呂 江, 趙 暉, 袁宗浩, 潘曉東, 孫宏磊, 蔡袁強(qiáng)

(1.杭州交通投資建設(shè)管理集團(tuán)有限公司，浙江 杭州 310024；2.浙江工業(yè)大學(xué)土木工程學(xué)院，浙江 杭州 310014)

土壤微生物是土壤生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，其不僅參與地下部分物質(zhì)和能量循環(huán)[1-3]，影響土壤團(tuán)聚體的形成，改變土壤結(jié)構(gòu)，還可以調(diào)控地上部分植物的生長和植被群落多樣性[1,2].例如土壤中叢枝菌根菌絲分泌物可以促進(jìn)難溶性無機(jī)磷的溶解，加速土壤磷的周轉(zhuǎn)[3]；土壤微生物分泌的土壤蛋白、黏液和多糖等物質(zhì)是一種親水性的黏合劑，可以將土壤顆粒緊緊地結(jié)合在一起，促進(jìn)土壤團(tuán)聚體的形成和穩(wěn)定[4]，土壤真菌群落可以提高濱海濕地中植物的耐鹽性等[5].土壤微生物群落結(jié)構(gòu)對(duì)周圍土壤環(huán)境的變化非常敏感，不僅受到各種環(huán)境因子的影響，例如土壤pH、濕度、重金屬含量、土壤養(yǎng)分含量等[6]，還受到地上部分植物群落結(jié)構(gòu)的影響[7]，因此土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的變化常常作為評(píng)價(jià)土壤生態(tài)質(zhì)量的指標(biāo)之一.

高速公路在建設(shè)過程中不僅會(huì)破壞沿線邊坡植被多樣性，造成地表裸露，還會(huì)破壞土壤結(jié)構(gòu)，造成土壤水分流失[8,9].近年來，高速公路建設(shè)造成的生態(tài)環(huán)境破壞越來越受到人們關(guān)注，有關(guān)高速公路邊坡生態(tài)修復(fù)技術(shù)和手段也日趨成熟[10].植被修復(fù)往往是高速公路邊坡修復(fù)的重要環(huán)節(jié)，其在防止水土流失、恢復(fù)土壤肥力方面起著積極作用[11].然而植被修復(fù)對(duì)土壤微生物的影響卻鮮少受到關(guān)注.檢測(cè)植被修復(fù)對(duì)高速公路邊坡土壤微生物多樣性的影響對(duì)于評(píng)估土壤生態(tài)環(huán)境優(yōu)良和植被修復(fù)質(zhì)量具有重要意義.

千黃高速淳安段(溧陽至寧德國家高速公路浙江省淳安段)地形變化大，山體破碎，陡坡多，該區(qū)域由于高速公路的建設(shè)造成大量邊坡地表裸露，植被多樣性降低，目前急需對(duì)該區(qū)域進(jìn)行有效的生態(tài)修復(fù).本研究將利用高通量測(cè)序技術(shù)[12]探究千黃高速淳安段邊坡植被修復(fù)對(duì)該區(qū)域土壤微生物群落多樣性的影響，為后期該區(qū)域更好的進(jìn)行土壤生態(tài)環(huán)境的修復(fù)提供依據(jù).

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)域與樣地概況

千黃高速淳安段區(qū)域，該區(qū)域?qū)賮啛釒Ъ撅L(fēng)氣候，年均氣溫17 ℃，年降水量1 430 mm，年平均日照時(shí)長1 951 h.

本研究土樣采集自該區(qū)域高速公路向陽邊坡(N 29.641 3°, E 118. 941 5°)，土壤層厚度80 cm，邊坡修復(fù)時(shí)間為4個(gè)月，土壤為黃壤土.其中對(duì)照邊坡為土壤裸露區(qū)域，無植被覆蓋，試驗(yàn)邊坡主要植被為草本植物，如狗牙根(Cynodondactylon)、牛筋草 (Eleusineindica)，其次為酢漿草 (Oxaliscorniculata)、雀稗(Paspalumthunbergii)、馬唐(Digitariasanguinalis)、紫花苜蓿(Medicagosativa).對(duì)照邊坡和試驗(yàn)邊坡海拔、坡向等其他環(huán)境因子基本一致.

1.2 樣品采集與處理

取樣時(shí)，在對(duì)照邊坡和試驗(yàn)邊坡分別選取3塊地作為固定采樣地點(diǎn)，每塊地面積4 m×4 m.在每個(gè)地點(diǎn)采用五點(diǎn)取樣法進(jìn)行取樣，土壤取樣深度為5～10 cm，每個(gè)地點(diǎn)的土壤樣品合并在一起，共得到6份土壤樣品.每份土壤樣品分為兩部分，一部分風(fēng)干保存，用于土壤理化性質(zhì)測(cè)定，一部分-80 ℃低溫保存，用于土壤微生物群落多樣性檢測(cè).

1.3 土壤理化性質(zhì)檢測(cè)

風(fēng)干后的土壤，過100目孔徑篩，然后用于土壤理化性質(zhì)測(cè)定.其中土壤pH值檢測(cè)采用電極法，土壤有機(jī)質(zhì)含量檢測(cè)采用重鉻酸鉀容量法-稀釋熱法，土壤速效磷檢測(cè)采用Olsen法，土壤全氮含量檢測(cè)用凱氏定氮法，土壤全磷含量檢測(cè)采用高氯酸-硫酸法.

1.4 土壤微生物基因測(cè)序

土壤微生物總DNA提取：利用MOBIO PowerSoil?DNA Isolation Kit試劑盒提取土壤微生物總DNA，提取方法按照試劑盒說明步驟進(jìn)行，用0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA提取質(zhì)量，同時(shí)采用紫外分光光度計(jì)對(duì)DNA進(jìn)行定量.

PCR擴(kuò)增：利用引物338F(5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3′)和806R(5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′)[13]對(duì)細(xì)菌V3-V4可變區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；以及引物ITS1F(5′-GGA AGTAAAAGTCGTAACAAGG-3′)和ITS2R(5′-GCTGCGTTCTTCATCGATGC-3′)[14]對(duì)真菌ITS區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增，然后利用Illumina Miseq平臺(tái)進(jìn)行高通量測(cè)序.

Illumina Miseq測(cè)序：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物通過2%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)目標(biāo)片段進(jìn)行切膠回收，回收采用AXYGEN公司的凝膠回收試劑盒(AxyPrep DNA Gel Extraction Kit).利用Microplate reader(BioTek, FLx800)將PCR擴(kuò)增回收產(chǎn)物進(jìn)行熒光定量.然后將純化后的PCR擴(kuò)增片段制備測(cè)序文庫.文庫在上機(jī)測(cè)序前先在Agilent Bioanalyzer上進(jìn)行質(zhì)檢，然后利用Illumina (MiSeq)平臺(tái)進(jìn)行上機(jī)測(cè)序.測(cè)序結(jié)果已經(jīng)上傳至NCBI(national center for biotechnology information)，序列號(hào)為PRJNA669968.

數(shù)據(jù)分析：首先運(yùn)用QIIME軟件(quantitative insights into microbial ecology，v1.8.0，http://qiime.org/)剔除嵌合體序列以及低質(zhì)量序列[15].然后按照 97%的相似性將序列進(jìn)行操作分類單元(operational taxonomic units，OUT)的聚類分析.利用ANOSIM (analysis of similarities)方法比較對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)之間細(xì)菌和真菌群落結(jié)構(gòu)的差異性.細(xì)菌和真菌的Alpha多樣性和Beta多樣性分析，以及典范對(duì)應(yīng)分析(canonical correspondence analysis, CCA)利用R語言(version 3.1.2; http://www.r-project.org/)完成.

2 結(jié)果與分析

2.1 土壤理化性質(zhì)

對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)土壤pH，全氮、全磷、速效磷含量無顯著性差異，但是試驗(yàn)區(qū)土壤有機(jī)質(zhì)含量顯著高于對(duì)照區(qū)(表1).

表1 對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)土壤理化性質(zhì)1)Table 1 Physiochemical properties of soil from the experimental plots and control

2.2 細(xì)菌群落多樣性

本研究中共獲得220 911條細(xì)菌序列，基于 97%的序列相似性水平聚類，對(duì)照區(qū)共得到4 009個(gè)OTU，試驗(yàn)區(qū)共得到5 280個(gè)OTU，對(duì)照區(qū)OTU數(shù)目顯著低于試驗(yàn)區(qū)(P<0.05)(表2).通過Veen圖(圖1a)可以直觀地看出對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)共有OTU 1 954個(gè)，對(duì)照區(qū)特有OTU 2 055個(gè)，試驗(yàn)區(qū)特有OTU 3 326個(gè).其中試驗(yàn)區(qū)特有且豐度最高的OTU屬于擬無枝酸菌屬(Amycolatopsis)，對(duì)照區(qū)特有且豐度最高的OTU屬于戴氏均屬(Dyella)和類卡諾氏屬(Nocardioides).

表2 對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)細(xì)菌多樣性指數(shù)1)Table 2 Biodiversity index of the soil bacteria from the experimental plots and control

表3 對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)真菌多樣性指數(shù)1)Table 3 Biodiversity index of the soil fungi from the experimental plots and control

a.細(xì)菌；b.真菌.圖1 OTUs分布Fig.1 OTUs distribution of the bacteria (a) and fungi (b)

通過計(jì)算細(xì)菌Alpha多樣性指數(shù)，顯示對(duì)照區(qū)Shannon指數(shù)顯著低于試驗(yàn)區(qū)(P<0.05)，對(duì)照區(qū)Simpson指數(shù)和Chao1指數(shù)與試驗(yàn)區(qū)無顯著性差異(P>0.05)(表2).

門(phylum)水平上(圖2a)，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)中主要的優(yōu)勢(shì)門為變形菌門(Proteobacteria)，其次為放線菌門(Actinobacteria)、酸桿菌門(Acidobacteria)、綠彎菌門(Chloroflex)、芽單胞菌門(Gemmatimonadetes)、擬桿菌門(Bacteroidetes)、浮霉菌門(Planctomycetes)、疣微菌門(Verrucomicrobia)、Rokubacteria.其中對(duì)照區(qū)變形菌門相對(duì)豐度(40.83%±5.3%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(29.03%±2.7%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)放線菌門相對(duì)豐度(16.77%±0.7%)顯著低于試驗(yàn)區(qū)(25.43%±4.0%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)酸桿菌門相對(duì)豐度(22.65%±4.4%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(17.67%±0.2%)(P<0.05).

a.細(xì)菌；b.真菌.圖2 對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)土壤細(xì)菌和真菌群落(門水平)分布Fig.2 Distribution of soil bacterial and fungal community (phylum level) in the experimental plots and control

屬(genus)水平上(圖3a)，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)中主要的優(yōu)勢(shì)屬為類諾卡氏屬(Nocardioides)，其次為假單胞菌屬(Pelomonas)、嗜酸棲熱菌屬(Acidothermus)、慢生根瘤菌屬(Bradyrhizobium)、鞘脂單胞菌屬(Sphingomonas)、羅爾斯通菌屬(Ralstonia)、鏈霉菌屬(Streptomyces)、Acidibacter.其中對(duì)照區(qū)類諾卡氏屬相對(duì)豐度(4.41%±1.1%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(1.59%±0.4%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)假單胞菌屬相對(duì)豐度(3.09%±0.7%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(1.16%±0.7%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)嗜酸棲熱菌屬相對(duì)豐度(2.83%±0.9%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(0.62%±0.5%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)羅爾斯通菌屬相對(duì)豐度(1.48%±0.02%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(0.68%±0.05%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)鏈霉菌屬相對(duì)豐度(0.45%±0.01%)顯著低于試驗(yàn)區(qū)(1.66%±0.4%)(P<0.05).

a.細(xì)菌；b.真菌.圖3 對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)土壤細(xì)菌和真菌群落(屬水平)分布Fig.3 Distribution of soil bacterial and fungal community (genus level) in the experimental plots and control

ANOSIM分析結(jié)果表明，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)土壤細(xì)菌群落無顯著性差異(P>0.05).CCA分析可以顯示不同土壤樣本之間的微生物群落相似度，CCA圖中樣本之間的距離越近，表明土壤樣本之間微生物群落相似度越高.如圖4a所示，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)土壤細(xì)菌群落比較分散，土壤細(xì)菌群落對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)沒有各自成聚群，表明對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)細(xì)菌群落無顯著性差異.

a.細(xì)菌；b.真菌；TN.土壤總氮；TP.土壤總磷；AP.土壤速效磷；OC.土壤有機(jī)質(zhì)含量.圖4 細(xì)菌和真菌群落CCA分析Fig.4 CCA analysis of bacteria and fungal communities between the experimental plots and control

2.3 真菌群落多樣性分析

本研究中共獲得383 483條真菌序列，基于97%的序列相似性水平聚類，對(duì)照區(qū)共得到837個(gè)OTU，試驗(yàn)區(qū)共得到1 158個(gè)OTU，對(duì)照區(qū)OTU數(shù)目顯著低于試驗(yàn)區(qū)(P<0.05)(表3).通過Veen圖(圖1b)可以直觀地看出對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)共有OTU 200個(gè)，對(duì)照區(qū)特有OTU 637個(gè)，試驗(yàn)區(qū)特有OTU 958個(gè).其中試驗(yàn)區(qū)特有且豐度最高的OTU屬于擬盾殼霉屬(Paraconiothyrium)和青霉屬(Penicillium)，對(duì)照區(qū)特有且豐度最高的OTU屬于傘狀霉屬(Umbelopsis)和被孢霉屬(Mortierella).

通過計(jì)算真菌Alpha多樣性指數(shù)，顯示對(duì)照區(qū)Shannon指數(shù)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(P<0.05)，試驗(yàn)區(qū)Simpson指數(shù)與對(duì)照區(qū)無顯著差異(P>0.05)，對(duì)照區(qū)Chao1豐富度指顯著小于試驗(yàn)區(qū)(P<0.05)(表3).

門(phylum)水平上(圖2b)，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)中主要的優(yōu)勢(shì)門為子囊菌門(Ascomycota)，其次為擔(dān)子菌門(Basidiomycota)、毛霉門(Mucoromycota)、被孢霉門(Mortierellomycota)、球囊菌門(Glomeromycota)、隱真菌門(Rozellomycota).其中對(duì)照區(qū)子囊菌門相對(duì)豐度(56.54%±2.6%)顯著低于試驗(yàn)區(qū)(66.73%±1.0%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)毛霉門相對(duì)豐度(10.84%±4%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(1.60%±0.7%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)球囊菌門相對(duì)豐度(0.11%±0.05%)顯著低于試驗(yàn)區(qū)(1.20%±0.1%)(P<0.05).

屬(genus)水平上(圖3b)，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)中主要的優(yōu)勢(shì)屬為青霉菌屬(Penicillium)，其次為傘狀霉屬(Umbelopsis)、Geminibasidium、被孢霉屬(Mortierella)、絲核菌屬(Rhizoctonia)、籃狀菌屬(Talaromyces)、蠟蚧菌屬(Lecanicillium)、粉紅粘帚霉屬(Clonostachys)、Knufia、Trichoderma.其中對(duì)照區(qū)青霉菌屬相對(duì)豐度(15.98%±4.0%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(6.52%±4.2%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)傘狀霉屬相對(duì)豐度(8.70%±3.7%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(0.22%±0.1%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)絲核菌屬相對(duì)豐度(0.20%±0.1%)顯著低于試驗(yàn)區(qū)(6.47%±6%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)籃狀菌屬相對(duì)豐度(3.88%±0.8%)顯著高于試驗(yàn)區(qū)(0.31%±0.1%)(P<0.05)；對(duì)照區(qū)Knufia屬相對(duì)豐度(0.09%±0.08%)顯著低于試驗(yàn)區(qū)(3.58%±0.3%)(P<0.05).

ANOSIM分析結(jié)果表明，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)土壤真菌群落結(jié)構(gòu)具有顯著性差異(P<0.05).CCA分析結(jié)果顯示，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)土壤真菌群落可以各自成聚群，表明對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)細(xì)菌群落具有顯著性差異.CCA圖中的箭頭和方向表明土壤有機(jī)質(zhì)含量是影響土壤真菌群落結(jié)構(gòu)主要因子(圖4b).

3 討論與結(jié)論

土壤微生物群落結(jié)構(gòu)受到地上部分植物多樣性的影響[16,17]，地上部分植物群落多樣性的改變，會(huì)使得土壤環(huán)境發(fā)生改變，進(jìn)而使土壤微生物群落多樣性發(fā)生變化.劉雅輝等[18]研究表明，種植植物樣地的土壤有機(jī)質(zhì)含量顯著高于裸地，且種植植物改變了土壤微生物群落結(jié)構(gòu).本研究與其結(jié)果一致，高速公路邊坡植物修復(fù)顯著提高了土壤有機(jī)質(zhì)含量，土壤有機(jī)質(zhì)含量的變化顯著影響了土壤真菌群落結(jié)構(gòu).植被修復(fù)過程中土壤有機(jī)質(zhì)含量增加可能有兩方面原因：一方面植物根系在土壤中分泌了各種次生代謝物質(zhì)，另一方面植物凋落物歸還于土壤.土壤有機(jī)質(zhì)含量增加不僅能夠?yàn)槲⑸锷L提供碳源，促進(jìn)一些土壤微生物的生長和繁殖，還可能會(huì)促進(jìn)土壤養(yǎng)分循環(huán)，改變土壤有機(jī)質(zhì)含量.因此植被修復(fù)是改良土壤性質(zhì)的重要手段之一.

此外，邊坡植被修復(fù)能夠顯著影響土壤真菌的群落結(jié)構(gòu)，但是對(duì)土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)無顯著性影響，暗示了土壤細(xì)菌和真菌群落對(duì)周圍環(huán)境變化的敏感性不同.這一結(jié)果和Li et al[19]的研究結(jié)果類似(千島湖庫區(qū)土壤細(xì)菌和真菌群落的構(gòu)建機(jī)制顯著不同，細(xì)菌和真菌群落對(duì)生境變化的響應(yīng)存在顯著差異).

3.1 細(xì)菌群落多樣性

雖然對(duì)照區(qū)(地表裸露區(qū))土壤細(xì)菌OTU 數(shù)目和Shannon多樣性指數(shù)顯著低于試驗(yàn)區(qū)(植被修復(fù)區(qū)域)，但是ANOSIM分析結(jié)果顯示對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)無顯著差異，表明土壤細(xì)菌群落總體不易受到植被覆蓋的影響.即便如此，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)某些細(xì)菌類群仍然存在門水平、屬水平上的差異.

研究表明，對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)最豐富的門是變形菌門和放線菌門.變形菌門是土壤中比較常見的優(yōu)勢(shì)門，在很多礦區(qū)、農(nóng)田等區(qū)域均屬于優(yōu)勢(shì)門[20-22]，這可能是由于變形菌門對(duì)環(huán)境的耐受性較強(qiáng)，因此能適應(yīng)地表裸露等各種復(fù)雜環(huán)境[23].放線菌也屬于土壤中比較常見菌群，對(duì)環(huán)境的耐受性較強(qiáng)，不止在土壤中，在水體中仍然廣泛分布[24].放線菌是抗生素的主要產(chǎn)生菌[25]，植被覆蓋區(qū)域放線菌門豐度顯著高于地表裸露區(qū)域，較高的放線菌門豐度可能會(huì)更有利于抗生素的產(chǎn)生，進(jìn)而抑制土壤病原菌，從而有利于植物生長.

3.2 真菌群落多樣性

研究表明，試驗(yàn)區(qū)土壤真菌OTU 數(shù)目顯著低于對(duì)照區(qū)，但是Shannon多樣性指數(shù)卻顯著高于對(duì)照區(qū)，表明地表裸露區(qū)域土壤真菌多樣性雖然升高了，但是豐度卻降低了(表2).ANOSIM分析結(jié)果顯示對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)具有顯著差異，表明植被修復(fù)顯著改變了土壤真菌的群落結(jié)構(gòu)，提高了土壤真菌的多樣性.

對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)最豐富的門是子囊菌門和擔(dān)子菌門.子囊菌門是土壤中比較常見的類群，在農(nóng)田、礦山等區(qū)域常常是優(yōu)勢(shì)門[26,27].雖然在門水平上地表裸露區(qū)域子囊菌門豐度高于植被修復(fù)區(qū)域，但是子囊菌門門下種類眾多，有些屬如Penicillium豐度在試驗(yàn)區(qū)卻高于對(duì)照區(qū)，表明同一門下的不同屬的真菌對(duì)環(huán)境的響應(yīng)各不相同.

環(huán)境的改變除了使微生物中優(yōu)勢(shì)類群的相對(duì)豐度發(fā)生變化，還可以改變一些豐度較低真菌類群的相對(duì)豐度，例如對(duì)照區(qū)球囊菌綱的相對(duì)豐度(0.11%)顯著低于試驗(yàn)區(qū)(1.20%)，表明植物存在更有利于球囊菌綱中某些真菌的生存.球囊菌綱的相對(duì)豐度在對(duì)照區(qū)和試驗(yàn)區(qū)都比較低，但是已有研究發(fā)現(xiàn)球囊菌綱對(duì)土壤的修復(fù)過程具有重要意義.目前球囊菌綱中的叢枝菌根真菌已經(jīng)成功用到礦山的土壤修復(fù)中[28,29]，因此在后期對(duì)千黃高速淳安段進(jìn)行生態(tài)修復(fù)時(shí)，可以更多地關(guān)注該類群.

3.3 結(jié)論

本研究顯示千黃高速淳安段邊坡植被修復(fù)能夠顯著提高土壤有機(jī)質(zhì)含量，并顯著影響土壤真菌的群落結(jié)構(gòu)，但是對(duì)土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)無顯著性影響，此結(jié)果暗示了植被修復(fù)對(duì)土壤有機(jī)質(zhì)含量的影響可能是土壤真菌群落發(fā)生改變的重要因素，同時(shí)也暗示了土壤真菌群落對(duì)土壤環(huán)境的變化更加敏感.因此在高速公路邊坡修復(fù)過程中可以通過適當(dāng)增加土壤有機(jī)質(zhì)含量(如施肥)，促進(jìn)土壤真菌活性，加快土壤養(yǎng)分循環(huán)，進(jìn)而更好地改善邊坡生態(tài)環(huán)境.此外，土壤有機(jī)質(zhì)增加也可以促進(jìn)土壤團(tuán)聚體的形成，進(jìn)而影響土壤微生物群落結(jié)構(gòu)[30]，未來研究中可以更多地關(guān)注高速公路邊土壤團(tuán)聚體形成和微生物群落多樣性的關(guān)系，這對(duì)于更好地進(jìn)行邊坡的生態(tài)修復(fù)具有重要意義.