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石漠生境下金銀花內(nèi)生/根際解磷菌在不同溫度及酸堿環(huán)境下的生長和溶磷能力

2021-05-25 08:02李劍峰張淑卿郭金梅
關(guān)鍵詞:有機(jī)磷根際無機(jī)

李劍峰,張淑卿,2*,龍 瑩,郭金梅,2

(1.貴州師范學(xué)院 喀斯特生境土壤與環(huán)境生物修復(fù)研究所,貴州 貴陽 550018;2. 貴州師范學(xué)院 地理與資源學(xué)院, 貴州 貴陽 550018)

【研究意義】探究解磷菌的溶磷能力及對(duì)酸堿、溫度等環(huán)境脅迫因子的耐受性,對(duì)分析影響石漠化環(huán)境植物根際解磷菌生長和溶磷的影響因素具有重要意義?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】磷是植物生長必需的主要營養(yǎng)元素之一[1],我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中磷肥當(dāng)季利用率不足25 %,由于95 %以上的土壤磷是很難被植物直接吸收利用的無效形式[2],提高土壤磷素的利用率成為降低化肥用量的熱點(diǎn)問題[3]。土壤解磷菌能將植物難以吸收利用的磷轉(zhuǎn)化為可吸收利用的形態(tài)[4]。環(huán)境因素會(huì)影響解磷微生物的分布和解磷能力,有研究表明,根際解磷菌能與其他土壤微生物產(chǎn)生相互作用[5],紅樹林根際解磷菌的解磷能力受初始pH值的影響[6],溫度過高或過低都不利于菌株發(fā)揮解磷作用[7],羊草根際分離出的解磷菌可在pH 8.5~10正常生長[8],不同碳、氮和鉀源對(duì)香椿根際解磷菌溶磷能力有較大影響[9]。【本研究切入點(diǎn)】目前國內(nèi)外有關(guān)解磷菌的探討已較為深入,并有研究逐漸將解磷菌的解磷機(jī)理發(fā)展到分子水平[10]。但針對(duì)西南石漠退化生境中先鋒植物根際解磷菌的報(bào)道相對(duì)較少,而土壤有效磷的缺乏正是制約西南石漠退化區(qū)域植被恢復(fù)的主要因素[11],在輕度至強(qiáng)度石漠化土壤中有效磷僅有3.43~5.69 mg/kg),處于嚴(yán)重缺磷的狀態(tài)[12]。金銀花(Lonicerajaponica)為忍冬科忍冬屬多年生植物,是石漠退化生境的先鋒植物,廣布于東亞和北美地區(qū)[13]。其植株生長期長達(dá)20余年,發(fā)達(dá)的根系能不斷穿越巖縫向巖層深入,隨著植株生長年限的增加,根際土壤的有效磷含量還在逐年增加[14],這一現(xiàn)象與其根際解磷菌的解磷作用有關(guān),但金銀花根際解磷菌對(duì)溫度及酸堿脅迫的抗逆性尚不明確。【擬解決的關(guān)鍵問題】篩選適宜于石漠化環(huán)境解磷效率高、抗逆性強(qiáng)的菌株,為開發(fā)適用于石漠化生境的植物解磷菌劑提供菌種資源,服務(wù)于石漠化地區(qū)的生態(tài)恢復(fù)建設(shè)。

1 材料與方法

1.1 采樣地生境

采樣地位于貴州省貴陽市烏當(dāng)區(qū)東風(fēng)鎮(zhèn)(25°59′31.05′′ N, 109°04′08.40′′ E),地處亞熱帶季風(fēng)濕潤氣候區(qū),雨量充沛氣候溫和,年均溫15 ℃,年日照時(shí)數(shù)1285 h,年均降水量約1174 mm,11月至次年2月降雨較少,僅占全年降水的7.9 %,降水多集中在4-10月。樣地相對(duì)濕度70 %左右,年均無霜期約270 d。

1.2 材料

1.2.1 金銀花(Lonicerajaponica)野生新鮮植株 采集于僅有金銀花單一群落分布巖礫裸露的典型重度石漠化坡地上,采集時(shí)盡可能避免根系損傷,植物樣品置于5 ℃保溫袋,1 h內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理。

1.2.2 培養(yǎng)基 ①PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基參照PIKOVSKAYA[15]的方法配制,葡萄糖10 g,(NH4)2SO40.5 g,NaCl 0.2 g,KCl 0.2 g,MgSO4·7H2O 0.03 g,MnSO40.03 g,F(xiàn)eSO40.003 g,酵母粉0.5 g,蒸餾水1000 mL,瓊脂粉18 g,Ca3(PO4)25 g過0.2 mm篩后單獨(dú)滅菌后與培養(yǎng)基混合,調(diào)節(jié)到pH(7.0±0.1)。②蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基參照周佳宇等[16]的方法配制,葡萄糖10 g,(NH4)2SO40.5 g,NaCl 0.3 g,KCl 0.3 g,MnSO4·4H2O 0.03 g,F(xiàn)eSO4·7H2O 0.03 g,酵母膏0.4 g,CaCO35 g,蒸餾水1000 mL,瓊脂粉18 g,卵磷脂0.2 g以5 mL 75 %的酒精加熱溶解,121 ℃單獨(dú)滅菌25 min,溫度降至70 ℃后與培養(yǎng)基混合,調(diào)節(jié)為pH(7.0±0.1),制成9 cm瓊脂平板。

1.3 解磷菌菌株的篩選

植物材料參照李劍峰等[17]的方法進(jìn)行組織分離和表面滅菌。在無菌操作臺(tái)內(nèi)將表面消毒完全的植株各部位用無菌手術(shù)刀分離成根、莖、葉、種子等部分。取植物組織或根際土壤0.5 g加無菌水5 mL,在無菌研缽內(nèi)研磨勻漿振蕩后轉(zhuǎn)入10 mL刻度試管,加無菌水配制成1×10-1~1×10-5的梯度濃度稀釋液。取上清液0.2 mL,以稀釋平板法分別均勻涂抹至蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基和PKO溶無機(jī)磷磷培養(yǎng)基上,28 ℃培養(yǎng)5~7 d。以每平板10~30個(gè)菌落的稀釋度為最佳稀釋度,在最佳稀釋度涂抹PKO固體平板上選取可形成解磷透明圈的代表性菌落,以劃線法挑取菌體在PKO培養(yǎng)基上分離純化。通過分離、篩選代表性解磷菌菌株。將篩選出的根際解磷菌株及PMN1513(CK)接種于PKO培養(yǎng)基上(溫度為28 ℃,pH 7.0)培養(yǎng)純化。菌株解磷和生長能力 以平板菌落直徑和溶磷圈徑法[18]進(jìn)行評(píng)價(jià)和計(jì)算。

溶磷指數(shù)=溶磷圈直徑/菌落直徑

1.4 溫度和酸堿環(huán)境對(duì)解磷菌生長及溶磷能力的影響

以PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基和蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,設(shè)計(jì)溫度和酸堿梯度,分別檢測(cè)溫度、酸堿度對(duì)解磷菌生長及溶磷能力的影響。

1.4.1 溫度 將生化培養(yǎng)箱的溫度分別設(shè)置為0、4、16、22、28(CK)、34、40 ℃,共7個(gè)水平,分別在PKO培養(yǎng)基和蒙金娜培養(yǎng)基上點(diǎn)接菌體,在生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),每個(gè)水平4次重復(fù)。

1.4.2 酸堿度 分別將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至6.0、7.0(CK)、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0,共8個(gè)水平,每個(gè)水平4次重復(fù),接入菌體后置于28 ℃生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003收集和整理數(shù)據(jù)。利用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析(Ducan法,P<0.05),不同小寫字母代表處理間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 篩選的解磷菌菌株溶磷能力的測(cè)定

在金銀花植株及根際土壤中共篩選出7株解磷菌,分別為PMN1513、PMN1502、PMN1504、PMN1510、PMN1505、PMN1506和PMN1509,菌株均可在溶有有機(jī)磷的培養(yǎng)基上形成濕潤的粘稠培養(yǎng)物,較其他菌株生長快,能在2~5 d內(nèi)形成溶磷透明圈,均表現(xiàn)出強(qiáng)解磷能力。PMN1513分離自金銀花莖下部,菌體均呈乳白色,生長速度快,解磷固氮能力強(qiáng);PMN1502選自金銀花根下端組織,菌體均呈半透明乳白色,形成中央凸起的圓形菌落;PMN1504、PMN1510均分離自金銀花須根組織,菌落白色圓形凸起狀;PMN1505和PMN1506均分離自金銀花根上端組織,菌體呈白色,解磷能力強(qiáng)。PMN1509選自金銀花根部附著土,解磷能力較強(qiáng),形成中央凸起的乳白色圓形菌落。

2.2 解磷菌菌株的溶磷能力

2.2.1 溶無機(jī)磷能力 在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基上(溫度為28 ℃,pH 7.0)培養(yǎng)的7株菌中有6株出現(xiàn)明顯的透明溶磷圈,僅PMN1506未出現(xiàn)溶磷圈。說明大部分根際解磷菌均具有溶解無機(jī)磷能力。其中,PMN1513的溶磷指數(shù)(1.55)顯著高于其他供試菌株(P<0.05),其溶無機(jī)磷的能力最強(qiáng);其次是PMN1510和PMN1509,溶磷指數(shù)顯著高于PMN1502、PMN1504、PMN1505(圖1);PMN1502、PMN1504、PMN1505菌株均能生長,但PKO培養(yǎng)基上未見溶磷透明圈。

2.2.2 溶有機(jī)磷能力 溫度為28 ℃,pH 7.0的環(huán)境下,在蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基上培養(yǎng)的7株解磷菌均出現(xiàn)透明溶磷圈,表明這7株解磷菌均有溶有機(jī)磷能力。PMN1510和PMN1513的溶磷指數(shù)最高,均顯著高于其他菌株(P<0.05)。PMN1506解有機(jī)磷指數(shù)最低,僅為PMN1513的52.61 %(圖2)。

2.3 不同溫度下解磷菌的溶磷能力

2.3.1 溶無機(jī)磷能力 從圖3看出,在PKO無機(jī)培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)8 d,供試菌株在溫度低于4 ℃時(shí)均不能生長;在16~34 ℃能正常生長且有溶無機(jī)磷的能力,但是各株耐受力存在差異。菌株P(guān)MN1513、PMN1502、PMKN1505在溫度16~40 ℃均能生長且能溶無機(jī)磷,表現(xiàn)出對(duì)溫度具有較寬的適應(yīng)范圍;PMN1513溶磷能力較強(qiáng),其在16 ℃時(shí)溶磷能力達(dá)最大值,之后隨著溫度的升高而降低。PMKN1502在16~40 ℃均能生長,且溶磷效果相同,不受溫度的影響。PMN1506在28 ℃未能生長,而在16~22 ℃及34~40 ℃均能生長且具有溶磷能力,對(duì)溫度的適應(yīng)性表現(xiàn)為兩極性。PMN1509在28 ℃溶磷能力低于34 ℃,溶磷指數(shù)分別為1.26和1.38,說明PMN1509更適應(yīng)高溫環(huán)境。

2.3.2 溶有機(jī)磷能力 從圖4看出,在蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)8 d后,溫度低于4 ℃時(shí),菌株均不能生長;在溫度為16~34 ℃均能生長且具有溶有機(jī)磷的能力,但是各株耐受力存在差異。大部分供試菌株在16~28 ℃溶有機(jī)磷能力隨溫度的升高先下降后上升;28~40 ℃各菌株溶有機(jī)磷能力隨溫度的升高而下降。溫度為40 ℃時(shí),PMN1513溶磷效果最好,溶磷指數(shù)為2.15;溫度為16 ℃時(shí),PMN1513溶磷效果依舊最好,溶磷指數(shù)為3.28,說明其對(duì)溫度有較寬的適應(yīng)范圍。PMN1509在34 ℃時(shí)溶磷指數(shù)為1.88。而16 ℃時(shí)溶磷指數(shù)為1.0。相對(duì)于低溫環(huán)境,說明其更適于生存于高溫環(huán)境且發(fā)揮溶磷效果。多數(shù)菌株均能在28 ℃環(huán)境條件下生長并發(fā)揮溶磷作用,而在16 ℃時(shí)生長及溶磷能力更佳,在16 ℃培養(yǎng)下,供試菌株中有6株溶磷菌表現(xiàn)出最高的溶磷能力。

2.3.3 菌株在有機(jī)、無機(jī)磷培養(yǎng)基中的生長情況 將7株解磷菌在34 ℃下連續(xù)培養(yǎng)8 d后,各菌株在蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基中均能生長,在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基中除PMN1510外均能生長,但各菌株菌落直徑存在差異(圖5)。解磷菌株P(guān)MN1509在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基上的菌落直徑可達(dá)4.07 cm,菌落生長速度快其他供試菌株;PMN1513在蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基中的菌落直徑可達(dá)6.11 cm,均優(yōu)于其他供試菌株;而各解磷菌株在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基和蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基中的菌落直徑間并無相關(guān)性。

2.4 不同酸堿度環(huán)境下解磷菌的溶磷能力

2.4.1 溶無機(jī)磷能力 由圖6所示,連續(xù)培養(yǎng)8 d后,供試菌株對(duì)堿脅迫的適應(yīng)和解磷能力存在差異。在有機(jī)磷培養(yǎng)基上,供試菌株對(duì)不同程度的堿脅迫具有一定的耐受能力,對(duì)堿性環(huán)境適應(yīng)范圍較廣;其中有6株解磷菌在pH 6.0~13.0可形成菌落并溶解有機(jī)磷。PMN1509僅能在pH 6.0~10.0的范圍內(nèi)生長,對(duì)酸堿性環(huán)境適應(yīng)范圍較小,對(duì)堿的適應(yīng)范圍較差。PMN1505在pH 6.0時(shí)菌株溶有機(jī)磷能力為PMN1513的53 %,pH 9.0時(shí)可達(dá)104 %,在pH 12.0時(shí)也可達(dá)120 %,表明該菌株對(duì)酸堿性環(huán)境的適應(yīng)范圍較廣,但偏堿性環(huán)境下溶磷能力優(yōu)于偏酸性環(huán)境。PMN1510在pH 7.0時(shí)菌株溶有機(jī)磷能力與PMN1513無顯著差異,而在其余pH條件下,菌株溶有機(jī)磷能力不受pH大小的影響。

2.4.2 溶無機(jī)磷能力 從圖7看出,菌株在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基上對(duì)酸堿環(huán)境適應(yīng)范圍較廣。供試解磷菌在pH值為6.0~10.0的PKO無機(jī)培養(yǎng)基中均能連續(xù)生長8 d以上。其中,PMN1513、PMN1502、PMN1504、PMN1505在pH 7.0~11.0均能生長并能持續(xù)溶解無機(jī)磷,表明菌株對(duì)堿性環(huán)境適應(yīng)范圍較廣,PMN1513在該pH范圍內(nèi)解無機(jī)磷能力最為穩(wěn)定,除pH 8時(shí)與PMN1504差異不顯著外,均顯著高出其他菌株(P<0.05);PMKN1504在pH 6.0、11.0時(shí)菌株溶磷能力僅分別為PMN1513的87 %和50 %,差異顯著(P<0.05); PMKN1509在pH 6.0、9.0時(shí)菌株溶磷能力分別為PMN1513的76 %和96 %,在pH 10.0時(shí)僅為PMN1513的78 %,當(dāng)pH達(dá)到11.0時(shí),菌株不再生長,表明該菌株對(duì)堿脅迫的耐受能力較弱。

2.4.3 堿脅迫和弱酸條件下菌株生長情況 從圖8看出,在pH 13的堿性環(huán)境下,供試7株解磷菌中有5株均能在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基和蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基中形成菌落并產(chǎn)生溶磷透明圈。PMN1509在2種培養(yǎng)基中均不能生長,表明該菌株無法適應(yīng)該堿性環(huán)境。在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基中,PMN1513生長最好,菌落直徑為3.93 cm,顯著高出其他菌株(P<0.05);在蒙金娜溶有機(jī)培養(yǎng)基中PMN1502生長最好,菌落直徑為6.21 cm。各解磷菌株在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基及蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基中菌落大小間缺乏相關(guān)性。

從圖9看出,pH 6.0的弱酸性環(huán)境下,供試7株解磷菌在PKO培養(yǎng)基上均能生長,但存在一定的差異。菌株P(guān)MN1506的生長最好,在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基和蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基中菌落直徑分別為6.15和3.78 cm,顯著高于其他菌株(P<0.05);除PMN1513外,其余6株解磷菌在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基上形成的菌落直徑均優(yōu)于在蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基上的菌落直徑,表明弱酸環(huán)境利于供試菌株在PKO溶無機(jī)磷培養(yǎng)基中生長。

3 討 論

3.1 菌株在不同酸堿及溫度環(huán)境下的溶磷能力

供試解磷菌株中,具有溶無機(jī)磷能力的菌種占供試代表性菌株的86 %,而全部菌株均能溶解難溶性有機(jī)磷,但不同供試菌株溶磷能力間存在較大差異。溶有機(jī)磷和溶無機(jī)磷能力最強(qiáng)的菌株均為PMN1510,溶無機(jī)磷指數(shù)在1.0~1.55。溶無機(jī)磷能力最低的是PMN1505,溶有機(jī)磷指數(shù)在1.51~2.87。溶有機(jī)磷能力最低的是PMN1506。各供試菌株的溶磷指數(shù)隨不同溫度、pH環(huán)境而存在較大差異,印證了趙小蓉等[19]有關(guān)解磷菌在不同條件下的解磷能力會(huì)產(chǎn)生較大差異的結(jié)論,與劉小玉等[20]的研究即解磷微生物的解磷能力會(huì)隨著外界環(huán)境或是養(yǎng)分供應(yīng)的變化而存在差異的結(jié)論一致,這可能是由于不同的酸堿環(huán)境和養(yǎng)分供給條件會(huì)改變解磷菌的生長代謝途徑,甚至影響解磷菌生長和繁殖而導(dǎo)致解磷能力不穩(wěn)定。

3.2 溫度對(duì)解磷菌解磷能力的影響

供試菌株在溫度為16~34 ℃能生長且有溶磷能力,溶磷能力隨溫度的升高呈先升高再降低的趨勢(shì)。溫度高于34 ℃菌株生長變緩,溫度低于4 ℃時(shí)則均不能生長。PMN1513,PMN1502和PMN1505在溫度16~40 ℃范圍內(nèi)均能正常生長,表現(xiàn)出對(duì)溫度具有較寬的適應(yīng)范圍。通過分析菌株的分離來源發(fā)現(xiàn),分離自金銀花莖部的內(nèi)生解磷菌PMN1513對(duì)溫度的抗逆及解磷能力普遍強(qiáng)于根際土壤中的解磷菌。這與李鳴曉等[21]高溫堆肥中篩選出5株耐高溫解磷菌,發(fā)現(xiàn)其最適生長溫度為40~50 ℃的結(jié)果相似。表明供試菌株可耐受40 ℃的高溫,可能與宿主植株生長環(huán)境有關(guān),宿主金銀花廣泛分布于全國南方多個(gè)省市[22],多能在高達(dá)40 ℃的高溫下生存,但通常不會(huì)長期維持在50 ℃高溫以上。解磷菌宿主所處的環(huán)境也會(huì)對(duì)菌株耐熱性和在熱脅迫下的解磷能力產(chǎn)生影響。

3.3 堿脅迫對(duì)解磷菌解磷能力的影響

在PKO無機(jī)培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)8 d后,所培養(yǎng)的7株解磷菌都能在pH值為6.0~10.0的范圍內(nèi)能生長,表明所測(cè)菌株對(duì)弱酸和弱堿環(huán)境均有適應(yīng)能力。其中PMN1513、PMN1502、PMN1504和PMN1505在pH值為7.0~13.0的范圍內(nèi)均能生長并能溶解無機(jī)磷,表明這些菌株對(duì)堿性環(huán)境適應(yīng)范圍較廣。在蒙金娜有機(jī)培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)8 d后,供試7株解磷菌中的6株在pH值為6.0~13.0的范圍內(nèi)能生長并能溶解有機(jī)磷,表明所測(cè)菌株對(duì)弱酸及中強(qiáng)堿性環(huán)境的適應(yīng)范圍廣。其中PMN1509僅能在pH值為6.0~10.0的范圍內(nèi)生長,表明該菌株對(duì)強(qiáng)堿性環(huán)境的適應(yīng)范圍較差。分離自金銀花莖的內(nèi)生解磷菌PMN1513對(duì)酸堿性環(huán)境的抗逆及解磷能力普遍強(qiáng)于根際土壤中的解磷菌。根際解磷菌中解磷抗逆能力以須根內(nèi)生解磷菌最高,根際土壤解磷菌最低。供試菌株溶解有機(jī)磷能力強(qiáng)于溶解無機(jī)磷能力。但由于微生物溶解有機(jī)磷與無機(jī)磷的機(jī)理不同,培養(yǎng)介質(zhì)的pH能衡量無機(jī)磷解磷能力,但不能作為衡量有機(jī)磷解磷能力的指標(biāo)??梢妏H不能成為菌株解磷能力強(qiáng)弱的唯一指標(biāo)[23]。

由金銀花莖部分離出的菌株解磷抗逆能力強(qiáng)于根際解磷菌,這可能與各部位所處的環(huán)境條件有關(guān)。推測(cè)是由于根部常年埋于土壤內(nèi),土壤對(duì)其起到一定的保護(hù)作用,而莖部常年暴露于空氣中,內(nèi)生解磷菌受外界環(huán)境因子的影響使耐逆性更強(qiáng)所致,所以莖部解磷菌的抗逆能力強(qiáng)于根際解磷菌。因?yàn)樵诳λ固厥h(huán)境下,土層薄且有裸露的巖石[24],溫度正?;蚱蜁r(shí)土層可以對(duì)植株根起到保護(hù)作用,而外界溫度較高時(shí),接近土壤外裸露的巖石則可能對(duì)植株根部產(chǎn)生熱脅迫,影響解磷菌的解磷能力。

4 結(jié) 論

在金銀花植株及根際土壤中分離的菌株在溫度為16~34 ℃均能生長并具有溶磷能力,但是各菌株之間存在差異。一定范圍內(nèi),各菌株菌落直徑隨溫度的升高呈先增大后減小的趨勢(shì),溫度高于34 ℃菌株生長能力減弱,溫度低于4 ℃時(shí)菌株均不能生長。7株解磷菌在pH為6.0~10.0能生長并且具有溶磷能力,表明所測(cè)菌株對(duì)酸堿環(huán)境適應(yīng)能力一般。在PKO無機(jī)培養(yǎng)基中PMN1513、PMN1502、PMN1504、PMN1505在pH值為6.0~13.0的范圍內(nèi)均具有溶磷能力,對(duì)酸堿有較寬的適應(yīng)范圍。在蒙金娜溶有機(jī)磷培養(yǎng)基上,7株解磷菌中有6株解磷菌在pH 6.0~13.0能生長并且具有溶磷能力,表明所測(cè)菌株對(duì)酸堿環(huán)境適應(yīng)范圍廣。其中PMN1509僅能在pH值為6.0~10.0的范圍內(nèi)生長,表明菌株對(duì)酸堿適應(yīng)范圍較小,對(duì)堿的適應(yīng)范圍較差。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,溶磷能力逐漸減小。

根部不同分離部位的解磷菌解磷抗逆能力為須根內(nèi)生解磷菌>主根內(nèi)生解磷菌>根際土壤解磷菌。分離自金銀花莖部的內(nèi)生解磷菌抗逆及解磷能力普遍強(qiáng)于根際土壤中的解磷菌;pH為6.0的環(huán)境下,解磷菌PMN1513的解磷能力最強(qiáng),溶無機(jī)磷和溶有機(jī)磷的溶磷指數(shù)分別達(dá)2.19和2.72。16 ℃環(huán)境下,除PMN1509外,供試的6株解磷菌均達(dá)到不同溫度下的最高解磷能力。解磷菌PMN1513的解磷能力最強(qiáng),對(duì)難溶性無機(jī)磷和有機(jī)磷的解磷指數(shù)分別達(dá)2.46和3.28。研究從極端石漠植物中分離篩選與本地環(huán)境相適應(yīng)的解磷效率高、抗逆性強(qiáng)的菌株,解磷菌PMN1513可用于石漠土壤解磷菌劑的研發(fā),具有良好的應(yīng)用潛力,可為適用于石漠生境下的植物促生解磷菌菌劑提供菌種資源。

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