果布次仁

(西藏貢覺(jué)縣哈加鄉(xiāng)農(nóng)牧綜合服務(wù)中心，西藏 昌都 854200)

在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能起到一定的抑制作用，同時(shí)抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。在正常情況下，酶通過(guò)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物乙酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，該產(chǎn)物在食品快速檢測(cè)儀器中用分光光度針在412 nm 處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值并計(jì)算抑制率，通過(guò)抑制率的高低可以判斷出蔬菜是否含有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘留。在蔬菜中高劑量的有機(jī)磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘留會(huì)引發(fā)食物中毒和影響身心健康，快速檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘留，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，控制高劑量農(nóng)藥殘留蔬菜上市，杜絕發(fā)生各類食品安全事故。但是，快速檢測(cè)結(jié)果無(wú)法保證不出現(xiàn)假陽(yáng)性等情況，在我國(guó)偏遠(yuǎn)地區(qū)和農(nóng)村普遍使用快速檢測(cè)來(lái)滿足和保障農(nóng)產(chǎn)品使用安全，一旦出現(xiàn)假陽(yáng)性等情況，無(wú)法及時(shí)經(jīng)氣相色譜法等實(shí)驗(yàn)技術(shù)驗(yàn)證快速檢測(cè)結(jié)果，因此規(guī)范的樣品前處理方法對(duì)于快速檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要，以確保減少和避免假陽(yáng)性等情況頻繁出現(xiàn)。

1 材料及方法

1.1 試劑及設(shè)備

試劑配置：量取1 mL緩沖液(100x)，加入100 mL純凈水，搖勻，于常溫保存。

試劑：緩沖液，顯色劑，酶試劑，底物。

設(shè)備：食品安全快速檢測(cè)儀(深圳市易瑞生物技術(shù)股份有限公司，中國(guó))、電子天平、比色皿。漏斗、濾紙、移液槍、槍頭、試管、菜板、試管架、剪刀。

樣品：小白菜、娃娃菜、木耳、西紅柿、胡蘿卜、黃瓜、土豆、香菜、香菇。

1.2 樣品前處理

1.2.1 整珠提取法

選出樣品，擦干表面泥土及灰塵，稱取2 g非剪碎整珠樣品，放入三角瓶或50 mL 離心管中，加入10 mL 緩沖液，輕輕震搖1^2 min，靜置5 min 以上，用濾紙過(guò)濾，濾液作為樣品待測(cè)液[8]。

1.2.2 整體測(cè)定法

選出樣品，擦干表面泥土及灰塵，剪成1 cm 左右見(jiàn)方碎片，稱取2 g 剪碎的樣品，放入三角瓶或50 mL 離心管中，加入10 mL 緩沖液，輕輕震搖1^2 min，靜置5 min 以上，用濾紙過(guò)濾，濾液作為樣品待測(cè)液。

1.3 對(duì)照測(cè)試

在比色皿中依次加入3.0 mL 緩沖液，100 μL酶試劑和100 μL 顯色劑，混勻；靜置10 min，加入100 μL 底物，迅速搖勻，立即上機(jī)進(jìn)行對(duì)照測(cè)試。對(duì)照測(cè)試△A 值必須大于0.1(1 min 測(cè)試)或0.3(3 min測(cè)試)。

1.4 樣品測(cè)試

在比色皿中依次加入3.0 mL 樣品待測(cè)液，100 μL酶試劑和100 μL顯色劑，混勻，靜置10 min，加入100 μL 底物，迅速搖勻，立即上機(jī)進(jìn)行樣品測(cè)試。

蔬菜作為日常生活所必須的食品，它的安全性直接關(guān)系到人們的身體健康，由于蔬菜生產(chǎn)方式主要以分散種植為主，且大部分種植戶安全生產(chǎn)意識(shí)淡薄，農(nóng)藥使用方法和用量上不統(tǒng)一，導(dǎo)致蔬菜上市后農(nóng)藥殘留超標(biāo)現(xiàn)象相對(duì)較多。為避免出現(xiàn)大量的蔬菜農(nóng)藥殘留超標(biāo)蔬菜上市現(xiàn)象，國(guó)家出臺(tái)了蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法和檢出限標(biāo)準(zhǔn)(表1)。

表1 部分農(nóng)藥的檢出限表

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)果判定

蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)抑制率大于等于50%表示檢測(cè)結(jié)果不合格，在出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)需做2 次以上重復(fù)檢測(cè)，按照重復(fù)檢測(cè)結(jié)果判定，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤；蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)抑制率小于50%表示農(nóng)藥含量符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求，即檢測(cè)結(jié)果合格。

根據(jù)整珠提取法檢測(cè)結(jié)果表2 顯示，以下9 批次樣品檢測(cè)結(jié)果均合格，按照檢測(cè)結(jié)果和葉綠素含量分析，以下樣品中小白菜、西紅柿、胡蘿卜、香菜適合利用整珠提取法進(jìn)行樣品前處理并檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留。

表2 整株提取法檢測(cè)結(jié)果表

根據(jù)整體測(cè)定法檢測(cè)結(jié)果表3 顯示，以下9 批次樣品中，西紅柿、黃瓜、胡蘿卜、土豆、香菜的檢測(cè)結(jié)果明顯高于整珠提取法的檢測(cè)結(jié)果，如葉綠素含量越高會(huì)導(dǎo)致整體測(cè)定法的檢測(cè)結(jié)果越高，西紅柿、黃瓜、胡蘿卜等5 種樣品應(yīng)按照整珠測(cè)定法進(jìn)行樣品前處理，反之采取整體測(cè)定法進(jìn)行樣品前處理。

2.2 結(jié)果分析

按照試劑的加入順序和加入量，加入底物，立刻觀察溶液顏色變化情況。若試管內(nèi)溶液顏色立刻變黃，無(wú)逐漸過(guò)程，說(shuō)明底物已經(jīng)分解，不能再用，若試管顏色一直沒(méi)變化，表明酶已失效；若試管內(nèi)溶液顏色逐漸變黃，說(shuō)明試劑基本正常。樣品檢測(cè)時(shí)，室內(nèi)溫度低于37 ℃時(shí)，酶反應(yīng)速度隨之放慢，加入酶液和顯色劑后放置反應(yīng)的時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)，同時(shí)確保1 min 的對(duì)照測(cè)試△A0值在0.1 以上。葉綠素含量較高的蔬菜檢測(cè)農(nóng)藥殘留時(shí)會(huì)對(duì)快速檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響，因此按照檢測(cè)結(jié)果表2、表3及葉綠素含量顯示，西紅柿、黃瓜、胡蘿卜、香菜應(yīng)用整珠提取法進(jìn)行樣品前處理，確保檢測(cè)結(jié)果的規(guī)范和準(zhǔn)確性。

表3 整體測(cè)定法檢測(cè)結(jié)果表

2.3 結(jié) 論

農(nóng)產(chǎn)品安全是關(guān)系民生問(wèn)題的主要因素之一，蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測(cè)對(duì)農(nóng)產(chǎn)品安全發(fā)展具有重要意義，通過(guò)對(duì)10 個(gè)品種蔬菜采取不同的樣品前處理方法，分析了2 種樣品前處理方法對(duì)不同農(nóng)產(chǎn)品的適應(yīng)性，從而避免了農(nóng)藥殘留檢測(cè)過(guò)程中假陽(yáng)性等現(xiàn)象的出現(xiàn)。