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幾種化學(xué)藥劑和微生物菌劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的室內(nèi)觸殺活性

2021-04-30 20:31:51張妞王東趙遠(yuǎn)征邱廷艷符永程孟煥文周洪友王新
植物保護(hù) 2021年2期
關(guān)鍵詞:微生物菌劑

張妞 王東 趙遠(yuǎn)征 邱廷艷 符永程 孟煥文 周洪友 王新

關(guān)鍵詞腐爛莖線蟲(chóng);化學(xué)藥劑;微生物菌劑;觸殺活性

腐爛莖線蟲(chóng)Ditylenchus destructor屬于遷移性植物內(nèi)寄生線蟲(chóng),是國(guó)際上重要的檢疫性線蟲(chóng)。該線蟲(chóng)寄主范圍廣,已知寄主大約120種,主要寄主為馬鈴薯和甘薯。由該線蟲(chóng)引起的病害在美國(guó)、加拿大、德國(guó)、法國(guó)、中國(guó)、日本、澳大利亞等國(guó)均有發(fā)生。近年來(lái)隨著我國(guó)馬鈴薯、甘薯種植面積的不斷擴(kuò)大,該線蟲(chóng)的分布也越來(lái)越廣。資料顯示,腐爛莖線蟲(chóng)病在北京、天津、山東、河北、河南、江蘇、新疆、甘肅等地均有發(fā)生,并以山東、河北兩省的發(fā)生最為嚴(yán)重,已成為北方甘薯最嚴(yán)重的病害之一。該病害一般可造成甘薯和馬鈴薯減產(chǎn)30%~50%,嚴(yán)重時(shí)可減產(chǎn)80%以上,甚至絕收,嚴(yán)重威脅著馬鈴薯、甘薯等相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。由于腐爛莖線蟲(chóng)抗逆性強(qiáng)且寄主范圍極廣,可在土壤、病殘?bào)w中長(zhǎng)期存活,對(duì)于該病害的防控極其困難,效果甚微。

化學(xué)防治是防控線蟲(chóng)病害的重要手段。漆永紅等的研究發(fā)現(xiàn),20%丁硫克百威乳油2000μg/mL和1.8%阿維菌素乳油180μg/mL對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的防治效果較好。張大帆等的研究表明,溴氰菊酯對(duì)馬鈴薯腐爛莖線蟲(chóng)具有一定的殺滅活性,且對(duì)其運(yùn)動(dòng)擴(kuò)散和攝食能力具有較高的抑制活性。李鵬程等的研究結(jié)果表明,53.8%氫氧化銅水分散粒劑結(jié)合3%阿維菌素乳油1000倍液蘸根處理當(dāng)歸種苗,對(duì)由腐爛莖線蟲(chóng)引起的當(dāng)歸麻口病有良好的防治效果,且對(duì)當(dāng)歸生產(chǎn)安全,能有效提高當(dāng)歸的產(chǎn)量。但化學(xué)防治也存在一定的局限性,過(guò)去常用的甲基異柳磷、氯唑磷、丙溴磷、硫線磷、滅線磷、苯線磷等有機(jī)磷類和涕滅威、丁硫克百威等氨基甲酸酯類殺線蟲(chóng)劑,都因高毒及對(duì)生態(tài)環(huán)境的破壞而被禁用或限用。且目前多數(shù)研究將根結(jié)線蟲(chóng)作為藥劑篩選的靶標(biāo),而部分化學(xué)藥劑雖然對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)等植物線蟲(chóng)有效但對(duì)于腐爛莖線蟲(chóng)的防效較差。夏彥飛等研究結(jié)果表明,100g/L吡蟲(chóng)啉可濕性粉劑處理花生根結(jié)線蟲(chóng)、程氏滑刃線蟲(chóng)、貝西滑刃線蟲(chóng)、松材線蟲(chóng)和腐爛莖線蟲(chóng)48h后致死率分別為91.00%、65.70%、45.70%、44.00%和9.67%,花生根結(jié)線蟲(chóng)對(duì)吡蟲(chóng)啉最為敏感,腐爛莖線蟲(chóng)最不敏感,因此有必要針對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)進(jìn)一步篩選高效、低毒、安全的化學(xué)藥劑。

生物防治具有對(duì)非靶標(biāo)生物安全、致毒作用小、環(huán)境兼容性好、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn),已成為防控腐爛莖線蟲(chóng)病害的重要手段。張國(guó)鋒等的研究表明,施用30kg/hm2的厚孢輪枝菌(2.5億孢子/g)和45kg/hm2的淡紫擬青霉顆粒劑(5億孢子/g)可有效防治甘薯莖線蟲(chóng),防治效果分別達(dá)70.94%和67.56%。有研究表明,蘇云金芽胞桿菌Bacillusthuringiensis對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)具有較高毒力,巨大芽胞桿菌B.megaterium菌株D45對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)具有一定的殺線活性。Zeng等分離獲得的芽胞桿菌菌株SMrs28的發(fā)酵液粗提物表現(xiàn)出較強(qiáng)的殺線蟲(chóng)活性,其主要化合物對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)具有毒殺作用。因此,進(jìn)一步開(kāi)發(fā)、篩選高效的生物菌劑并對(duì)其使用方法進(jìn)行合理優(yōu)化,必將有助于腐爛莖線蟲(chóng)的防控。

本試驗(yàn)利用5種化學(xué)藥劑和4種微生物菌劑進(jìn)行腐爛莖線蟲(chóng)的室內(nèi)觸殺活性研究,通過(guò)設(shè)置不同濃度或用量處理,旨在篩選出對(duì)該線蟲(chóng)具有良好觸殺效果的化學(xué)藥劑和微生物菌劑,并進(jìn)一步探索了化學(xué)藥劑和微生物菌劑聯(lián)合應(yīng)用的效果,旨在為腐爛莖線蟲(chóng)的有效防治提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1供試化學(xué)藥劑及推薦用量

20%噻唑膦水乳劑(EW)750~1000mL/667m2,山東海而三利生物化工有限公司;5%阿維菌素懸浮劑(SC)16~20mL/667m2,青島奧迪斯生物科技有限公司;41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑(SC)0.024~0.03mL/株,拜耳股份公司;70.00%噁霉靈可濕性粉劑(WP)1.25~1.75g/m2,青島鑫潤(rùn)生物科技有限公司;5%高氯·甲維鹽微乳劑(ME)6~12mL/667m2,佳木斯興宇生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。

1.1.2供試微生物菌劑及推薦用量

有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑粉劑(DP)15kg/667m2(有效成分:枯草芽胞桿菌和黑曲霉),河北上瑞化工有限公司;20億芽胞/g蠟質(zhì)芽胞桿菌可濕性粉劑(WP)兌水稀600~1000倍,廣東植物龍生物技術(shù)有限公司;10億活芽胞/g枯草芽胞桿菌可濕性粉劑(WP)75~100g/667m2,保定市科綠豐生化科技有限公司;≥2億孢子/g木霉菌肥效劑粉劑(DP)1600株/kg,山東省科學(xué)院生物研究所與無(wú)錫幾丁生物新材料科技發(fā)展有限公司聯(lián)合研制。

1.1.3供試線蟲(chóng)

腐爛莖線蟲(chóng)Ditylenchus destructor采自發(fā)病的甘薯,并轉(zhuǎn)接于健康的甘薯薯塊中進(jìn)行擴(kuò)繁,室溫條件下保存于內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝與植保學(xué)院植物病理研究室。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1線蟲(chóng)分離

采用改良的貝曼漏斗法從發(fā)病的甘薯薯塊中分離線蟲(chóng)。

1.2.2線蟲(chóng)懸浮液制備

參考徐進(jìn)軍等的方法收集線蟲(chóng),并制備線蟲(chóng)懸浮液(約1000條/mL),備用。

1.2.3藥液的配制

化學(xué)藥劑的配制:參考供試化學(xué)藥劑說(shuō)明書(shū)的推薦用量,將20%噻唑膦EW、5%阿維菌素SC、41.7%氟吡菌酰胺SC、70%噁霉靈WP、5%高氯·甲維鹽ME分別配制成有效濃度為6.06、0.033、5.21、26.92、0.02 g/L的藥液備用;分別將20%噻唑膦EW、41.7%氟吡菌酰胺SC和70%噁霉靈WP3種化學(xué)藥劑稀釋100倍(有效濃度分別為2.00、4.17、7.00g/L)、300倍(有效濃度分別為0.67、1.39、2.33g/L)和500倍(有效濃度分別為0.40、0.83、1.40g/L),備用。

微生物菌劑的配制:參考供試微生物菌劑說(shuō)明書(shū)推薦的用量,將有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP、20億芽胞/g蠟質(zhì)芽胞桿菌WP、10億活芽胞/g枯草芽胞桿菌WP、≥2億孢子/g木霉菌肥效劑DP分別配制成500.00、8.33、66.67、83.00g/L的藥液備用;在此基礎(chǔ)上,分別按照增加25%和減少25%菌劑用量進(jìn)行配制,備用。

復(fù)合藥液的配制:按照推薦使用濃度或用量,將觸殺活性效果好的3種化學(xué)藥劑(20%噻唑膦EW、70%噁霉靈WP和41.7%氟吡菌酰胺SC)分別配制成有效濃度為6.06、26.92g/L和5.21g/L的藥液,將2種微生物菌劑(有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP和10億活芽胞/g枯草芽胞桿菌WP)分別配制成500.00g/L和66.67g/L的水溶液,再按照化學(xué)藥劑與生物菌劑1:1的比例進(jìn)行混合,配制復(fù)合藥液。

1.2.4腐爛莖線蟲(chóng)的室內(nèi)觸殺試驗(yàn)

采用直接觸殺法,用移液槍吸取100μL線蟲(chóng)懸浮液(含腐爛莖線蟲(chóng)約100條)至1.5mL離心管,3000r/min離心2min,棄上清液,加入配制好的藥液1.5mL,與線蟲(chóng)振蕩混合均勻后,用移液槍吸人到細(xì)胞培養(yǎng)板的小孔中,每個(gè)處理重復(fù)3次,以無(wú)菌水作為對(duì)照。用橡皮筋固定,放入聚乙烯塑料袋中,25℃恒溫培養(yǎng)24、48、72 h后在顯微鏡下進(jìn)行觀察,記錄腐爛莖線蟲(chóng)的總數(shù)以及死亡數(shù)。

1.3數(shù)據(jù)分析

計(jì)算腐爛莖線蟲(chóng)的死亡率和校正死亡率,并使用IBM SPSS Statistics 24對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析。

線蟲(chóng)死亡率=死蟲(chóng)數(shù)/供試線蟲(chóng)數(shù)×100%;

校正死亡率=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(1-對(duì)照組死亡率)×100%。

2結(jié)果與分析

2.1化學(xué)藥劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的室內(nèi)觸殺活性

2.1.1推薦濃度下5種化學(xué)藥劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的室內(nèi)觸殺活性

結(jié)果表明,推薦濃度下藥劑處理24 h,70%噁霉靈WP和20%噻唑膦EW對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果最好,線蟲(chóng)校正死亡率分別達(dá)到58.44%和55.09%,均與其他藥劑處理差異顯著,但二者之間無(wú)顯著差異;其次41.7%氟吡菌酰胺SC效果也較好,校正死亡率達(dá)到50.60%。藥劑處理48h,70%噁霉靈WP對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的校正死亡率達(dá)75.23%,顯著高于其他處理;20%噻唑膦EW的觸殺效果次之,校正死亡率達(dá)70.27%;41.7%氟吡菌酰胺SC處理的線蟲(chóng)校正死亡率也達(dá)到了66.11%。藥劑處理72 h,70%噁霉靈WP對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果依然最好,線蟲(chóng)校正死亡率達(dá)87.32%,且與其他藥劑處理差異顯著;20%噻唑膦EW和41.7%氟吡菌酰胺SC對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果次之,但二者差異不顯著,線蟲(chóng)校正死亡率分別為75.24%和73.95%(表1)。推薦濃度下,5%高氯·甲維鹽ME和5%阿維菌素SC對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果較差,72h的線蟲(chóng)校正死亡率均未達(dá)到50%。

2.1.2不同稀釋濃度下化學(xué)藥劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的室內(nèi)觸殺活性

在推薦使用濃度的基礎(chǔ)上,分別將20%噻唑膦EW、41.7%氟吡菌酰胺SC和70%噁霉靈WP稀釋100、300、500倍,測(cè)定其對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的室內(nèi)觸殺活性。結(jié)果表明,3種化學(xué)藥劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺活性均隨著稀釋倍數(shù)的增加有所降低;在不同時(shí)問(wèn)點(diǎn)(24、48、72h),各藥劑稀釋100倍時(shí)的線蟲(chóng)校正死亡率均為最高,且顯著高于其他稀釋倍數(shù)。

藥劑處理24h,41.7%氟吡菌酰胺SC對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果均最好,稀釋100倍時(shí)的線蟲(chóng)校正死亡率最高,為38.16%,稀釋300倍和500倍的線蟲(chóng)校正死亡率也分別達(dá)到35.47%和32.19%;其次為70%嗯霉靈WP,稀釋100倍時(shí)的線蟲(chóng)校正死亡率為33.00%;20%噻唑膦EW效果較差,不同稀釋倍數(shù)處理的線蟲(chóng)校正死亡率均未超過(guò)30%。

但隨著時(shí)間的推移,3種藥劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺活性發(fā)生變化,在藥劑處理48h和72h,20%噻唑膦EW和70%噁霉靈WP100倍稀釋液的效果較好,藥劑處理48h時(shí),線蟲(chóng)校正死亡率分別達(dá)55.63%和55.24%,均顯著高于41.7%氟吡菌酰胺SC100倍稀釋液的線蟲(chóng)校正死亡率(43.49%)。藥劑處理72h,3種藥劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺活性進(jìn)一步增強(qiáng),各濃度處理的線蟲(chóng)校正死亡率均高于50%;20%噻唑膦EW和70%噁霉靈WP100倍稀釋液的線蟲(chóng)校正死亡率分別達(dá)84.61%和81.68%,且顯著高于線蟲(chóng)校正死亡率為65.50%的41.7%氟吡菌酰胺SC 100倍稀釋液;20%噻唑膦EW和70%噁霉靈WP 300倍稀釋液的線蟲(chóng)校正死亡率也較高,分別達(dá)67.28%和68.76%(表2)。

2.2不同用量條件下微生物菌劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的室內(nèi)觸殺活性

推薦用量下不同時(shí)間點(diǎn)(24、48h和72h),有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP均好于其他菌劑處理,對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果最為顯著,24、48h和72h時(shí)線蟲(chóng)的校正死亡率分別達(dá)60.89%、69.14%和76.48%;其次為10億活芽胞/g枯草芽胞桿菌WP,3個(gè)時(shí)間點(diǎn)線蟲(chóng)的校正死亡率分別達(dá)47.06%、55.77%和63.31%;而≥2億孢子/g木霉菌肥效劑DP對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果最不理想,

3個(gè)時(shí)間點(diǎn)的線蟲(chóng)校正死亡率均在30%以下(表3)。

增加25%用量后,有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP不同時(shí)間點(diǎn)(24、48h和72h)的觸殺活性依然顯著好于其他菌劑處理,24 h時(shí)腐爛莖線蟲(chóng)的校正死亡率達(dá)63.27%,但與推薦用量處理相比差異不顯著;在48h和72h時(shí),菌劑加量25%后表現(xiàn)出對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)更強(qiáng)的觸殺效果,線蟲(chóng)的校正死亡率分別達(dá)到82.39%和85.58%,顯著好于推薦用量。其次為10億活芽胞/g枯草芽胞桿菌WP加量25%,24h對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的校正死亡率達(dá)51.12%,但與推薦用量處理差異不顯著;在處理48h和72h時(shí),線蟲(chóng)的校正死亡率分別達(dá)到63.54%和73.45%,比推薦用量的觸殺效果更為顯著(表3)。

4種微生物菌劑分別減少用量25%對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果有所減弱,但有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果仍然較好,72h時(shí)線蟲(chóng)的校正死亡率達(dá)63.47%;其次為10億活芽胞/g枯草芽胞桿菌WP,72h時(shí)線蟲(chóng)的校正死亡率達(dá)58.94%(表3)。

2.3化學(xué)藥劑與微生物菌劑復(fù)合使用對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的室內(nèi)觸殺活性

參考推薦使用濃度或用量,將篩選獲得的觸殺活性效果好的3種化學(xué)藥劑(20%噻唑膦EW、70%噁霉靈WP、41.7%氟吡菌酰胺SC)和2種微生物菌劑(有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP、10億活芽胞/g枯草芽胞桿菌WP)分別按照化學(xué)藥劑與生物菌劑1:1的比例混合后進(jìn)行室內(nèi)觸殺活性試驗(yàn)。結(jié)果表明:有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP與70%噁霉靈WP復(fù)合處理的效果最好,24h和48h的腐爛莖線蟲(chóng)校正死亡率分別達(dá)到79.53%和93.30%,均顯著高于其他處理;有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP與20%噻唑膦EW復(fù)合處理后效果也較好,48h線蟲(chóng)的校正死亡率達(dá)81.68%;其他復(fù)合處理的效果也較好,24h的線蟲(chóng)校正死亡率均在60%以上(64.65%~70.16%),48h后線蟲(chóng)的校正死亡率均在70%以上(72.26%~77.78%)(表4)。

3討論

噁霉靈作為一種常用殺菌劑,通常被應(yīng)用于防治水稻立枯病、西瓜枯萎病等土傳真菌病害。本研究發(fā)現(xiàn)了殺菌劑70%噁霉靈WP無(wú)論是在推薦濃度條件下還是經(jīng)過(guò)不同稀釋倍數(shù)對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)均具有較好的觸殺效果,是殺菌劑的新利用,有必要繼續(xù)開(kāi)展田間防控試驗(yàn)。

噻唑膦和氟吡菌酰胺是生產(chǎn)上常用的化學(xué)藥劑,但由于氟吡菌酰胺成本較高,其使用范圍受到了一定的影響,而噻唑膦的使用更為普遍。魯旭鵬等的研究表明,10%噻唑膦顆粒劑2000倍液對(duì)黃瓜和番茄根結(jié)線蟲(chóng)病的防效分別為72.75%和67.79%,可有效抑制黃瓜和番茄根部根結(jié)的形成。本研究發(fā)現(xiàn)20%噻唑膦EW與41.70%氟吡菌酰胺SC對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)具有較強(qiáng)的觸殺效果,這與多位學(xué)者報(bào)道結(jié)果較為一致。例如,楊鋒等報(bào)道,10%噻唑膦顆粒劑穴施可以有效防控甘薯莖線蟲(chóng)病,平均防效達(dá)94.68%;張淑玲報(bào)道,41.7%氟吡菌酰胺SC稀釋200倍對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果為61.93%。已有研究表明,氟吡菌酰胺水溶液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)和腎形盤(pán)旋線蟲(chóng)有較好的觸殺作用,主要表現(xiàn)為麻痹作用,受藥后的線蟲(chóng)活力下降直至蟲(chóng)體僵直死亡,但去除藥劑沖洗線蟲(chóng)24h后部分線蟲(chóng)的活力可恢復(fù)。本研究也發(fā)現(xiàn),41.70%氟吡菌酰胺SC在處理24h時(shí)對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果較為明顯,特別是在相同稀釋倍數(shù)條件下,24h的線蟲(chóng)校正死亡率顯著高于其他藥劑,這可能是由于41.70%氟吡菌酰胺SC在短時(shí)間內(nèi)對(duì)線蟲(chóng)具有較強(qiáng)的毒殺作用和擊倒活性;但是隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng),該藥劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果有所減弱。與41.70%氟吡菌酰胺SC不同,20%噻唑膦EW在稀釋條件下,短時(shí)間內(nèi)(24h)對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果并不突出,但隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)觸殺效果逐漸增強(qiáng),即使在較低濃度條件下也表現(xiàn)出較高的觸殺活性。

阿維菌素和高氯·甲維鹽也是經(jīng)常用于線蟲(chóng)病害防控的藥劑。本研究表明,這兩種藥劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果不理想,這與高德良等的研究結(jié)果不一致;但張淑玲研究發(fā)現(xiàn)1.8%阿維菌素懸浮劑和3%高氯·甲維鹽懸浮劑稀釋200倍,72h時(shí)對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的校正死亡率僅為14.26%和9.36%,與本研究結(jié)果較為一致。

4種微生物菌劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺活性試驗(yàn)表明,有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)表現(xiàn)出最強(qiáng)的觸殺活性,而該菌劑的主要成分是黑曲霉和枯草芽胞桿菌。關(guān)于黑曲霉和枯草芽胞桿菌防治根結(jié)線蟲(chóng)和孢囊線蟲(chóng)的報(bào)道較多。李頌等研究發(fā)現(xiàn),不同濃度的黑曲霉Snf009次生代謝產(chǎn)物均能降低番茄植株的根結(jié)指數(shù)和根結(jié)線蟲(chóng)種群數(shù)量;李婷等發(fā)現(xiàn),用生防真菌黑曲霉NBC001發(fā)酵液2倍稀釋液處理大豆孢囊線蟲(chóng)其24h的校正死亡率約90%,孵化抑制率在68%以上;張輝民等發(fā)現(xiàn),曲霉屬真菌HN214和HN132的發(fā)酵液對(duì)禾谷孢囊線蟲(chóng)的校正死亡率分別為99.66%和96.56%。高旭利等發(fā)現(xiàn),枯草芽胞桿菌ZJSS能夠有效抑制根結(jié)線蟲(chóng)的侵染和根結(jié)的形成,同時(shí)提高黃瓜產(chǎn)量;彭雙等的研究表明,枯草芽胞桿菌發(fā)酵上清液稀釋3倍處理24h殺線蟲(chóng)率達(dá)到95%以上。但是,多數(shù)研究是將根結(jié)線蟲(chóng)和孢囊線蟲(chóng)作為靶標(biāo),而本研究表明,以黑曲霉和枯草芽胞桿菌為主要成分的抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)也具有良好的觸殺活性,今后有必要進(jìn)一步開(kāi)展田問(wèn)試驗(yàn),明確其對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)病的防治效果,使得該菌劑擁有更為廣闊的應(yīng)用前景。

本研究表明,≥2億孢子/g木霉菌肥效劑DP對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺活性最差。許多研究表明,木霉菌作為生防因子可以用來(lái)防控根結(jié)線蟲(chóng)病害。馬金慧等報(bào)道木霉TRI2發(fā)酵液在48h時(shí)可以100%殺死根結(jié)線蟲(chóng),在盆栽試驗(yàn)中使黃瓜根結(jié)減退率達(dá)到63.5%,在田間對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病的防治效果達(dá)到72.2%。但與根結(jié)線蟲(chóng)等其他植物線蟲(chóng)相比,腐爛莖線蟲(chóng)較為特殊,除了可以寄生植物之外,還可在木霉屬Trichoderma、鐮孢屬Fusarium、葡萄孢屬Botrytis、輪枝孢屬Verticillium等約40個(gè)屬70余種真菌上繁殖。一般來(lái)說(shuō),大多數(shù)木霉不僅不能抑制腐爛莖線蟲(chóng)生長(zhǎng),而且利于其繁殖;徐鵬剛研究發(fā)現(xiàn),30℃條件下用長(zhǎng)枝木霉T.longi-brachiatum接種1000條腐爛莖線蟲(chóng),30d后繁殖線蟲(chóng)多達(dá)18750條。當(dāng)然一些生防木霉菌株經(jīng)過(guò)發(fā)酵,產(chǎn)生大量具有殺線蟲(chóng)活性的次級(jí)代謝產(chǎn)物,可能會(huì)對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)具有一定的觸殺作用,但與根結(jié)線蟲(chóng)等其他植物線蟲(chóng)相比,其對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的活性可能會(huì)減弱;如段玉璽等研究表明,哈茨木霉Snef85發(fā)酵液的5倍稀釋液對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)、水稻干尖線蟲(chóng)和大豆孢囊線蟲(chóng)的毒力均較強(qiáng)(處理48h校正死亡率94.18%~100%),但對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的毒力一般(處理48h校正死亡率55.64%)。

化學(xué)藥劑與微生物菌劑復(fù)合使用可以有效減少化學(xué)藥劑的使用量,對(duì)于線蟲(chóng)病害的綠色防控意義重大。而且,本研究發(fā)現(xiàn)二者的復(fù)合處理,比單一菌劑或藥劑對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺活性更高,使用效果更好。張桂娟等的研究發(fā)現(xiàn),10%噻唑膦顆粒劑分別與黑曲霉Y61和3%芽胞桿菌微乳劑復(fù)合使用對(duì)土壤中根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)均具有一定的抑制作用,對(duì)芹菜根結(jié)線蟲(chóng)病防治效果分別為75.3%和52.1%,且分別增產(chǎn)17.2%和2.7%。萬(wàn)景旺等利用枯草芽胞桿菌Jdm2分別與阿維菌素、苦參堿、印楝素、藜蘆堿混用,表明生防菌與生物源農(nóng)藥混用可對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)的防治起到增效作用。本研究初步篩選出對(duì)腐爛莖線蟲(chóng)的觸殺效果較為明顯的2個(gè)復(fù)合處理——有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP與70%噁霉靈WP混合使用和有效活菌數(shù)≥200.0億/g抗根結(jié)線蟲(chóng)菌劑DP與20%噻唑膦EW混合使用,為腐爛莖線蟲(chóng)病害的防控提出了新的解決方法。

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