蔣為 顧佳佳 丁兆生 劉熙 施燕 馮非雨 周衍

【關鍵詞】 阿爾茨海默病; AD7C-NTP;檢測

阿爾茨海默病（alzheimer's disease，AD）又叫老年性癡呆，是一種起病隱襲、慢性進行性發(fā)展的神經退行性疾病。隨著老年化社會進程的高速發(fā)展，AD已成為繼心臟病、癌癥、中風之后，導致老年人死亡的第四大病因，成為本世紀威脅人類健康的最嚴重的疾病之一[1-2]。為了喚起公眾對AD的關注和重視，世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）將每年的9月21日確定為國際老年癡呆日，中國政府將每年的9月17日確定為 “中華老年癡呆防治日。據(jù)統(tǒng)計，在中國，65歲以上老年人的AD平均患病率為5.21%，75～85歲老年人患病率為15%～20%，85歲以上的老年人患病率可高達30%，給社會主義社會的健康發(fā)展帶來極大的壓力[3]。

AD相關神經絲蛋白（AD7C-NTP）是一種相對分子質量為41000的跨膜磷蛋白，屬于神經絲蛋白家族。AD7C-NTP自神經元胞體中表達后，廣泛存在于神經細胞發(fā)生的軸突中，并大量出現(xiàn)在AD 患者腦中的NFTs 里，呈分泌性上調表達。研究表明，AD7C-NTP 在神經元中的沉積在神經元變性早期即可出現(xiàn)，并且發(fā)生在NFTs形成之前，在早期AD 患者的腦組織抽提物、腦脊液、尿液中均可以檢測到AD7C-NTP蛋白。同時，AD7C-NTP蛋白的含量水平隨病程延長和癡呆嚴重程度呈正相關逐漸增高，這可能是由于AD患者腦組織NTP 免疫活性及信使RNA表達增強，導致神經元細胞凋亡增多，繼而使死亡細胞釋放大量的AD7C-NTP。進一步發(fā)現(xiàn)，在尿液中檢測AD7C-NTP蛋白的濃度，與在和腦脊液的檢測具有相同的效果[2-4]。尿液檢測，方便取樣，接受度高，無創(chuàng)檢測具有較好的基層推廣和市場應用價值。

AD是一個典型的慢性疾病，嚴重影響患者本人和及其家屬的生活質量，盡早發(fā)現(xiàn)、積極干預，可以有效緩解AD的發(fā)病進程，提高患者及家人的生活質量，減輕家庭和社會巨大的經濟負擔，提高居民的生活質量，符合經濟建設和社會發(fā)展的需求。AD7C-NTP指標在臨床鑒別上有較多應用[5-6]，但鮮有報道作為篩查指標，評判在社區(qū)健康體檢中的意義。本研究以江蘇省無錫市內的社區(qū)老人作為研究對象，組織定量檢測受檢人群的尿液中AD7C-NTP蛋白含量，評判AD7C-NTP在社區(qū)篩查中的應用價值，為無錫地區(qū)老年人群 AD 的風險預測、早期診斷和積極治療為提供一種方案，為政府機構提供政策依據(jù)。創(chuàng)新的探討了尿AD7C-NTP蛋白檢測在社區(qū)健康體檢中篩查意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象

陽性組為2019年6月至2020年12月在江蘇省榮軍醫(yī)院經臨床確診為AD的患者（所有入組人群均需有詳細的病史采集、專科診斷、行頭顱CT或MRI檢查，進行神經精神量表評價等）最終，共收集有輕度患者有22例，中重度32例。

正常組納入標準：（1）截止至2019年6月，在無錫市濱湖區(qū)稻香社區(qū)實際居住已滿6個月或在江蘇省榮軍醫(yī)院養(yǎng)老院實際居住已滿3個月的志愿者;（2）年齡≥ 60歲;（3）依從性高，積極配合調查隨訪。排除標準：心血管器質性疾病和神經精神性疾病、無先天性癡呆和一級親屬中存在抑郁癥、輕度認知功能障礙或癡呆患者。最終，共入組198例。本人或監(jiān)護人對研究知情同意并簽署同意書。

1.2 AD的臨床評定標準

根據(jù)臨床患者的表現(xiàn)、病史資料，根據(jù)《中國精神障礙分類與診斷標準（第3版）》[7]進行確診;采用Hachinski缺血量表（Hachinski Ischemic Scale，HIS）排除血管性癡呆和混合性癡呆。簡易智力狀態(tài)檢查量表（Mini-mental State Examination，MMSE）：文盲≤17分，小學≤20 分，中學及其以上≤26分;臨床癡呆評定量表（Clinical Dementia Rating ，CDR） ≥1分，HIS≤4分。輕度 AD：19 分 ≤ MMSE≤26分，CDR=1分;中重度AD：MMSE<19 分，CDR≥2分。

1.3 AD7C-NTP測定

尿液AD7C-NTP蛋白檢測試劑盒采購于深圳市安群生物工程有限公司。收集受檢者的中段晨尿，尿液樣本經尿常規(guī)檢測確定合格。離心機4000 r/min離心10 min，取2 mL上清液待測。后續(xù)所有的檢測步驟嚴格按照廠家試劑盒的說明書進行操作。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用 SPSS 19.0 統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計量資料以（x—±s）表示，采用配對t檢驗。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 尿液AD7C-NTP蛋白在正常組、AD組的濃度

輕度AD組和中重度AD組的MMSE評分均低于正常組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。輕度AD組和中重度AD組的尿液AD7C-NTP濃度高于正常組，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.000）。且隨著AD病程的加重，MMSE評分值越低，AD7C-NTP值越高，見表1。

2.2 尿液AD7C-NTP蛋白在各年齡組的濃度

尿液AD7C-NTP蛋白濃度在正常組中的年齡差異不大，無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;但在AD組的年齡間有差異，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表2。

2.3 尿液AD7C-NTP蛋白在不同性別組的濃度

尿液AD7C-NTP蛋白濃度在正常組、AD組的性別差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），見表3。

3 討論

AD是一種進行性認知功能障礙的腦部變性疾病。隨著社會老年化的加劇，AD發(fā)病率和死亡率逐年增加：預估計，到2030年全球AD患者將達到7470萬人，2050年更將突破1.3億人;我國AD患者人數(shù)已超過900萬，占全球總病例數(shù)的1/5[8]。更令人擔憂的是，絕大部分患者就診不及時或根本不到醫(yī)院診治，很多人（包括患者本人和身邊親屬）都認為患者的狀況是自然衰老的結果，導致患者及家人生活質量十分低下。

AD的風險評估和早期診斷對于后期的治療與預后十分重要，早發(fā)現(xiàn)早干預，能極大的延緩病程的發(fā)展，所以，找到合適的AD生物學標志物十分重要。在AD現(xiàn)有的診斷方法中，病理診斷被臨床醫(yī)學作為疾病診斷的金標準。但AD疾病為大腦病變導致，在病人生前獲取腦組織進行病理檢測，屬于有創(chuàng)性檢查，難以讓患者及家屬接受，可行性差;神經影像學檢查（頭部CT或MRI檢查）被認為能夠發(fā)現(xiàn)某些與AD有關的異常，但腦部異常明顯的患者大多已進入AD中、晚期，達不到早診斷、早治療的目的，特異性高靈敏度低且費用昂貴。所以目前AD的診斷主要還是依賴基于量表的使用，如簡易精神狀態(tài)檢查量表（MMSE），長谷川癡呆量表（HDS），癡呆簡易篩查表（BSSD）等，評判易受患者主觀因素和臨床醫(yī)生經驗的影響，難以作出客觀的臨床診斷。

目前，發(fā)現(xiàn)與AD 相關的標記物有淀粉樣前體蛋白（amyloid precursor protein，APP）、β淀粉樣蛋白（amyloid β-peptides，Aβ）、Tau蛋白、AD7C-NTP等。淀粉樣蛋白（主要為Aβ40與Aβ42）是 AD 患者大腦神經損傷的一個顯著生物標記物，許多研究提示血漿 Aβ蛋白是癡呆的保護因素，但與 AD 發(fā)病是否相關存在爭議[9-11]。值得關注的是，神經絲蛋白（ NTPs）的發(fā)現(xiàn)提高了AD早期診斷的準確性，AD7c‐NTP含量的測定在社區(qū)AD的早期診斷中有較好的應用：（1）AD7c‐NTP對診斷AD，有較高靈敏度，特異度好;（2）取樣方便，無創(chuàng)尿液檢測對于社區(qū)大樣本人群的早期篩查更適用。

本研究通過對無錫地區(qū)的252例人群（198例正常組，54例AD組）結果分析顯示，尿液AD7C-NTP在AD組的濃度顯著高于正常組（P<0.01），且隨著AD病程的加重，AD7C-NTP值越高。AD7C-NTP蛋白濃度在正常組的年齡，性別和AD組性別差異不大，但在AD組的年齡有差異。分析原因可能是，AD7C-NTP與病程相關，AD患者年齡越大，AD病程越嚴重，所以AD7C-NTP值在AD組中與年齡正相關。

以往臨床門診是等著患者主動就診才明確AD的診斷，一確診往往就是進入了中晚期階段，錯過了最佳的治療時期，給AD患者本身和其家人帶來了巨大壓力。通過本研究發(fā)現(xiàn)，尿液AD7C-NTP蛋白濃度可作為無錫地區(qū)老年人群的AD早期篩查的一種應用指標。本文將簡單易取樣的尿液 AD7c‐ NTP檢測應用到無錫地區(qū)社區(qū)老年人群的體檢篩查中，通過檢測尿液中AD7c‐ NTP的含量，提示AD患病風險、做到早發(fā)現(xiàn)早治療，及時干預治療，可以延緩病程進展，大大減輕家庭及社會的經濟負擔和精神負擔 ，給政府機構提供政策依據(jù)，符合經濟建設和社會發(fā)展的需求。