劉玉霞 張彩（山東大學(xué)藥學(xué)院免疫藥物學(xué)研究所，濟南250012）

γδT細(xì)胞是一群性質(zhì)獨特的固有免疫細(xì)胞，主要分布于皮膚、黏膜等部位，參與多種免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)的過程，如介導(dǎo)免疫炎癥反應(yīng)、直接識別并殺傷腫瘤等［1］。γδT細(xì)胞識別抗原無MHC限制性，能夠迅速地對多種入侵的病原體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，被稱為是抵抗外來感染的第一道防線。γδT細(xì)胞不僅在抵抗外來感染中發(fā)揮著重要的作用，在腫瘤免疫中也發(fā)揮著重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)γδT細(xì)胞對多種腫瘤如乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌具有積極的抗腫瘤作用，可以通過其強大的細(xì)胞毒作用直接殺傷腫瘤細(xì)胞，也可以間接的通過影響其他免疫細(xì)胞的功能發(fā)揮抗腫瘤作用，如增強樹突狀細(xì)胞呈遞抗原的能力、增強細(xì)胞毒性T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷能力等［2］。然而，也有研究表明γδT細(xì)胞具有促腫瘤作用。如分泌IL-17的γδT細(xì)胞亞群，即γδT17細(xì)胞，是腫瘤微環(huán)境中IL-17的主要來源。IL-17可以通過促進(jìn)非小細(xì)胞性肺癌、胃癌、膽囊癌等腫瘤組織的血管生成促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。γδT17細(xì)胞還能招募MDSC（骨髓來源的抑制細(xì)胞）到腫瘤部位，抑制免疫細(xì)胞殺傷腫瘤的功能進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的生長［3］。

由此可見，γδT細(xì)胞作為機體免疫防御的第一道防線，在抗腫瘤作用中發(fā)揮著重要的作用［4］。但是，腫瘤微環(huán)境的長期影響會調(diào)控γδT細(xì)胞的功能，使γδT細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榇龠M(jìn)腫瘤進(jìn)展的細(xì)胞亞群，如γδT17細(xì)胞亞群、調(diào)節(jié)性γδT細(xì)胞（γδ Treg）亞群等。本文就γδT細(xì)胞及其主要亞群、γδT細(xì)胞識別腫瘤及其殺傷腫瘤的機制、γδT細(xì)胞促進(jìn)腫瘤發(fā)生、發(fā)展的機制以及γδT細(xì)胞在免疫治療中的作用等方面做一綜述。

1 γδT細(xì)胞亞群的分類

目前對于γδT細(xì)胞亞群的分類主要有3種方法。①根據(jù)TCRγ或δ的組成進(jìn)行分類。通常人的γδT細(xì)胞根據(jù)TCRδ的組成不同分為三大亞群，即Vδ1+、Vδ2+、Vδ3+γδT細(xì)胞，各個亞群的分布和特點不完全相同［5］。Vδ1+γδT細(xì)胞主要分布于皮膚、小腸等黏膜組織，在脾臟、肝臟中也有發(fā)現(xiàn)，Vδ1+能夠和多種Vγ鏈（如Vγ2、Vγ3、Vγ5和Vγ8等）共表達(dá)，組成不同的γδT細(xì)胞亞群。Vδ1+γδT細(xì)胞對慢性淋巴系白血病細(xì)胞具有特異性的細(xì)胞毒性［6］。Vδ2+γδT主要存在于外周血中，是參與血液循環(huán)的主要γδT細(xì)胞，在TCRγδ重排過程中，Vδ2幾乎只和Vγ9共表達(dá)，Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞能夠識別磷酸化抗原，具有很強的抗腫瘤能力，能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡［7］。Vδ3+γδT細(xì)胞主要存在于肝臟和小腸上皮，目前關(guān)于其對腫瘤進(jìn)程影響的研究還很少［8］。而小鼠γδT細(xì)胞則通常根據(jù)TCRγ鏈進(jìn)行分類，可分為6個亞群，通常采用“Heilig命名法則”對其命名，分別是Vγ1+、Vγ2+、Vγ4+、Vγ5+、Vγ6+與Vγ7+γδT細(xì)胞亞群［9］。②根據(jù)γδT細(xì)胞表型進(jìn)行分類。目前有許多表面標(biāo)記可以用于γδT細(xì)胞亞群的分類，如CD27、CD44、Ly-6C等。目前最公認(rèn)的標(biāo)志是CD27，根據(jù)CD27的表達(dá)可以將小鼠γδT細(xì)胞分為CD27+γδT細(xì)胞和CD27-γδT細(xì)胞，這兩群細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子不同，通常認(rèn)為CD27+γδT細(xì)胞主要分泌IFN-γ，而CD27-γδT細(xì)胞主要分泌IL-17。此外，還可以根據(jù)CD27和CD45RA的表達(dá)，將其分為4個亞群，即幼稚型（CD27+CD45RA+）、效應(yīng)記憶型（CD27-CD45RA-）、中央記憶性（CD27+CD45RA-）和終末分化型（CD27-CD45RA+）γδT細(xì)胞［10］。③根據(jù)γδT細(xì)胞的功能進(jìn)行分類。與αβT細(xì)胞類似，γδT細(xì)胞也可以根據(jù)功能的不同分為不同的亞群，如γδT1、γδ T17、濾泡輔助性γδT（γδTfh）、調(diào)節(jié)性γδT（γδTreg）與記憶性γδT（memory γδT）細(xì)胞等［11］。γδT1細(xì)胞是指分泌IFN-γ的γδT細(xì)胞，γδT17則是指分泌IL-17的γδT細(xì)胞。γδTfh細(xì)胞與傳統(tǒng)的Tfh細(xì)胞的功能類似，能夠促進(jìn)B細(xì)胞的成熟和產(chǎn)生抗體的能力［12］。γδTreg細(xì)胞能夠表達(dá)一種特異性的轉(zhuǎn)錄因子FOXP3，具有免疫抑制功能［13］。Memory γδT細(xì)胞具有免疫記憶的特點，在再次接受同一抗原刺激后能夠迅速產(chǎn)生免疫反應(yīng)［14］。

2 γδT細(xì)胞抗腫瘤作用的機制

2.1 γδT細(xì)胞識別腫瘤細(xì)胞的機制識別腫瘤細(xì)胞是γδT細(xì)胞能夠殺傷腫瘤的基礎(chǔ)。γδT細(xì)胞識別腫瘤抗原主要通過TCR依賴和NKR依賴的兩種方式［15］。Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞主要通過TCR依賴的方式識別腫瘤相關(guān)抗原，最早發(fā)現(xiàn)的是Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞能夠通過TCR依賴的方式特異性地識別非肽類的磷酸化抗原，如異戊烯焦磷酸（IPP）［16］。在正常組織內(nèi)，細(xì)胞會經(jīng)甲羥戊酸代謝途徑合成類異戊二烯（isoprenoid）參與膽固醇的合成，在此過程中也會生成少量的IPP。而在腫瘤組織中為了滿足腫瘤的能量供應(yīng)，甲羥戊酸代謝途徑增強，會導(dǎo)致IPP在細(xì)胞內(nèi)的累積超出正常生理范圍，從而被Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞識別并殺傷［17］。F1-ATP酶一般在線粒體膜上表達(dá)，偶爾在肝細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞上也能表達(dá)，Vγ9Vδ 2γδT細(xì)胞能被異常表達(dá)在腫瘤細(xì)胞表面的Fl-ATP酶激活，在載脂蛋白A-1（apoA-1）的參與下還能強化此激活作用，其機制在于F1-ATP酶能夠與apoA-1形成復(fù)合物遞呈磷酸化抗原使其被Vγ9+Vδ2+TCR識別［18］。最近有研究表明，Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞識別磷酸化抗原依賴于嗜乳脂蛋白3A1（BTN3A1，也稱為CD277），BTN3A1是B7超蛋白家族的成員，在Vγ 9+Vδ2+TCR識別磷酸化抗原中發(fā)揮著重要的作用，然而BTN3A1與磷酸化抗原之間相互作用的分子機制還需進(jìn)一步研究［19］。內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體（EPCR）是近些年來新發(fā)現(xiàn)的γδTCR的配體，是C蛋白通路的重要組成部分，屬于MHCⅠ/CD1類蛋白分子，在缺氧和炎癥狀態(tài)下保護(hù)內(nèi)皮屏障。EPCR僅在內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)，內(nèi)皮細(xì)胞是CMV感染的主要靶點，在CMV感染的上皮細(xì)胞和上皮腫瘤細(xì)胞EPCR表達(dá)會上調(diào)，γδTCR與EPCR的相互作用使得γδT細(xì)胞能夠識別CMV感染的上皮細(xì)胞和上皮腫瘤細(xì)胞［20］。

γδT細(xì)胞除了通過γδTCR識別腫瘤抗原外，還可以通過自然殺傷細(xì)胞受體（NKR，如NKG2D、DNAM-1、NKp30、NKp44和NKp46等）識別表達(dá)在腫瘤細(xì)胞上的相應(yīng)的配體識別腫瘤細(xì)胞［21］。NKR在NK細(xì)胞中能夠調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的活化和功能，在γδT細(xì)胞中發(fā)揮著免疫監(jiān)視的作用，能夠區(qū)分轉(zhuǎn)化的細(xì)胞以及感染的細(xì)胞。NKG2D是一種C型凝集素受體，其配體在大多正常組織上不表達(dá)而在腫瘤細(xì)胞上高表達(dá)，γδT細(xì)胞可以通過NKG2D識別其配體對腫瘤細(xì)胞行使其殺傷作用。目前在人類細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的NKG2D的配體包括MHCⅠ類分子相關(guān)蛋白（MICA/MICB）和6種ULBP結(jié)合蛋白（ULBP1-6）［22］。之前一直認(rèn)為NCR是NK細(xì)胞特有的，然而近些年在活化的小腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞（intraepithelial lymphocytes，IELs）和固有樣淋巴細(xì)胞（innate lymphoid cells，ILCs）中均發(fā)現(xiàn)了NCR的表達(dá)［23］。盡管γδT細(xì)胞在正常情況下不表達(dá)NCR，但在TCR激動劑持續(xù)的刺激以及IL-15或IL-2的誘導(dǎo)下大部分γδT細(xì)胞能夠表達(dá)NCR，并且這一現(xiàn)象基本上只在Vδ1+γδT細(xì)胞上出現(xiàn)，Vδ2+γδT細(xì)胞尚未發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象［24］。Vδ1+γδT細(xì) 胞 誘 導(dǎo) 產(chǎn) 生 的NCR主 要 有NKp44、NKp30、NKp46，這些NCR+Vδ1+γδT細(xì)胞具有更強的對腫瘤細(xì)胞的靶向殺傷能力和分泌IFN-γ的能力［21，25］?；谶@些研究，已經(jīng)有人開發(fā)出了新型細(xì)胞產(chǎn)品NCR+Vδ1+γδT細(xì)胞用于腫瘤過繼免疫治療，并且能夠有效控制慢性淋巴細(xì)胞白血病的生長和擴散［26］。

2.2 γδT細(xì)胞抗腫瘤機制γδT細(xì)胞可以通過多種途徑發(fā)揮直接的抗腫瘤作用：如通過釋放穿孔素-顆粒酶裂解腫瘤細(xì)胞或Fas-FasL和TRAIL途徑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，還可以通過ADCC途徑以及分泌細(xì)胞因子（如IFN-γ和TNF-α）殺傷腫瘤細(xì)胞［5］。

γδT細(xì)胞還可以通過影響B(tài)細(xì)胞、αβT細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞（DC細(xì)胞）、NK細(xì)胞等其他免疫細(xì)胞的功能間接發(fā)揮抗腫瘤作用。有文獻(xiàn)指出當(dāng)Vγ9Vδ2T細(xì)胞和IPP、IL-21在體外共孵育時，Vγ9Vδ2T細(xì)胞會顯示出濾泡輔助性T（Tfh）細(xì)胞的特點，提高B細(xì)胞分泌抗體的能力［27］。γδT細(xì)胞還可以作為αβT細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞，參與αβT細(xì)胞的活化過程，使na?ve αβT細(xì)胞分化為效應(yīng)T細(xì)胞，發(fā)揮抗腫瘤作用。當(dāng)受到腫瘤抗原刺激時，γδT細(xì)胞會上調(diào)抗原遞呈分子HLA-DA、共刺激和黏附分子（CD80、CD86和CD40等）的表達(dá)，γδT細(xì)胞還會上調(diào)清道夫受體CD36的表達(dá)，參與腫瘤細(xì)胞碎片的清除，此時γδT細(xì)胞會發(fā)揮其抗原遞呈細(xì)胞的功能引起抗原特異性CD8+T細(xì)胞的應(yīng)答［28］。γδT細(xì)胞還可以促進(jìn)DC細(xì)胞的成熟，反過來，DC細(xì)胞也能誘導(dǎo)γδT細(xì)胞的活化和增殖。有研究表明DC細(xì)胞的成熟依賴于TNF-α和細(xì)胞之間的相互接觸，γδT細(xì)胞分泌的TNF-α、γδT細(xì)胞與DC細(xì)胞的相互接觸促進(jìn)了DC細(xì)胞的成熟，這兩者的交互作用能夠加強γδT細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的識別和殺傷作用［29］。

3 γδT細(xì)胞促進(jìn)腫瘤發(fā)展的機制

雖然γδT細(xì)胞能夠通過直接殺傷腫瘤細(xì)胞、分泌細(xì)胞因子（IFN-γ、TNF-α等）、促進(jìn)DC細(xì)胞成熟等方式發(fā)揮抗腫瘤作用，但這一功能往往會被腫瘤微環(huán)境所抑制，腫瘤微環(huán)境甚至?xí)偈功忙腡細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榇龠M(jìn)腫瘤進(jìn)展的亞群。

目前我們所知的γδT細(xì)胞的促腫瘤能力主要來源于其分泌的IL-17。IL-17是一種促炎因子，能夠促進(jìn)慢性組織炎癥的發(fā)展進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。在多種惡性腫瘤（如胰腺癌、肝癌、非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌等）中均發(fā)現(xiàn)IL-17水平升高與腫瘤的轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后有關(guān)［30］。分泌IL-17的γδT（γδT17）細(xì)胞在健康個體中很少發(fā)現(xiàn)，但在一些疾病環(huán)境（如腦膜炎和癌癥）中則會發(fā)現(xiàn)γδT17細(xì)胞的聚積。有文獻(xiàn)證實，結(jié)直腸癌病人腫瘤部位上皮屏障的破壞會引起微生物產(chǎn)物和炎性樹突狀細(xì)胞的聚積，促使γδT細(xì)胞向γδT17細(xì)胞極化［31］。激活的炎癥樹突狀細(xì)胞會誘導(dǎo)γδT17細(xì)胞分泌IL-17、IL-8、TNF-α、粒細(xì)胞集落刺激因子等。IL-17進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤部位血管增生、募集免疫抑制性MDSCs到腫瘤部位發(fā)揮促腫瘤作用［3，32］。肺是一種黏膜組織，定植著多共生菌，JIN等［33］發(fā)現(xiàn)當(dāng)肺癌發(fā)生時肺部的總菌群載量增加但菌群多樣性減少，腫瘤部位菌群的失調(diào)刺激組織駐留的γδT細(xì)胞活化，使之分泌大量的IL-17和其他促炎介質(zhì)，進(jìn)而促進(jìn)中性粒細(xì)胞浸潤和腫瘤細(xì)胞增殖，這進(jìn)一步加劇炎癥和菌群失調(diào)，加速腫瘤進(jìn)展的惡性循環(huán)。

有研究者證實γδT細(xì)胞在γδTCR單抗和TGF-β的刺激下會轉(zhuǎn)變?yōu)镕OXP3+γδTreg細(xì)胞［34］。γδTreg細(xì)胞和傳統(tǒng)Treg細(xì)胞的功能類似，能夠分泌多種抑制性細(xì)胞因子，如IL-10和TGF-β，抑制αβT細(xì)胞對腫瘤的免疫應(yīng)答。腫瘤微環(huán)境中存在著大量的免疫抑制分子，是否會影響γδT細(xì)胞對腫瘤的作用呢？研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤浸潤的γδT細(xì)胞往往會發(fā)生表型或（和）功能的改變。在胰腺癌病人中發(fā)現(xiàn)γδT細(xì)胞廣泛分布于腫瘤間質(zhì)中，而在正常胰腺中則無分布，并且腫瘤浸潤的γδT細(xì)胞具有獨特的表型，高表達(dá)趨化因子受體CCR2、CCR5和CCR6，提示腫瘤微環(huán)境中可能存在多種趨化因子趨化γδT細(xì)胞向腫瘤部位浸潤。胰腺癌微環(huán)境中的γδT細(xì)胞高表達(dá)FOXP3和程序性死亡受體-配體PD-L1，抑制αβT細(xì)胞的增殖和活化，使腫瘤部位的αβT處于免疫抑制或功能耗竭狀態(tài)［35］。

由此可見，腫瘤微環(huán)境能夠募集大量的γδT細(xì)胞向腫瘤部位浸潤，并改變它們的表型和功能，腫瘤浸潤的γδT細(xì)胞進(jìn)而又能加劇炎癥、促進(jìn)血管增生、招募MDSCs等抑制性細(xì)胞，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。因此，若能糾正腫瘤微環(huán)境，逆轉(zhuǎn)腫瘤浸潤的γδT細(xì)胞的負(fù)調(diào)作用，對于γδT細(xì)胞用于腫瘤免疫治療將有重要意義。

4 基于γδT細(xì)胞的腫瘤免疫治療

腫瘤免疫治療通過重新啟動或增強腫瘤病人的抗腫瘤免疫反應(yīng)，恢復(fù)機體正常的抗腫瘤免疫反應(yīng)，從而控制與清除腫瘤。目前基于αβT細(xì)胞的腫瘤免疫治療已經(jīng)取得了一定進(jìn)展，但治療的持久性和有效性還需進(jìn)一步改進(jìn)。這是由于αβT細(xì)胞的活化依賴于特定腫瘤相關(guān)抗原（TAA）、MHC分子以及共刺激信號。一旦TAA、MHC分子或共刺激信號丟失，αβT細(xì)胞對腫瘤的殺傷能力就會降低甚至導(dǎo)致αβT細(xì)胞的失能［36］。

由于γδT細(xì)胞自身識別腫瘤抗原無MHC限制性，且對腫瘤細(xì)胞具有較強的細(xì)胞毒作用，并且在體外、體內(nèi)均能大量擴增，γδT細(xì)胞在腫瘤免疫治療中有巨大的應(yīng)用前景。然而，由于γδT細(xì)胞自身對腫瘤的發(fā)展具有雙重作用，為了保證γδT細(xì)胞在腫瘤免疫治療中發(fā)揮積極的抗腫瘤作用而不是促腫瘤作用，往往不會直接使用未經(jīng)處理的γδT細(xì)胞進(jìn)行腫瘤免疫治療，而是使用經(jīng)特異性擴增、具有特定亞型的γδT細(xì)胞進(jìn)行治療，目前研究最多、最具應(yīng)用前景的是Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞和Vδ1γδT細(xì)胞。

Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞主要存在于人外周血中，占外周血γδT細(xì)胞的50%～70%，能夠識別磷酸化抗原并被其活化。已經(jīng)有研究證實將分選得到的γδT細(xì)胞在氨基二碳酸鹽類藥物（N-BPs類藥物，如唑來膦酸）和IL-2或的刺激下能夠激活Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞并實現(xiàn)Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞的特異性擴增。使用體外擴增的Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞進(jìn)行過繼轉(zhuǎn)輸治療時，往往也會伴隨使用唑來膦酸和IL-2以維持Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞的活化狀態(tài)，并增加腫瘤細(xì)胞對Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞的殺傷敏感性［37］。轉(zhuǎn)輸Vγ9Vδ2γδT用于腫瘤免疫治療已在多種晚期實體瘤的臨床試驗中初步顯示出較好的安全性與療效。ALNAGGAR等［38］發(fā)現(xiàn)將Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞與唑來膦酸在體外培養(yǎng)擴增后過繼轉(zhuǎn)輸給Ⅳ期膽囊癌的病人給予治療，治療8個療程（前6個療程是每2周1個療程，后2個療程是每4周1個療程，每個療程治療3次，每次輸注4×108個Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞）后發(fā)現(xiàn)腫瘤的體積減小，病人的生活質(zhì)量提高，淋巴結(jié)明顯縮小，未見明顯的副作用。研究者還發(fā)現(xiàn)Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞治療后功能性CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞比例有所升高，而耗竭的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的比例降低［38］。

Vδ1γδT細(xì)胞是一個近些年被廣泛關(guān)注的具有較強抗腫瘤活性的亞群，能夠被多種配體激活，如應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生的自身抗原，CD1c/d遞呈的糖脂抗原以及多種潛在的未發(fā)現(xiàn)的配體［39］。Vδ1γδT細(xì)胞具有很強的抗腫瘤活性，與Vγ9Vδ2γδT細(xì)胞相比，Vδ 1γδT細(xì)胞的活化不依賴于N-BPs類藥物，并且能在體內(nèi)長時間參與循環(huán)，有望維持長期的治療效果。雖然Vδ1γδT細(xì)胞的比例在外周血的比例不高，但目前人們已經(jīng)開發(fā)出成熟的在體外擴增Vδ1γδT細(xì)胞的方法，將分選得到的γδT細(xì)胞在TCR激動劑和多種細(xì)胞因子（如IL-4、IL-21、IFN-γ和IL-1β）的刺激下3周內(nèi)能夠?qū)δ1γδT細(xì)胞擴增至1 000倍，并且能夠?qū)⒊跏急壤∮?.5%的Vδ1γδT的比例提高至超過70%［26］。Vδ1γδT細(xì)胞對急性髓系白血病等多種淋巴系和髓系血液瘤具有較好的治療效果，過繼轉(zhuǎn)輸Vδ1γδT細(xì)胞治療能夠降低患者血液和靶器官中的腫瘤負(fù)荷，顯著延長患者的存活時間，且無明顯毒性［40］。

近些年，CAR-T細(xì)胞在治療急性白血病和非霍奇金淋巴瘤方面取得了極大的進(jìn)展，被認(rèn)為是最有前景的腫瘤治療方式之一。然而，CAR-T細(xì)胞免疫療法在臨床應(yīng)用中還存在著細(xì)胞因子風(fēng)暴、脫靶效應(yīng)、對實體瘤效果不佳以及治療后復(fù)發(fā)率高等問題［41］。由于γδT細(xì)胞獨特的識別腫瘤的能力，人們開始思考CAR-γδT細(xì)胞是否能夠成為另一個有巨大潛力的用于腫瘤過繼細(xì)胞免疫治療的效應(yīng)細(xì)胞［42］。DENIGER等［43］曾構(gòu)建出靶向CD19的CARγδT細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)CAR-γδT細(xì)胞在體內(nèi)、體外對CD19+的腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性均有明顯的提高，說明CARγδT細(xì)胞有望用于治療腫瘤。GD2是一種神經(jīng)節(jié)苷脂，廣泛表達(dá)于神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞表面和其他幾種癌癥類型上，為了限制CAR-γδT細(xì)胞的毒副作用，F(xiàn)ISHER等［44］將Vγ9Vδ2+T細(xì)胞進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造設(shè)計了一個靶向GD2的CAR-γδT細(xì)胞。此設(shè)計中，CAR-γδT細(xì)胞的激活需要兩個相互獨立的信號，γδTCR識別腫瘤抗原為第一信號，抗GD2的單抗識別GD2并激活下游的共刺激信號域提供第二信號，在這兩個信號的同時參與下CAR-γδT細(xì)胞才能被活化發(fā)揮抗腫瘤作用。由于正常的細(xì)胞不會被Vγ 9Vδ2+T細(xì)胞殺傷所以經(jīng)修飾的靶向GD2的CARγδT細(xì)胞不會對正常組織產(chǎn)生毒性。CAPSOMIDIS［45］也表明他們構(gòu)建出的靶向GD2的CAR-γδT細(xì)胞能夠維持向腫瘤部位的遷移能力和對腫瘤細(xì)胞特異性的細(xì)胞毒性。靶向CD19的CAR-γδT細(xì)胞用于治療淋巴瘤和白血病的臨床研究也正在開展，CAR-γδT細(xì)胞有望在將來成為一種新型的腫瘤免疫治療方式。

5 總結(jié)與展望

γδT細(xì)胞對腫瘤的影響及其用于腫瘤免疫治療的巨大潛力逐漸引起了人們的關(guān)注。由于γδT細(xì)胞識別腫瘤抗原無MHC限制性，γδT細(xì)胞用于腫瘤免疫治療也許能夠避免因MHCⅠ類分子下調(diào)而導(dǎo)致的免疫逃逸，同時也能夠避免免疫排斥反應(yīng)，尤其適用于同種異體的過繼轉(zhuǎn)輸策略，在未來有望制備出現(xiàn)成的同種異體的細(xì)胞治療產(chǎn)品［46］。然而，γδT細(xì)胞用于腫瘤免疫治療仍然存在一些問題，如治療的反應(yīng)率低以及如何保證γδT細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用而不是促腫瘤作用。為了解決這些問題，將對腫瘤具有特異性殺傷作用的γδT細(xì)胞純化出來或制備工程化的γδT細(xì)胞（如CAR-γδT細(xì)胞）用于腫瘤免疫治療將會提高γδT細(xì)胞治療的反應(yīng)率并具有更好的治療效果。腫瘤微環(huán)境對γδT細(xì)胞的功能影響較大，如何糾正腫瘤微環(huán)境，逆轉(zhuǎn)γδT細(xì)胞的促腫瘤作用也是在未來的研究中我們應(yīng)該關(guān)注的問題。分泌IFN-γ和IL-17的γδT細(xì)胞亞群之間的平衡對于治療的效果有較大的影響，在未來的臨床試驗中應(yīng)該關(guān)注這一點，研究發(fā)現(xiàn)IL-23和TGF-β對于分泌IL-17的細(xì)胞的分化是至關(guān)重要的，可考慮使用抗IL-23或TGF-β的單克隆抗體阻止γδT細(xì)胞向γδT17細(xì)胞分化［47］。另一個需要關(guān)注的重要因素是微生物菌群的影響，目前已經(jīng)有文獻(xiàn)報道了腫瘤部位的共生菌群通過影響γδT細(xì)胞進(jìn)而影響腫瘤的進(jìn)展，可以考慮聯(lián)合抗生素治療清除不利的菌群［33］。在未來的研究中，仍需繼續(xù)探索如何提高γδT細(xì)胞治療的效果以及如何逆轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境對γδT細(xì)胞的影響，若解決了這些問題，γδT細(xì)胞免疫治療有望成為一種有巨大應(yīng)用前景的新型腫瘤免疫療法。