趙桂香 劉佳

截肢創(chuàng)傷患者手術前后均會發(fā)生應激反應,已證實心血管事件是截肢手術圍手術期并發(fā)癥及術后死亡的主要原因，其中心律失常是常見的并發(fā)癥之一[1]。心肌電活動異常和炎性因子的異常表達是預測心血管事件的重要指標，傳統(tǒng)臨床治療心律失常的主要藥物包括鈉通道阻滯劑、β受體拮抗劑、延長動作電位時程藥物及鈣通道阻滯藥，其中代表藥物分別是利多卡因、普萘洛爾、胺碘酮和維拉帕米。對截肢手術患者術后相關心肌電及炎性反應的研究很少[2-3]，本研究利用單相動作電位技術觀察了抗心律失常藥對截肢大鼠炎性因子表達及心肌電活動的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

30只健康清潔級雄性SD大鼠，8周齡，250～300 g，購自于新疆醫(yī)科大學基礎研究室，許可證號[SYXK(新)2016-0008]，適應性喂養(yǎng)1周，飼養(yǎng)環(huán)境溫度22～25 ℃，濕度50%～60%，自然光照條件下，大鼠自由攝食飲水。

1.2 方法

將大鼠隨機分為5組，每組6只，建立左后肢截肢手術創(chuàng)傷模型。使用3%異戊巴比妥鈉80 mg/kg對大鼠進行腹腔麻醉，仰臥位固定后切開左側(cè)腹股溝皮膚，將股動靜脈游離并于腹壁牽動下進行鏡面結扎，于膝關節(jié)上1.3 cm處，將除股動脈和股靜脈之外所有結構完全切除，最后將股動脈和股靜脈剪斷建立截肢創(chuàng)傷模型[4]。A組給予等量生理鹽水，B組、C組、D組和E組分別給予利多卡因(2 mg/kg)、普萘洛爾(7 mg/kg)、胺碘酮(200 mg/kg)和維拉帕米(20 mg/kg)。使用生理信號采集系統(tǒng)，皮下插入針型電極，記錄標準Ⅱ?qū)?lián)心電圖，掃描速率設定200 ms，頻率設定10 kHz，觀察大鼠的心率、QT間期和PR間期變化。使用MedLab U/4CS生物信息采集處理系統(tǒng)(南京美易科技公司)實時記錄(MAP)，彩色多普勒超聲檢測大鼠左室收縮壓(LVSP)并觀測是否存在室性心律失常。于術前、術后2 h取尾靜脈血3 mL,靜置30 min后，3 000 轉(zhuǎn)/min離心10 min；分離血清，將血清轉(zhuǎn)移至EP管中，保存于-80℃的冰箱備用；酶聯(lián)免疫法檢測血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)和C反應蛋白(CRP)，酶標儀(美國BD公司)檢測450 nm波長讀數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學分析

數(shù)據(jù)整理分析采用SPSS 22.0軟件，TNF-α、IL-6、CRP等計量資料以均數(shù)±標準差表示，組間比較使用方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組大鼠手術前后心電圖相關指標比較

C組、D組和E組術后15、30、60 min時心率明顯低于A組和B組；B組、C組、D組和E組術后15、30、60、120 min時PR間期、QT間期高于A組(P<0.05)。見表1。

表1 各組大鼠心電圖相關指標比較

2.2 各組大鼠手術前后MAP比較

B組術后15、30、60、120 min時MAP振幅明顯低于A組、C組、D組和E組(P<0.05)，見表2。

表2 各組大鼠MAP指標比較

2.3 各組大鼠手術前后LVSP比較

B組、C組、D組和E組術后15、30、60、120 min時LVSP明顯低于A組(P<0.05)，見表3。

表3 各組大鼠LVSP相關指標比較

2.4 各組大鼠手術前后炎性因子比較

各組大鼠術后2 h血清TNF-α、IL-6和CRP較術前均升高(P<0.05)，但各組間比較差異均無統(tǒng)計學意義，見表4。

表4 各組大鼠手術前后炎性因子比較

3 討論

國內(nèi)外學者對截肢手術并發(fā)癥的研究主要集中在術后并發(fā)癥的預防與處理,如殘端出血、感染、皮膚壞死、深靜脈血栓、繼發(fā)性骨筋膜室綜合征、殘肢疼痛以及截肢后遠端臟器繼發(fā)損傷等。對截肢創(chuàng)傷導致心律失常的機制缺乏深入認識[5-10]。本研究動態(tài)觀察術前、術后不同時間點應用抗心律失常藥物大鼠的心電圖、右心室心內(nèi)膜MAP振幅和LVSP的變化。結果發(fā)現(xiàn)抗心律失常藥物均可有效改善患者PR間期、QT間期，其中普萘洛爾、胺碘酮和維拉帕米較利多卡因降低心率更明顯。利多卡因較其他抗心律失常藥物更有助于降低MAP振幅，其機制可能是利多卡因可通過阻斷鈉通道, 延長動作電位及不應期，還可鎮(zhèn)靜神經(jīng)系統(tǒng)，提高興奮閾值,穩(wěn)定神經(jīng)細胞膜, 減少病灶高頻放電的擴散[11-12]。

本研究提示抗心律失常藥有助于減輕截肢對大鼠心肌電活動的影響，降低患者血壓。截肢大鼠由于嚴重創(chuàng)傷刺激且易感染，導致炎性指標升高，而引起心肌電活動異常，進而出現(xiàn)高血壓和心血管不良事件。利多卡因?qū)儆阝c通道阻滯劑，對缺血或強心苷中毒所致的除極化型心律失常具有較強的抑制作用，可與強心苷競爭 Na+/K+-ATP，抑制強心苷中毒所致的滯后除極，進而發(fā)揮抗室性心律失常的作用[13-14]。

手術前后炎性因子比較結果顯示，各組大鼠術后2 h血清TNF-α、IL-6和CRP較術前升高，但組間比較無顯著差異，提示抗心律失常藥物對炎性因子并無明顯作用。

綜上所述，抗心律失常藥有助于減輕截肢對大鼠心肌電活動的影響，但對炎性因子無明顯作用。