○孫清華
隨著我國(guó)漁業(yè)養(yǎng)殖的快速發(fā)展,出現(xiàn)了飼料原料緊缺的問(wèn)題,尤其是進(jìn)口蛋白等原料。尋找一些替代非常規(guī)原料替代蛋白等原料至關(guān)重要,不僅可以降低養(yǎng)殖成本,也可以緩解原料緊缺問(wèn)題。我國(guó)桑樹種植面積較廣,屬于種植大國(guó);桑葉可作為飼料原料應(yīng)用到養(yǎng)殖生產(chǎn)中,桑葉中富含多種生物活性物質(zhì),如多糖、黃酮、甾醇等,這些活性物質(zhì)具有抗炎、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、促生長(zhǎng)等功能,可以很好地應(yīng)用到畜牧養(yǎng)殖生產(chǎn)中。桑葉經(jīng)微生物發(fā)酵后不僅保留了原始的功能性成分,還富含大量的有益菌,可以調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道菌群結(jié)構(gòu),改善腸道健康,促進(jìn)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,提高機(jī)體抗病力等。研究表明,發(fā)酵桑葉可以顯著提高魚類的生長(zhǎng)性能,改善血液生化指標(biāo),提高機(jī)體免疫力及抗氧化能力。草魚作為我國(guó)淡水魚的主要養(yǎng)殖品種,在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中起著重要的作用。目前,發(fā)酵桑葉在草魚養(yǎng)殖中的研究甚少,因此,本試驗(yàn)以草魚為研究對(duì)象,探討不同劑量的發(fā)酵桑葉對(duì)草魚血液生化指標(biāo)的影響,為發(fā)酵桑葉在水產(chǎn)養(yǎng)殖中合理應(yīng)用提供理論數(shù)據(jù)支撐。
試驗(yàn)所用桑葉采摘于7月份,晾干粉碎后過(guò)40目篩。選用乳酸桿菌和酵母桿菌等比例發(fā)酵48小時(shí)后,經(jīng)65℃烘干粉碎后留用。試驗(yàn)草魚購(gòu)買于當(dāng)?shù)厮a(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)。
試驗(yàn)選取120尾體重相近、健康的草魚按照單因素隨機(jī)分組原則分成4個(gè)處理組,每個(gè)處理組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10尾。依次在基礎(chǔ)日糧中添加0%、3%、6%、9%的發(fā)酵桑葉,試驗(yàn)周期為60天。試驗(yàn)日糧原料成分及營(yíng)養(yǎng)成分含量如表1所示。
試驗(yàn)草魚飼養(yǎng)于1.8m×1.8 m×2.0m的網(wǎng)箱中,試驗(yàn)開始前,預(yù)試驗(yàn)7天。每日換水量為1/3,每日早晨定時(shí)清除箱內(nèi)糞便。試驗(yàn)中保持水溫在25℃左右,溶氧含量大于5.5mg/L,氨氮含量小于0.3mg/L。
試驗(yàn)結(jié)束后,草魚禁食12小時(shí),每組選取10尾與組內(nèi)平均體重相近的草魚于尾靜脈采血,在4℃條件下經(jīng)10000r/min離心8min,吸取上層血清樣品于-20℃保存。
草魚血液生化指標(biāo)的測(cè)定主要包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、葡萄糖、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、總膽固醇等指標(biāo),測(cè)定方法參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行,試劑盒均購(gòu)買于南京建成生物工程研究所。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2020進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)后,再采用SPSS 20.0進(jìn)行單因素的方差分析,并用LSD法對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較,P<0.05作為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn),結(jié)果用平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)誤呈現(xiàn)。
日糧添加不同劑量的發(fā)酵桑葉對(duì)草魚血液生化指標(biāo)的影響見(jiàn)表2。由表2數(shù)據(jù)可見(jiàn),在草魚日糧中添加一定劑量的發(fā)酵桑葉對(duì)草魚機(jī)體的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性、葡萄糖含量、高密度脂蛋白含量未產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)。試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組草魚血液中的甘油三酯、總膽固醇和低密度脂蛋白含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05),試驗(yàn)1組草魚血液中的甘油三酯、總膽固醇和低密度脂蛋白含量有低于對(duì)照組的趨勢(shì),但差異不顯著(P>0.05)。
表2 日糧添加不同劑量的發(fā)酵桑葉對(duì)草魚血液生化指標(biāo)的影響 單位:nmol/L
谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性代表著動(dòng)物機(jī)體肝功能狀態(tài),當(dāng)機(jī)體處于氧化應(yīng)激等狀況下,會(huì)導(dǎo)致其活性升高??偰懝檀?、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白含量代表著機(jī)體脂類代謝情況。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,在草魚日糧中添加6%和9%的發(fā)酵桑葉可以顯著降低甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白含量,顯著改善了機(jī)體脂類代謝,但對(duì)肝臟功能指標(biāo)未產(chǎn)生顯著影響,說(shuō)明日糧添加發(fā)酵桑葉未對(duì)草魚肝功能產(chǎn)生不利影響。丁國(guó)玉等的研究表明,在草魚日糧中添加10%的發(fā)酵桑葉可以顯著降低草魚的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性,降低甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白含量,顯著改善了草魚的血液生化指標(biāo),與本試驗(yàn)研究結(jié)果類似。發(fā)酵桑葉改善草魚機(jī)體血液生化指標(biāo)可能是由于其發(fā)酵后,其營(yíng)養(yǎng)成分含量增多,抗?fàn)I養(yǎng)因子含量減少,富含的生物活性物質(zhì)調(diào)節(jié)了機(jī)體脂類代謝。
本試驗(yàn)研究表明,在草魚日糧中添加一定劑量的發(fā)酵桑葉可以顯著降低甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白含量,改善了草魚的血液生化指標(biāo),且最適添加量為6%-9%。
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