趙琴，張建超，任杰，唐建如，李敏

（湖南省瀏陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南瀏陽(yáng)410300）

重大動(dòng)物疫病是指發(fā)病率或者死亡率均高、且突發(fā)性和傳播性都極強(qiáng)的一類動(dòng)物疫病，能給養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)安全造成嚴(yán)重威脅，并可能對(duì)公眾身體健康與生命安全造成危害，疫苗免疫是有效防控疫病發(fā)生的一項(xiàng)重要舉措。為確保人類健康及保護(hù)公共衛(wèi)生安全，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部已明確將重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃作為2020 年畜牧獸醫(yī)工作一大要點(diǎn)。按照中央、省市關(guān)于做好2020 年春季重大動(dòng)物疫病免疫效果評(píng)估工作要求，減少重大動(dòng)物疫病對(duì)畜禽生產(chǎn)養(yǎng)殖造成的經(jīng)濟(jì)損失，提高養(yǎng)殖效益，2020 年5月，瀏陽(yáng)市對(duì)31 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）多家養(yǎng)殖場(chǎng)隨機(jī)采集770 余份血清樣品，旨在對(duì)高致病性禽流感、牲畜口蹄疫、小反芻獸疫、豬繁殖與呼吸綜合征和豬瘟等5 個(gè)強(qiáng)制免疫病種進(jìn)行了9 個(gè)項(xiàng)目的抗體免疫水平的檢測(cè)，現(xiàn)將檢測(cè)結(jié)果分析如下。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

隨機(jī)選取瀏陽(yáng)市轄區(qū)31 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)（戶），采樣地點(diǎn)覆蓋瀏陽(yáng)中心城區(qū)（C 區(qū)）、東部地區(qū)（E 區(qū)）、西部地區(qū)（W 區(qū)）、南部地區(qū)（S 區(qū)）以及北部地區(qū)（N 區(qū)），采集樣品共770 份，其中豬血清155 份，牛血清 155 份，羊血清 150 份，禽血清 310份，所有樣品分離血清后置于-20℃保存，備檢。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材

96 孔V 型微量反應(yīng)板，電熱恒溫培養(yǎng)箱，12 道移液器，單道移液器、微量振蕩器、酶標(biāo)儀、純水儀、冰箱等。

1.3 檢測(cè)試劑

（1）豬瘟病毒抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒，北京億森寶生物科技有限公司生產(chǎn)（批號(hào)：20190818）。

（2）口蹄疫O 型抗體液相阻斷ELISA 檢測(cè)試劑盒，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸疫研究所生產(chǎn)（批號(hào)20200427101-1）。

（3）豬藍(lán)耳病毒抗體檢測(cè)試劑盒，北京億森寶生物科技有限公司生產(chǎn)（批號(hào)：20200310）。

（4） 禽 流 感 病 毒 H5-Re-11、H5-Re-12 和H7-Re-2 亞型抗原株（批號(hào)分別為190066100、190056300 和 190066500）。

（5）小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒，法國(guó)ID-VET公司生產(chǎn)（批號(hào)：D52）。

1.4 檢測(cè)方法

（1）豬瘟、口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征抗體水平檢測(cè)均參考國(guó)標(biāo)規(guī)定方法GB/T18935-2003、GB/T16551-2008 以及 GB/T18090-2008。

（2）禽流感 H5-Re-11、H5-Re-12 和 H7-Re-2亞型抗體檢測(cè)參考GB/T18936-2003，均采用血凝及血凝抑制試驗(yàn)方法進(jìn)行。

（3）小反芻獸疫抗體檢測(cè)采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA 法對(duì)血清中小反芻獸疫病毒核蛋白的抗體進(jìn)行。

以上檢測(cè)步驟及判定標(biāo)準(zhǔn)均按照各項(xiàng)目試劑盒說(shuō)明書執(zhí)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 整體重大動(dòng)物疫病免疫效價(jià)評(píng)估結(jié)果

本次對(duì)5 種重大動(dòng)物疫病共計(jì)770 余份血清樣品的抗體水平進(jìn)行了檢測(cè)，檢測(cè)項(xiàng)目包括豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬O 型口蹄疫、牛O 型口蹄疫、羊 O 型口蹄疫、H5-Re11、H5-Re12、H7-Re2 亞型禽流感以及小反芻獸疫等9 個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，整體合格率均不低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%。其中豬瘟、H5-Re11 和H7-Re2 亞型禽流感的抗體合格率達(dá)到了 96.77%（表 1）、91.94%（表 3） 和 91.94%（表3），免疫效價(jià)較好；H7-Re2 亞型禽流感、羊小反芻獸疫的整體抗體水平合格率分別為89.68%（表3）和85.81%（表2）；而繁殖與呼吸綜合征、豬O 型口蹄疫、牛O 型口蹄疫以及羊O 型口蹄疫的抗體水平均在70%～80%之間，分別是72.67%（表1）、72.26%（表 1）、75.48%（表 2） 和 76.67%（表 2），免疫效果良好。

2.2 生豬疫病免疫效價(jià)評(píng)估結(jié)果

本次共檢測(cè)生豬血清樣品155 份，檢測(cè)項(xiàng)目包括豬瘟、豬O 型口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征3 個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，其中豬瘟免疫抗體合格數(shù)為150 份，整體合格率為96.77%，除N 區(qū)合格率為87.50%外，其余4 區(qū)均為100%；豬O 型口蹄疫免疫抗體合格數(shù)為 112，整體合格率為 72.26%，C、E、W、S、N 五區(qū)的免疫抗體合格率分別為73.33%、66.67%、60.00%、88.00%、77.50%；豬繁殖與呼吸綜合征免疫抗體合格數(shù)為109 份，整體合格率為72.67%，C、E、W、S、N 五區(qū)的免疫抗體合格率分別為90.00%、78.00%、60.00%、93.33%、57.50%（如表 1）。

表1 生豬重大動(dòng)物疫病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 牛羊疫病免疫效價(jià)評(píng)估結(jié)果

本次共檢測(cè)牛血清樣品155 份，羊血清樣品155 份，檢測(cè)項(xiàng)目包括牛羊O 型口蹄疫和羊小反芻獸疫3 個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，其中牛O 型口蹄疫免疫抗體合格數(shù)為117 份，整體合格率為75.48%，C、E、W、S、N 五區(qū)的免疫抗體合格率分別為 93.33%、91.11%、56.67%、72.00%、67.50%；羊 O 型口蹄疫免疫抗體合格數(shù)為115，整體合格率為76.67%（檢測(cè)數(shù)量為 150 份），C、E、W、S、N 五區(qū)的免疫抗體合格率分別為 100%、64.44%、80.00%、80.00%、77.50%；羊小反芻獸疫免疫抗體合格數(shù)為133 份，整體合格率為 85.81%（檢測(cè)數(shù)量為 155 份），C、E、W、S、N 五區(qū)的免疫抗體合格率分別為100.00%、84.44%、100.00%、84.00%、72.50%（如表 2）。

表2 牛羊重大動(dòng)物疫病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2.4 禽類疫病免疫效價(jià)評(píng)估結(jié)果

本次共檢測(cè)禽類血清樣品310 份，檢測(cè)項(xiàng)目包括高致病性禽流感H5-Re11、H5-Re12 和H7-Re2亞型3 個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，其中H5-Re11 亞型免疫抗體合格數(shù)為285 份，整體合格率為91.94%，C、E、W、S、N 五區(qū)的免疫抗體合格率分別為 100.00%、100.00%、91.67%、60.00%、100.00%；H5-Re12 亞型免疫抗體合格數(shù)為278，整體合格率為89.68%，C、E、W、S、N 五區(qū)的免疫抗體合格率分別為 100%、100.00%、90.00%、48.00%、100.00%；H7-Re2 亞型免疫抗體合格數(shù)為285 份，整體合格率為91.94%，C、E、W、S、N 五 區(qū) 的 免 疫 抗 體 合 格 率 分 別 為100.00%、100.00%、91.67%、60.00%、100.00%（如表3）。

表3 禽類重大動(dòng)物疫病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

3 小結(jié)與討論

3.1 生豬疫病免疫抗體水平結(jié)果分析

從檢測(cè)結(jié)果可以看出（表1），3 種生豬疫病免疫效果整體良好，其中豬瘟抗體效價(jià)免疫整體合格率高達(dá)96.77%，而豬O 型口蹄疫和豬繁殖與呼吸綜合征免疫抗體免疫結(jié)果較差，均不到73%，尤其是W 區(qū)，兩者的抗體水平均偏低，未達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的不低于70%的標(biāo)準(zhǔn)。分析原因，可能是生豬在進(jìn)行免疫接種時(shí)同時(shí)接種兩種或兩種以上疫苗，機(jī)體對(duì)其中某種抗原的免疫應(yīng)答能力減弱，從而導(dǎo)致接種效果不佳，影響免疫抗體效價(jià)水平[1]，各鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）應(yīng)提前制定牲畜疫病預(yù)防免疫計(jì)劃，合理安排免疫時(shí)間，確保達(dá)到最佳免疫效果。

3.2 牛羊疫病免疫抗體水平分析

從檢測(cè)結(jié)果可以看出（表2），羊小反芻獸疫作為國(guó)家強(qiáng)制免疫計(jì)劃的一種，免疫效果較好，整理合格率達(dá)到85.81%，各區(qū)的免疫效價(jià)水平也超過(guò)國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。牛羊O 型口蹄疫盡管整體免疫水平達(dá)到了75.48%和76.67%，但區(qū)域之間存在較大差距，如E 區(qū)牛羊O 型口蹄疫疫病免疫的抗體效價(jià)低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部最低要求70%，該區(qū)域是否存在疫苗保存或使用不當(dāng)、注射途徑或間隔時(shí)間不規(guī)范等影響因素[2]，應(yīng)積極查找原因，提高免疫效果，確保免疫水平達(dá)標(biāo)。

3.3 禽類疫病免疫抗體水平分析

從檢測(cè)結(jié)果可以看出（表3），禽類疫病免疫效果是所有畜禽種類中抗體水平最高的3 種，整體免疫水平在89.68%～91.94%之間，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)生豬、牛和羊的各種疫病免疫水平。值得注意的是，S 區(qū)高致病性禽流感 H5-Re11、H5-Re12 和 H7-Re2 亞型的3 種抗體水平出現(xiàn)同時(shí)低于70%的情況，分析其原因，一是采樣對(duì)象并未注射相關(guān)疫苗；二是注射時(shí)間間隔較長(zhǎng)，疫苗效果減弱或已失效。建議該地區(qū)應(yīng)加強(qiáng)禽類疫病免疫計(jì)劃實(shí)施，全面提高免疫效果。

3.4 重大動(dòng)物疫病免疫工作幾點(diǎn)建議

牲畜重大動(dòng)物疫病免疫監(jiān)測(cè)一直以來(lái)都是畜牧系統(tǒng)的一項(xiàng)重要工作，而春秋防免疫抗體效價(jià)評(píng)估是有效預(yù)防、控制重大動(dòng)物疫情的一項(xiàng)重要手段，抗體水平的高低決定了該地區(qū)疫病防控工作落實(shí)到位的程度。從本次檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，雖然9 個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目抗體水平均已達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的要求，但還存在部分區(qū)域、某種疫病免疫水平不達(dá)標(biāo)的情況。就此，特提出幾點(diǎn)建議：一是規(guī)范疫苗保存、運(yùn)輸途徑，避免影響疫苗效價(jià)；二是加強(qiáng)防疫員隊(duì)伍建設(shè)，積極開(kāi)展基層防疫員免疫培訓(xùn)，規(guī)范防疫員免疫注射程序，提升防疫工作質(zhì)量；三是提前制定免疫計(jì)劃，及時(shí)對(duì)牲畜進(jìn)行補(bǔ)免，防止出現(xiàn)免疫空白；四是正確保存血清樣品，避免出現(xiàn)溶血、膠凍狀、污染等情況[3]。最重要的是，各級(jí)動(dòng)物防疫工作人員應(yīng)正確認(rèn)識(shí)動(dòng)物疫病防疫工作的重要性，加大牲畜重大動(dòng)物疫病防控工作的落實(shí)力度，確保疫病防控有效性，減少疫病給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失，增加畜產(chǎn)品養(yǎng)殖效益。 □