常桂林

（昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，云南 昆明）

0 引言

當(dāng)前，男性中不育癥患者人數(shù)不斷升高，這不僅給患者造成很大的傷害，而且甚至?xí)绊懸粋€(gè)家庭的幸福指數(shù)。據(jù)相關(guān)研究結(jié)果顯示，若男性的精子DNA 受到損傷，那么就會(huì)嚴(yán)重影響男性的生育能力[1]，另外還會(huì)增加配偶的意外流產(chǎn)的概率，所以，一些業(yè)內(nèi)人士認(rèn)為精子DNA 損傷情況可以準(zhǔn)確評(píng)價(jià)精子的質(zhì)量，這樣就可以很好地對(duì)不孕不育癥患者提供可靠的治療依據(jù)，進(jìn)而提升妊娠幾率，提高患者的幸福指數(shù)[2]。那么本次研究就來(lái)探討一下，現(xiàn)將相關(guān)的情況匯報(bào)如下。

1 基礎(chǔ)資料與方法

1.1 基本資料

納入本研究的研究資料均為本院在2020 年全年收治的男性不育癥患者120 例，這些患者均經(jīng)過(guò)相關(guān)的檢測(cè)確診為不育癥患者，在將患者納入研究之前對(duì)全部患者均講解了此次研究的目的、方法、意義等情況，在患者明確了相關(guān)研究情況之后，全部患者均簽署同意書(shū)，其中包含DNA 損傷率＜25%的患者與DNA 損傷率≥25%的患者，分別為60 例與60 例，并以此分組。應(yīng)用精子染色質(zhì)擴(kuò)散法（SCD 法）對(duì)男性精子DNA 的損傷率情況進(jìn)行檢測(cè)。將兩組患者的資料做一比較分析，無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），符合本次研究的研究標(biāo)準(zhǔn)，具有較好的可比較性。

1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

曾經(jīng)患過(guò)腮腺炎的患者；曾經(jīng)患有隱睪癥或無(wú)精子癥疾病的患者；患有精索靜脈曲張疾病的患者；存在性功能障礙的病人；患者不能積極配合研究工作等。若有上述情況者將予以排除在外。

1.3 干預(yù)方法

1.3.1 采集精液

在對(duì)患者進(jìn)行精液采集之前，要向患者講明采集精液的主要方法，讓患者有一個(gè)心理準(zhǔn)備。要嚴(yán)格依照WHO制定的精液采集標(biāo)準(zhǔn)對(duì)患者的精液進(jìn)行采集，首先要囑患者禁欲2-8 天，然后囑其用手淫法采集精液，收集到合格的精液之后將其放在37℃恒溫水浴箱內(nèi)進(jìn)行液化，然后測(cè)定精子的計(jì)數(shù)及動(dòng)態(tài)、靜態(tài)等參數(shù)情況[3]。

1.3.2 檢測(cè)患者的精子DNA 損傷情況

1.3.2.1 首先取患者的精液并進(jìn)行充分的稀釋?zhuān)♂尯蟮玫降臐舛葹椋?-10×106/ml，之后將60μl 精子稀釋液加入到已融化的易熔膠管里并進(jìn)行充分混合均勻，在37℃條件下實(shí)施孵育，待用。

1.3.2.2 DNA 的變性處理

在預(yù)冷的載玻片上放置上30μl 精子凝膠混合液包被，在2-8℃的環(huán)境下使其凝固[4]，之后移除蓋玻片。將反應(yīng)液A 滴入其中，在室溫內(nèi)反應(yīng)7min，將載玻片加入反應(yīng)液B 中予以充分浸泡，時(shí)間為25min，然后用清水反復(fù)沖洗載玻片1-3 次。

1.3.2.3 DNA 染色

應(yīng)用濃度梯度不同的乙醇溶液將樣本進(jìn)行脫水處理，然后用瑞氏染色液覆蓋，再加入瑞氏緩沖液，混合均勻后用清水沖洗1-3 次，然后進(jìn)行干燥備用。

1.3.2.4 DNA 損傷統(tǒng)計(jì)

檢測(cè)男性患者的精子DNA 損傷率情況應(yīng)用SCD 檢測(cè)法，依據(jù)光暈大小對(duì)男性精子損傷程度實(shí)施判別。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

應(yīng)用SPSS18.0 軟件對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，計(jì)量資料應(yīng)用（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用t 檢驗(yàn)，使用χ2檢驗(yàn)。若P＜0.05 則表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。若P＞0.05則表示結(jié)果沒(méi)有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

見(jiàn)表1。

表1 兩組精液指標(biāo)情況對(duì)比

3 討論

近年來(lái)，隨著社會(huì)的不斷發(fā)展與進(jìn)步，人們?cè)陲嬍沉?xí)慣、作息習(xí)慣等方面具有顯著變化，再加上人們的壓力普遍增大，有很多因素會(huì)導(dǎo)致人們的不孕不育發(fā)病率顯著升高，而且此病呈逐年升高的趨勢(shì)，其中一些不育癥是和精液質(zhì)量不佳有緊密聯(lián)系的。精液質(zhì)量與男性生育能力息息相關(guān)，是評(píng)價(jià)男性生殖能力方面的重要內(nèi)容之一，但是這項(xiàng)指標(biāo)對(duì)于評(píng)價(jià)精子受精能力方面并不全面，局限性較大[5]。男性精子DNA 受損的機(jī)制相對(duì)較為復(fù)雜，據(jù)相關(guān)研究資料結(jié)果顯示，導(dǎo)致精子DNA 發(fā)生損傷的主要因素主要包括：精子染色質(zhì)包裝發(fā)生異常；精子在產(chǎn)生過(guò)程中細(xì)胞發(fā)生凋亡；精子在運(yùn)輸過(guò)程中受到氧化自由基的不良影響。男性的生殖能力高低與精子的質(zhì)量高低是有直接關(guān)系的，而DNA 受損會(huì)顯著降低患者的精子質(zhì)量，也就是能夠直接損害患者的生殖能力[6]。

在本次研究，我們將收集到的不育癥患者并將患者分為DNA 損傷率＜25%組別與DNA 損傷率≥25%組別兩組，研究中我們對(duì)兩組患者的前向運(yùn)動(dòng)精子、精子活動(dòng)率、精子正常形態(tài)率等指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比分析，通過(guò)檢測(cè)分析并比較結(jié)果發(fā)現(xiàn)，DNA 損傷率＜25%組均顯著好于DNA 損傷率≥25%組，兩組結(jié)果比較具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這個(gè)研究結(jié)果表明，男性精子DNA 的損傷程度是與精子活動(dòng)率、精子正常形態(tài)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系的，研究結(jié)果顯示，男性精子DNA 受損可能會(huì)導(dǎo)致男性患者的正常生殖能力顯著降低[7,8]，在臨床中，要改善患者的生殖解決，我們可以通過(guò)采用精子DNA 損傷小的精液精子和睪丸精子來(lái)受精，進(jìn)而提升女方的懷孕率[9]。

總之，通過(guò)本次的深入研究與分析，我們認(rèn)為精子DNA 損傷可能成為獨(dú)立的精子質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)患上不育癥的男性患者及時(shí)進(jìn)行精子DNA 損傷情況的檢測(cè)[10]，及時(shí)了解患者的精子受損情況，可幫助篩選出DNA 損傷程度較低的精子，以此來(lái)改善患者的生殖的治療結(jié)局，提高女方受孕率，是值得在臨床中加強(qiáng)研究[11,12]。