李芳蓉，牛娟，張建軍，趙云峰，韓秀鳳

（甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)教學(xué)部，甘肅定西 743000）

甘肅省定西市岷縣為“中國(guó)當(dāng)歸之鄉(xiāng)”，所產(chǎn)當(dāng)歸謂之“岷歸”，栽種和藥用歷史悠久、品質(zhì)優(yōu)良，為歷代醫(yī)家公認(rèn)的甘肅道地藥材[1]。當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸[Angelica Sinensis（Oliv.）Diels]的干燥根[2]，有補(bǔ)血活血、調(diào)經(jīng)止痛、扶正固本、潤(rùn)燥通便之功效，其藥用價(jià)值多樣化[3～4]，有“十方九歸”之美譽(yù)，藥食同源[5]。近年來(lái)，隨著生活水平提高及保健意識(shí)增強(qiáng)，當(dāng)歸藥材的市場(chǎng)需求量、生產(chǎn)規(guī)模和庫(kù)存量遞增，因其多糖類成分含量較高，傳統(tǒng)貯藏養(yǎng)護(hù)技術(shù)方法欠科學(xué)，貯藏期間易發(fā)生霉變、蟲(chóng)蛀、變質(zhì)等現(xiàn)象，影響藥材質(zhì)量和用藥安全有效，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)調(diào)查當(dāng)歸是甘肅省受倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)為害最嚴(yán)重的藥材之一[6]。目前當(dāng)歸貯藏養(yǎng)護(hù)多沿用傳統(tǒng)硫磺熏蒸陰干法，雖有較好的防霉、防蟲(chóng)蛀等效果[7]，但會(huì)影響其療效且有害人體健康[8]。若過(guò)度硫熏更會(huì)造成其化學(xué)成分和藥理作用的改變及殘留超標(biāo)[9]。因此，研究當(dāng)歸的科學(xué)綠色貯存及防霉防蟲(chóng)養(yǎng)護(hù)刻不容緩。

1 超聲清洗消除隱患

超聲技術(shù)在醫(yī)療衛(wèi)生、食品工業(yè)和環(huán)境保護(hù)等方面發(fā)揮著重要作用。超聲清洗主要是利用超聲空化效應(yīng)對(duì)物體表面污物撞擊、剝離，潔凈且不留死角[10]。超聲清洗中藥材作用快速?gòu)氐?，且空化效?yīng)能在細(xì)胞液與細(xì)胞壁間產(chǎn)生微射流及局部高熱高壓，抑制蟲(chóng)卵，殺滅細(xì)菌、霉菌、病菌等[11～13]。實(shí)現(xiàn)節(jié)水、節(jié)能、省時(shí)、省力，清潔，快速、高效洗滌，綠色環(huán)保，有效保護(hù)中草藥[14]，減少藥材有效成分損失量，是理想的中藥材清洗方法[15]。將當(dāng)歸藥材在貯藏保存前預(yù)先進(jìn)行超聲波清洗，提前消除隱患，有利于后期的貯藏養(yǎng)護(hù)。

2 超聲聯(lián)用養(yǎng)護(hù)的天然抑菌性高分子

天然抑菌性高分子在果蔬保鮮中應(yīng)用較多。通過(guò)采用果蔬和糧食保鮮方面應(yīng)用廣泛的殼聚糖、甘露聚糖等作為與超聲聯(lián)用養(yǎng)護(hù)的天然抑菌性高分子，進(jìn)行研究。

殼聚糖是一種理想綠色抗菌材料，來(lái)源豐富、價(jià)格低廉、多功能、無(wú)毒、潛力巨大的新型環(huán)保天然防腐劑[16]，具有可生物降解性、成膜性、生物相容性、抗菌譜廣性、高活性和再生性等特點(diǎn)[17～18]，廣泛應(yīng)用于食品、工農(nóng)業(yè)、化妝品、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域，抑菌活性良好，能有效防止水果在貯藏期腐爛并維持其品質(zhì)，故在食品果蔬保鮮方面的應(yīng)用尤為重要[19～20]。水溶性殼聚糖在酸性介質(zhì)中抑菌性能更好[21]，可以在貯藏期內(nèi)有效對(duì)中藥材防霉防蛀[22]。

甘露聚糖無(wú)色、無(wú)毒、無(wú)異味，是一種天然可再生的食品抑菌防腐劑，具有親水性、成膜性、抗菌性、可食用性等性能，可有效抑制真菌及細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖。水溶液可在果蔬表面形成一層薄膜[23～24]，有效阻止空氣氧化、減少水分蒸發(fā)、抑制病害微生物的生長(zhǎng)繁殖，降低呼吸強(qiáng)度，使果蔬保鮮[25～26]。經(jīng)甘露聚糖涂膜后的蘋(píng)果可有效防止褐變和保持水分等，感官保持效果明顯[27]。甘露聚糖還能有效防止食品腐敗變質(zhì)、發(fā)霉和遭受蟲(chóng)害，抗菌性較強(qiáng)[28～29]，能延長(zhǎng)包裝食品貨架期和抑制纖維素水解[30]。

將當(dāng)歸貯藏前預(yù)先超聲清洗，并利用其分散作用在藥材表面均勻涂布一層天然抑菌性高分子進(jìn)行聯(lián)用養(yǎng)護(hù)，使藥材與外界環(huán)境隔離并阻斷貯藏期細(xì)菌、霉菌和病毒的侵蝕，屬于安全、高效、無(wú)化學(xué)污染、綠色科學(xué)的當(dāng)歸藥材貯藏養(yǎng)護(hù)技術(shù)。

3 超聲-天然抑菌性高分子聯(lián)用技術(shù)養(yǎng)護(hù)當(dāng)歸的效果評(píng)價(jià)

將當(dāng)歸藥材超聲凈洗后，選取部分與抑菌性能的有機(jī)高分子聯(lián)用養(yǎng)護(hù)，并與僅超聲清洗的當(dāng)歸比較，根據(jù)各自貯存期內(nèi)外觀品質(zhì)改變情況和分析檢測(cè)主要有效成分含量的變化，綜合評(píng)價(jià)養(yǎng)護(hù)效果。若在18～24 個(gè)月實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)不出現(xiàn)霉變和蟲(chóng)蛀等，各有效成分變化不大，且仍符合藥典要求，即可進(jìn)一步優(yōu)選與超聲技術(shù)聯(lián)用的天然抑菌性高分子的最佳種類、最佳加入量及最佳條件，從而得到理想的超聲-天然抑菌性高分子聯(lián)用養(yǎng)護(hù)當(dāng)歸的科學(xué)方法。

3.1 待檢藥效成分

以當(dāng)歸的代表性或指標(biāo)性藥效成分作為超聲波聯(lián)用技術(shù)養(yǎng)護(hù)當(dāng)歸藥材后評(píng)價(jià)養(yǎng)護(hù)效果的待檢藥效成分。

阿魏酸、當(dāng)歸多糖、藁本內(nèi)酯、丁烯基苯酞和丁基苯酞[32]等是公認(rèn)的主要指標(biāo)性和代表性藥效成分。阿魏酸是歷年《中國(guó)藥典》規(guī)定的鑒定當(dāng)歸藥材質(zhì)量的標(biāo)志性檢測(cè)指標(biāo)，是其主要水溶性活性成分，阿魏酸可保護(hù)心臟、抗血栓和抑制血小板聚集[33～34]，抗抑郁和抗老年癡呆，能促進(jìn)清除自由基酶的產(chǎn)生并清除自由基，調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能。藁本內(nèi)酯是重要的鑒定當(dāng)歸真?zhèn)魏驮u(píng)定其質(zhì)量的特征指標(biāo)之一[35]，具有抗癌、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗動(dòng)脈粥樣硬化、神經(jīng)保護(hù)、抑制心肌肥大等藥理活性[36]。藁本內(nèi)酯能顯著提升老齡小鼠的力量與耐力，改善老齡小鼠運(yùn)動(dòng)能力[37]。丁基苯酞和丁烯基苯酞也是當(dāng)歸的主要藥效成分，能夠擴(kuò)張血管、抗心肌缺血缺氧，改善腦部微循環(huán)和抗抑郁等[38]。當(dāng)歸多糖是其主要水溶性成分，藥理作用和生物活性廣泛，能提高機(jī)體免疫力，促進(jìn)造血、抗癌、抗輻射損傷等[39]。

3.2 待檢藥效成分分析測(cè)定方法

3.2.1 HPLC 法分析測(cè)定阿魏酸、藁本內(nèi)酯、丁基苯酞和丁烯基苯酞

《中國(guó)藥典》2020年版對(duì)當(dāng)歸藥材阿魏酸等的含量分別進(jìn)行了限定。阿魏酸含量的測(cè)定多采用HPLC 法，何元等[40]建立了當(dāng)歸藥材HPLC 指紋圖譜，并測(cè)定了藥材及提取物中阿魏酸等成分的含量。徐金玲等[41]新建了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并整合了當(dāng)歸藥材的鑒別，增加了HPLC 法測(cè)定阿魏酸含量項(xiàng)目，方法準(zhǔn)確可靠、簡(jiǎn)便快捷、適用性良好。羅錚等[42]建立了精密度、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性符合指導(dǎo)原則要求的HPLC 測(cè)定當(dāng)歸中阿魏酸等5 種成分的方法。楊蕊菁等[43]采用HPLC 法同時(shí)測(cè)定當(dāng)歸中阿魏酸等9 種成分的含量準(zhǔn)確簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好的方法。黃玉宇等[44]以HPLC 測(cè)定檢測(cè)飲片及煎液中阿魏酸等含量，為按飲片類型分類規(guī)范處方的加水量標(biāo)準(zhǔn)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。馬紀(jì)偉等[45]采用HPLC 測(cè)定養(yǎng)血當(dāng)歸軟膠囊中阿魏酸的含量，方法簡(jiǎn)便易行，可作為養(yǎng)血當(dāng)歸膠囊的質(zhì)量控制方法。劉雪楓等[46]采用HPLC 法測(cè)定當(dāng)歸芍藥散中阿魏酸等含量，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、分離效果好。

藁本內(nèi)酯是當(dāng)歸揮發(fā)油主要組分和重要活性成分，是公認(rèn)的鑒定當(dāng)歸真?zhèn)魏驮u(píng)定其質(zhì)量的特征指標(biāo)[47～48]。HPLC 法是應(yīng)用最廣且重要的藁本內(nèi)酯測(cè)定方法[49～50]。潘娉娉等[51]建立了準(zhǔn)確穩(wěn)定、重復(fù)性好，可用于質(zhì)量控制的同時(shí)測(cè)定杜仲-當(dāng)歸藁本內(nèi)酯等5種成分含量的HPLC法。葉曉婭等[52]采用HPLC 法同時(shí)測(cè)定當(dāng)歸片中藁本內(nèi)酯等的含量，經(jīng)方法學(xué)考察均符合規(guī)定，可用于質(zhì)量控制。吳姣等[53]建立了準(zhǔn)確、可靠的當(dāng)歸膠囊藁本內(nèi)酯和阿魏酸含量的HLPC 法測(cè)定方法。陳方等[54]建立并優(yōu)化了簡(jiǎn)便、可靠、穩(wěn)定、可行的測(cè)定當(dāng)歸藁本內(nèi)酯含量的HPLC 指紋圖譜和測(cè)定方法。

丁烯基苯酞是當(dāng)歸揮發(fā)油的另一主要成分，其含量在當(dāng)歸揮發(fā)油中僅次于藁本內(nèi)酯[55]，是當(dāng)歸活血調(diào)經(jīng)的藥效成分[56]。鄢玉芬等[57]建立了準(zhǔn)確、可行的同時(shí)測(cè)定不同貯藏條件下川芎中丁烯基苯酞等10 種化學(xué)成分的方法。肖宇奇等[58]采用HPLC 法分析了當(dāng)歸樣品中不同生長(zhǎng)期化學(xué)成分丁烯基苯酞等的動(dòng)態(tài)變化。李冬華等[59]以HPLC法測(cè)定當(dāng)歸飲片中阿正丁烯基苯酞等的含量，用以建立和完善當(dāng)歸飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

丁基苯酞（3-正丁基苯酞）是當(dāng)歸又一重要的藥效成分，其測(cè)定主要以HPLC 法。王寧寧等[60]以HPLC 法研究3-正丁基苯酞在大鼠體內(nèi)的組織分布情況。丁軍霞等[61]建立了HPLC 法同時(shí)測(cè)定當(dāng)歸中正丁基苯酞等5 種成分及不確定度評(píng)定方法。鐘應(yīng)淮等[62]采用HPLC 法同時(shí)測(cè)定丁基苯酞等5 種成分的含量，結(jié)果表明方法穩(wěn)定可靠，可用于質(zhì)量控制。郭小藤等[63]采用HPLC 法同時(shí)測(cè)定川芎油丁基苯酞等的含量，方法簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)。

3.2.2 紫外可見(jiàn)光譜法測(cè)定當(dāng)歸多糖

當(dāng)歸多糖含量測(cè)定多采用UV-Vis 法[64]。張素斌等[65]采用苯酚-硫酸UV-Vis 法測(cè)定當(dāng)歸多糖含量對(duì)4 種當(dāng)歸多糖提取方法的比較研究。吳平安等[66]采用苯酚-硫酸UV-Vis 法測(cè)定當(dāng)歸中的多糖含量。劉云[67]醇提當(dāng)歸多糖并以采用苯酚-硫酸UV-Vis 法測(cè)定當(dāng)歸多糖含量。何先元等[68]以超聲提取當(dāng)歸多糖，以苯酚-硫酸UV-Vis 法測(cè)定其含量。許會(huì)生[69]建立了多糖含量測(cè)定的苯酚-硫酸UV-Vis 法，其研究和測(cè)定方法規(guī)范可靠。

4 小結(jié)

當(dāng)歸臨床應(yīng)用廣泛，但因貯藏養(yǎng)護(hù)技術(shù)方法欠科學(xué)，霉?fàn)€和蟲(chóng)蛀等各種變質(zhì)變異現(xiàn)象嚴(yán)重，科學(xué)貯藏養(yǎng)護(hù)勢(shì)在必行。超聲洗滌中藥材快速、環(huán)保、節(jié)能、節(jié)水，能夠抑制蟲(chóng)卵、殺死害蟲(chóng)、強(qiáng)烈殺滅細(xì)菌、霉菌、病菌等，藥效成分散失少。而天然抑菌性高分子在果蔬保鮮中應(yīng)用廣泛。養(yǎng)護(hù)后評(píng)價(jià)養(yǎng)護(hù)效果的待檢藥效成分為阿魏酸、藁本內(nèi)酯、丁烯基苯肽、丁基苯肽和當(dāng)歸多糖，測(cè)定方法分別為HPLC 法測(cè)定阿魏酸、藁本內(nèi)酯、丁烯基苯肽和丁基苯肽，UV-Vis 法測(cè)定當(dāng)歸多糖。各待檢成分代表性強(qiáng)，測(cè)定方法得當(dāng)，操作簡(jiǎn)便，穩(wěn)定性高、重現(xiàn)性好，可靠性強(qiáng)。將無(wú)殘毒、無(wú)公害、安全綠色的超聲-天然抑菌性高分子聯(lián)用貯藏養(yǎng)護(hù)當(dāng)歸，可提前消除隱患并進(jìn)一步保證貯藏期間防霉防蛀等，研究和應(yīng)用前景廣闊。