由表2可知，模型組大鼠血清中MDA濃度顯著高于對(duì)照組 （P＜0.05），在飼喂TSPC后，A、B、C組均能夠使大鼠血清中MDA的濃度顯著低于模型組（P＜0.05）。

2.3 TSPC抗氧化活性與抗疲勞能力的相關(guān)性

圖 4 大鼠TSPC抗氧化活性與抗疲勞能力的相關(guān)性Fig. 4 Correlation between antioxidant activity and anti-fatigue capacity of TSPC in rats

為確立TSPC抗氧化活性與抗疲勞能力間的聯(lián)系，分別以對(duì)照組、模型組、A組、B組、C組的SOD活力為縱坐標(biāo)，耐力運(yùn)動(dòng)時(shí)間為橫坐標(biāo)繪制散點(diǎn)圖。如圖4所示，通過(guò)線性回歸方程擬合計(jì)算，體內(nèi)抗氧化活性與抗疲勞能力決定系數(shù)R2為0.8205，顯著水平經(jīng)F檢驗(yàn)為0.01，證明在該運(yùn)動(dòng)模型下大鼠的抗氧化活性與抗疲勞能力呈正相關(guān)。

3 討 論

疲勞是機(jī)體的一種自我保護(hù)反應(yīng)，它被描述為“機(jī)體在生理過(guò)程中不能持續(xù)維持其在特定水平上運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的生理現(xiàn)象”[26]，“自由基理論”是對(duì)其產(chǎn)生的較為統(tǒng)一學(xué)說(shuō)，其原理是機(jī)體高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)活性氧自由基的生成和清除速率失衡，致使活性氧積累機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，當(dāng)體內(nèi)自由基濃度升高，體內(nèi)消除自由基抗氧化酶活性提高，但所積累的自由基一旦超出酶的清除能力范圍，就會(huì)對(duì)生物膜系統(tǒng)造成氧化損傷，引發(fā)副反應(yīng)并最終導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)性疲勞的產(chǎn)生、機(jī)體工作能力下降[27]。

在體外抗氧化活性研究中所篩選3 個(gè)TSPC劑量組，其體內(nèi)抗氧化活性與體外抗氧化活性強(qiáng)弱的趨勢(shì)基本保持一致，抗氧化物酶的活性增加以及MDA含量降低直接證明了TSPC能夠通過(guò)清除自由基緩解運(yùn)動(dòng)性疲勞所導(dǎo)致的氧化損傷。

在本實(shí)驗(yàn)的力竭跑臺(tái)實(shí)驗(yàn)中，大鼠在劇烈的運(yùn)動(dòng)過(guò)程中，為了滿足機(jī)體能量代謝的需求，體內(nèi)無(wú)氧環(huán)境下通過(guò)糖酵解途徑供給能量并產(chǎn)生代謝產(chǎn)物L(fēng)A[28]，與此同時(shí)肝臟也會(huì)消耗部分氨基酸與蛋白質(zhì)參與能量的供給并產(chǎn)生代謝產(chǎn)物BUN[29]，它們二者均會(huì)通過(guò)血液進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)中，因而通過(guò)對(duì)二者濃度進(jìn)行分析以及力竭運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)的比對(duì)，能有效評(píng)判大鼠的疲勞程度以及TSPC的抗疲勞效果。結(jié)果顯示在運(yùn)動(dòng)性疲勞模型下，TSPC中牛磺酸占比越高，LA、BUN濃度越低、耐力運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)越長(zhǎng)，表明TSPC具有良好的抗疲勞效果，且與牛磺酸呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。

最后本實(shí)驗(yàn)根據(jù)SOD活力與運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)的相關(guān)系數(shù)證實(shí)，TSPC的抗氧化活性與抗疲勞能力呈正相關(guān)，陳園園等[30]在對(duì)大豆低聚肽的研究中與得到本實(shí)驗(yàn)一致的結(jié)論。因此，可以根據(jù)體外抗氧化實(shí)驗(yàn)對(duì)多種原料復(fù)配的抗疲勞效果進(jìn)行初篩。

4 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)采用了體外抗氧化實(shí)驗(yàn)對(duì)?；撬崤cHSP的質(zhì)量濃度比進(jìn)行了篩選，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果最終選取了1∶10、1∶20、1∶303 種比例進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，通過(guò)運(yùn)動(dòng)性疲勞大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ桶l(fā)現(xiàn)各組均表現(xiàn)出一定的體內(nèi)抗氧化活性，可提高SOD、GSH-Px、CAT活力，降低MDA濃度，從而減輕過(guò)氧化損傷程度，并通過(guò)LA、BUN濃度降低以及運(yùn)動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng)的結(jié)果驗(yàn)證了TSPC具有一定的抗疲勞能力，其中質(zhì)量濃度比為1∶10時(shí)效果最佳。最后通過(guò)計(jì)算體內(nèi)抗氧化活性與抗疲勞能力相關(guān)性，確立了TSPC體內(nèi)抗氧化活性在本實(shí)驗(yàn)中運(yùn)動(dòng)性疲勞模型下與抗疲勞能力正相關(guān)，表明可以根據(jù)體外抗氧化實(shí)驗(yàn)對(duì)抗疲勞產(chǎn)品的配比進(jìn)行初篩，從而為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)以水解蛋白和牛磺酸為基礎(chǔ)原料的復(fù)合功能抗疲勞產(chǎn)品提供了理論依據(jù)。