張 彬，毛家真，鄒季福，劉紅云，楊金勇，王 翀*

（1.浙江農(nóng)林大學(xué)集賢學(xué)院，動(dòng)物科技學(xué)院.動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，浙江省畜禽綠色生態(tài)健康養(yǎng)殖應(yīng)用技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，動(dòng)物健康互聯(lián)網(wǎng)檢測(cè)技術(shù)浙江省工程實(shí)驗(yàn)室，浙江杭州 311300；2.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 310058；3.浙江省畜牧技術(shù)推廣與種畜禽監(jiān)測(cè)總站，浙江杭州 310021）

酮病是奶牛產(chǎn)后能量負(fù)平衡導(dǎo)致的一種營(yíng)養(yǎng)代謝病[1]。通常，當(dāng)血清中β羥丁酸（BHBA）含量≥1.2 mmol/L時(shí)，提示奶?；加衼喤R床酮病[2-3]。奶牛產(chǎn)后1～3 周是亞臨床酮病的高發(fā)期，國(guó)外研究報(bào)道顯示亞臨床酮病的發(fā)病率為28.5%～60%[4-5]，而我國(guó)酮病的發(fā)病率為15%～30%，且呈現(xiàn)逐年升高的趨勢(shì)[6]。亞臨床酮病對(duì)泌乳牛造成的損失高達(dá)130 歐元/（頭.年），變化范圍從1 胎奶牛的83 歐元/（頭.年）到3 胎奶牛175 歐元/（頭.年），所造成的經(jīng)濟(jì)損失包括產(chǎn)犢間隔延長(zhǎng)、產(chǎn)奶量降低、治療費(fèi)用、棄奶、淘汰等[7]。本研究擬對(duì)亞臨床酮病奶牛的產(chǎn)后疾病、繁殖性能及產(chǎn)奶性能進(jìn)行研究，了解亞臨床酮病發(fā)生對(duì)不同胎次奶牛產(chǎn)奶量及繁殖性能的影響，以期為生產(chǎn)實(shí)踐提供數(shù)據(jù)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)與動(dòng)物 調(diào)研地點(diǎn)為山西省北部某大型牧場(chǎng)，牧場(chǎng)奶牛存欄量5 000 頭以上，泌乳牛單產(chǎn)約11 t。選擇產(chǎn)后1～2 周的荷斯坦泌乳奶牛共計(jì)807 頭，亞臨床酮病判斷標(biāo)準(zhǔn)為血液中BHBA 含量≥1.2 mmol/L[8]。

1.2 試驗(yàn)時(shí)間與飼養(yǎng)管理 酮病數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)時(shí)間段為2019年1 月1 日—2019 年6 月30 日，繁殖及產(chǎn)奶數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)時(shí)間段為2019 年1 月1 日—2020 年3 月1 日。試驗(yàn)牛只均為荷斯坦奶牛，散欄臥床式飼養(yǎng)，并列式擠奶機(jī)，自動(dòng)識(shí)別計(jì)量系統(tǒng)，每天3 次。每天TMR 飼喂3 次，自由飲水。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將血液中BHBA 含量≥1.2 mmol/L 歸為亞臨床酮病組，BHBA 含量＜1.2 mmol/L 歸為正常組，其中酮病組336 頭，正常組471 頭。記錄每組牛只產(chǎn)后營(yíng)養(yǎng)代謝?。ㄕ嫖敢莆弧a(chǎn)后癱瘓、胎衣不下、子宮炎、產(chǎn)后發(fā)燒等）、繁殖性能（配種次數(shù)、首配天數(shù)、配準(zhǔn)天數(shù)等，其中亞臨床酮病組1 胎樣本數(shù)量127 頭，2 胎樣本數(shù)量92 頭，3 胎樣本數(shù)量88 頭；正常組1 胎樣本數(shù)量254 頭，2 胎樣本數(shù)量71 頭，3 胎樣本數(shù)量121 頭）、產(chǎn)奶量等指標(biāo)。通過分析相關(guān)指標(biāo)之間的差異及相關(guān)性，判斷酮病對(duì)奶牛產(chǎn)后營(yíng)養(yǎng)代謝病、繁殖性能及產(chǎn)奶量的影響。

1.4 基礎(chǔ)日糧 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分參照牧場(chǎng)現(xiàn)有飼養(yǎng)管理水平，具體見表1。

1.5 數(shù)據(jù)收集及分析

1.5.1 血液酮體含量 產(chǎn)后1～2 周，通過奶牛尾根靜脈采集全血2 mL，使用便攜式酮體檢測(cè)儀（北京怡成血酮測(cè)試儀-奶牛專用）快速測(cè)定奶牛血酮值，根據(jù)酮體值≥1.2 mmol/L、＜1.2 mmol/L 分為亞臨床酮病組和正常組。

1.5.2 產(chǎn)后營(yíng)養(yǎng)代謝病 統(tǒng)計(jì)亞臨床酮病組與正常組內(nèi)每頭牛產(chǎn)后30 d 內(nèi)的真胃移位、產(chǎn)后癱瘓、胎衣不下、子宮炎、乳房炎、死淘等發(fā)病率數(shù)據(jù)，上述疾病判定標(biāo)準(zhǔn)參考Suthar 等[9]文獻(xiàn)報(bào)道。

1.5.3 繁殖性能 統(tǒng)計(jì)亞臨床酮病組與正常組內(nèi)每頭牛各項(xiàng)繁殖性能指標(biāo)，包括首配天數(shù)、配種次數(shù)及配準(zhǔn)天數(shù)，并依據(jù)配次計(jì)算亞臨床酮病組、正常組的首配受胎率。其中首配天數(shù)指奶牛產(chǎn)犢后第1 次輸精與產(chǎn)犢之間的間隔天數(shù)；配種次數(shù)指奶牛產(chǎn)后至再次懷孕過程中參加人工輸精的次數(shù)；配準(zhǔn)天數(shù)指有效輸精日期（準(zhǔn)胎日期）與產(chǎn)犢日期之間的間隔天數(shù)[10]。

表1 日糧組成與營(yíng)養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)） %

1.5.2 產(chǎn)奶性能 利用牧場(chǎng)擠奶機(jī)的數(shù)據(jù)記錄系統(tǒng)，收集亞臨床酮病組與正常組內(nèi)每頭奶牛產(chǎn)后305 d 內(nèi)每天的產(chǎn)奶量，從2019 年1 月1 日—2020 年3 月1 日，共計(jì)約65 萬條數(shù)據(jù)。

1.5.3 泌乳曲線擬合 用 Wood 函數(shù)對(duì)產(chǎn)奶量的變化進(jìn)行擬合，基本模型如下[11]：

式中，t 為泌乳天數(shù)；Yt為t 時(shí)間的產(chǎn)奶量；a、b、c為模型參數(shù)，其中a 為產(chǎn)后初始產(chǎn)奶量；b 為達(dá)到峰值的傾斜度參數(shù)；c 為下降的傾斜度參數(shù)。在進(jìn)行曲線擬合時(shí)，各參數(shù)初始值的確定采用Oloria 等[12]計(jì)算所得的結(jié)果，并利用如下公式換算出以下二級(jí)參數(shù):

式中，TMAX為在擬合產(chǎn)奶量時(shí)達(dá)到產(chǎn)奶量高峰所需的時(shí)間，即產(chǎn)奶量高峰出現(xiàn)時(shí)間，Ymax為高峰產(chǎn)奶量，Per為泌乳持續(xù)力。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010 軟件進(jìn)行整理，使用SPSS 20.0 對(duì)酮體值、首配天數(shù)、配準(zhǔn)天數(shù)、配次等數(shù)據(jù)進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析，結(jié)果以平均值表示；使用卡方檢測(cè)分析亞臨床酮病與產(chǎn)后營(yíng)養(yǎng)代謝病的相關(guān)性。P＜0.01 為顯著極差異，P＜0.05 為顯著差異，0.05 ≤P＜0.10 為存在差異趨勢(shì)。所有產(chǎn)奶量數(shù)據(jù)均先用Excel 2010 初步整理，再用Origin 2018 軟件進(jìn)行擬合，擬合效果用擬合度（R2）進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2 結(jié)果

2.1 血液酮體檢測(cè)值 亞臨床酮病組血液BHBA 含量1.89 mmol/L，正常組血液BHBA 含量0.84 mmol/L，亞臨床酮病組BHBA 含量極顯著高于正常組（圖1）。

2.2 亞臨床酮病發(fā)病率與胎次的關(guān)系 該牧場(chǎng)整體亞臨床酮病發(fā)病率41.63%。1 胎牛共計(jì)396 頭，其中亞臨床酮病134 頭，發(fā)病率33.84%。2 胎牛共計(jì)182 頭，其中亞臨床酮病104 頭，發(fā)病率54.17%。3 胎牛共計(jì)229 頭，其中亞臨床酮病98 頭，發(fā)病率42.79%。

圖1 亞臨床酮病組與正常組β 羥丁酸含量對(duì)比

2.3 亞臨床酮病與其他疾病的相關(guān)性分析 對(duì)奶牛產(chǎn)后疾病與亞臨床酮病之間關(guān)系進(jìn)行相關(guān)性分析（表2），結(jié)果顯示，亞臨床酮病與真胃變位相關(guān)性極顯著（P=0.01），與胎衣不下、死淘、產(chǎn)后癱瘓、乳房炎及產(chǎn)后發(fā)燒無顯著相關(guān)。

表2 亞臨床酮病與其他疾病的卡方分析

2.4 亞臨床酮病對(duì)奶牛繁殖性能的影響 由表3 可知，亞臨床酮病組1 胎、3 胎牛的首配天數(shù)均顯著高于正常組，2 胎牛與正常組之間差異不顯著；亞臨床酮病組各胎次的配準(zhǔn)天數(shù)與正常組相比均差異不顯著；亞臨床酮病組2 胎的配次顯著高于正常組，亞臨床酮病組1 胎的配次顯著低于正常組。亞臨床酮病組1 胎的首配受胎率高于正常組，亞臨床酮病組2、3 胎的首配受胎率均低于正常組。

表3 亞臨床酮病對(duì)不同胎次奶牛首配首配天數(shù)、配準(zhǔn)天數(shù)、配次及首配受胎率的影響

2.5 亞臨床酮病對(duì)奶牛胎次產(chǎn)奶量的影響 如圖2、表4所示，亞臨床酮病組與正常組1 胎奶牛的泌乳曲線擬合度R2均大于0.90。亞臨床酮病組1 胎的高峰日比正常組晚1.01 d，高峰奶量比正常組高1.77 kg，泌乳持續(xù)力比正常組高0.01。

圖2 亞臨床酮病組與正常組1 胎產(chǎn)奶曲線對(duì)比

表4 亞臨床酮病與正常組1 胎產(chǎn)奶高峰日、高峰奶量及持續(xù)力比較

如圖3、表5 所示，亞臨床酮病組與正常組2 胎奶牛的泌乳曲線擬合度R2均接近0.90。亞臨床酮病組2 胎的高峰日比正常組晚2.25 d，高峰奶量比正常組高1.16 kg，泌乳持續(xù)力比正常組高0.06。

圖3 亞臨床酮病組與正常組2 胎產(chǎn)奶曲線對(duì)比

表5 亞臨床酮病與正常組2 胎產(chǎn)奶高峰日、高峰奶量及持續(xù)力比較

如圖4、表6 所示，亞臨床酮病組與正常組3 胎奶牛的泌乳曲線擬合度R2均高于0.90。亞臨床酮病組3 胎的高峰日比正常組早1.23 d，高峰奶量比正常組低0.14 kg，泌乳持續(xù)力比正常組高0.03。

圖4 亞臨床酮病組與正常組3 胎產(chǎn)奶曲線對(duì)比

3 討 論

3.1 亞臨床酮病與奶牛胎次之間的關(guān)系 本試驗(yàn)中牛群亞臨床酮病發(fā)病率41.63%，其中2 胎、3 胎牛亞臨床酮病發(fā)病率高于1 胎牛。邊四輩等[13]對(duì)上海地區(qū)9 個(gè)規(guī)模化牧場(chǎng)亞臨床酮病調(diào)研結(jié)果顯示，產(chǎn)后3～7 d 亞臨床酮病發(fā)病率為16.4%。張瑞華[14]報(bào)道奶牛亞臨床酮病的發(fā)病率為25%，各胎次亞臨床酮病發(fā)病率分別為1胎17.65%、2 胎23.08%、3 胎40.00%、4 胎60.00%、5 胎20.00%、6 胎以上14.29%。

表6 亞臨床酮病與正常組3 胎產(chǎn)奶高峰日、高峰奶量及持續(xù)力比較

3.2 亞臨床酮病與產(chǎn)后疾病的關(guān)系 研究表明，亞臨床酮病奶牛（血漿BHBA＜1.2 mmol/L）產(chǎn)后真胃移位的發(fā)病率是健康牛的2.6～6.9 倍[3,15]。本試驗(yàn)結(jié)果亦顯示，亞臨床酮病牛只產(chǎn)后真胃移位的發(fā)病率是健康牛的5.2倍。亞臨床酮病與死淘之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的趨勢(shì)，亞臨床酮病組的死淘比例是正常組的2.3 倍，而國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道亞臨床酮病奶牛產(chǎn)后60 d 內(nèi)淘汰的概率是健康牛的1.4～3.0 倍[4,16]，本試驗(yàn)結(jié)果在此區(qū)間內(nèi)。由于樣本數(shù)量較少，本試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)亞臨床酮病與胎衣不下、產(chǎn)后癱瘓等存在正相關(guān)關(guān)系。

3.3 亞臨床酮病與繁殖性能的關(guān)系 朱奎玲等[6]研究顯示，酮病牛的配次、配準(zhǔn)天數(shù)均顯著高于健康牛。張瑞華[14]報(bào)道，酮病牛首配受胎率為18.18%，顯著低于健康牛27.27%，首配受胎率下降33.33%。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道顯示，酮病牛首次配種受胎率比健康牛低30%[4]。本試驗(yàn)中1 胎牛的首配受胎率并沒有受到亞臨床酮病的影響，但亞臨床酮病組2 胎牛的首配受胎率與正常組相比下降23.58%，亞臨床酮病組3 胎牛的首配受胎率與正常組相比下降13.05%。相對(duì)于上述研究結(jié)果，本試驗(yàn)結(jié)果中亞臨床酮病組2、3 胎首配受胎率與正常組相比降幅較低，可能與試驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)良好規(guī)范的產(chǎn)后護(hù)理有關(guān)；而1 胎牛首配受胎率未受影響，原因尚不清楚。

3.4 亞臨床酮病與產(chǎn)奶性能的關(guān)系 在試驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)飼養(yǎng)管理水平下，以1.2 mmol/L 為閾值判定亞臨床酮病時(shí)，各胎次亞臨床酮病組牛只的高峰奶量均不同程度高于或接近正常組；高峰日及泌乳持續(xù)力與正常組相比差異不大。亞臨床酮病對(duì)產(chǎn)奶量的影響既有積極影響的研究結(jié)論，也有負(fù)面影響的研究結(jié)論[17]。張瑞華[14]研究結(jié)果表明，在整個(gè)泌乳前期酮病組的平均產(chǎn)奶量均高于健康組（38.0 kg/d vs 35.9 kg/d），說明亞臨床酮病更容易發(fā)生于高產(chǎn)奶牛。Ospina[18]研究表明，亞臨床酮病對(duì)產(chǎn)奶量的影響與胎次有關(guān)，頭胎牛亞臨床酮病組305 d 產(chǎn)奶量比正常組增加403 kg，經(jīng)產(chǎn)牛亞臨床酮病組305 d 產(chǎn)奶量比正常組減少393 kg。Mellado 等[19]報(bào)道顯示，當(dāng)以1.2 mmol/L 判定亞臨床酮病時(shí)，正常組305 d 產(chǎn)奶量（9 991 kg）與亞臨床酮病組（10 123 kg）無顯著差異。

4 小 結(jié)

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，2 胎、3 胎牛的亞臨床酮病發(fā)病率高于1 胎牛，亞臨床酮病牛只產(chǎn)后真胃移位的發(fā)病率是正常牛的5.2 倍，死淘率是正常牛的2.3 倍，亞臨床酮病會(huì)導(dǎo)致2 胎、3 胎牛配次增加，首配受胎率下降13.05～23.58%；亞臨床酮病對(duì)1、2 胎高峰奶量無負(fù)面影響，但會(huì)導(dǎo)致3 胎牛高峰奶量下降0.14 kg/d。