張玉田 李子晶

(甘肅省張掖市農(nóng)畜產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，甘肅 張掖 734000)

油桃原產(chǎn)于我國(guó)西北黃土高原，我國(guó)擁有1000多個(gè)品種。油桃作為桃的一個(gè)變種，因其果面光滑無(wú)毛，很受廣大消費(fèi)者歡迎。甘肅河西的紫桃、新疆的黃肉李光桃是其典型代表。油桃營(yíng)養(yǎng)豐富，所含成分復(fù)雜，含糖13%、有機(jī)酸1.5%、果膠1%、蛋白質(zhì)1.1%等，這些成分對(duì)農(nóng)殘分析造成巨大的干擾。近年來(lái)，農(nóng)藥殘留檢測(cè)的提取方法集中在液液萃取、固相萃取、QuEChERS等方法，其中QuEChERS以高效、簡(jiǎn)便、易操作等優(yōu)勢(shì)應(yīng)用廣泛。油桃中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)少有報(bào)道，本文基于QuEChERS法開發(fā)了氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)油桃中多種農(nóng)藥殘留的方法[1-2]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

油桃：市售；乙酸乙酯、丙酮、乙腈(均為色譜純)：迪馬科技有限公司；無(wú)水硫酸鎂(分析純)：天津致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；萃取鹽包：北京本立科技股份有限公司；Quick Pro凈化柱(QuEChERS-PP、QuEChERS-CP、QuEChERS-HF)：河南華仁健康科技有限公司；陶瓷均質(zhì)子：安捷倫科技(中國(guó))有限公司；0.22μm微孔濾膜：安捷倫科技(中國(guó))有限公司；敵敵畏、氧樂果、甲拌磷、五氯硝基苯、百菌清、甲基對(duì)硫磷、馬拉硫磷、毒死蜱、對(duì)硫磷、水胺硫磷、甲基異柳磷、腐霉利、丙溴磷、三唑磷、聯(lián)苯菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(濃度均100ug/mL)：來(lái)自天津農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所。

1.2 儀器與設(shè)備

安捷倫7890B-7000C氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀：安捷倫科技(中國(guó))有限公司；XH-C型多管漩渦混勻器：山東青云實(shí)驗(yàn)耗材有限公司；MH503電子天平：德國(guó)賽多利斯SARTORIUS公司；FJ-200均質(zhì)儀：德國(guó)IKA公司。

1.3 方法

1.3.1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

1.3.2標(biāo)準(zhǔn)溶液配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

混合標(biāo)準(zhǔn)中間液：分別吸取1.0mL 100μg/mL各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液置于100mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度線，得到濃度為1μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，在4℃下避光、密封條件下保存。

基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)使用液：分別移取混合標(biāo)準(zhǔn)溶液40ul、60ul、80ul、100ul、120ul，用空白基質(zhì)提取液定容至1ml，混勻，配制成系列混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。

1.3.3樣品前處理

準(zhǔn)確稱取油桃試樣10g(精確到0.01)于50mL離心管中，先加入10mL乙腈，均質(zhì)2min，加入六顆陶瓷均質(zhì)子，然后加入萃取鹽包，渦旋混合1min，于冰水浴冷卻，4000r/min條件下離心5min，取1.0mL上清液到套有0.22μm微孔濾膜的QuEChERS-PP凈化柱中，用推桿將提取液過濾到樣品瓶中，待測(cè)定。

1.3.4分析條件

色譜條件：色譜柱：HP-5MS(30m×250μm×0.25μm)；載氣：高純氦氣(He)；進(jìn)樣口溫度：250℃；柱箱升溫程序：初始溫度設(shè)為60℃，保持1min，以每分鐘40℃速率升到120℃，以每分鐘5℃速率升到310℃，保持3.5min；色譜柱流量：1.2mL/min；進(jìn)樣量：1.0μL；進(jìn)樣模式：不分流進(jìn)樣[2]。

1.3.5質(zhì)譜條件

電離能量：70eV；離子化模式：EI+；離子源溫度：280℃；四級(jí)桿1溫度：150℃；四級(jí)桿2溫度：150℃；傳輸線溫度：230℃；渦輪泵轉(zhuǎn)速：100%；延遲時(shí)間：3min；掃描方式：多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)，19種目標(biāo)農(nóng)藥在此條件下的保留時(shí)間及離子參數(shù)見表1。

表1 19種農(nóng)藥的保留時(shí)間及離子參數(shù)

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用7890B-7000C自帶Mass Hunter化學(xué)工作站及Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 儀器條件優(yōu)化

進(jìn)樣口溫度從230℃～280℃進(jìn)行考察，250℃時(shí)各組分響應(yīng)較好，所以進(jìn)樣口溫度設(shè)置為250℃?？傠x子流色譜圖結(jié)果見圖1。結(jié)果表明，在本次實(shí)驗(yàn)的儀器條件下，各組分能夠分離，峰寬窄，無(wú)拖尾現(xiàn)象。

圖1 19種農(nóng)藥混標(biāo)的總離子流色譜圖注：峰形上方的編號(hào)與表1中各組分編號(hào)代表的目標(biāo)農(nóng)藥相對(duì)應(yīng)

2.2 方法優(yōu)化

2.2.1緩沖體系的選擇

目前QuEChERS方法常用的緩沖體系有乙酸—乙酸鈉、檸檬酸鈉—檸檬酸氫二鈉體系，即美國(guó)農(nóng)藥國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)分析方法和歐洲法定標(biāo)準(zhǔn)分析方法，本實(shí)驗(yàn)選用EN方法萃取鹽析包，避免乙酸進(jìn)入氣相系統(tǒng)，延長(zhǎng)色譜柱壽命，降低儀器維護(hù)成本。

2.2.2提取溶劑的選擇

農(nóng)藥殘留檢測(cè)常用的提取溶劑有丙酮、乙腈、乙酸乙酯。不同提取溶劑的總離子流色譜圖見圖1。丙酮極性較乙腈弱，能夠溶解部分脂溶性和水溶性的色素并且與水很難分離，凈化較為困難，回收率不穩(wěn)定；乙酸乙酯極性較弱，對(duì)于較強(qiáng)極性的農(nóng)藥提取不完全，回收率偏低。乙腈對(duì)大部分農(nóng)藥有較大的溶解度，且與水易分離，提取效果好，回收率穩(wěn)定，故本實(shí)驗(yàn)選用乙腈作為提取溶劑。當(dāng)加標(biāo)量為0.01mg/kg時(shí)，分別用乙腈、丙酮、乙酸乙酯作為提取試劑時(shí)，目標(biāo)農(nóng)藥回收率結(jié)果如圖2所示。結(jié)果顯示，用乙腈作為提取溶劑時(shí)，提取效果最佳，丙酮和乙酸乙酯次之。

圖2 不同提取溶劑(乙腈、丙酮、乙酸乙酯)的提取效果

2.2.3方法的回收率及精密度

稱取18份空白油桃樣品進(jìn)行3水平加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，19種目標(biāo)農(nóng)藥的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)r、檢出限、定量限結(jié)果見表2，回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)結(jié)果見表3。由表3可知，樣品在55ug/kg、70ug/kg、100ug/kg的添加水平下，回收率在77.1%～121.4%之間，檢出限在0.0003～0.3mg/kg之間，定量限在0.01～6mg/kg在之間，回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在1.9%～11.5%之間，能夠滿足分析要求。

表2 19種目標(biāo)農(nóng)藥的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限

續(xù)表

表3 19種目標(biāo)農(nóng)藥在油桃基質(zhì)中的加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=6)

3 結(jié)論

本文對(duì)油桃建立了19種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，進(jìn)行了方法學(xué)論證，結(jié)果表明在QuEChERS方法的基礎(chǔ)上，進(jìn)行提取與凈化方面的優(yōu)化，采用乙腈作溶劑，選取適合有機(jī)磷和有機(jī)氯類農(nóng)藥的殘留分析，提高了提取效率與基質(zhì)的凈化效果，為油桃的安全生長(zhǎng)提供了技術(shù)支撐。