班維固，滕秀英，齊 輝

（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150001）

關(guān)于針灸治療機(jī)制的研究日益成熟，在國內(nèi)外有著廣泛的文獻(xiàn)報道，針灸發(fā)揮治療作用的機(jī)制被認(rèn)為可能與局部微創(chuàng)、軸突反射、脊髓節(jié)段支配、腦內(nèi)整合及腦輸出等五級效應(yīng)途徑相關(guān)[1]，其作用機(jī)制復(fù)雜多樣，仍需進(jìn)一步探索驗證。近年來，關(guān)于microRNA研究越來越廣泛，其可參與各種各樣的調(diào)節(jié)通路，包括發(fā)育、病毒防御、造血過程、器官形成、細(xì)胞增殖和凋亡、脂肪代謝等，有研究嘗試從調(diào)控microRNA角度探討針灸治療的作用機(jī)制。本文綜述了關(guān)于針灸調(diào)控microRNA在基礎(chǔ)研究中應(yīng)用的研究進(jìn)展，以期為針灸的治療機(jī)制研究提供新思路。

1 microRNA功能及作用方式

microRNA（miRNA）是一類由內(nèi)源基因編碼的長度約為22個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子，它們在動植物中參與轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)調(diào)控。到目前為止，在動植物及病毒中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有28 645種miRNA分子[2]。大多數(shù)miRNA基因以單拷貝、多拷貝或基因簇的形式存在于基因組中。此外，miRNA是一類內(nèi)生的小分子RNA，其在細(xì)胞內(nèi)具有多種重要的調(diào)節(jié)作用。每個miRNA可以有多個靶基因，而幾個miRNA也可以調(diào)節(jié)同一個基因。這種復(fù)雜的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)既可以通過1個miRNA來調(diào)控多個基因的表達(dá)，也可以通過幾個miRNA的組合來精細(xì)調(diào)控某個基因的表達(dá)[3]。據(jù)推測，miRNA調(diào)節(jié)著人類1/3的基因。最近的研究表明，大約70%的哺乳動物miRNA是位于TUs區(qū)（transcriptionunits，TUs），且其中大部分是位于內(nèi)含子區(qū)。一些內(nèi)含子miRNA的位置在不同的物種中是高度保守的。miRNA不僅在基因位置上保守，序列上也呈現(xiàn)出高度的同源性，miRNA高度的保守性與其功能的重要性有著密切的關(guān)系。miRNA與其靶基因的進(jìn)化有著密切的聯(lián)系[4]。

近年來，miRNA對基因表達(dá)的調(diào)控已成為各疾病研究中特別關(guān)注的問題。miRNA為由18～24個核苷酸組成的非編碼RNA，與靶mRNA的3'UTR處的種子序列結(jié)合，從而抑制蛋白質(zhì)表達(dá)。單個miRNA可以與各種mRNA相互作用，單個miRNA可以由復(fù)雜miRNA-mRNA網(wǎng)絡(luò)中的多個miRNA調(diào)控。miRNA表達(dá)失調(diào)被認(rèn)為是各種人類疾病中的常見事件，miRNA失調(diào)涉及的疾病包括腦卒中、心力衰竭、腸易激綜合征、潰瘍性結(jié)腸炎、慢性疲勞綜合征、阿爾茨海默病[5]等。因此，miRNA具有雙向作用，使其成為潛在的治療或診斷靶標(biāo)[6]。

miRNA的作用方式主要取決于它與靶基因轉(zhuǎn)錄體序列互補(bǔ)的程度，有3種方式：

第一種是切斷靶基因的mRNA分子——miRNA與靶基因完全互補(bǔ)結(jié)合，作用方式和功能與siRNA非常相似，最后切割靶mRNA。在植物中，大部分miRNA都以這種方式發(fā)揮作用，靶基因mRNA斷裂后，無poly（A）分子的3’端加上多個U并很快降解，含poly（A）的分子能穩(wěn)定存在一段時間（如擬南芥miR-171）。在植物中目前有1個miRNA和3個潛在的目標(biāo)靶基因完全互補(bǔ)（這些scarecrow基因編碼潛在的轉(zhuǎn)錄因子），盡管還不清楚這些基因是否就是miRNA的目標(biāo)靶，這仍是第一次發(fā)現(xiàn)miRNA和其潛在的目標(biāo)靶完全互補(bǔ)，也提示miRNA可能包含與siRNA類似的作用方式。

第二種是抑制靶基因的翻譯——作用時與靶基因不完全互補(bǔ)結(jié)合，進(jìn)而阻遏翻譯而不影響mRNA的穩(wěn)定性，這種miRNA是目前發(fā)現(xiàn)最多的種類（如線蟲lin-4）。而在植物中極少數(shù)的miRNA通過此方式來抑制靶基因。

第三種是結(jié)合抑制——具有以上兩種作用模式：當(dāng)與靶基因互補(bǔ)結(jié)合時，直接靶向切割mRNA；當(dāng)與靶基因不完全結(jié)合時，起調(diào)節(jié)基因表達(dá)的作用[7]。針灸的多途徑、多表達(dá)方式與miRNA作用方式高度契合，因此可從動物實驗出發(fā)，探討miRNA的調(diào)控靶點(diǎn)，探討針灸治療疾病的作用機(jī)制，以豐富針灸的作用機(jī)理。

2 針灸調(diào)控miRNA在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用

2.1 腦缺血再灌注

2.1.1 通督調(diào)神針灸法調(diào)控miRNA表達(dá) 針灸可通過調(diào)節(jié)不同的基因信號傳導(dǎo)通路發(fā)揮其作用機(jī)制，不同的針灸方法及穴位所調(diào)控的基因也不同，通督調(diào)神法以補(bǔ)益為原則，其機(jī)制以上調(diào)血清miRNA表達(dá)為主。鄭仕平等[8]采用通督調(diào)神針法治療腦缺血再灌注大鼠，將大鼠分為電針組、艾灸組、阿司匹林組、模型組及空白對照組，治療7 d后進(jìn)行腦缺血再灌注，結(jié)果在24 h后，針刺可有效降低大鼠的神經(jīng)行為學(xué)評分；針刺是通過調(diào)控miRNA-664的表達(dá)來降低腦組織基質(zhì)金屬蛋白9的表達(dá)，達(dá)到治療目的；這被認(rèn)為是針刺治療缺血性腦卒中的作用機(jī)制之一。鄭仕平等[9]采用通督調(diào)神針法治療腦缺血再灌注大鼠，將大鼠分為電針組、艾灸組、阿司匹林組、模型組及空白對照組，治療7 d后造模，在24 h后發(fā)現(xiàn)，與模型組比較，電針組及艾灸組大鼠miRNA-290和miRNA-494表達(dá)量均顯著增高；大鼠大腦中動脈閉塞造成的腦缺血可明顯改變miRNA表達(dá)，引發(fā)神經(jīng)元保護(hù)，達(dá)到調(diào)控腦卒中目的；針灸可調(diào)控miRNA-290和miRNA-494的表達(dá)，降低水通道蛋白-4的表達(dá)量，減輕腦水腫。

2.1.2 針刺加亞低溫調(diào)控miRNA表達(dá) 針刺加亞低溫法可調(diào)控多個miRNA傳導(dǎo)通路，通過上調(diào)或下調(diào)其靶基因達(dá)到治療目的。何灝龍等[10]觀察了針刺加亞低溫對腦缺血再灌注損傷大鼠缺血側(cè)海馬組織miRNA歸屬通路影響，將造模成功的大鼠隨機(jī)分為針刺組、亞低溫組、針刺加亞低溫組及模型對照組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)針刺組miRNA表達(dá)數(shù)量為16個、亞低溫組為7個、針刺加亞低溫組為23個，證實針刺加亞低溫組可明顯改善大鼠腦缺血情況，減少腦梗死面積，其機(jī)制可能與針刺調(diào)控多個miRNA傳導(dǎo)通路有關(guān)，包括p53通路、Calcium通路、Jak-STAT通路及Neurotrophin通路等。針刺可多途徑調(diào)控信號，達(dá)到保護(hù)神經(jīng)元的目的。陳楚淘等[11]觀察了針刺聯(lián)合亞低溫對腦缺血大鼠腦組織相關(guān)miRNA表達(dá)影響，將造模大鼠隨機(jī)分為針刺組、亞低溫組、針刺加亞低溫組及模型對照組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)針刺加亞低溫組大鼠神經(jīng)功能缺損評分及腦梗死面積均明顯低于其余各組，且針刺組調(diào)控miRNA數(shù)量為16個，亞低溫組為7個，聯(lián)合組為23個，證實針刺可通過多途徑、多靶點(diǎn)調(diào)控miRNA表達(dá)，其調(diào)控miRNA數(shù)量越多，在改善腦梗死面積及神經(jīng)功能評分上越好，但具體的調(diào)節(jié)機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

有研究[12-14]探討了針刺聯(lián)合亞低溫對腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織miRNA表達(dá)的影響，將造模大鼠分為針刺組、亞低溫組、針刺加亞低溫組及模型對照組，發(fā)現(xiàn)相對于模型對照組，其他3組均可降低腦梗死面積，降低miRNA-181表達(dá)，并認(rèn)為針刺加亞低溫組作用機(jī)制是通過下調(diào)p38 MAPK通路上miRNA-181表達(dá)來實現(xiàn)的，針刺治療的機(jī)制與miRNA調(diào)控具有相關(guān)性。何曉婷[15]基于MAPK信號通路研究了針刺聯(lián)合亞低溫對腦缺血再灌注大鼠腦組織的影響，將造模大鼠隨機(jī)分為針刺組、亞低溫組、針刺加亞低溫組及模型對照組，發(fā)現(xiàn)相對于模型對照組，其他3組均可降低miRNA-29c在腦組織中的表達(dá)，下調(diào)缺血側(cè)海馬組織中Map4k4的表達(dá)。針灸調(diào)控機(jī)理是基于降低MAPK信號通路上miRNA-29c及其靶基因Map4k4的表達(dá)，以及上調(diào)miRNA-29c靶基因Fem1b的表達(dá)來實現(xiàn)的，為針灸治療腦缺血再灌注提供了另一種的方式。

2.1.3 針刺百會、足三里調(diào)控miRNA表達(dá) 針灸調(diào)控與經(jīng)絡(luò)傳導(dǎo)有一定關(guān)聯(lián)，針灸選穴多依據(jù)經(jīng)絡(luò)選穴。百會、足三里為補(bǔ)虛要穴，針刺百會、足三里可上調(diào)血清miRNA表達(dá)。徐虹等[16]觀察了針刺百會、足三里對腦缺血再灌注損傷大鼠miRNA-126表達(dá)的影響，將造模大鼠隨機(jī)分為針刺組、藥物組、模型組及假手術(shù)組，分別于再灌注損傷第1、3、5、7天測定miRNA-126表達(dá)，針刺組miRNA-126表達(dá)明顯高于藥物組，針刺可以提高miRNA-126表達(dá)，以出芽相關(guān)蛋白-1和磷酸肌醇3激酶調(diào)節(jié)亞單位作為作用靶點(diǎn)，減輕腦血管損傷。CHEN S H等[17]研究了針刺百會、足三里對腦缺血再灌注損傷大鼠miRNA-124表達(dá)的影響，將造模大鼠隨機(jī)分為模型組、針刺組和假手術(shù)組，分別于再灌注損傷第1、3、5、7天測定miRNA-124表達(dá)，并使用定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測血清miRNA-124表達(dá)。腦缺血大鼠血清miRNA-124表達(dá)水平顯著升高，模型組和針刺組大鼠miRNA-124的表達(dá)峰值均在第3天出現(xiàn)。針刺組在同一時間點(diǎn)miRNA-124的表達(dá)高于模型組，針刺大鼠百會和足三里可減輕腦缺血再灌注損傷，這與周圍血清中miRNA-124的表達(dá)上調(diào)，以及整合素β1和層黏連蛋白的下調(diào)有關(guān)。這些變化可能成為針刺緩解腦缺血再灌注損傷的機(jī)制之一。王富明[18]研究證實針刺足三里、百會對腦血管再灌注損傷大鼠腦組織具有保護(hù)作用，保護(hù)機(jī)制與調(diào)控miRNA-126表達(dá)有關(guān)。

2.1.4 電針預(yù)處理調(diào)控miRNA表達(dá) 電針刺激強(qiáng)度更大，可下調(diào)并抑制miRNA表達(dá)并激發(fā)信號傳導(dǎo)通路達(dá)到治療目的。劉曌宇等[19]研究了電針預(yù)處理對腦缺血損傷小鼠海馬神經(jīng)元miRNA-223表達(dá)的影響，將造模小鼠隨機(jī)分為電針預(yù)處理組、模型組及假手術(shù)組，檢測miRNA-223表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)電針預(yù)處理組miRNA-223表達(dá)低于模型組，且神經(jīng)功能評分顯著高于模型組，證實電針預(yù)處理改善腦缺血情況與抑制miRNA-223表達(dá)相關(guān)，其作用機(jī)制可能為下調(diào)miRNA引發(fā)突觸后膜上α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異惡唑丙酸受體下降，阻滯鈣離子經(jīng)該受體進(jìn)入細(xì)胞，進(jìn)一步減輕毒性，減少腦缺血損傷。趙俊等[20]研究了電針刺激對抑郁大鼠海馬及中縫核miRNA-16表達(dá)的影響，將造模大鼠隨機(jī)分為電針組、藥物組、模型組及正常對照組，電針組大鼠miRNA-16表達(dá)低于藥物組、模型組，針刺治療腦血管病與調(diào)控miRNA表達(dá)高度相關(guān)。柳維林[21]基于miRNA介導(dǎo)突觸可塑性，進(jìn)一步探討了電針對缺血性腦卒中模型大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響及作用機(jī)制，研究發(fā)現(xiàn)電針治療可提高缺血性腦卒中大鼠的記憶學(xué)習(xí)能力，其作用機(jī)制為抑制腦卒中模型大鼠miR-219a的表達(dá)，上調(diào)靶基因蛋白激酶，促進(jìn)下游環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白的磷酸化，從而促使學(xué)習(xí)記憶相關(guān)蛋白的合成，發(fā)揮治療認(rèn)知障礙的作用。

上述研究中選用的百會、足三里為補(bǔ)虛要穴，通督調(diào)神法以補(bǔ)益為原則，針灸干預(yù)的作用機(jī)制均以上調(diào)血清miRNA表達(dá)為主。補(bǔ)虛與瀉實相對，但對于瀉實未見相關(guān)報道，仍需進(jìn)一步探索以瀉實為原則，針灸干預(yù)對血清miRNA表達(dá)的影響。針灸調(diào)控miRNA是多途徑、多靶點(diǎn)、多通路的，這與經(jīng)絡(luò)錯綜復(fù)雜的循行路線有一定關(guān)聯(lián)。

2.2 心肌缺血再灌注損傷 針灸調(diào)控miRNA保護(hù)心肌細(xì)胞是通過多通路、多途徑、多靶點(diǎn)實現(xiàn)的。針灸干預(yù)心肌缺血再灌注損傷的機(jī)制為調(diào)控部分基因表達(dá)上調(diào)，部分基因表達(dá)下調(diào)。這與經(jīng)絡(luò)系統(tǒng)密切相關(guān)，經(jīng)絡(luò)能調(diào)節(jié)人體的機(jī)能活動，使之保持協(xié)調(diào)、平衡。當(dāng)人體的某一臟器功能異常時，針刺等治療方法可激發(fā)經(jīng)絡(luò)的調(diào)節(jié)功能，從而使功能異常的臟器恢復(fù)正常。針灸治療心肌缺血多以補(bǔ)虛瀉實為治療準(zhǔn)則，針灸調(diào)控miRNA基因的表達(dá)是補(bǔ)虛瀉實的作用過程。盧繼東[22]運(yùn)用標(biāo)本配穴取穴方法，研究電針對心肌缺血大鼠細(xì)胞凋亡miRNA的調(diào)控機(jī)制，選用心肌缺血模型大鼠作為研究對象，隨機(jī)分為標(biāo)本配穴組、電針組、正常組及模型組，治療22 d后行熒光定量PCR法檢測大鼠心肌組織miRNA-133-3p、miRNA-133-5p、miRNA-1-3p、miRNA-486表達(dá)。研究結(jié)果表明，標(biāo)本配穴組miRNA-133-3p、miRNA-133-5p表達(dá)高于電針組及模型組，miRNA-1-3p、miRNA-486低于電針組及模型組，證實多個miRNA基因參與了心肌細(xì)胞凋亡代謝過程，“標(biāo)本配穴”電針法通過調(diào)控miRNA-133-5p與Caspase-3、Aifm2之間的基因來防治心肌缺血，主要是上調(diào)miRNA-133-5p表達(dá)和降低Caspase-3、Aifm2表達(dá)達(dá)到治療心肌缺血的目的。柳培雨[23]基于miRNA-214/Ca2+信號通路研究了電針干預(yù)心肌缺血再灌注損傷大鼠的作用機(jī)制，將造模大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、電針組、正常組，測定miRNA-214表達(dá)情況，證實電針可上調(diào)miRNA表達(dá)情況，抑制鈣離子和CypD等相關(guān)蛋白的升高，發(fā)揮保護(hù)心肌作用；同時將H9c2細(xì)胞隨機(jī)分為Sham組、氧糖剝奪組（OGD組）、氧糖剝奪+電針+miRNA-214沉默組（miR-NC組）、氧糖剝奪+電針+miRNA-214過表達(dá)組（miR-214組），發(fā)現(xiàn)miR-214組細(xì)胞凋亡情況及血漿乳酸脫氫酶水平、肌酸激酶活性、鈣離子水平均較低，因此電針可通過miRNA-214/Ca2+信號通路干預(yù)心肌缺血-再灌注損傷。盧繼東[24]探討了電針內(nèi)關(guān)穴對心肌缺血大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)miRNA表達(dá)的影響，將造模大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組和電針組，并檢測心肌細(xì)胞miRNA-133a、miRNA-133b、miRNA-208、miRNA-499的表達(dá)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)電針組miRNA-133a、miRNA-133b表達(dá)量高于模型組，miRNA-208、miRNA-499的表達(dá)量低于模型組，因此電針主要是通過上調(diào)miRNA-133a、miRNA-133b表達(dá)，下調(diào)miRNA-208、miRNA-499的表達(dá)，達(dá)到保護(hù)心肌細(xì)胞、減少心肌損害的目的。王華等[25]探討了電針不同腧穴對心肌缺血模型大鼠心肌細(xì)胞miRNA表達(dá)影響，將大鼠隨機(jī)分為電針內(nèi)關(guān)組、標(biāo)本配穴電針組、正常組及模型組，治療21 d后，檢測心肌細(xì)胞miRNA-1、miRNA-133、miRNA-208、miRNA-499的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)標(biāo)本配穴電針組miRNA-133表達(dá)高于電針內(nèi)關(guān)組及模型組，而miRNA-1、miRNA-208、miRNA-499表達(dá)低于電針內(nèi)關(guān)組及模型組，標(biāo)本配穴電針和電針內(nèi)關(guān)均可調(diào)控心肌細(xì)胞凋亡，保護(hù)心肌細(xì)胞，且標(biāo)本配穴電針療效更為顯著。上調(diào)miRNA-133表達(dá)，下調(diào)miRNA-1、miRNA-208、miRNA-499表達(dá)，為針刺治療心肌缺血再灌注損傷大鼠的作用機(jī)制。

2.3 慢性疲勞綜合征 針灸調(diào)控miRNA治療慢性疲勞綜合征的機(jī)制主要為上調(diào)miRNA基因表達(dá)，通過多途徑抑制細(xì)胞凋亡，達(dá)到治療該病的目的。朱昕昀[26]研究了針刺對慢性疲勞綜合征認(rèn)知功能障礙大鼠海馬miRNA-184表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)針刺可明顯改善大鼠的認(rèn)知障礙，提高學(xué)習(xí)及自主探索能力，認(rèn)為可能與聽宮上調(diào)海馬中miR-184表達(dá)，激活海馬中5-羥色胺通路、抑制Caspase-3蛋白表達(dá)、進(jìn)而抑制神經(jīng)元進(jìn)一步凋亡相關(guān)。楊蕾[27]研究認(rèn)為慢性疲勞綜合征患者外周血中存在異常表達(dá)的miRNA，這可能與調(diào)節(jié)免疫炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)和能量代謝等相關(guān)信號通路有關(guān)，進(jìn)而調(diào)控慢性疲勞綜合征的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程。針刺治療可有效緩解患者疲勞程度，減少緊張或焦慮及注意力不集中等心理癥狀，這種效應(yīng)機(jī)制可能與針刺下調(diào)miR-122表達(dá)等相關(guān)信號通路有關(guān)。

2.4 膝骨關(guān)節(jié)炎 針灸調(diào)控miRNA治療膝骨關(guān)節(jié)炎的機(jī)制為促進(jìn)miRNA表達(dá)水平，調(diào)控信號通路，降低炎癥反應(yīng)，抑制細(xì)胞凋亡。林道冠等[28]基于miRNA-30b-5p/TLR4/NF-κB軸，研究針灸干預(yù)膝骨關(guān)節(jié)炎大鼠的作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)單一針灸及聯(lián)合治療可促進(jìn)miRNA-30b-5p的表達(dá)，降低TLR4這一作用靶點(diǎn)，降低炎癥因子，抑制膝關(guān)節(jié)細(xì)胞的凋亡，為針灸靶向治療提供了基礎(chǔ)。葉靜[29]研究發(fā)現(xiàn)針刺治療可有效緩解膝骨關(guān)節(jié)炎患者膝關(guān)節(jié)疼痛，改善關(guān)節(jié)活動功能，并發(fā)現(xiàn)膝骨關(guān)節(jié)炎患者與健康受試者血清外泌體miRNA的差異表達(dá)明顯，針刺干預(yù)能下調(diào)膝骨關(guān)節(jié)炎患者血清外泌體miR-1228-5p、miR-1296-5p、miR-3168的信號通路表達(dá)。針刺可能通過調(diào)控患者M(jìn)APK信號通路、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞自噬及代謝等途徑,發(fā)揮治療作用。劉君偉[30]研究了溫針灸對兔膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨組織的影響，溫針灸治療兔膝骨關(guān)節(jié)炎的機(jī)理可能是通過降低Bax、Caspase-3表達(dá)，上調(diào)Bcl-2 miRNA水平，抑制軟骨細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮治療作用。

2.5 炎癥性疾病 目前關(guān)于針灸調(diào)控miRNA的基礎(chǔ)研究中，以腦缺血再灌注損傷和心肌缺血再灌注損傷研究最為常見，除此之外尚有部分基礎(chǔ)研究以炎癥性疾病為主，如潰瘍性結(jié)腸炎、腸易激綜合征、慢性萎縮性胃炎等。針灸可通過調(diào)控miRNA表達(dá)治療上述炎癥性疾病，降低機(jī)體炎癥反應(yīng)，下調(diào)炎癥因子指標(biāo)。這與經(jīng)絡(luò)系統(tǒng)密切相關(guān)，經(jīng)絡(luò)有感應(yīng)刺激和傳導(dǎo)信息的作用。當(dāng)人體的某一部位受到炎癥刺激時，刺激可沿著經(jīng)絡(luò)傳入臟腑，使其發(fā)生相應(yīng)的病理變化。病理反應(yīng)通過經(jīng)絡(luò)反應(yīng)于體表。針刺可通過經(jīng)絡(luò)感應(yīng)和傳導(dǎo)功能作用炎癥部位，miRNA表達(dá)與經(jīng)絡(luò)密切相關(guān)，調(diào)控miRNA表達(dá)可促進(jìn)經(jīng)絡(luò)的循行與傳導(dǎo)，達(dá)到治療疾病的目的。

2.5.1 潰瘍性結(jié)腸炎 針灸調(diào)控miRNA治療潰瘍性結(jié)腸炎，主要作用機(jī)制為上調(diào)結(jié)腸組織的miRNA表達(dá)水平。李毅等[31]研究發(fā)現(xiàn)miRNA及其靶基因在潰瘍性結(jié)腸炎病變發(fā)展過程中具有重要調(diào)控作用。顧沐恩等[32]研究發(fā)現(xiàn)，隔姜灸天樞穴對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織黏膜損傷具有一定的保護(hù)效應(yīng)，這與結(jié)腸組織miRNA基因表達(dá)密切相關(guān)，尤其是miR-139-5p、miR-204和miR-184的表達(dá)有關(guān)。王倩[33]研究發(fā)現(xiàn)，艾灸關(guān)元、足三里可對結(jié)腸炎產(chǎn)生干預(yù)效應(yīng)，其作用機(jī)制一部分是通過升高M(jìn)UC2 miRNA和EGFR miRNA表達(dá)來實現(xiàn)的，其基因表達(dá)多為上調(diào)。這與虛則補(bǔ)之的治療原則相對應(yīng)，所選穴關(guān)元、足三里為補(bǔ)益要穴。

2.5.2 腸易激綜合征 吳立斌[34]研究發(fā)現(xiàn)艾灸天樞、上巨虛對腹瀉型腸易激綜合征大鼠的腹瀉癥狀和結(jié)腸炎癥有明顯改善作用，這與結(jié)腸組織β-防御素-2及mRNA表達(dá)升高有密切關(guān)系。陸高[35]研究發(fā)現(xiàn)針刺可能通過調(diào)控腸易激綜合征患者體內(nèi)miRNA的表達(dá)，間接調(diào)控下游蛋白分子的表達(dá)，從而改善腹痛等癥狀。其作用機(jī)制為調(diào)控針灸-miRNA-免疫調(diào)節(jié)、針灸-miRNA-神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)、針灸-miRNA-細(xì)胞保護(hù)、針灸-miRNA-腫瘤抑制等通路，其miRNA表達(dá)通路為15個。

2.5.3 慢性萎縮性胃炎 黃艷等[36]研究發(fā)現(xiàn)，隔藥餅灸可不同程度地逆轉(zhuǎn)慢性萎縮性胃炎大鼠外周血清oxo3、Uba52、S100a1、Nod2的mRNA表達(dá)水平。羅淑瑜[37]研究發(fā)現(xiàn)熱敏灸能下調(diào)胃黏膜c-myc mRNA、survivin mRNA基因的表達(dá)，恢復(fù)胃黏膜細(xì)胞增殖與凋亡之間平衡而達(dá)到治療慢性萎縮性胃炎的目的。

2.6 睡眠剝奪 針灸調(diào)控miRNA改善睡眠剝奪是通過平衡miRNA表達(dá)實現(xiàn)的，由于下丘腦神經(jīng)遞質(zhì)失調(diào)引發(fā)失眠，針灸通過調(diào)控其信號通路保持平衡，改善睡眠。吳雪芬[38]運(yùn)用針刺治療失眠大鼠，發(fā)現(xiàn)針刺能通過上調(diào)5-HT1a miRNA及下調(diào)5-HT2a miRNA表達(dá)實現(xiàn)鎮(zhèn)靜安神作用。郭鑫[39]研究發(fā)現(xiàn)針刺改善大鼠失眠與調(diào)節(jié)血清單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量和MT1-miRNA、MT2-miRNA的表達(dá)有關(guān)，通過下調(diào)MTI和MT2表達(dá)達(dá)到改善睡眠質(zhì)量的目的。魏歆然[40]研究發(fā)現(xiàn)針刺百會、神門可以改善睡眠時間及睡眠潛伏期，提高VLPO區(qū)的Clock mRNA的表達(dá)量，達(dá)到鎮(zhèn)靜安神作用。郭保君[41]發(fā)現(xiàn)針刺調(diào)理蹺脈能夠有效縮短入睡潛伏期、延長睡眠時間，這與提高大鼠視交叉上核內(nèi)Clock mRNA、Per2 mRNA相對表達(dá)量有關(guān)。

2.7 多囊卵巢綜合征 針灸調(diào)控miRNA治療多囊卵巢綜合征是通過平衡卵巢組織的miRNA表達(dá)、改善內(nèi)環(huán)境實現(xiàn)的。研究[42]發(fā)現(xiàn)多囊卵巢綜合征患者的卵泡液、顆粒細(xì)胞、卵泡膜細(xì)胞及脂肪組織均存在特殊的miRNA差異表達(dá)譜，miRNA可以調(diào)節(jié)卵泡發(fā)育和激素合成，參與多囊卵巢綜合征的發(fā)生。林鸞[43]研究發(fā)現(xiàn)穴位埋線能夠明顯改善多囊卵巢綜合征大鼠生殖內(nèi)分泌紊亂，促進(jìn)卵泡正常發(fā)育和排卵，進(jìn)一步降低大鼠雄激素水平，解除高雄激素血癥對miR-125b表達(dá)的抑制，使miR-125b表達(dá)上調(diào)，降低靶基因FSHR mRNA表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)卵泡的正常發(fā)育，達(dá)到治療疾病的目的。

3 總 結(jié)

針灸可通過調(diào)控miRNA表達(dá)，借助傳導(dǎo)通路的作用，達(dá)到靶向治療的目的，且miRNA表達(dá)數(shù)量越多，針灸可調(diào)控途徑越廣泛，針灸能通過多途徑及綜合靶向治療發(fā)揮其作用機(jī)制，達(dá)到治療疾病的目的。另一方面，針灸調(diào)控miRNA表達(dá)與經(jīng)絡(luò)密切相關(guān)，經(jīng)絡(luò)可聯(lián)系臟腑器官，通行氣血，濡養(yǎng)臟腑組織，miRNA基因通路可能作用于經(jīng)絡(luò)上，發(fā)揮治療疾病的目的。同時根據(jù)針灸補(bǔ)虛瀉實的治療原則，miRNA基因表達(dá)上調(diào)與下調(diào)與其可能有一定相關(guān)性。

目前的研究多以基礎(chǔ)研究為主，研究內(nèi)容多以心腦血管疾病為主，仍需進(jìn)一步擴(kuò)大基礎(chǔ)研究范圍。同時雖有關(guān)于針灸調(diào)控miRNA治療疾病的臨床報道[44-46]，但其樣本量小，仍需大樣本、雙盲的隨機(jī)對照臨床研究進(jìn)一步驗證針灸調(diào)控miRNA的作用機(jī)制。