◎ 丁宗博，李 莉，張興龍

（青島市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心，山東 青島 266000）

隨著人們對食品質(zhì)量安全的重視，食品檢驗檢測對整體的質(zhì)量控制有了更高的要求。質(zhì)量控制措施如果不科學、不嚴謹，會影響檢測結(jié)果的有效性，從而造成決策失誤。做好蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留分析的質(zhì)量控制是出具準確、可靠數(shù)據(jù)的前提和重要保障[1-2]。

相比傳統(tǒng)的固相萃取前處理方法，QuEChERS 方法由于其快速、簡單、廉價、有效、可靠及安全的特點，在食品安全檢測中的應用越來越廣泛。本文基于QuEChERS 前處理方法，對蔬菜和水果中農(nóng)藥殘留檢測過程中的關鍵控制點進行性析，并提出了質(zhì)量控制措施。

1 樣品采集的質(zhì)量控制

樣品采集主要包括產(chǎn)地和市場兩個方面。產(chǎn)地采樣時，應嚴格按照NY/T 789—2004[3]要求，確定抽樣單元；市場采樣時，同一攤位、同一品種、同一來源及同批銷售的為1 個抽樣單元。每個抽樣單元內(nèi)采集1 個代表性樣本，保證被抽檢的樣品具有代表性和隨機性。按照GB/T 8855—2008[4]規(guī)定，隨機抽取該范圍內(nèi)的樣本，每個樣品的采樣量應不少于3 kg，南瓜取5 個個體，花椰菜、大白菜、紅甘藍和萵苣等取10 個個體。

2 樣品制備的質(zhì)量控制

2.1 制樣場所的要求

制樣場所應潔凈衛(wèi)生，并具有滿足樣品制備相關要求的用水。如現(xiàn)場條件無法滿足制樣要求，則可就近選擇合適場所進行樣品制備。

2.2 制樣器具的要求

應采用適合并有效的制樣器具，制樣器具不應對樣品造成污染。每處理完一個樣品后，都要對制樣器具進行清潔，避免交叉污染。

2.3 制樣

樣品首先進行預處理，先去除雜物以及腐爛、枯萎或受病蟲害侵蝕嚴重的個體。用于農(nóng)藥殘留檢測的樣品，用干凈紗布擦去附著在樣品表面的泥土。如果樣品附著太多泥土，可用濕毛巾擦洗或用軟毛刷刷洗，并擦干。然后，按照GB 2763—2019[5]附錄A 要求，確定樣品的測定部位，經(jīng)四分法縮分后制備樣品。制樣時，應采用破壁機，使樣品粉碎程度盡量高，有助于克百威、涕滅威、氧樂果和吡蟲啉等內(nèi)吸傳導性農(nóng)藥的提取檢測。

2.4 樣品分裝

制備好的樣品必須馬上獨立包裝，避免相互污染，根據(jù)檢測需要分裝成若干份，加貼唯一性標簽。不立即進行前處理的，可在-18 ～-20 ℃左右的冰柜中保存?zhèn)溆谩y定時每份樣品只解凍一次，切不可重復解凍。

3 樣品運輸?shù)馁|(zhì)量控制

樣品應在24 h 內(nèi)運送到實驗室，否則應將樣品制備冷凍后運輸。樣品運輸過程中應采用適當措施保證樣品不被污染，避免陽光直射。高溫季節(jié)樣品運輸應選擇保持低溫的容器，低溫包裝時應使用適當?shù)牟牧习鼧悠?，避免與冷凍劑接觸造成凍傷，冷凍劑不可使用碎冰。

4 樣品提取的質(zhì)量控制

4.1 稱樣

樣品制樣結(jié)束后立即測定的，稱樣前可用稱樣匙先混勻，然后稱量，尤其針對含水量大的樣品；若樣品已冷凍保存，可待其完全解凍后，在稱樣前用勻漿機高速勻漿混勻，然后稱樣。若解凍不完全就稱量，容易造成乳化，也容易造成待測農(nóng)藥組分分布不均，檢測結(jié)果不可靠。

4.2 提取

加入提取溶劑、萃取鹽包渦旋振蕩時振蕩器力度要足夠大，使其充分接觸，確保提取效率。為防止加入鹽包后放熱反應產(chǎn)生結(jié)塊，加入陶瓷均質(zhì)子提取效果更加理想。

5 樣品凈化的質(zhì)量控制

參照GB 23200.113—2018[6]，對于提取顏色較深的試樣，需加入含有885 mg 硫酸鎂、150 mg PSA 及15 mg GCB 的凈化包，以去除色素。因GCB 對農(nóng)藥有不同程度的吸附性，要謹慎使用。對于顏色較淺的試樣，使用內(nèi)含900 mg 硫酸鎂、150 mg PSA 的凈化包即可。

6 樣品濃縮、復溶的質(zhì)量控制

凈化離心好的上清液過0.22 μm 濾膜后可直接上LC-MS/MS 測定；上氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀之前，因提取溶劑為乙腈，為防止損壞色譜柱，需進行溶劑置換。此過程中氮吹儀的水浴溫度設定在40 ℃左右，控制好氮氣流速，以免有機相濺落容器內(nèi)部或濺出，導致待測農(nóng)藥組分損失，影響測定結(jié)果。氮吹至近干后，加入乙酸乙酯復溶，上GC-MS/MS 測定。

7 儀器測定的質(zhì)量控制

7.1 進樣順序

為防止污染，應遵循以下進樣順序：試劑空白→空白樣品→質(zhì)控樣品→試劑空白→標準溶液→樣品溶液→標準溶液→空白試劑。

需特別注意的是，對于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，流動相要現(xiàn)配現(xiàn)用，尤其是水相，時間過長容易滋生細菌，建議使用屈臣氏蒸餾水配制。

7.2 標準物質(zhì)

目前，農(nóng)藥殘留測定使用的標準品母液濃度多為1 000 mg·L-1，容量為1 mL。標準物質(zhì)要密封、避光、低溫保存，標簽要完整，有效期要明確，并定期進行期間核查。按照GB/T 27404—2008[7]的規(guī)定，50 ～100 mg·L-1的標準儲備液可-20 ℃保存，有效期為6 個月；5 ～10 mg·L-1的標準溶液-20 ℃保存，有效期為1 個月；測試用濃度可冷藏保存，有效期為1 周。過期標準溶液不可使用，需重新配制。此外，標準物質(zhì)要有統(tǒng)一編號，保證可溯源，并填好配制記錄、使用記錄等。

7.3 試劑和耗材

每購入一批試劑和耗材，在使用前應按相應檢驗標準進行檢測，對其進行雜質(zhì)的檢查，排除試劑、耗材中雜質(zhì)對檢測結(jié)果的干擾，如有必要應進行處理后再使用。一般試劑濃縮50 ～100 倍后測定，檢查對被測組分是否有干擾；對新購入同一批次的耗材隨機挑選一批按照檢測標準方法進行回收率測定，經(jīng)儀器確認回收率正常后方可使用。

7.4 質(zhì)控樣品

質(zhì)控樣品的基質(zhì)，可根據(jù)檢測批次的種類進行選擇或選擇特殊、復雜、難做的基質(zhì)；質(zhì)控的項目盡量要兼顧儀器、性質(zhì)或者選擇難做的項目；質(zhì)控樣品的數(shù)量要達到每20 個樣品有一個質(zhì)控樣的要求；質(zhì)控樣品的回收率范圍應在70%～120%，方可保證該批次檢測結(jié)果的有效性。

7.5 校準

農(nóng)藥殘留檢測多采用單點校準。每進10 針樣品后應進1 針標準，用前后標樣來計算中間樣品含量，消除儀器靈敏度變化的影響。此外，由于基質(zhì)效應的影響，最好使用基質(zhì)標進行校準，消除基質(zhì)干擾。

對于陽性樣品或檢出值在限量值附近時，需進行復測。復測時需要做質(zhì)控樣，并使用空白基質(zhì)配制標準溶液，標準溶液的濃度要接近樣品的濃度；對于含量很高的樣品，可選擇稀釋的方法上機測定。

7.6 儀器維護

與固相萃取前處理相比，QuEChERS 方法凈化效果不是很理想，對儀器的污染程度更高，因此，對儀器的維護頻率會更加頻繁。對于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，樣品測定完畢后，依次用90%水-甲醇、純甲醇沖洗整個系統(tǒng)至少2 h，用無紡布沾取異丙醇-水溶液（體積比1 ∶1）擦洗錐孔及其周圍，定期清洗泵頭，2 ～3 個月清洗離子源等；而氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀要做好進樣口的維護，定期更換襯管、隔墊，清洗進樣針，根據(jù)出峰情況截取色譜柱柱頭10 ～30 cm，調(diào)諧參數(shù)不佳時清洗離子源等，確保儀器處于最佳狀態(tài)。

8 檢測結(jié)果處理的質(zhì)量控制

樣品測定結(jié)束后，應根據(jù)保留時間和定性/定量離子及其豐度比，準確定性；定量部分數(shù)據(jù)要記錄正確，計算無誤；數(shù)據(jù)結(jié)果計算時應符合有效數(shù)字運算的規(guī)定，數(shù)值修約應符合《數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定》（GB/T 8170—2008）[8]的規(guī)定。

平行樣測定結(jié)果應符合有關精密度要求。若不符合，需重新測定。當測定結(jié)果小于方法檢出限時應報告為未檢出，同時寫明小于方法檢出限；當測定結(jié)果大于方法檢出限且小于方法定量限時，報告為定性檢出，同時寫明小于方法定量限。

9 結(jié)語

為了確保農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果的準確度和精密度，保證檢測質(zhì)量，除文中質(zhì)量控制環(huán)節(jié)，還必須做好儀器設備的期間核查和校準、使用情況登記、實驗室用水、實驗室環(huán)境控制以及檢測人員的技術培訓、持續(xù)能力提升等工作。只有質(zhì)量控制覆蓋蔬菜和水果中農(nóng)藥殘留檢測的全過程，才能使分析結(jié)果準確、可靠和有效。