王艷芳

吉林省前衛(wèi)醫(yī)院病理科,吉林 長春 130021

BC是女性群體中發(fā)病率最高的惡性腫瘤，近些年患病群體有年輕化趨向，侵襲與轉(zhuǎn)移是造成治療失敗及患者死亡的主要因素。人體PD-L1也被稱之為CD279，位于染色體2q37.35，由細(xì)胞外區(qū)、跨膜區(qū)與胞內(nèi)區(qū)共同構(gòu)成?，F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)[1]，PD-L1在BC淋巴細(xì)胞、單核及巨噬細(xì)胞表面廣泛表達(dá)，在人類腫瘤細(xì)胞株內(nèi)表達(dá)上調(diào)，這提示PD-L1和腫瘤發(fā)生、發(fā)展間存在密切相關(guān)性，程序性死亡分子1(PD-1)是PD-L1的受體。目前，關(guān)于PD-L1作為BC免疫治療預(yù)測(cè)標(biāo)志物的研究偏少，故而探究其在BC組織內(nèi)的表達(dá)情況有一定現(xiàn)實(shí)意義，本文基于以上宗旨做出分析報(bào)道。

1 資料與方法

1.1一般資料 采集2017.8～2019.8期間我院120份BC石蠟標(biāo)本，基于腫瘤組織的核心區(qū)建設(shè)組織微陣列(TMA)。入選的120例患者年齡27～74歲；平均(51.8±10.9)歲；流體直徑0.7～7，平均(4.8±1.52)；結(jié)合《WHO乳腺腫瘤分類》[2]內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)判斷入組患者腫瘤分化程度:SBR I、II、III級(jí)分別有8、102、10例；把BC分為如下4組分子亞型：Luminnal A型15例、Luminnal B型47例、HER-2過表達(dá)型30例、TNBC型28例；TNM分期[3]：I+II期93例，III+IV期27例。

1.2方法 選用免疫組化SP法染色，用檸檬酸鈉溶液誘導(dǎo)5μm切片TMA組織抗原修復(fù)過程，過氧化氫抑制內(nèi)源性過氧化物酶表達(dá)過程，滴入事前稀釋的PD-L1(E1L3N)單克隆抗體，安放在37℃溫箱內(nèi)1h。采用標(biāo)準(zhǔn)DAB技術(shù)完成免疫染色，蘇木精溶液復(fù)染。

1.3判斷標(biāo)準(zhǔn) 局部或整個(gè)細(xì)胞膜染色(≥1+)腫瘤細(xì)胞在整個(gè)腫瘤中所占比例≥1%則判斷PD-L1為陽性，反之則為陰性；Ki67將20%設(shè)為截點(diǎn)，用于判斷PD-L1表達(dá)程度的高低。

2 結(jié) 果

2.1BC的臨床病理特征 出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯者分別有50例、25例，占41.7%、20.83%。SBR分類表明， I、II、III級(jí)分別有8、102、10例，占6.7%、85.0%、8.3%。免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)，ER、PR與HER-2陽性率依次為30.8%(37/120)、38.3%(46/120)、44.2%(53/120)。且還評(píng)估了Ki67的表達(dá)情況，高、低表達(dá)者依次有86例、54例，各占71.7%、28.3%。分子分型結(jié)果表明，Luminnal B型最為常見，占39.2%(47/120)。

2.2PD-L1表達(dá)和BC臨床病理參數(shù)間的相關(guān)性分析 PD-L1表達(dá)主要定位在腫瘤細(xì)胞細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)。入選的120例乳腺患者PD-LI陽性率為16.7%(20/120)，在BC患者TNBC型內(nèi)PD-L1的陽性率最高，為35.7%(10/28)，其次為HER-2過表達(dá)型，占16.7%(5/30)，Luminnal A型占13.3%(2/15)，Luminnal B型為6.3%(3/47)。不同分子分型者PD-L1表達(dá)情況之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)一步分析表明，PD-L1表達(dá)情況和BC組織分化程度、分子分型、瘤體直徑、ER狀態(tài)、PR狀態(tài)、HER狀態(tài)以及Ki67表達(dá)存在相關(guān)性(P<0.05)，與病患年齡、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與血管侵犯情況無相關(guān)性(P>0.05)。具體見表1。

表1 PD-L1表達(dá)和120例BC患者病理參數(shù)特征的相關(guān)性分析

3 討 論

程序性死亡分子1(PD-1)有兩個(gè)配體，即PD-L1與PD-L2，他們均是B7家族的成員。PD-L1蛋白在響應(yīng)LPS與GM-CSF處置后的巨噬細(xì)胞與樹突狀細(xì)胞(DC)上被上調(diào)，且在傳導(dǎo)TCR與B細(xì)胞受體信號(hào)時(shí)上調(diào)T細(xì)胞與B細(xì)胞，在靜息狀態(tài)的小鼠體內(nèi)，可以于心臟、、肺、胸腺、脾及腎內(nèi)檢出PD-L1 mRNA。采用IFN-γ處理PD-L1時(shí)其基本上在全部鼠腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，包括PA1骨髓瘤、P815肥大細(xì)胞瘤與B16黑素瘤內(nèi)。

PD-L1屬于I型跨膜蛋白，在非造血細(xì)胞和非淋巴器官內(nèi)組成型表達(dá) ，且在多種惡性腫瘤微環(huán)境內(nèi)上調(diào)。PD-L1誘導(dǎo)T細(xì)胞活化與增殖能力降低過程，抑制抗細(xì)胞凋亡分子表達(dá)，但促進(jìn)炎性細(xì)胞因素釋放過程，進(jìn)而削弱癌癥有關(guān)免疫細(xì)胞原性，抑制免疫應(yīng)答，以上這種機(jī)制誘導(dǎo)疾病進(jìn)展過程。

本次研究入選的120例乳腺患者PD-LI陽性率為16.7%，PD-L1表達(dá)情況和BC組織分化程度、分子分型、瘤體直徑、ER狀態(tài)、PR狀態(tài)、HER狀態(tài)以及Ki67高表達(dá)性等不良病理特征相關(guān)，HEQin等[4]部分研究結(jié)果相似，提示PD-LI為腫瘤侵入性偏高的指標(biāo)，并且PD-LI在TNBC內(nèi)的較高表達(dá)性可能會(huì)成為TNBC患者臨床靶向治療的靶標(biāo)，且可能是TNBC患者預(yù)后的重要標(biāo)志物之一。本次研究表明PD-L1表達(dá)和淋巴轉(zhuǎn)移之間無相關(guān)性，和過往文獻(xiàn)研究結(jié)果存在一定差異，分析其原因可能和納入樣本量偏少，患者較為單一相關(guān)?？筆D-LI單抗治療荷瘤小鼠模型提示明顯抑制腫瘤生長過程，腫瘤細(xì)胞被清除。局部完全緩解，聯(lián)合細(xì)胞毒性T細(xì)胞，和單純采用細(xì)胞毒性T細(xì)胞療法相比，較明顯提升了荷瘤小鼠的生存率，這提示PD-L1可能參與乳腺癌亞型的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移過程。

TNBC是一類高度異質(zhì)性腫瘤，盡管免疫表型均不表達(dá)ER、PR與HER-2，在其在生物學(xué)行為形成有很大異質(zhì)性，在黏液癌與微乳頭癌上不表達(dá)。綜合本文論述的內(nèi)容，可以看出PD-L1在TNBC內(nèi)高表達(dá)，可以作為TNBC患者臨床免疫治療的靶標(biāo)與預(yù)后標(biāo)記物；腫瘤直徑大、Ki67增殖指數(shù)高是PD-L1表達(dá)的危險(xiǎn)因素[5]。結(jié)合PD-L1在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)特征，筆者推測(cè)其可能和BC患者臨床治療效果相關(guān)，其可能會(huì)對(duì)后續(xù)幾年中BC患者免疫治療做出一定科學(xué)指導(dǎo)。