聶 鑫 聶海洋 李 響*
(黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué),黑龍江 大慶163319)
眾所周知,光合作用作為植物所有代謝的總和,是所有植物生長的基礎(chǔ),光合作用通過陽光照射與葉綠素發(fā)生化學(xué)反應(yīng)[1],吸收二氧化碳從而排出氧氣和產(chǎn)生植物生長所需要的一系列養(yǎng)分的過程,光合作用的一切都以光照為基礎(chǔ),所以當(dāng)改變太陽光組成對植物的光合作用會產(chǎn)生巨大的影響[2]。增強UV-B 輻射會通過降低植物葉片的光合作用等生理生化功能[3],從而抑制植物的生長,大多數(shù)植物的含糖量都會呈現(xiàn)出先上升再下降的趨勢,這種趨勢會因為不同植物而產(chǎn)生差別。
供試生菜(lactucis) 品種為美國大速生(Americanrapidgrowth)。該品種生長速度快,生育期45 天左右,品質(zhì)甜脆,無纖維,不易抽薹;耐寒性強,溫度12℃以上,適合北方露地和保護地周年生產(chǎn)。
使用SPAD502 儀(日本柯尼卡美能達公司)和Li-6400XTR 光合儀(美國Li-COR 公司)對4 個不同UV-B 劑量處理且分別恢復(fù)3d、5d、10d、15d 的生菜,以及相應(yīng)的對照,共20 個處理的植物,選擇第二片全展葉進行相關(guān)指標的測定,每個處理至少重復(fù)10 次。其中光合儀測定時葉室CO2濃度為400μL·L-1,光強約為800mmol·m-2·s-1,溫度為25℃±2℃。
稱取葉片鮮樣1.0g 進行研磨,放入10ml 的試管中定容至10ml,將試管放入50℃的水浴鍋中煮30min,在煮樣過程中一定要不斷攪動。加熱后放入離心機(4000r)10min 進行離心,離心后取上清液加入到10ml 的試管中并定容至10ml。再取2ml 的上清液加入1.5ml3,5-二硝基水楊酸(DNS),將試管放入100℃的水浴鍋中煮沸5min,再定容至25ml。冷卻后放入分光光度計在540nm 波長下閉塞測定吸光值,帶入標準曲線和公式后得出還原糖含量。
采用EXCEL2010 和DPS9.2、MultiExperimentViewer 對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
圖1 不同UV-B 處理后的生菜圖片
如圖2 所示,從圖中我們可以看出生菜的葉綠素含量隨著UV-B 輻射的增加呈下降趨勢,且效果明顯。UV-B 輻射處理2h、4h、6h 和8h 等4 個處理,在處理后恢復(fù)UR3d、UR5d、UR10d和UR15d 時生菜葉片葉綠素含量變化趨勢基本一致,即不同劑量UV-B 輻照導(dǎo)致生菜葉綠素含量顯著降低,葉綠素含量降低程度與輻照劑量成正比,而且UV-B 輻照對生菜葉綠素的影響在供試的恢復(fù)期內(nèi)未得到明顯恢復(fù)。UR3d 和UR5d 各處理間的差異極顯著,其原因是生菜在經(jīng)過UV-B 輻射后,葉面會出現(xiàn)大面積的枯萎和變黃的跡象,這種現(xiàn)象在UR3d 時就已經(jīng)表現(xiàn)的十分明顯,所以在UR3d 和UR5d 時各處理之間的差異就已經(jīng)十分顯著。UR10d 和UR15d 的相對葉綠素含量從圖中也可以看出差異極為顯著,其原因可能是植物受到UV-B 輻射后的自我修復(fù)期較長,無法在15d 內(nèi)完全修復(fù),造成了相對葉綠素含量的明顯差異。表明供試劑量UV-B 對生菜相對葉綠素含量造成顯著的抑制。
圖2 不同UV-B 處理生菜相對葉綠素含量變化
如圖3 所示,UV-B 輻射處理2h、4h、6h 和8h 等4 個處理,在處理后UR3d、UR5d、UR10d 和UR15d 時生菜光合速率受到不同程度的抑制。與對照相比,U2 和U4 劑量的UV-B 對生菜光合速率的影響基本一致,在UR3d 和UR15d 階段與對照間無顯著差異,在UR3d 時U0、U2、U4 間沒有明顯差異,U0、U2、U4與U6 和U8 之間差異性顯著,在UR15d 時U0、U2、U4 間沒有明顯差異,U6 與U8 沒有明顯差異,但U0、U2、U4 與U6、U8 間差異性顯著;在UR5d 時差異最明顯,在UR10d 時開始恢復(fù);U6 和U8 劑量的UV-B 輻射在供試4 個取樣期一直與對照間差異顯著,未發(fā)生有效的恢復(fù),由于植物的光合速率與植物的葉綠素含量有著直接的關(guān)系,生菜在經(jīng)過UV-B 輻射后,葉綠素含量發(fā)生明顯的變化,導(dǎo)致生菜的光合速率也受到了極大的影響,可能與光合色素和光合系統(tǒng)受到高劑量UV-B 損傷有關(guān)。
圖3 不同UV-B 處理生菜光合速率變化
如圖4 所示,隨著輻射時間的增加,生菜的氣孔導(dǎo)度呈不斷的下降趨勢。UR3d 的生菜U0、U2、U4、U6、U8 的氣孔導(dǎo)度存在著明顯差異,呈現(xiàn)出下降趨勢且效果顯著,其中U4 與U6 之間的差異不顯著。UR5d 的生菜U0、U2、U4、U6、U8 間仍然存在著差異,但是經(jīng)過5d 的恢復(fù)時間,各處理之間的差異有降低的趨勢。UR10d 的生菜中,趨勢與UR5 相一致。15d 的時候差異性進一步降低,其中U0、U2、U4 之間差異不顯著,U6 與U8 間差異也不顯著,這說明生菜在經(jīng)過UV-B 輻射后,通過一定時間的恢復(fù),氣孔導(dǎo)度差異性會逐漸降低。氣孔導(dǎo)度與蒸騰速率相一致,在UR3d 和UR5d 時U4 與各處理之間存在明顯的差異性,在UR10d 和UR15d 時U4 與U2 之間差異性不顯著,在蒸騰速率與氣孔導(dǎo)度中我們可以看出U4 確實有這明顯的優(yōu)勢。
圖4 不同UV-B 處理生菜氣孔導(dǎo)度變化
UV-B 輻射處理2h、4h、6h 和8h,在處理后UR3d、UR5d、UR10d 和UR15d 時,生菜的還原糖含量隨著UV-B 輻射的增加呈先上升再下降趨勢,即U2 和U4 處理生菜還原糖含量較對照增加,U6 和U8 處理還原糖含量降低;而且隨恢復(fù)時間的延長,處理間差異顯著性逐漸增加,至UR15d 時4 個處理及對照間差異顯著。其中U4 輻射處理生菜在供試的4 個恢復(fù)期均大幅度顯著增加??v觀整個試驗過程,U4 的還原糖含量在UR3d、UR5d、UR10d 和UR15d 時均為最高值,這與可溶性糖的趨勢相一致。在UR3d、UR5d、UR10d 和UR15d 的4 個恢復(fù)期U4 處理生菜還原糖含量較對照顯著增加,U6 和U8 處理還原糖含量顯著降低。表明,U4 劑量UV-B 輻照有助于增加生菜還原糖含量,U6 和U8 降低了生菜的還原糖含量。
在經(jīng)過UV-B 輻射照射2h、6h、4h、8h 后,生菜的相對葉綠素含量、光合速率、氣孔導(dǎo)度、均有不同程度的變化。隨著UV-B輻射劑量的增加,對生菜的損傷越大且各處理間的差異顯著,生菜的生長受到了明顯的影響。還原糖含量均出現(xiàn)先上升再下降的趨勢且各處理之間的差異顯著,其中各項指標在經(jīng)過照射4h 時最高,8h 時最低,這種趨勢一直貫穿了試驗的整個過程,這表明8h 處理對生菜代謝產(chǎn)生嚴重損傷,致使無法恢復(fù)。相對低劑量的UV-B 輻射有助于增強代謝產(chǎn)物的積累,所以我們認為經(jīng)過40μw/cm2UV-B 輻射4h 的生菜最有生產(chǎn)價值。