呂雪峰，許艷麗，鄭文新，胡 昕，賽迪古麗·賽買提，王 樂*

(1.新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830000；2.新疆畜牧科學(xué)院畜牧業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究所，新疆 烏魯木齊 830046)

【研究意義】新疆地處中國(guó)西北部，總面積占中國(guó)陸地面積六分之一，屬于溫帶大陸性氣候，降水量少，氣候干燥。天山作為天然屏障將新疆分為南疆和北疆，南疆屬暖溫帶，北疆屬中溫帶，年平均氣溫10～13 ℃，其中阿勒泰地區(qū)冬季氣溫最低達(dá)-50 ℃，吐魯番地區(qū)夏季氣溫最高達(dá)49 ℃，多樣的自然環(huán)境造就了物種的豐富性。根據(jù)《中國(guó)畜禽遺傳資源志羊志》[1]，新疆共有13個(gè)地方綿羊品種，這些品種分布在天山南北，各大河流附近，在長(zhǎng)期的選育下，逐漸形成了適應(yīng)當(dāng)?shù)貧夂虻钠贩N，有著獨(dú)特的優(yōu)良性能。如阿勒泰羊、哈薩克羊、巴什拜羊是新疆主要的肉用羊品種，具有體格大、產(chǎn)肉多的特點(diǎn)；多浪羊具有良好的多胎性能；策勒黑羊是我國(guó)優(yōu)良的裘皮用羊；塔什庫爾干羊是高海拔環(huán)境下良好的肉用品種；和田羊是以生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)地毯毛而著稱的半粗毛羊等?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】地方品種是在特定的地區(qū)、特定的地理環(huán)境中培育出來的，是我國(guó)寶貴的遺傳資源。遺傳多樣性反映了物種所包含基因的豐富程度和它對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力。已經(jīng)有學(xué)者通過微衛(wèi)星對(duì)新疆部分綿羊品種的遺傳多樣性進(jìn)行了分析[2-5]。由于線粒體 DNA(mtDNA)具有嚴(yán)格的母系遺傳、分子量小、突變率高、無組織特異性等優(yōu)點(diǎn)，目前已成為研究物種進(jìn)化的重要的分子標(biāo)記，通過分析線粒體DNA的多態(tài)性可以探討種群的遺傳結(jié)構(gòu)、起源、地理分布、種群分歧、系統(tǒng)發(fā)育等[6-9]。寧禮群等[10]利用Cytb序列分析新疆10個(gè)綿羊品種，發(fā)現(xiàn)新疆地方綿羊品種的遺傳多樣性豐富，至少有3個(gè)獨(dú)立的母系起源。王世峰等通過mtDNA D-loop[11]和ND2[12]基因序列分析了新疆部分綿羊品種的親緣關(guān)系和起源,發(fā)現(xiàn)塔什庫爾干羊、巴什拜羊、哈薩克羊與東方盤羊關(guān)系較近，摩弗倫羊是家綿羊的野生祖先?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】近年來，由于消費(fèi)市場(chǎng)的需求，新疆引進(jìn)肉羊品種與本地綿羊品種雜交，同時(shí)，因?yàn)榻煌ū憷?，各地方品種交流也非常頻繁，導(dǎo)致這些地方品種資源的純度急劇下降，數(shù)量減少。為全面系統(tǒng)地揭示新疆地方綿羊品種資源遺傳現(xiàn)狀，本研究對(duì)新疆13個(gè)地方綿羊品種遺傳多樣性、親緣關(guān)系和系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)行了分析?！緮M解決的關(guān)鍵問題】為綿羊品種的分類提供合理依據(jù)，對(duì)品種資源開發(fā)、利用和保護(hù)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

以新疆13個(gè)地方綿羊品種作為主要研究對(duì)象，分布地區(qū)見圖1，以內(nèi)蒙古烏珠穆沁羊和西藏綿羊做對(duì)照，共15個(gè)綿羊品種211個(gè)個(gè)體(表1)。頸靜脈采血，抗凝，置于-20 ℃冰箱保存。從NCBI上下載已發(fā)表綿羊線粒體胞色素b(cytochrome b,Cytb)基因序列：KF677303.1、KU899149、KU899141；東方盤羊(Ovisvignei)EU366052、東方盤羊?yàn)跗潉e克斯坦亞種(Ovisammonsevertzovi)EU366057、亞洲摩佛倫羊(Ovisorientalis)KF677307.1、和歐洲摩佛倫羊(Ovisariesmusimon)FR873152作為參照。

1.2 方法

1.2.1 基因組DNA提取 采用上海生工生物工程股份有限公司的EZUP柱式動(dòng)物基因組DNA試劑盒提取。

1.2.2 引物設(shè)計(jì)與PCR擴(kuò)增參考 NCBI 綿羊Cytb基因(Gen Bank登錄號(hào):EU176819)序列，用Primer Premier 5.0 軟件設(shè)計(jì)能擴(kuò)增Cytb基因部分序列的引物(由上海生工股份有限公司合成)。上游引物：5′-ATATACACGCAAACGGGGCA-3′，下游引物：5′-AGGGGGAGTGTTAAGTGGGT-3′，PCR反應(yīng)體系25 μl:TaqPCR MasterMix試劑12.5 μl，雙蒸水H2O29.5 μl，DNA 樣品1 μl，上、下游引物各1 μl。PCR擴(kuò)增程序?yàn)?4 ℃預(yù)變性5 min，94 ℃變性30 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，30個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸5 min，4 ℃保存。PCR產(chǎn)物經(jīng)1 %瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后送上海生工股份有限公司測(cè)序。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析測(cè)序結(jié)果 根據(jù)峰圖進(jìn)行人工校對(duì)，利用 Clustal-X 軟件對(duì)序列進(jìn)行比對(duì)、剪切和拼接，得到Cytb基因部分序列。利用DnaSP v5.10.0.1軟件計(jì)算各堿基組成比例、單倍型多樣度(Hd)、核苷酸多樣性(Pi)、平均核苷酸差異數(shù)(k)、種群間核苷酸平均差異數(shù)(Kxy)、遺傳分化指數(shù)(Fst)、核苷酸歧義度(Dxy)、遺傳分化系數(shù)(Gst)和基因交流值(Nm)，并進(jìn)行Tajima’s D 中性檢驗(yàn)；利用Network 4.6.1.3軟件構(gòu)建單倍型網(wǎng)絡(luò)圖；利用Arlequin V3.5.1.3 軟件進(jìn)行分子變異分析和錯(cuò)配分析。運(yùn)用MEGA7.0軟件計(jì)算堿基轉(zhuǎn)換與顛換平均比率，構(gòu)建單倍型的系統(tǒng)進(jìn)化樹(neighbor-joining， NJ法，Bootstrap抽樣重復(fù)次數(shù)為1000次)。

2 結(jié)果與分析

2.1 PCR擴(kuò)增結(jié)果

以基因組DNA為模板對(duì)Cytb基因進(jìn)行擴(kuò)增，經(jīng)電泳檢測(cè)，得到與預(yù)期目標(biāo)片段大小一致、整齊而清晰的條帶，送上海生工股份有限公司測(cè)序。

2.2 Cytb序列多態(tài)位點(diǎn)

測(cè)序結(jié)果經(jīng)ChromasPro拼接后，獲得Cytb序列，長(zhǎng)度為1017 bp，共檢出24個(gè)變異位點(diǎn)，其中單堿基變異位點(diǎn)6個(gè)，簡(jiǎn)約信息位點(diǎn)18個(gè)(圖2)，堿基含量平均值A(chǔ) 30.1 %、T 27.3 %、C 29.1 %、G 13.5 %，沒有發(fā)現(xiàn)堿基缺失或插入現(xiàn)象。其中A+T含量(57.4 %)明顯高于C+G含量(42.6 %)。本研究顯示轉(zhuǎn)換率明顯高于顛換率，總的轉(zhuǎn)換顛換偏倚率R值為25.06，T 和 C 之間的轉(zhuǎn)換率最高，為62.5 %。

2.3 遺傳多樣性

15個(gè)地方綿羊品種單倍型多樣度(Hd)在0.396～0.782，群體總Hd為0.684，其中，和田羊的單倍型多樣度最低，為0.396，羅布羊的單倍型多樣度最高，為0.782，各地方綿羊品種核苷酸多樣度Pi在0.00056～0.00593，總?cè)后w核苷酸多樣度為0.00407，其中，和田羊最低，為0.00056，巴爾楚克羊最高，為0.00593，各地方品種綿羊核苷酸平均差異數(shù)k在0.571～6.029，總?cè)后w核苷酸平均差異數(shù)為0.00407，其中和田羊最低，為0.571，巴爾楚克羊最高，為6.029。 Tajima’s D 中性檢測(cè)顯示，巴爾楚克羊、和田羊和塔什庫爾干羊檢驗(yàn)結(jié)果顯著(P<0.05，表1)，因此這3個(gè)品種可能經(jīng)歷過種群擴(kuò)張。

表1 15個(gè)綿羊品種遺傳多樣性參數(shù)

表2 15個(gè)綿羊品種群體間遺傳距離

2.4 遺傳距離和分化

基于 Kimura 雙參數(shù)模型計(jì)算15個(gè)綿羊品種內(nèi)和品種間的遺傳距離(表2)。品種內(nèi)遺傳距離在0.0006～0.0060，最小是和田羊和烏珠穆沁羊，為0.0006，最大是巴爾楚克羊，為0.006。品種間遺傳距離在0.001～0.006，在新疆13個(gè)地方綿羊品種中，和田羊和策勒羊之間的遺傳距離最近，為0.0014，巴爾楚克羊和策勒黑羊的遺傳距離最遠(yuǎn)，為0.0059，而且巴爾楚克羊與其它品種羊的遺傳距離均較大。各地理種群總遺傳分化系數(shù)Gst為 0.41938，總固定系數(shù)Fst為 0.69561，總基因流Nm為 4.5。各種群間核苷酸差異數(shù)Kxy在1.0857～5.9783，均值為4.0767；核苷酸歧義度Dxy在00014～0.0059，均值為0.0040，其中策勒羊和巴爾楚克羊的分歧度最大，達(dá)到0.0059；遺傳分化系數(shù)Gst在-0.0376～0.1017，均值為0.0268；固定系數(shù)Fst在-0.0893～0.3882，均值為0.0766。

2.5 單倍型分析

在 211個(gè)個(gè)體中共發(fā)現(xiàn)19種單倍型，其中新疆13個(gè)地方綿羊品種有17種單倍型，西藏綿羊單獨(dú)享有2個(gè)單倍型。在19種單倍型中，有 12個(gè)共享單倍型(在2個(gè)及以上個(gè)體中出現(xiàn))和7個(gè)特殊單倍型(僅在1個(gè)個(gè)體中發(fā)現(xiàn))，其中共享單倍型1(Hap1)出現(xiàn)頻率最高，占個(gè)體的51.66 %(109/211)，推測(cè)其可能為祖先單倍型，所有的種群均共享該單倍型；其次是單倍型2(Hap2)，占個(gè)體的16.59 %(35/211，表3)。用19種單倍型構(gòu)建中介網(wǎng)絡(luò)圖(圖3)，發(fā)現(xiàn)歸屬于3個(gè)不同的單倍型群(A,B和C)，分別包括 8、6和5個(gè)單倍型。在15個(gè)地方綿羊品種中，哈薩克羊單倍型數(shù)量最多，有6個(gè)單倍型；烏珠穆沁羊單倍型數(shù)量最少，僅有2個(gè)單倍型。

表3 15個(gè)綿羊品種單倍型分布情況

續(xù)表3 Continued table 3

2.6 種群變異分析

從表4可知，15個(gè)地方綿羊品種種群間的遺傳變異(8.68 %)遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于種群內(nèi)的遺傳變異(91.33 %)。說明，這些地方綿羊品種變異主要來自種群內(nèi)，種群間的遺傳變異較低，品種之間遺傳交流非常頻繁，品種分化不明顯。

2.7 系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建

品種間遺傳距離構(gòu)建N-J系統(tǒng)進(jìn)化樹(圖4)顯示，巴爾楚克羊和塔什庫爾干羊單獨(dú)聚為一類，其它13個(gè)品種聚為一類。

以鄰接法Neighbour-Joining構(gòu)建19個(gè)單倍型和參照綿羊、盤羊群體的系統(tǒng)進(jìn)化樹(圖5)，19個(gè)單倍型聚為3支(A,B,C)，單倍型A支包括除和田羊外的14個(gè)品種；單倍型B支包括所有的15個(gè)品種；單倍型C支包括12個(gè)品種，不包括和田羊、烏珠穆沁羊和策勒黑羊。歐洲摩佛倫羊與單倍型A支聚為一支，亞洲摩佛倫羊與單倍型C支聚為一支，這3支與東方盤羊聚在一起，最后再與東方盤羊?yàn)跗潉e克斯坦亞種聚在一起。

表4 15個(gè)綿羊品種的分子變異分析

2.8 種群歷史動(dòng)態(tài)分析

Tajima's D 是對(duì)地理種群古老突變的檢測(cè)，F(xiàn)u′s Fs是對(duì)近期發(fā)生的種群擴(kuò)張檢測(cè)。根據(jù)Tajima's D 中性檢測(cè)結(jié)果，巴爾楚克羊、和田羊和塔什庫爾干羊可能經(jīng)歷過種群擴(kuò)張。Fu′s Fs 檢驗(yàn)結(jié)果中負(fù)的Fs值和差異顯著的P值被認(rèn)為種群在歷史上有擴(kuò)張跡象，提示和田羊可能經(jīng)歷過種群擴(kuò)張。進(jìn)一步利用Arlequin軟件進(jìn)行核苷酸錯(cuò)配分析，如果期望值是一條平滑的曲線，而觀測(cè)值有1個(gè)單峰，并且中性檢驗(yàn)結(jié)果顯著，說明該種群可能在歷史進(jìn)化過程中經(jīng)歷過種群擴(kuò)張，如果觀察值呈現(xiàn)多峰，說明該群體大小保持相對(duì)穩(wěn)定。對(duì)巴爾楚克羊、和田羊和塔什庫爾干羊錯(cuò)配分析(圖6)發(fā)現(xiàn)，巴爾楚克羊和塔什庫爾干羊錯(cuò)配分布呈現(xiàn)多峰，且Fu′s Fs 檢驗(yàn)結(jié)果不顯著，說明該群體大小保持相對(duì)穩(wěn)定，未經(jīng)歷種群擴(kuò)張。和田羊錯(cuò)配分析有1個(gè)單峰，Tajima's D中性檢驗(yàn)顯著，F(xiàn)u′s Fs檢驗(yàn)為負(fù)值且差異顯著，因此，可認(rèn)為和田羊群體經(jīng)歷過種群擴(kuò)張。

3 討 論

3.1 遺傳多樣性分析

遺傳多樣性是指生物體內(nèi)遺傳物質(zhì)發(fā)生變化，可以遺傳給后代的變異程度。遺傳多樣性越高，遺傳變異程度越大，該種群適應(yīng)環(huán)境的能力就越強(qiáng)[13]。在新疆13個(gè)地方綿羊品種和其它2個(gè)品種(內(nèi)蒙古烏珠穆沁羊和西藏綿羊)mtDNACytb基因序列中共發(fā)現(xiàn)了24個(gè)變異位點(diǎn)，定義了19個(gè)單倍型。這15個(gè)地方綿羊品種總的單倍型多樣度平均為0.684±0.029，核苷酸多樣性為0.00407，根據(jù)Grant等[14]將mtDNA序列遺傳變異分成的4個(gè)類型，羅布羊、葉城羊、塔什庫爾干羊和巴爾楚克羊?qū)儆诟叩膯伪缎投鄻佣?Hd>0.5)和高的核苷酸多樣性(Pi>0.005)，說明這4個(gè)品種遺傳多樣性豐富，在進(jìn)化中產(chǎn)生了較多突變，積累了豐富的單倍型和核苷酸變異，也表明該物種對(duì)當(dāng)?shù)氐沫h(huán)境具有非常強(qiáng)的適應(yīng)能力。其中塔什庫爾干羊的遺傳多樣性與王世峰[12]的研究非常一致。阿勒泰羊、哈薩克羊、巴什拜羊、策勒黑羊、吐魯番黑羊、柯爾克孜羊、多浪羊、巴音布魯克羊、西藏羊和烏珠穆沁羊共10個(gè)品種屬于高的單倍型多樣度(Hd>0.5)和低的核苷酸多樣性(Pi<0.005)，說明這些品種也具有豐富的遺傳多樣性，但是沒有足夠的時(shí)間積累核苷酸多樣性[15]。和田羊?qū)儆诘偷膯伪缎投鄻佣?Hd<0.5)和低的核苷酸多樣性(Pi<0.005)，說明和田羊種群遺傳多樣性低，中性檢驗(yàn)表明和田羊經(jīng)歷過種群擴(kuò)張，種群擴(kuò)張可以快速增加單倍型多樣度，但沒有足夠的時(shí)間積累核苷酸的變異。雖然如此，和田羊的單倍型多樣度仍然比較低。目前，受市場(chǎng)和消費(fèi)的影響，我國(guó)許多地方綿羊品種的數(shù)量在下降[16]，真正純種的和田羊數(shù)量也在下降，結(jié)合遺傳多樣性分析，該品種需要加強(qiáng)遺傳資源的保護(hù)。在15個(gè)地方綿羊品種中，單倍型多樣度最高的是羅布羊，這是一個(gè)生存在塔里木盆地中心的羅布泊地區(qū)，極適宜荒漠草場(chǎng)、極端干旱氣候、耐粗飼、強(qiáng)抗逆的獨(dú)特地方羊種，羅布羊的生存地域環(huán)境相對(duì)封閉，與其它品種羊交流不多，但其遺傳多樣性豐富，說明其受自然和人工選擇壓力較小，這可能與當(dāng)?shù)貍鹘y(tǒng)放牧管理、自然交配方式有關(guān)，鄭永富[17]的研究也證實(shí)了這一點(diǎn)。

基因流是一個(gè)群體遷移到另一個(gè)群體時(shí)，將某基因帶到新的群體從而產(chǎn)生的基因流動(dòng)。通常，Nm<1，說明群體可能由于遺傳漂變發(fā)生了分化[18]，Nm>1，說明群體間基因流水平較高，遺傳分化較??；Nm>4說明種群間的基因交流更為充分，遺傳分化更小[19]。15個(gè)綿羊品種總基因流Nm為4.5，表明各品種之間的基因交流非常廣泛，這與品種內(nèi)遺傳分化程度較高的結(jié)論相對(duì)應(yīng)。分子變異分析也證實(shí)了這一點(diǎn)，表明遺傳變異主要來自于品種內(nèi)，而非品種間，也充分表明各品種之間基因交流頻繁，沒有明顯的地理遺傳結(jié)構(gòu)。固定系數(shù)Fst是一種種群間遺傳距離的測(cè)度參數(shù)[20]，可反映種群之間基因的差異程度，根據(jù)Weight[21]報(bào)道，F(xiàn)st值在0～0.05表明群體間的遺傳分化程度很小，在0.05～0.15表明群體間遺傳分化程度中等，在0.15～0.25表明群體間的遺傳分化較大，15個(gè)綿羊品種平均遺傳分化指數(shù)Fst為0.0766，表明群體間的遺傳分化程度中等。其中和田羊與巴爾楚克羊的遺傳分化程度最大，達(dá)0.3882；這與兩者的遺傳距離相一致。

3.2 親緣關(guān)系與進(jìn)化起源分析

遺傳距離分析顯示，15個(gè)地方綿羊品種中，和田羊與策勒黑羊、烏珠穆沁羊遺傳距離最近，與巴爾楚克羊遺傳距離最遠(yuǎn)；阿勒泰羊與和田羊、烏珠穆沁羊遺傳距離比較近，與巴爾楚克羊和塔什庫爾干羊遺傳距離比較遠(yuǎn)；巴爾楚克羊和塔什庫爾干羊與其余13個(gè)地方綿羊品種遺傳距離都較遠(yuǎn)。從遺傳距離看，和田羊與烏珠穆沁羊的遺傳距離比與西藏羊的遺傳距離近，說明和田羊與蒙古羊系統(tǒng)有一定的親緣關(guān)系。和田羊主產(chǎn)區(qū)與策勒黑羊主產(chǎn)區(qū)有重疊，兩者之間的遺傳距離近，說明這2個(gè)品種存在非常近的親緣關(guān)系。策勒黑羊的育成歷史不詳，大概是19 世紀(jì)末，引入黑羔皮羊與當(dāng)?shù)鼐d羊雜交形成，推測(cè)是與和田羊雜交育成的。塔什庫爾干羊分布在新疆帕米爾高原上的塔什庫爾干縣，與巴基斯坦、阿富汗和蘇聯(lián)3個(gè)國(guó)家相鄰。因此，塔什庫爾干羊的育成很可能受周邊地區(qū)羊(如阿富汗肥尾羊和吉薩爾大尾羊)的影響，因此與其它地方品種遺傳距離較遠(yuǎn)。而巴爾楚克羊則是因巴爾楚克地名而來，據(jù)《新疆簡(jiǎn)史》記載，巴爾楚克命名是在1902年，已知巴爾楚克羊品種的歷史有200多年[22]，它的育成史可能與塔什庫爾干羊或周邊國(guó)家的綿羊品種有關(guān)，值得進(jìn)一步研究。羅布羊是15個(gè)地方綿羊品種中遺傳多樣性最高的品種，它與多浪羊、巴音布魯克羊存在系統(tǒng)上的進(jìn)化關(guān)系，與王慧華[23]、袁澤湖[24]的研究結(jié)果一致。新疆地方綿羊品種的親緣與地理分布有明顯的關(guān)系，從遺傳距離構(gòu)建的進(jìn)化樹可以看出，柯爾克孜羊、巴音布魯克羊、多浪羊、羅布羊、吐魯番黑羊、葉城羊親緣關(guān)系均較近，這6個(gè)品種，除吐魯番黑羊外都分布在天山以南，塔克拉瑪干沙漠邊緣，沿塔里木河流域，地域上的優(yōu)勢(shì)使得品種可能互相交流。而吐魯番黑羊則是以巴音布魯克羊?yàn)楦副?，哈薩克羊和卡拉庫爾羊?yàn)槟副具M(jìn)行雜交,長(zhǎng)期選育而成的[25]，因此，與巴音布魯克羊有更近的親緣關(guān)系。

研究發(fā)現(xiàn)，15個(gè)地方綿羊品種分為三大支系：支系 A 占所有單倍型42.1 %(8/19)，包括歐洲摩佛倫羊和14個(gè)綿羊品種中(除和田羊)；支系 B占所有單倍型的31.6 %(6/19)，在15個(gè)地方綿羊品種中均有分布，支系 C占所有單倍型的26.3 %(5/19)；包括亞洲摩佛倫羊和12個(gè)地方綿羊品種(除策勒黑羊、和田羊和烏珠穆沁羊)。表明新疆地方綿羊品種至少有三大母系起源。關(guān)于綿羊起源，一直存在雙起源說[26-28]和三起源說[29-31]。本研究結(jié)果與三起源說相符，除亞洲摩佛倫羊和歐洲摩佛倫羊兩大起源，還有1個(gè)不同的母系起源，這也與羅玉柱[32]、劉剛[33]等的研究一致。

對(duì)新疆13個(gè)地方綿羊品種遺傳多樣性的分析一定程度上可了解這些品種遺傳現(xiàn)狀、系統(tǒng)發(fā)育和親緣關(guān)系，可為后期地方品種資源保護(hù)、利用提供理論依據(jù)。

4 結(jié) 論

新疆地方綿羊品種除和田羊外，遺傳多樣性都比較高，和田羊的單倍型多樣度最低，為0.396±0.159；羅布羊的單倍型多樣度最高，為0.782±0.107。和田羊和策勒黑羊之間的遺傳距離最近，巴爾楚克羊和策勒黑羊的遺傳距離最遠(yuǎn)。單倍型網(wǎng)絡(luò)圖顯示新疆13個(gè)地方綿羊品種有3個(gè)不同的母系起源，育成史與地理分布基本一致。和田羊經(jīng)歷過種群擴(kuò)張，但單倍型多樣度仍比較低，提示和田羊需要加強(qiáng)品種的選育和保護(hù)。