王 玙，王建強(qiáng)

(天水市動物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 天水 741000)

實(shí)施動物免疫接種是我國目前控制重大動物疫病最根本、科學(xué)和直接有效的措施之一，確保免疫質(zhì)量成為防控重大動物疫病工作的重中之重,而免疫抗體監(jiān)測是檢驗(yàn)免疫質(zhì)量直接有效的方法，也是衡量基層動物防疫人員工作效果的主要考核技術(shù)指標(biāo)。為貫徹落實(shí)《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)》，切實(shí)做好2020年天水市動物疫病強(qiáng)制免疫工作，面掌握天水市春季動物防疫工作情況，科學(xué)評價天水市重大動物疫病集中免疫工作質(zhì)量和效果，于2020年5 ～6月，在全市34個自然村和27個畜禽養(yǎng)殖場隨機(jī)采集豬牛羊雞血清樣品共計425份，進(jìn)行了口蹄疫、高致病性禽流感、豬瘟、小反芻獸疫4個主要動物疫病的9種免疫抗體檢測，以便對免疫抗體合格率不達(dá)標(biāo)或略高于70%的養(yǎng)殖場戶查漏補(bǔ)缺及時整改。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 檢測試劑 小反芻獸疫病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒(試劑盒廠家：青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心，試劑盒批號：020171906)；口蹄疫O型間接血凝抗體檢測試劑盒(試劑盒廠家：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸疫研究所，試劑盒批號：20200428201)；口蹄疫A型液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒(試劑盒廠家：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸疫研究所，試劑盒批號：20200303103-2)；豬瘟病毒抗體ELISA檢測試劑盒(試劑盒廠家：哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司，試劑盒批號：CSFV20161112)；禽流感H5亞型(Re-11)血凝抑制試驗(yàn)抗原(試劑盒廠家：哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司，試劑盒批號：2019007)；禽流感H7亞型(Re-2)血凝抑制試驗(yàn)抗原(試劑盒廠家：哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司，試劑盒批號：2019004)。

1.1.2 檢測樣品 于2020年5月份在全市春季統(tǒng)一集中免疫后3周左右后進(jìn)行采樣，要求每個縣(區(qū))隨機(jī)選取至少4個中小規(guī)模養(yǎng)殖場(雞場、豬場、牛場、羊場各一個，豬存欄量在100～1 000頭，牛存欄量在20～200頭，羊存欄量在100～1 000只，禽存欄量在1 000～ 10 000羽)和2個自然村進(jìn)行隨機(jī)采樣，每個養(yǎng)殖場至少采集血清樣品10份，每個自然村樣品來源不少于3家養(yǎng)殖戶，兼顧豬牛羊。全市共在34個自然村和27個規(guī)模養(yǎng)殖場采集豬牛羊雞血清樣品425份，其中豬103份、牛105份、羊105份、雞112份，全部低溫條件下送市動物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室于6月上旬統(tǒng)一做重大病免疫抗體監(jiān)測。

1.1.3 疫苗種類 豬口蹄疫O型滅活苗(O/Mya98/XJ/2010株+O/GX/09-7株)(疫苗廠家：金宇保靈，疫苗批號：19136023)；口蹄疫O型-A型二價滅活疫苗(OHM/02株+AKT-III株，懸浮培養(yǎng))(疫苗廠家：中牧股份蘭州生物藥廠，疫苗批號：1911002)；重組禽流感(H5+H7)三價滅活疫苗(H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株)(疫苗廠家：乾元浩生物股份有限公司，疫苗批號：2019228)；豬瘟耐熱保護(hù)劑活疫苗(疫苗廠家：山東綠都生物科技有限公司，疫苗批號：1907033)；小反芻獸疫活疫苗(疫苗廠家：天康生物股份有限公司，疫苗批號：20210326)。

1.2 方法

豬瘟免疫抗體采用ELISA檢測方法(GB/T 16551-2008)；牛羊口蹄疫O型免疫抗體采用正向間接血凝試驗(yàn)(GB/T 18935-2003)；豬口蹄疫O型免疫抗體采用正向間接血凝試驗(yàn)和非結(jié)構(gòu)蛋白抗體阻斷ELISA(GB/T 18935-2003)；牛羊口蹄疫A型免疫抗體采用液相阻斷ELISA檢測方法(GB/T 18935-2003)；禽流感H5(Re-11)亞型、H7(Re-2)亞型免疫抗體采用血凝與血凝抑制試驗(yàn)檢測方法(GB/T 18936-2003)；羊小反芻獸疫免疫抗體采用阻斷ELISA檢測方法(GB/T 27982-2011進(jìn)行)。在所有試驗(yàn)對照均符合試劑盒說明書時，試驗(yàn)結(jié)果成立，結(jié)果判定參照試劑盒說明書。

2 結(jié)果

2.1 全市整體情況

4個主要動物疫病的9種免疫抗體檢測結(jié)果及數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析顯示，豬0型口蹄疫檢測103份，平均樣本合格率為81.6%；豬瘟檢測103份，平均樣本合格率為89.3%。牛O型口蹄疫檢測105份，平均樣本合格率為78.1%；牛A型口蹄疫檢測95份，平均樣本合格率為63.2%。羊0型口蹄疫檢測105份，平均樣本合格率為84.8%；羊A型口蹄疫檢測105份，平均樣本合格率為69.5%；羊小反芻獸疫檢測102份，平均樣本合格率為95.1%。禽流感H5亞型檢測112份平均樣本合格率為92.0%；禽流感H7亞型檢測112份，禽流感為93.8%。具體見表1。

表1 9種免疫抗體檢測全市整體情況 %

2.2 規(guī)模場情況

所抽檢規(guī)模場中，豬0型口蹄疫場合格率為71.43%，平均樣本合格率為82.67%；豬瘟場合格率為85.71%，平均樣本合格率為96.0%。牛O型口蹄疫場合格率為85.71%，平均樣本合格率為83.75%；牛A型口蹄疫場合格率為71.43%，平均樣本合格率為62.67%。羊0型口蹄疫場合格率為85.71%，平均樣本合格率為86.25%；羊A型口蹄疫場合格率為57.14%，平均樣本合格率為73.75%；羊小反芻獸疫場合格率為100.00%，平均樣本合格率為98.75%。禽流感H5亞型場合格率為100.00%，平均樣本合格率為96.92%；禽流感H7亞型場合格率為100.00%，平均樣本合格率為98.46%。具體見表2。

表2 9種免疫抗體檢測規(guī)模場情況 %

2.3 散養(yǎng)戶情況

所抽檢散養(yǎng)戶中，其中豬型口蹄疫場點(diǎn)合格率為80.00%，平均樣本合格率為78.57%；豬瘟場點(diǎn)合格率為100.00%，平均樣本合格率為71.43%。牛O型口蹄疫場點(diǎn)合格率為40.00%，平均樣本合格率為60.0%；牛A型口蹄疫場點(diǎn)合格率為50.00%，平均樣本合格率為65.0%。羊0型口蹄疫場點(diǎn)合格率為80.00%，平均樣本合格率為為80.0%；羊A型口蹄疫場點(diǎn)合格率為20.00%，平均樣本合格率為56.0%；羊小反芻獸疫場點(diǎn)合格率為80.00%，平均樣本合格率為81.82%。禽流感H5亞型場點(diǎn)合格率為71.43%，平均樣本合格率為85.11%；禽流感H7亞型場點(diǎn)合格率為57.14%，平均樣本合格率為87.23%。具體見表3。

3 結(jié)果分析

3.1 不同病種之間免疫抗體水平存在不平衡現(xiàn)象

一是從全市整體來看，各類動物疫病免疫抗體之間的合格率存在較大差異。其中羊小反芻獸疫免疫抗體合格率為95.1%遠(yuǎn)高于其他病種，高致病性禽流感H5亞型和H7亞型次之，分別為92.0%和93.8%，豬瘟和豬牛羊O型口蹄疫也都在70%以上，體現(xiàn)了良好的免疫效果，能夠有效防范此類重大動物疫病的發(fā)生。但牛羊A型口蹄疫整體達(dá)不到70.0%，針對A型口蹄疫抗體不合格的場戶需進(jìn)行及時補(bǔ)免。具體見圖1。

圖1 不同病種免疫抗體水平情況比

3.2 采樣場點(diǎn)之間免疫抗體水平存在不平衡現(xiàn)象

采樣場點(diǎn)之間的區(qū)別主要是指規(guī)模場和散養(yǎng)戶之間的區(qū)別。從檢測結(jié)果來看，無論不同病種之間還是同病種不同亞型之間，規(guī)模養(yǎng)殖場的場合格率和平均樣本合格率普遍高于散養(yǎng)戶，也有個別病種散養(yǎng)戶免疫抗體合格率高于養(yǎng)殖場的情況。散養(yǎng)戶免疫抗體水平偏低的主要原因是散養(yǎng)畜禽飼養(yǎng)者免疫意識差，其次是農(nóng)村居住不集中，交通不便，飼養(yǎng)分散范圍廣，給免疫工作帶來很大困難。具體見表4。

表4 9種免疫抗體不同場點(diǎn)情況 %

3.3 同病種不同亞型之間免疫抗體水平存在不平衡現(xiàn)象

同病種不同亞型之間免疫抗體水平差異較大，主要表現(xiàn)在牛羊O型和A型口蹄疫之間。比如牛羊O型免疫抗體合格率分別為78.1%和84.8%，而牛羊A型分別為63.2%和69.5%。主要原因是檢測方法和檢測結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)不同引起，因?yàn)榕Ｑ蚩谔阋咭呙缡强谔阋逴型-A型二價滅活疫苗，所以存在較低的漏免現(xiàn)象。從檢測方法來看，牛羊O型口蹄疫免疫抗體采用了正向間接血凝檢測方法，敏感性相對較低，首孔抗體滴度從1∶2開始，結(jié)果判斷人為主觀性偏高，而牛羊A型口蹄疫免疫抗體采用了液相阻斷ELISA檢測方法，敏感性較高，首孔抗體滴度從1∶16開始，結(jié)果判斷相對客觀。從判斷標(biāo)準(zhǔn)來看，牛羊O型口蹄免疫抗體效價以≥1∶32為合格，而牛羊A型口蹄疫免疫抗體效價以≥1∶128為合格，相對O型來說，A型判斷標(biāo)準(zhǔn)高于O型2個滴度，這是此次檢測O型口蹄疫免疫抗體水平高于A型的主要原因。

4 結(jié)論

從監(jiān)測結(jié)果分析，2020年上半年天水市高致病性禽流感、口蹄疫、豬瘟、小反芻獸疫等主要動物疫病防制工作總體取得了良好成績，除了牛羊A型口蹄疫外，其他各類動物疫病免疫抗體合格率都在70%以上，體現(xiàn)了良好的免疫效果，能夠有效防范此類重大動物疫病的發(fā)生。而牛羊A型不合格的主要原因是檢測方法和檢測結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)不同引起，抗體效價尚未達(dá)到檢測結(jié)果判定合格標(biāo)準(zhǔn)的要求。為降低疫情發(fā)生風(fēng)險，針對A型口蹄疫抗體不合格的場戶需進(jìn)行及時補(bǔ)免以確保免疫抗體合格率處于較高水平。