楊峰山，高夢(mèng)穎，孫 叢，王顏波，楊思源，付海燕，劉春光

（1黑龍江大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物技術(shù)教育部工程研究中心，哈爾濱150500；2黑龍江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，黑龍江省寒地生態(tài)修復(fù)與資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱150080；3黑龍江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，黑龍江省普通高校分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱150080）

0 引言

除草是農(nóng)作物生產(chǎn)的重要組成部分，通常是通過體力勞動(dòng)來完成的，但由于除草作業(yè)費(fèi)工費(fèi)力，在當(dāng)今勞動(dòng)力短缺和勞動(dòng)力成本增加的情況下，這種情況越來越不常見，化學(xué)除草具有簡(jiǎn)單方便、節(jié)省人力、除草效果好等優(yōu)點(diǎn)[1]。因此，化學(xué)除草劑已經(jīng)成為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)不可缺少的重要組成部分。但不可否認(rèn)的是，化學(xué)除草劑在給人們帶來巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益的同時(shí)，其廣泛應(yīng)用也給人們帶來了一些負(fù)面影響[2]。一些研究表明，噴灑的除草劑作用在雜草上不到1%，99%以上的除草劑散播到周圍環(huán)境中，隨著施用面積的擴(kuò)大，農(nóng)田系統(tǒng)中殘留的除草劑可能對(duì)作物、土壤和水體造成污染?；瘜W(xué)除草劑在世界范圍內(nèi)廣泛使用，常用的除草劑有400多種。2007年，世界農(nóng)藥支出總額約為394億美元，除草劑約占銷售額的40%，占最大份額，其次是殺蟲劑、殺菌劑[3]。除草劑在促進(jìn)作物產(chǎn)量方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用，也造成了嚴(yán)重的環(huán)境污染問題，在某些條件下，某些除草劑可以通過淋洗或地表徑流來運(yùn)輸，污染地下水或遙遠(yuǎn)的地表水源。一些除草劑會(huì)導(dǎo)致一系列的健康影響，從皮疹到死亡[4]。除對(duì)生態(tài)系統(tǒng)造成污染的風(fēng)險(xiǎn)和對(duì)人體健康的風(fēng)險(xiǎn)外，以往作物上使用的除草劑殘留還會(huì)對(duì)輪作作物造成植物毒性，威脅食品生產(chǎn)安全[5]。

由于除草劑的毒性和在環(huán)境中長(zhǎng)期存在，人們對(duì)其在生態(tài)系統(tǒng)中的殘留相當(dāng)關(guān)注。微生物分解代謝是除草劑在環(huán)境中消散的主要途徑。從20世紀(jì)中葉開始，已經(jīng)分離出數(shù)百種能夠降解各種除草劑的微生物。在這些微生物資源的基礎(chǔ)上，闡明了許多微生物的除草劑代謝途徑，鑒定了幾十個(gè)與除草劑分解代謝有關(guān)的基因和酶，并報(bào)道了微生物對(duì)除草劑污染部位的生物修復(fù)。土壤酶主要由生長(zhǎng)在動(dòng)植物殘?jiān)系奈⑸锂a(chǎn)生，是土壤生態(tài)系統(tǒng)中負(fù)責(zé)生化過程的最活躍成分之一[6]。由于土壤酶活性對(duì)環(huán)境變化敏感，土壤酶對(duì)自然或人為因素引起的土壤變化能夠迅速作出反應(yīng)，并反映了土壤的化學(xué)和物理?xiàng)l件以及代謝狀態(tài)[7-8]，因此在許多實(shí)驗(yàn)室和田間試驗(yàn)研究中，它們被用作土壤污染的質(zhì)量指標(biāo)，該指標(biāo)可用于指示土壤微生物活性、土壤質(zhì)量和土壤生產(chǎn)力[9-11]。酶催化土壤中的生物地球化學(xué)過程，如脲酶和磷酸酶分別參與氮磷循環(huán)，脫氫酶可以反映土壤微生物的代謝活性微生物活性，易受有毒有機(jī)物的影響，研究表明，土壤中殘留的除草劑可影響酶活性和土壤微生物群落[12-16]。土壤酶活性也是土壤微生物群落對(duì)代謝需求的直接表達(dá)，發(fā)揮著物質(zhì)循環(huán)、能量轉(zhuǎn)換和污染物降解等多種功能，從而促進(jìn)了農(nóng)業(yè)系統(tǒng)的可持續(xù)利用和環(huán)境質(zhì)量[17-18]。土壤酶活性、土壤微生物群落的豐度、多樣性和結(jié)構(gòu)以及土壤功能基因的豐度對(duì)環(huán)境變化的響應(yīng)迅速，因此，它們被廣泛應(yīng)用于研究土壤對(duì)環(huán)境污染物的響應(yīng)，盡管在除草劑的作用下土壤中的酶活性是一個(gè)重要的問題，但在研究中卻被忽略了，到目前為止，針對(duì)該問題的工作很少，本研究通過總結(jié)和梳理施用四類除草劑的危害和對(duì)土壤酶活性的影響，以期為除草劑污染的土壤修復(fù)提供理論依據(jù)和參考。

1 氯乙酰苯胺類除草劑對(duì)土壤酶活性的影響

1.1 氯乙酰苯胺類除草劑的概述

氯乙酰苯胺類除草劑常用于玉米、棉花、玉米、水稻、大豆、甘蔗、甜菜根、向日葵等作物。這些除草劑的水溶性相對(duì)較高，在自然界具有持久性，因此，它們的殘余物及其代謝物通常在土壤以及地表和地下水中被檢測(cè)出來[19]。最常用的氯乙酰苯胺類除草劑是乙草胺、丙胺、丁草胺、異丙甲草胺、s-異丙甲草胺、前甲草胺和丙草胺，這些除草劑被美國(guó)環(huán)保局列為B2、L2和C類致癌物，據(jù)報(bào)道有中度到高慢性毒性[20]。生態(tài)毒理學(xué)研究表明，這些除草劑是導(dǎo)致大鼠、魚類和人類細(xì)胞DNA損傷和腫瘤誘導(dǎo)的誘因，這是在體外研究死亡期間發(fā)現(xiàn)的[21]。因此，人們對(duì)這些除草劑在環(huán)境中的去向和清除給予了很大的關(guān)注。

1.2 氯乙酰苯胺類除草劑對(duì)土壤酶活性影響

土壤微生物產(chǎn)生的許多酶可參與土壤碳、磷、氮循環(huán)植物、土壤和微生物之間的相互作用，對(duì)土壤生態(tài)系統(tǒng)功能至關(guān)重要[22]。土壤人為污染物可以通過直接調(diào)節(jié)或通過對(duì)微生物群落的影響來限制酶促養(yǎng)分礦化，從而影響農(nóng)業(yè)和非農(nóng)業(yè)土壤中的植物生長(zhǎng)。磷酸酶活性是細(xì)胞代謝過程中必需的養(yǎng)分磷循環(huán)所必需的，在這里被用作土壤酶功能的代表。

單敏等[23]通過從浙江大學(xué)華家池校區(qū)大棚蔬菜地試驗(yàn)田采樣研究施用丁草胺對(duì)土壤酶活的影響，研究結(jié)果表明不同濃度(2、4、10 mg/kg)的丁草胺對(duì)土壤酸性、堿性磷酸酶、脲酶和蔗糖酶均有一定的抑制作用，且隨著濃度的增加而增加，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，抑制作用緩慢消失，酶活性恢復(fù)到與對(duì)照水平一致。丁草胺過氧化氫酶表現(xiàn)出一定的促進(jìn)作用。

嚴(yán)巖等[24]通過田間模擬試驗(yàn)，研究了施用丁草胺對(duì)松嫩平原西部灌區(qū)鹽堿蘆葦濕地土壤酶活性的影響，結(jié)果表明不同濃度(360、720、1440 μg/L)的丁草胺加入鹽堿蘆葦濕地1個(gè)月內(nèi)迅速下降，不同濃度丁草胺對(duì)濕地土壤酶活性的影響不同，中高濃度丁草胺對(duì)土壤過氧化氫酶活性有顯著抑制作用，但對(duì)堿性磷酸酶活性無顯著影響；中濃度丁草胺對(duì)土壤蔗糖酶活性有顯著影響。

丁草胺對(duì)土壤酶活性的影響結(jié)果不同，可能是由于研究環(huán)境的不同所形成的微生物種群不一樣和微生物數(shù)量上的差異所造成的，還可能是因?yàn)檠芯康亩〔莅窛舛炔煌蜁r(shí)間不同對(duì)酶活性以及微生物種群的影響不一樣所導(dǎo)致的。

2 苯氧乙酸類對(duì)土壤酶活性的影響

2.1 苯氧乙酸類除草劑的概述

2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和2-甲基-4-氯苯氧乙酸(MCPA)是一類合成植物生長(zhǎng)素，廣泛應(yīng)用于多種作物中。這些化合物是世界上使用最廣泛的除草劑之一。它們?cè)谕寥乐懈叨攘鲃?dòng)，MCPA通常比2,4-D更持久，2,4-D可能對(duì)哺乳動(dòng)物造成中度急性毒性，2,4-D也可能對(duì)水生無脊椎動(dòng)物、浮游植物和魚類有毒，盡管不同物種的毒性和損害程度不同[25]。二氯喹啉酸（3,7-二氯-8-喹啉-羧基）是一種高選擇性生長(zhǎng)素除草劑，廣泛應(yīng)用于稻田稗草和某些雙子葉雜草的防治，二氯喹啉酸是高度穩(wěn)定的，降解非常緩慢[26]。二氯喹啉酸殘留對(duì)許多作物和蔬菜具有植物毒性，已成為稻-多巴輪作的主要問題之一。在稻煙輪作田，二氯喹啉酸殘留會(huì)對(duì)煙草造成嚴(yán)重的植物毒性。二氯喹啉酸的殘留也可能影響微生物的活性，并通過土壤污染對(duì)環(huán)境造成潛在危害。

2.2 苯氧乙酸類除草劑對(duì)土壤酶活性的影響

土壤酶活性被認(rèn)為是對(duì)污染敏感的，并被提議作為土壤退化的指標(biāo)。過氧化氫酶（過氧化氫氧化還原酶，酶代碼EC1.11.1.6）是一種細(xì)胞內(nèi)酶，存在于所有需氧菌和大多數(shù)兼性厭氧菌中，但在專性厭氧菌中不存在[27]。眾所周知，氧還原的產(chǎn)物，如過氧化氫、超氧自由基、羥基自由基等，對(duì)細(xì)胞具有很強(qiáng)的毒性，并可能破壞細(xì)胞大分子。過氧化氫酶能將過氧化氫分解成分子氧和水，從而防止活性氧對(duì)細(xì)胞的損傷,這種酶存在于所有需氧微生物、植物和動(dòng)物細(xì)胞中。雖然它是最早分離純化的酶之一，但其生理功能和調(diào)節(jié)機(jī)制仍不清楚。過氧化氫酶活性可能與需氧生物的代謝活性有關(guān)，并被用作土壤肥力的指標(biāo)。過氧化氫酶活性在土壤中是非常穩(wěn)定的，并且顯示出與有機(jī)碳含量隨著土壤深度的降低而顯著相關(guān)[28]。

和文祥等[29]通過從西北農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)田采集土樣，利用模擬法研究施用2,4-D對(duì)土壤酶活性的影響，結(jié)果表明2,4-D能顯著降低土壤脲酶活性，土壤脲酶活性先是有一個(gè)緩慢的濃度周期，變化不大，然后表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用。土壤轉(zhuǎn)化酶效應(yīng)無規(guī)律性變化，對(duì)2,4-D的響應(yīng)相對(duì)較慢。隨著農(nóng)藥濃度的變化，土壤堿性磷酸酶活性先被激活，再被抑制，最后被激活，說明磷酸酶活性與土壤污染密切相關(guān)；楊彩宏等[30]通過廣東省白云水稻試驗(yàn)田采集土樣研究施用二氯喹啉酸在在淹水和不淹水的條件下對(duì)土壤酶活性的影響，研究結(jié)果表明不同濃度(0、83.3、166.6 μg/kg)的二氯喹啉酸在水淹條件下對(duì)脲酶的影響不同，表現(xiàn)為高濃度促進(jìn)，低濃度抑制；在不淹水條件下，則低濃度促進(jìn)；在水淹和不淹水條件下，土壤中過氧化氫酶活性是一致的，都是伴隨二氯喹啉酸濃度的增大而升高；在淹水土壤中，纖維素酶活性會(huì)隨著二氯喹啉酸濃度的升高而下降，在相同濃度的非淹水土壤中，纖維素酶活性會(huì)隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)而下降；在淹水土壤中脫氫酶活性變化趨勢(shì)與對(duì)照組一致，表現(xiàn)為二氯喹啉酸濃度越高，脫氫酶活性越低。

3 二苯醚類除草劑對(duì)土壤酶活性的影響

3.1 二苯醚類除草劑的概述

二苯醚類除草劑目前是世界上最大的一類除草劑，1901年首次報(bào)道[31]。中國(guó)二苯醚類除草劑主要有9大類[32]：氟草醚、氟草醚、乳香醚、雙酚醚、氟草醚、氟乙草醚、氯草醚、氯草醚和乙草醚。目前，乳粉、氟磺胺草醚、氟氧芬因其高效、低毒、高選擇性而得到廣泛應(yīng)用。二苯醚類除草劑是一類廣譜除草劑，使用壽命長(zhǎng)。氟草醚、氟磺胺草醚、氟乙草醚等除草劑具有高活性和高選擇性，對(duì)一些敏感作物有一定的危害。研究表明，土壤中的二苯醚類除草劑可以通過光解、化學(xué)水解和微生物降解等途徑降解，微生物降解是主要途徑[33]。

二苯醚類除草劑氟磺胺草醚｛5-[2-氯-4（三氟甲基）苯氧基]-N-[甲基磺?；鵠-2-硝基苯甲酰胺｝廣泛應(yīng)用于大豆和一些其他豆類植物闊葉雜草的選擇性緊急后防治[34]。氟磺胺草醚自引進(jìn)中國(guó)以來，因其低用量、高除草活性而迅速成為大豆和花生田最受歡迎的除草劑之一。氟磺胺草醚的半衰期從100～240天不等，因此人們擔(dān)心，如果連續(xù)幾年種植敏感作物，殘留的除草劑可能會(huì)造成植物毒性和傷害。這種除草劑的持續(xù)使用也可能導(dǎo)致食物污染，從而威脅人類健康，殘留除草劑也可能通過改變微生物代謝活性、群落結(jié)構(gòu)和酶活性對(duì)土壤健康和生物過程產(chǎn)生不利影響[35]。

3.2 二苯醚類除草劑對(duì)土壤酶活性的影響

土壤酶活性可作為評(píng)價(jià)除草劑對(duì)土壤生態(tài)效應(yīng)影響的指標(biāo)之一[36]。轉(zhuǎn)化酶是土壤中普遍存在的酶，對(duì)于從蔗糖中釋放果糖和葡萄糖很重要，因此為土壤微生物的生長(zhǎng)提供了易于降解的碳源，因此其抑制作用是碳循環(huán)和微生物生長(zhǎng)普遍關(guān)注的問題[37]；脲酶是催化尿素水解為CO2和NH3的酶，是土壤氮素循環(huán)的關(guān)鍵組成部分，脲酶活性存在于大量的土壤細(xì)菌和真菌中，磷酸酶是一種由許多土壤微生物產(chǎn)生的細(xì)胞外酶，負(fù)責(zé)將有機(jī)磷化合物水解為無機(jī)磷，一些研究人員已經(jīng)證明，在各種除草劑應(yīng)用后，脲酶活性要么不變，要么增加，要么減少[38-40]。

鄭景瑤等[41]研究發(fā)現(xiàn)，氟磺胺草醚可抑制土壤脲酶、蛋白酶、過氧化物酶和過氧化氫酶活性；張清明等[42]通過山東農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)田研究氟磺胺草醚(0、10、100、500 μg/kg)對(duì)土壤酶活性的影響，研究表明氟磺胺草醚對(duì)酸性磷酸酶、堿性磷酸酶和脫氫酶活性有不同的刺激作用，其中脫氫酶對(duì)氟磺胺草醚最敏感。在第10天，不同濃度的氟磺胺草醚對(duì)脲酶活性有明顯的抑制作用，30天后這種抑制作用逐漸消失并恢復(fù)到對(duì)照水平；胡海燕等[43]研究表明高劑量(37.5 mg/ kg )和低劑量(18.75 mg/ kg )的氟磺胺草醚分別從第30天和第45天到試驗(yàn)結(jié)束（90天）顯著降低根際土壤中的脲酶和轉(zhuǎn)化酶活性；鄭麗英等[44]通過湖南省常德取樣模擬試驗(yàn)研究雙草醚對(duì)土壤酶活性的影響，結(jié)果表明，雙草醚對(duì)土壤過氧化氫酶活性略有抑制，21天后恢復(fù)正常，雙草醚可抑制脲酶活性，濃度越低抑制效果越明顯。

4 二硝基苯胺類除草劑對(duì)土壤酶活性的影響

4.1 二硝基苯胺類類除草劑的概述

二硝基苯胺類除草劑是一類高效的除草劑，廣泛應(yīng)用于防治棉花、大豆、玉米等作物的多種一年生禾草和某些一年生闊葉雜草[45-46]。最常用的二硝基苯胺類除草劑包括二甲戊靈、丁胺靈、氟樂靈和稻瘟靈。二甲戊靈是僅次于草甘膦和百草枯的第三大除草劑，也是世界上使用最廣泛的選擇性除草劑。二硝基苯胺類除草劑在土壤中中度持久，半衰期約為3～12個(gè)月。二硝基苯胺類除草劑的廣泛使用和長(zhǎng)期存在，導(dǎo)致其在土壤、地下水和地表水中的頻繁檢測(cè)，這些除草劑對(duì)環(huán)境造成了負(fù)面影響[47]。二硝基苯胺類除草劑對(duì)水生生物和大鼠具有較高的毒性[48-49]。二甲戊靈是一種可能的人類致癌物質(zhì)，美國(guó)環(huán)境保護(hù)署(EPA)將其歸類為一種持久性生物累積性毒素[50]。此外，氟樂靈被懷疑是內(nèi)分泌干擾物，并被歸類為C組可能的人類致癌物[51-52]。二甲戊靈主要通過硝基還原和氧化脫烷基途徑代謝[53]。

4.2 二硝基苯胺類除草劑對(duì)土壤酶活性的影響

除草劑在土壤中的降解受多種因素的影響，包括土壤類型，pH值和有機(jī)質(zhì)含量。除了土壤之間的物理和化學(xué)差異外，土壤微生物群落的差異還可以極大地影響降解的速度和程度。土壤和微生物群落的差異可能是導(dǎo)致研究之間存在差異的原因。

王維靜等[54]通過沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)田研究氟樂靈對(duì)土壤酶活性的影響，結(jié)果表明氟樂靈能刺激土壤過氧化物酶活性；抑制土壤蔗糖酶、脲酶和過氧化氫酶活性，氟樂靈濃度越高，效果越明顯，一段時(shí)間后，抑制酶的活性恢復(fù)到對(duì)照水平，可見，氟樂靈能在在短期內(nèi)降低土壤微生物量和酶活性，破壞土壤肥力；范君華等[55]研究結(jié)果表明施用氟樂靈后土壤蔗糖酶和脲酶的變化趨勢(shì)為抑制—促進(jìn)—抑制—恢復(fù)，過氧化氫酶酶活性變化趨勢(shì)為抑制—促進(jìn)—恢復(fù)，由此可見，氟樂靈的應(yīng)用過程會(huì)對(duì)環(huán)境產(chǎn)生一定的影響，在試驗(yàn)劑量和時(shí)間范圍內(nèi)，短期內(nèi)土壤環(huán)境受氟污染的影響較強(qiáng)，隨后逐漸減弱和恢復(fù)，但對(duì)作物生長(zhǎng)發(fā)育會(huì)帶來不可恢復(fù)的影響。因此，在實(shí)際應(yīng)用中，應(yīng)按科學(xué)用量使用氟樂靈，避免土壤生態(tài)環(huán)境惡化對(duì)作物生長(zhǎng)發(fā)育的不利影響；胡佳月等[56]通過新疆棉田試驗(yàn)研究施用二甲戊靈對(duì)土壤酶活性的影響，研究結(jié)果表明，不同濃度的二甲戊靈(0、2700、4050、5400 g/hm2)對(duì)土壤堿性磷酸酶活性有明顯抑制作用；脲酶活性持續(xù)被激活，蔗糖酶和脫氫酶活性隨二甲戊靈濃度的增加而增加，土壤表層的增強(qiáng)作用明顯強(qiáng)于10～20 cm土層，過氧化氫酶在0～10 cm土層的增強(qiáng)作用最為明顯，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，二甲戊靈先抑制后激活，二甲戊靈能激活脲酶和過氧化氫酶，抑制堿性磷酸酶，降低棉田土壤有效磷含量，長(zhǎng)期施用二甲戊靈可引起土壤養(yǎng)分失衡。

5 總結(jié)與展望

由于在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中，除草劑的廣泛使用是世界范圍內(nèi)的普遍做法，因此除草劑對(duì)土壤的污染可能會(huì)增加[57]。高濃度的除草劑活性物質(zhì)經(jīng)常殘留在土壤中，經(jīng)常會(huì)發(fā)生生物和物理化學(xué)變化，影響土壤中的微生物生長(zhǎng)和酶活性。土壤微生物量和酶活性是土壤質(zhì)量和健康的重要指標(biāo)，因?yàn)樗鼈儗?duì)土壤的自然或人為變化有直接的反應(yīng)。土壤環(huán)境中微生物分布是決定作物發(fā)育和生產(chǎn)力最佳條件的關(guān)鍵因素[58-59]。

除了對(duì)微生物的影響外，除草劑的積累還對(duì)土壤酶產(chǎn)生顯著影響，而土壤酶是影響微生物在土壤中棲息地的重要催化劑[60]。土壤中存在的酶可能有多種來源和來源，其中之一是腐爛的原核或真核細(xì)胞。此外，土壤酶是真菌和植物根系分泌到土壤中的獨(dú)立細(xì)胞外蛋白[61]。由于除草劑的結(jié)構(gòu)多樣性和分解途徑的多樣性，很難解釋施用農(nóng)藥后的酶和微生物反應(yīng)。還應(yīng)提及的是，在自然環(huán)境中，除草劑的微生物降解是由多種物質(zhì)的混合物組成的，而實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)往往分析單一活性物質(zhì)的分布。這樣的試驗(yàn)可以確定農(nóng)藥中單個(gè)活性物質(zhì)的降解途徑。然而，在其他理化土壤因素的影響下，活性物質(zhì)混合物在土壤中的分布卻鮮有研究，土壤基質(zhì)是一種復(fù)雜而困難的研究材料，因?yàn)樗哂懈鞣N重疊的環(huán)境參數(shù)，例如：溫度、pH值、顆粒組成、氧化還原電位、金屬離子和其他離子的存在，在某些情況下還包括各種有機(jī)物（腐殖酸、農(nóng)藥、有機(jī)物、無機(jī)物、，多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯-多氯聯(lián)苯等），所有這些因素都影響微生物和土壤酶的活性[62]。

利用基因工程的方法和各種生物技術(shù)，可以分析除草劑是如何被微生物生物降解的，基因工程產(chǎn)生的新菌株能夠更有效地降解各種化合物的復(fù)雜混合物，特別是除草劑等環(huán)境污染物。另一個(gè)問題與生物活性測(cè)定方法的選擇有關(guān)：現(xiàn)有的方法很多，而且差異很大。在某些情況下，很難為特定的微生物活性選擇合適的試驗(yàn)。這種狀況的條件是缺乏所有實(shí)驗(yàn)室接受的標(biāo)準(zhǔn)分析方法，而這些方法是解釋結(jié)果所必需的。此外，在樣品收集、儲(chǔ)存、預(yù)處理以及測(cè)定酶和微生物活性的方案方面也存在差異，所有這些因素都影響著酶編碼基因的比較和土壤中酶的活性。對(duì)于這一課題的研究仍然非常重要，因?yàn)檫@些研究可以深入了解土壤中酶的來源，確定各種污染物對(duì)土壤健康的影響。