燕東　楊熊飛

【摘要】目的：探討西妥昔單抗聯(lián)合FOLFOX治療結(jié)直腸癌中miR-125b和miR-100表達(dá)的臨床意義。方法：選擇本院收治的39例轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者為研究對(duì)象，運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR方法對(duì)miR-125b和miR-100表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，然后將其分為四組，分別是miR-125b高表達(dá)（n=11）、低表達(dá)（n=28）;miR-100高表達(dá)（n=14）、低表達(dá)（n=25），均采用西妥昔單抗聯(lián)合FOLFOX治療，比較分析各組治療效果。結(jié)果：與miR-125b高表達(dá)組相比，miR-125b低表達(dá)組的治療有效率低（P<0.05）;miR-100高表達(dá)組的治療有效率低于miR-100低表達(dá)組（P<0.05）;同時(shí)，miR-125b高表達(dá)組的疾病進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)低于miR-125b低表達(dá)組;miR-100高表達(dá)組的疾病進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)高于miR-100低表達(dá)組;miR-125b高表達(dá)組的死亡風(fēng)險(xiǎn)高于miR-125b低表達(dá)組;miR-100高表達(dá)組的死亡風(fēng)險(xiǎn)高于miR-100低表達(dá)組。結(jié)論：在結(jié)直腸癌患者的臨床治療中，對(duì)于miR-125b高表達(dá)和miR-100低表達(dá)患者，采用FOLFOX聯(lián)合西妥昔單抗方案可以提高治療效果，延長患者生存時(shí)間。

【關(guān)鍵詞】西妥昔單抗;結(jié)直腸癌;miR-125b;miR-100

【中圖分類號(hào)】R574.63? ?【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A? ?【文章編號(hào)】2026-5328（2021）11--01

結(jié)直腸癌是比較常見的一種惡性腫瘤，在全球范圍內(nèi)，其發(fā)病率占有較高的比例，居于第三位。近年來，隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)水平的提高，尤其是腫瘤標(biāo)記物、肛腸鏡等技術(shù)的應(yīng)用，逐漸提高了結(jié)直腸癌的早期診斷率，但是對(duì)于轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌，還是具有較高的病死率，嚴(yán)重危害患者身心健康。當(dāng)前臨床上在治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌時(shí)，以氟尿嘧啶聯(lián)合伊立替康（FOLFIRI）或者奧沙利鉑（FOLFOX）的化療方案為主，雖然可以減輕患者癥狀，但是預(yù)后效果較差。而西妥昔單抗作為一種靶向藥物，其作用機(jī)制主要為通過將表皮生長因子受體（EGFR）信號(hào)通路阻斷，對(duì)腫瘤細(xì)胞的繁殖進(jìn)行抑制，對(duì)其消亡起到一定的促進(jìn)作用，從而提高治療效果。有文獻(xiàn)[1]報(bào)道，結(jié)直腸癌患者的腫瘤進(jìn)展與微小RNA有關(guān)，能夠?qū)⒛[瘤細(xì)胞的耐藥性充分反映出來，為判斷患者預(yù)后提供一個(gè)有效指標(biāo)，但是根據(jù)mir-125b和miR-100表達(dá)水平對(duì)化療效果進(jìn)行預(yù)測(cè)尚無統(tǒng)一定論。因此，本文對(duì)我院收治Kras、Nras、Braf野生型的轉(zhuǎn)移性左半結(jié)直腸癌患者，采用FOLFOX聯(lián)合西妥昔單抗聯(lián)合治療，檢測(cè)miR-100和miR-125b的表達(dá)并分析其意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1.資料和方法

1.1一般資料

選擇2019年6月-2021年6月期間醫(yī)院收治的39例結(jié)直腸癌患者為研究對(duì)象，年齡53-78歲，平均（65.3±9.1）歲，其中15例為女性、24例為男性，疾病類型：25例為直腸癌、14例為左半結(jié)腸癌。運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR方法對(duì)miR-125b和miR-100表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，然后將其分為四組，分別是miR-125b高表達(dá)（n=11）、低表達(dá)（n=28）;miR-100高表達(dá)（n=14）、低表達(dá)（n=25）。

1.2.1納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）與《中國結(jié)直腸癌診療規(guī)范（2017）版》中關(guān)于轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)相符;（2）基金檢測(cè)結(jié)果Kras、Nras、Braf均為野生型;（3）一線化療結(jié)束6個(gè)月或者既往未行化療者，臨床資料完善;（4）預(yù)計(jì)生存時(shí)間>3個(gè)月;（5）患者可以正常交流和溝通，且依從性較好。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）藥物禁忌證或者過敏史;（2）既往行結(jié)直腸癌手術(shù)者;（3）嚴(yán)重心肝腎功能病變者;（4）嚴(yán)重感染者;（5）合并其他惡性腫瘤者。

1.3方法

1.3.1治療方法

所有患者均運(yùn)用FOLFOX方案聯(lián)合西妥昔單抗治療，即將患者的體表面積作為基本依據(jù)，確定給藥劑量，第1周，運(yùn)用400mg.m-2西妥昔單抗對(duì)患者進(jìn)行靜脈滴注，控制好滴注時(shí)間，一般>120min，需要注意的是，用藥前，先運(yùn)用5mg地塞米松進(jìn)行靜脈推注。之后每周維持劑量為250mg.m2，滴注速度維持5ml.min-1，用藥前，運(yùn)用抗組胺藥物進(jìn)行肌肉注射。結(jié)束西妥昔單抗治療后60min，采用FOLFOX方案，即化療第1d，運(yùn)用200mg.m2亞葉酸鈣+100mg.m2奧沙利鉑對(duì)患者進(jìn)行靜脈滴注，然后運(yùn)用3.0g.m2氟尿嘧啶維持靜脈滴注48h，每2周重復(fù)1次，直到不可耐受的副反應(yīng)出現(xiàn)或者疾病進(jìn)展。

1.3.2檢測(cè)miRNA

取出液氮中保存的結(jié)直腸癌標(biāo)本，研磨成粉末狀，采用Trizol總RNA提取試劑盒，嚴(yán)格按照說明書要求，對(duì)標(biāo)本中的mRNA進(jìn)行提取，然后運(yùn)用紫外分光光度計(jì)對(duì)提取的miRNA純度和濃度進(jìn)行檢測(cè)。同時(shí)，根據(jù)miRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書，轉(zhuǎn)錄提取的RNA為cDNA，反應(yīng)條件為4°Cmin，95°C5min，37°C60min，運(yùn)用PCR試劑盒進(jìn)行PCR擴(kuò)增，設(shè)置所有反應(yīng)為3個(gè)復(fù)孔，反應(yīng)條件為70°C30s;58°C30s;94°C15s，95°C15min，循環(huán)30次。運(yùn)用Lightcyler480實(shí)時(shí)定量PCR儀檢測(cè)，對(duì)相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行計(jì)算，并且根據(jù)結(jié)果運(yùn)用-△CT對(duì)miRNA相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行計(jì)算，其中miR-125b低表達(dá)為≤3.124;高表達(dá)為>3.124;miR-100低表達(dá)為≤-6.200;高表達(dá)為>-6.200。

1.4療效判定標(biāo)準(zhǔn)

評(píng)價(jià)治療效果：（1）完全緩解（CR）。靶病灶全部消失;（2）部分緩解（PR）。所有靶病灶直徑之和較基線水平減少≥30%;（3）穩(wěn)定（SD）。靶病灶直徑未增加或者減少<30%;（4）病情進(jìn)展（PD）。新的病灶出現(xiàn)或者靶病灶半徑總和增加20%[2]。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

由SPSS20.0軟件分析數(shù)據(jù)，其中計(jì)數(shù)資料采用百分率（%）表示，組間比較行X2檢驗(yàn)，以P<0.05表示有差異。

2.結(jié)果

2.1miR-100不同表達(dá)水平的化療效果比較

與miR-100低表達(dá)組相比，miR-100高表達(dá)組的治療有效率較低（P<0.05），見表1。

2.2miR-125b不同表達(dá)水平的化療效果對(duì)比

miR-125b低表達(dá)組的治療有效率低于miR-125b高表達(dá)組（P<0.05），見表2。

2.3miR-125b和miR-100不同表達(dá)水平的無進(jìn)展生存率對(duì)比

本次研究顯示，miR-125b高表達(dá)組的疾病進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)低于miR-125b低表達(dá)組;miR-100高表達(dá)組的疾病進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)高于miR-100低表達(dá)組;miR-125b高表達(dá)組的死亡風(fēng)險(xiǎn)高于miR-125b低表達(dá)組;miR-100高表達(dá)組的死亡風(fēng)險(xiǎn)高于miR-100低表達(dá)組。

3.討論

mRNZ作為人體內(nèi)高度保守的一種單鏈非編碼RNA，其結(jié)合mRNA后，能夠?qū)RNA的降解或轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)節(jié)，從而對(duì)人體細(xì)胞的生物行為如凋亡、增殖等產(chǎn)生直接影響。研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌患者腫瘤細(xì)胞的耐藥性與miR-125b和miR-100有關(guān)，并且可以將表達(dá)水平作為判斷化療效果的一個(gè)有效指標(biāo)。有文獻(xiàn)報(bào)道，miR-125b具有抑癌基因的作用，并且患者分化程度與其水平呈正比關(guān)系，可以獲得較好預(yù)后[3]。本次研究顯示，經(jīng)西妥昔單抗靶向生物治療后，miR-125b高表達(dá)和miR-100低表達(dá)患者均獲得較好療效。分析原因主要為，miR可以正向調(diào)節(jié)耐藥腫瘤細(xì)胞增殖，其低表達(dá)能夠使周圍耐藥腫瘤的增殖和再生減少，使患者預(yù)后得到改善。而miR-125b能夠使腫瘤細(xì)胞在組織中的侵襲作用減緩，從而降低患者的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)率[4]。同時(shí)，miR-125b高表達(dá)組和miR-100低表達(dá)組患者的疾病進(jìn)展和死亡風(fēng)險(xiǎn)均較低，提示患者預(yù)后較好，其原因主要為miR-125b和miR-100低表達(dá)患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移少，腫瘤分化程度高，且化療效果較好，這一結(jié)果與李志發(fā)[5]等研究報(bào)道基本一致。

綜上所述，臨床上在治療Kras、Nras、Braf野生型的轉(zhuǎn)移性左半結(jié)直腸癌時(shí)，對(duì)于miR-125b高表達(dá)和miR-100低表達(dá)患者，運(yùn)用FOLFOX聯(lián)合西妥昔單抗方案的效果較好，能夠使患者生存時(shí)間延長，有助于改善患者預(yù)后，值得推廣。

參考文獻(xiàn)：

[1]張令巧.西妥昔單抗與化療一線治療KRAS/RAS野生型轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的療效及預(yù)后因素分析[J].實(shí)用癌癥雜志，2021，36（10）：1690-1692+1710.

[2]李辰翔.西妥昔單抗聯(lián)合FOLFOX4化療方案治療晚期直腸癌分析[J].實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2021，21（13）：48-49.

[3]何婉，HEINEMANN V，VON WEIKERSTHAL L F，DECKER T.FOLFIRI聯(lián)合西妥昔單抗或貝伐珠單抗治療晚期結(jié)直腸癌：隨機(jī)臨床試驗(yàn)FIRE-3的最終生存及符合方案分析[J].結(jié)直腸肛門外科，2021，27（01）：77-79.

[4]張善信.袁偉.唐萬燕.等.微小RNA-100表達(dá)與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)性[J].中華腫瘤雜志，2015，37（8）：603-608.

[5]李志發(fā).陳戎.吳小兵.等.miR-23a和miR-125b在進(jìn)展期結(jié)直腸癌中表達(dá)水平的研究[J].消化腫瘤雜志（電子版），2018，10（1）：25-28.