王 倩，何 濤，周佳麗，劉 寧，湯 爽，劉傳鑫，黃建梅

·循證醫(yī)學與臨床用藥·

Meta分析關聯(lián)網絡藥理學的補腎活血湯治療糖尿病腎病的臨床評價及其潛在作用機制探析

王 倩，何 濤，周佳麗，劉 寧，湯 爽，劉傳鑫*，黃建梅*

北京中醫(yī)藥大學中藥學院，北京 100029

整合Meta分析和網絡藥理學策略，評價補腎活血湯治療糖尿病腎病的臨床療效，初步探索其干預機制。首先通過Meta分析，全面檢索補腎活血湯治療糖尿病腎病隨機對照試驗（randomized controlled trial，RCT）研究的中英文文獻，基于納排標準，確定定量文獻，采用Review Manager對納入數據統(tǒng)計分析；然后基于網絡藥理學，篩選補腎活血湯中的化學成分及其作用靶點、疾病靶點、共有靶點等相關信息，隨后基于生物信息學技術，進行關鍵通路的相關注釋，探討補腎活血湯干預糖尿病腎病的潛在機制。共納入19篇RCTs文獻，共計1502例受試者，Meta分析結果顯示，在有效率、血糖、血脂以及腎功能指標方面，治療組優(yōu)于對照組，具有統(tǒng)計學差異（＜0.05）；通過在線數據庫共得到559個化學成分和2306個潛在靶標，其中201個成分、145個靶標和185條通路與干預的糖尿病腎病關系極為密切，主要涉及晚期糖基化終末產物/AGEs受體（advanced glycation end products/AGEs receptor，AGE-RAGE）信號通路、胰島素抵抗、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）信號通路、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）信號通路等分子過程?，F(xiàn)有證據表明，在西醫(yī)常規(guī)治療基礎上加用補腎活血湯能提高糖尿病腎病的臨床療效，并在降糖、調血脂和保護腎功能方面具有一定優(yōu)勢，但整體證據級別較低，仍需進行大規(guī)模、多中心的RCTs進一步支持；補腎活血湯干預糖尿病腎病是多成分、多靶標共同作用的綜合性結果，其主要通過干預氧化應激、炎癥反應、多元醇通路、胰島素途徑、糖脂代謝、細胞凋亡等途徑達到治療糖尿病腎病的目的。在Meta分析和網絡藥理學聯(lián)合應用的基礎上進行了科研嘗試，也為其他藥物的臨床評價及機制研究提供參考。

補腎活血湯；糖尿病腎??；Meta分析；網絡藥理學；臨床評價；潛在作用機制

糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy）是一類由糖尿病所誘發(fā)的腎臟疾病，臨床表現(xiàn)為腎動脈壓增高，腎小球增生，基底膜增厚，腎小球高灌注，腎臟功能失常等[1]。現(xiàn)代流行病學的研究表明，由于糖尿病腎病的隱蔽性，待其病理活檢確診時多已進入中晚期，具有較大的治療難度，且患者預后較差[2]。目前，糖尿病腎病的診療環(huán)境以西醫(yī)藥為主流，其通常采取調血脂、降血壓、控制血糖、改善微循環(huán)等方法以減緩糖尿病腎病的病程。然而，其治療往往未能達到滿意療效，且長期服用會導致肝腎損傷、致敏等諸多副作用[3]。

補腎活血湯出自《傷科大成》，方中君藥為黃芪，臣藥為丹參，佐使藥為白術、茯苓、山藥、菟絲子、川芎、懷牛膝、澤瀉，是典型的補腎活血類方劑[4]，其具有補腎壯筋、活血止痛之功效。目前，已有部分研究發(fā)現(xiàn)，補腎活血湯可改善糖代謝，調控血脂水平[5]，但仍然缺乏足夠的循證依據，且干預機制尚不明確。

基于以上研究現(xiàn)狀，本研究首先基于Meta分析，以西醫(yī)常規(guī)診療為對照組，補腎活血湯聯(lián)合常規(guī)治療為觀察組，對2組的治療效果進行評價，全面綜合地分析其對糖尿病腎病患者的血糖、血脂、血壓等結局指標的影響，為臨床應用提供循證支持。此外，在Meta分析的基礎上，進一步應用網絡藥理學方法，初步探索補腎活血湯治療糖尿病腎病的潛在作用機制，為后續(xù)的分子生物學研究提供參考。

1 方法

1.1 Meta分析

1.1.1 文獻納入標準 研究人群應符合2019年世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）公布的糖尿病診斷標準[6]，即空腹血糖≥7.0 mmol/L（126 mg/dL），餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L（200 mg/dL）；尿白蛋白/肌酐高于30 mg/g持續(xù)超過3個月或估算腎小球濾過率＜60 mL/(min·1.73 m2)（糖尿病腎病）或尿微量白蛋白排泄率在20～200 μg/mL（早期糖尿病腎?。Ｋ醒芯咳巳簾o年齡、性別以及糖尿病病程的嚴格限制。所有納入研究均為臨床隨機對照試驗。

1.1.2 文獻排除標準 動物實驗、文獻綜述、回顧性研究、重復發(fā)表的文獻；臨床研究設計不設對照組，非臨床隨機對照試驗；患者具有其他腎臟合并癥（如原發(fā)性腎?。?。

1.1.3 干預措施 對照組采用西醫(yī)對癥基礎方法（如基礎糖尿病教育，給予卡托普利或纈沙坦等）治療糖尿病腎病；試驗組在對照組基礎上加用中藥補腎活血湯干預糖尿病腎病。

1.1.4 結局指標 空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白、24 h尿微量蛋白排泄量、血肌酐。

1.1.5 文獻檢索策略 全面檢索中文期刊4大數據庫：中國知網（CNKI，https://www.cnki.net/）、維普資訊中文期刊服務平臺（VIP，http://www.cqvip. com/）、萬方期刊數據庫（WANGFANG，http://www. wanfangdata.com.cn/index.html）和中國生物醫(yī)學文獻數據庫（Sinomed，http://www.sinomed.ac.cn/）；英文3大數據庫：Pubmed（https://www.ncbi.nlm.nih. gov/）、Cochrane Library（https://www.cochrane.org/ welcome）和Web of Science（http://isiknowledge.com）。

檢索文獻語種僅限于中英文，檢索時間從各數據庫建庫至2020年5月。具體檢索方式如下：主題詞結合自由詞（同義詞），中文檢索詞有“補腎活血湯”“糖尿病腎病”等。英文檢索詞有“Bushenhuoxue Decoction”“diabetic nephropathy”等。

1.1.6 文獻篩選及其質量評價 將上述得到的所有文獻，通過2位研究人員獨立按照納入和排除標準分別閱讀題目和摘要進行首次篩選，進一步查找并閱讀全文進行二次篩選。隨后，對符合納入標準的文獻基于數據提取表，分別提取相關數據。具體內容包括：文獻的題目、第1作者與通信作者、發(fā)表單位、發(fā)表時間、干預措施和觀察指標等。由2位研究員“背對背”獨立的按照Cochrane風險偏倚評估工具[7]對納入文獻進行評價，其內容包括以下7個方面：①隨機序列的產生；②分配隱藏；③對受試者和干預提供者施盲；④對結果評價者施盲；⑤結果數據不完整；⑥選擇性結果報告；⑦其他偏倚來源。“l(fā)ow risk”表示低偏倚風險，“high risk”表示高偏倚風險，“unclear risk”表示依據文獻提供的信息未能明確的風險判斷。

1.1.7 數據統(tǒng)計與分析 采用Review Manager 5.3對上述文獻進行Meta分析，首先對納入文獻進行異質性分析，若≥0.1且2≤50%可認為多個同類研究間具有同質性，選用固定效應模型進行分析；若＜0.1或2＞50%時采用隨機效應模型進行分析。計數資料采用比值比（odds ratio，OR），計量資料采用標準均數差（standard mean difference，SMD）表示，兩者均用95%可信區(qū)間（credibility interval，CI）表達其療效分析統(tǒng)計量。分析結果用森林圖表示或在表格中列出結果，發(fā)表偏倚用漏斗圖表示。

1.2 網絡藥理學方法

1.2.1 補腎活血湯化學成分庫的建立 基于中藥分子機制生物信息學分析工具（Bioinformatics Analysis Tool for Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine，BATMAN-TCM，http://bionet. ncpsb.org/batman-tcm/）、中藥系統(tǒng)藥理學平臺（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology，TCMSP，http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php）、中藥綜合數據庫（Traditional Chinese Medicines Integrated Database，TCMID，http://183.129.215.33/tcmid/）等數據庫收集補腎活血湯中各中藥的化學成分，構建其化學成分庫。

1.2.2 “化學成分-靶標”數據庫的構建 “化學成分-靶標”的構建來源于2個方面：（1）基于在線數據進行預測：通過STITCH（http://stitch.embl.de/）、DRAR-CPI（http://cpi.bio-x.cn/drar/）和Swiss Target Prediction（http://www.swisstargetprediction.ch/）預測補腎活血湯中化學成分的作用靶標。（2）基于中藥數據庫進行預測：通過TCMSP、BANTAMAN- TCM、TCMID等數據庫篩選各化學成分作用靶標并進行整合，通過UniProt數據庫（https://www. uniprot.org/）校正靶標為人源官方的標準基因名。

1.2.3 “糖尿病腎病-靶標”數據庫的構建 通過在GeneCards數據庫（http://www.genecards.org/）、比較基因組學毒理數據庫（Comparative Toxicogenomics Database，CTD，http://ctdbase.org/）、治療靶點數據庫（Therapeutic Target Database，TTD，http://db. idrblab.net/ttd/）搜索欄中鍵入關鍵詞“糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy、diabetic kidney disease）”篩選已報道的、與糖尿病腎病相關且標記“marker/ mechanism”的基因，去除重復項得到“糖尿病腎病-靶標”數據庫。

1.2.4 蛋白互作網絡的構建與分析 蛋白質-蛋白質相互作用（protein-protein interaction，PPI）基于String平臺得以實現(xiàn)。將所獲取的共有靶標導入String數據庫，選擇人源，打分默認0.4[8]，得到TSV格式，保留節(jié)點（Node1、Node）相關信息，隨后導入Cytoscape分析相互作用網絡。以節(jié)點反映網絡中連接度（degree）的大小，得到靶標之間相互作用的數據?；贑ytoscape中的“network analyer”整體網絡進行拓撲學研究，degree為重要參考，進一步計算節(jié)點的連接度、接近中心性（closeness centrality，CC）和中介中心度（betweenness centrality，BC）共3個拓撲結構特征值，以尋找網絡中的關鍵靶標。

1.2.5 基因本體論（gene ontology，GO）生物分析與京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路富集分析 為了揭示互作蛋白在基因功能上的富集情況，通過生物過程（biology process）、分子功能（molecular function）、細胞定位（cellular location）3個維度對基因進行說明與注釋。通路分析采用KEGG，其可以直觀檢測靶標參與的通路。利用Cytoscape軟件的Bingo插件和DAVID數據庫（https://david.ncifcrf. gov/），基于共有靶標篩選來源為人源、錯誤發(fā)現(xiàn)率（false discovery rate，F(xiàn)DR）低（＜0.05）的關鍵通路和生物過程。

2 結果

2.1 Meta分析結果

2.1.1 文獻檢索及納入結果 基于上述檢索策略，共檢索到701篇中英文文獻，去除重復后，共得到347個唯一項，其中中文文獻346篇，英文文獻1篇。通過進一步閱讀文獻的題目、摘要和全文，最終納入19篇中文文獻，共計1502例患者。文獻篩選流程及結果見圖1。

2.1.2 納入文獻基本特征 所納入研究中年齡、性別、病程等基線比較無統(tǒng)計學差異（＞0.05），具可比性。共納入19項研究，合計1502例患者，其中試驗組757例，對照組745例，具體信息見表1。

圖1 文獻篩選流程

表1 納入文獻的基線表征

續(xù)表1

T-試驗組 C-對照組 M-男性 F-女性 ①空腹血糖 ②餐后2 h血糖 ③三酰甘油 ④總膽固醇 ⑤糖化血紅蛋白 ⑥24 h尿蛋白排泄量 ⑦24 h尿微量白蛋白排泄量 ⑧血流動力學 ⑨高密度脂蛋白 ⑩血肌酐 ?尿素氮 ?尿微量白蛋白與肌酐的比值 ?低密度脂蛋白 ?炎癥因子

T-test group C-control group M-male F-female ①fasting blood sugar ②2 h postprandial blood glucose ③triglyceride ④total cholesterol ⑤glycosylated hemoglobin A1c ⑥24 h urinary albumin excretion rates ⑦24 h microalbuminuria ⑧hemodynamics ⑨high density lipoprotein ⑩serum creatinine ?blood urea nitrogen ?microalbumin creatinine ratio ?low density lipoprotein ?inflammatory factor

2.1.3 納入研究的偏倚風險評價 基于Cochrane協(xié)作網所提供偏倚風險評估策略，對納入的19篇中文文獻進行系統(tǒng)的質量評價，評估結果采用“不清楚”“低風險”“高風險”進行描述。本研究所納入的所有研究[8-26]均提及了隨機分組，其中7項研究[8-9,12,20-22,26]明確描述了以速記數字表進行隨機分組，因此給予“低風險”評價；1項研究[25]采用就診順序進行分組，屬于偽隨機范疇，給予“高風險”評價；其余11項研究均描述為隨機數字的生成方式，無法判斷隨機方法是否正確，均給予“不清楚”評價。所納入的研究中均未提及分配隱藏，均給予“不清楚”評價。有1項研究[15]說明了是否施盲，給予“低風險”評價，其余18項研究均未提及對受試者、研究員、結局測量人員施盲的方法，給予“不清楚”評價。

所納入研究有3項[11,14-15]未明確說明有效率，屬結局指標不完整范疇，給予“高風險”評價，其余文獻均未有明確的結局指標，數據完整，給予“低風險”評價。所納入研究未發(fā)現(xiàn)有重復發(fā)表和已發(fā)表偏倚，給予“低風險”評價。其他偏倚未知，給予“不清楚”評價，具體信息見圖2。

2.1.4 臨床綜合有效率分析 所納入的研究中，共有16項研究報道了臨床綜合有效率，同質性檢驗結果顯示具有明確的同質性 [Chi2＝8.15，df＝15（＝0.92），2＝0]，因此基于固定效應模型進行分析。結果顯示，試驗組與對照組比較，2組綜合有效率具有統(tǒng)計學差異 [OR＝3.76，95% CI（2.83，4.99），＝9.17，＜0.000 01]，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可提高臨床綜合有效率，見圖3。

圖2 所有納入研究的整體偏倚風險(A)和具體偏倚風險(B)

2.1.5 調控血糖的療效評價 基于Meta分析觀察補腎活血湯調控糖尿病腎病空腹血糖的指標評價，共納入10項研究，異質性檢驗結果為 [Chi2＝40.80，df＝9（＜0.000 01），2＝78%]，故采用隨機效應模型。Meta分析結果（表2）顯示，試驗組與對照組比較，2組空腹血糖水平具有統(tǒng)計學差異 [SMD＝?0.72，95% CI（?1.03，?0.41），＜0.000 01]，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可降低空腹血糖水平。分析餐后2 h血糖指標，共納入8項研究，異質性檢驗結果為 [Chi2＝24.26，df＝7（＝0.001），2＝71%]，故采用隨機效應模型。Meta分析結果（表2）顯示，試驗組與對照組比較，2組餐后2 h血糖水平具有統(tǒng)計學差異[SMD＝?0.65，95% CI（?0.96，?0.34），＜0.000 1]，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可降低餐后2 h血糖水平。分析糖化血紅蛋白指標，共納入7項研究，異質性檢驗結果為 [Chi2＝113.95，df＝6（＜0.000 01），2＝95%]，故采用隨機效應模型。Meta分析結果（表2）顯示，試驗組與對照組比較，2組糖化血紅蛋白水平具有統(tǒng)計學差異 [SMD＝?1.21，95% CI（?2.03，?0.39），＝0.004]，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可降低糖化血紅蛋白水平。

2.1.6 調控血脂的療效評價 基于Meta分析觀察補腎活血湯調控糖尿病腎病三酰甘油的指標評價，共納入6項研究，異質性檢驗結果為 [Chi2＝101.04，df＝5（＜0.000 01），2＝95%]，故采用隨機效應模型。Meta分析結果（表2）顯示，試驗組與對照組比較，2組三酰甘油水平具有統(tǒng)計學差異 [SMD＝?1.24，95% CI（?2.16，?0.33），＝0.008]，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可降低三酰甘油水平。分析總膽固醇指標，共納入6項研究，異質性檢驗結果為 [Chi2＝25.48，df＝5（＝0.000 1），2＝80%]，故采用隨機效應模型。Meta分析結果（表2）顯示，試驗組與對照組比較，2組總膽固醇水平具有統(tǒng)計學差異 [SMD＝?1.30，95% CI（?1.76，?0.85），＜0.000 01]，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可降低總膽固醇水平。分析低密度脂蛋白指標，共納入3項研究，異質性檢驗結果為 [Chi2＝0.07，df＝2（＝0.97），2＝0]，故采用固定效應模型。Meta分析結果（表2）顯示，試驗組與對照組比較，2組低密度脂蛋白水平具有統(tǒng)計學差異 [SMD＝?0.85，95% CI（?1.13，?0.57），＜0.000 01]，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可降低低密度脂蛋白水平。

2.1.7 調控腎功能的療效評價 基于Meta分析觀察補腎活血湯調控糖尿病腎病24 h尿蛋白排泄量的指標評價，共納入7項研究，異質性檢驗結果為 [Chi2＝42.82，df＝6（＜0.000 01），2＝86%]，故采用隨機效應模型。Meta分析結果（表2）顯示，試驗組與對照組比較，2組24 h尿蛋白排泄量水平具有統(tǒng)計學差異 [SMD＝?37.33，95% CI（?43.66，?30.99），＜0.000 01]，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可減少24 h尿蛋白排泄量。分析血肌酐指標，共納入7項研究，異質性檢驗結果為 [Chi2＝164.21，df＝6（＜0.000 01），2＝96%]，故采用隨機效應模型。Meta分析結果（表2）顯示，試驗組與對照組比較，2組血肌酐水平具有統(tǒng)計學差異 [SMD＝?1.77，95% CI（?2.77，?0.76），＝0.000 6]，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可降低血肌酐水平。

2.1.8 安全性評價 所納入的文獻中，共有3項研究[15,24-25]報道了臨床應用過程中的安全性研究與藥物警戒，結果顯示，服用補腎活血湯的過程中，并未發(fā)現(xiàn)明確的肝腎功能和心電圖異常。其余16篇均未見不良反應，所有納入的文獻均未出現(xiàn)嚴重的不良反應。

2.1.9 發(fā)表偏倚分析 基于臨床有效性結局，共納入19篇文獻，漏斗圖顯示以對稱軸為界，左側6篇文獻，右側13篇文獻，所納入的文獻不對稱，表明存在發(fā)表偏倚，具體見圖4。

2.1.10 敏感性分析 基于STATA軟件進行敏感性分析，對臨床總有效率結局指標總體合并效應量運用逐一排除法分別進行檢驗，即每次排除1個獨立研究，對剩余研究重新進行Meta分析，從而判斷結果穩(wěn)定性。如圖5所示，合并效應量未發(fā)生質的變化，說明本研究結果穩(wěn)定性較好。

2.2 網絡藥理學結果

2.2.1 補腎活血湯化學成分庫的建立 基于各在線數據庫，共收集補腎活血湯中的化學成分559個，其中黃芪72個，丹參85個，白術31個，茯苓58個，山藥41個，菟絲子21個，川芎182個，牛膝22個，澤瀉47個。

2.2.2 “化學成分-靶標”數據庫的構建 基于各化學成分數據庫，共篩選和整理出補腎活血湯共計2306個靶標，去除重復項后為1161個。其中，黃芪227個，丹參446個，白術33個，茯苓338個，山藥401個，菟絲子6個，川芎758個，牛膝54個，澤瀉43個。此外，在預測過程中，由于存在部分化合物相對分子質量較大，無法預測靶標信息，或無法獲取靶標信息，因此，實際共有335個化學成分參與靶標分析。

表2 臨床結局指標的組間比較

圖4 發(fā)表偏倚漏斗圖

2.2.3 “糖尿病腎病-靶標”數據庫的構建 以“diabetic nephropathy”“diabetic kidney disease”為關鍵詞，CTD（comparative Toxicogenomics Database，http://ctdbase.org/）中找到46個標記有“marker/mechanism”的疾病靶標；TTD（Therapeutic Target Database，http://db.idrblab.org/ttd/）找到19個疾病靶標；Genecard（https://www.genecards.org/）中找到633個疾病靶標，合并去重后共得到667個疾病靶點。

圖5 臨床總有效率敏感性分析

2.2.4 共有靶點的獲取 將得到的2306個藥物潛在靶標和633個疾病靶標進行比對，得到兩者的交集靶標，共計145個共有靶點，這些靶標被認為是補腎活血湯治療糖尿病腎病的潛在作用靶標?；?45個共有靶點（圖6-A、D），進一步進行反向篩選，發(fā)現(xiàn)補腎活血湯中201個化學成分與糖尿病腎病關系極為密切，是治療糖尿病腎病的潛在藥效物質基礎。

2.2.5 PPI網絡的構建與分析 將上述145個作用靶蛋白導入STRING蛋白互作數據庫，限定來源為人源，獲取靶標對相互作用關系，導入Cytoscape軟件進行PPI網絡的拓撲學分析，共涉及136個節(jié)點（不包括9個孤立節(jié)點）、2249條邊，見圖6-B和表3。

2.2.6 GO生物分析與KEGG通路分析 將上述145個共有靶點導入Cytoscape軟件的Bingo插件和DAVID在線數據庫進行通路分析，F(xiàn)DR＜0.05的生物途徑。在GO分析中，生物過程共得到2402條GO-terms，主要涉及“對含氧化合物的反應”“對有機物的反應”“對化學物質的反應”相關作用途徑；分子功能共捕獲209個GO-terms，主要與“信號受體結合”“受體配體活性”“細胞因子受體結合”較為密切；細胞成分共富集得到105個GO-terms，主要參與“細胞外間隙”“細胞外區(qū)域”“囊泡”等相關定位。KEGG通路分析中發(fā)現(xiàn)了187條相關通路（pathway），晚期糖基化終末產物/AGEs受體（advanced glycation end products/AGEs receptor，AGE-RAGE）信號通路、胰島素抵抗（insulin resistance，IR）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）信號通路、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）信號通路等相關通路與補腎活血湯治療糖尿病腎病極為密切，GO和KEGG富集分析見圖6-C。

A-共有靶點的獲取 B-共有靶點蛋白互作模式圖 C-GO和KEGG通路分析（C1：生物途徑分析，C2：分子功能分析，C3：細胞成分分析，C4：KEGG通路分析） D-補腎活血湯“化學成分-共有靶點-糖尿病腎病”網絡圖

表3 蛋白互作的拓撲學參數分析(前30個)

3 討論

3.1 臨床有效性分析

現(xiàn)代醫(yī)學研究表明[29]，糖尿病腎病的發(fā)病機制目前普遍認為有糖脂代謝紊亂[30-31]、氧化應激[32-34]、炎性介質表達[35]、細胞因子活化、多元醇途徑的激動[36]、腎臟血流動力學改變[37-38]及遺傳因素[39-40]等諸多方面。盡管西醫(yī)臨床常采用調血脂、降糖、降壓、糖尿病科學教育等多種方式聯(lián)動，控制糖尿病腎病病程，但由于藥物耐受性、副作用等因素，疾病的治療水平仍然有限。中醫(yī)學認為，糖尿病腎病屬于“關格”“尿濁”“水腫”“虛勞”等范疇[25]，其病因學來源為“初為消渴”，隨病程進展?jié)u生變證，“虛勞”為其最終致病結果[41]。近代研究認為糖尿病腎病的病機學說基本分為脾腎虧虛[42]、氣陰兩虛[43]、腎虛血癖[44]、絡脈癥瘕[45]、毒損腎絡[46]。絕大多數腎病患者均存在一定程度的“腎虛”“血瘀”，因此臨床常采用“補腎”與“活血”的方式進行治療。本研究所納入的16篇文獻均分析了補腎活血湯治療糖尿病腎病的總有效率，其中評估血糖水平的有13項[9-10,12-14,16,18,20-21,23,25-27]，評估血脂的有6項[10,13,18,20,23,27]，評估腎功能有9項[10,12,14,18-19,21,23,26-27]，所有指標均具有統(tǒng)計學意義。結果提示，在西醫(yī)常規(guī)治療的基礎上聯(lián)用補腎活血湯治療糖尿病腎病的療效優(yōu)于僅用西醫(yī)常規(guī)治療，其可提高臨床綜合有效率，改善血糖、血脂與腎功能水平。

3.2 對臨床研究的建議

本研究盡管嚴格控制共同干預措施，即在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合補腎活血湯。但各研究的治療療程及劑量仍有差異，因此終端結局效應仍有一定差別。因此，本研究仍需更多設計精煉、樣本較多、操作嚴格、規(guī)模較大、多中心聯(lián)動的隨機對照試驗予以支持。故建議臨床試驗應注重提高方法學質量，清晰明確地描述隨機分配、分配隱藏、施盲對象等具體細節(jié)，規(guī)范臨床報告，為后續(xù)的臨床研究提供更好的循證醫(yī)學證據。

3.3 潛在的干預機制與臨床指標的聯(lián)系分析

在上述Meta分析結果的基礎上，為初步探索補腎活血湯治療糖尿病腎病的潛在作用機制，進一步進行網絡藥理學實踐。結果表明，在明確補腎活血湯共559個化學成分的基礎上，通過反向篩選發(fā)現(xiàn)201個潛在藥效成分并進一步作用于胰島素（insulin，INS）、白細胞介素-6（intedeukin-6，IL-6）、血清白蛋白（albumin，ALB）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）、胰島素樣生長因子1（insulin-like growth factor 1，IGF1）等核心靶標，從而調節(jié)相關分子途徑，進一步延緩和抑制糖尿病腎病的有害結局事件的發(fā)生。

對補腎活血湯中的化學成分分析，從目前的研究可以發(fā)現(xiàn)，補腎活血湯中所有中藥均有不同程度的防治糖尿病的作用，本研究表明，基于網絡藥理學的反向篩選，發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷[47-58]、丹參酮IIA[59]、隱丹參酮、丹皮酚、丹酚酸[60]、白術內酯Ⅰ[61-62]、茯苓素[63-64]、山藥多糖[65-66]、菟絲子多糖[67-68]、蒿本內酯[69]、川芎嗪[70]、蛻皮甾醇[71-72]、24-乙酰澤瀉醇A[73-74]等化學成分可以直接調控糖尿病腎病疾病靶標，是治療糖尿病腎病的潛在藥效物質基礎。

基于上述文獻調研情況，從分子靶點和相關通路的角度分析，本研究基于共有靶點，采用GO和KEGG富集分析提供了大量的相關通路，其中，AGE-RAGE信號轉導途徑、胰島素抵抗、腫瘤壞死因子信號通路、MAPK信號通路、IL-17信號通路等脂質代謝與糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展極為密切。

炎癥反應是糖尿病腎病的發(fā)病機制之一，已有研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病腎病病程與血漿中的炎癥介質濃度呈正相關[75-76]，與尿白蛋白排泄極為密切[77-78]，因其能吸引循環(huán)中的白細胞并促進向腎組織遷移，從而誘發(fā)腎損傷[79]。Meta分析結果表明尿微量白蛋白排泄率具有統(tǒng)計學差異，同時文獻中糖尿病腎病患者血清和尿液中IL-18水平明顯均升高且與尿白蛋白排泄呈正相關。這與本研究發(fā)現(xiàn)的TNF信號通路、MAPK信號通路、IL-17信號通路、核苷酸寡聚化結構域（nucleotide oligomerization domain，NOD）樣受體信號通路等典型的炎癥信號轉導途徑相吻合，這說明補腎活血湯可在一定程度上抑制炎癥反應，緩解糖尿病腎病的病情。但臨床報道炎性指標的文獻僅有1篇[23]，仍需要更多證據的支持。

氧化應激反應亦是糖尿病腎病的發(fā)病機制之一。本研究發(fā)現(xiàn)，盡管并未富集得到Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關蛋白1-核轉錄因子NF-E2相關因子2-抗氧化反應元件（Kelch-like epichlorohydrin associated protein 1-nuclear transcription factor NF-E2-associated factor 2-antioxidant reaction element，Keap1-Nrf2-ARE）典型的氧化應激途徑，但結果發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷、川芎嗪、阿魏酸等化學成分可與超氧化物歧化酶1（superoxide dismutase 1，SOD1）、SOD2靶標識別，起到抑制氧化應激的作用。氧化應激在臨床指征的反應可能表現(xiàn)為血流動力學參數的改變，但僅有2項研究[9,15]報道了血流動力學參數。

細胞凋亡與自噬亦是糖尿病腎病的發(fā)病機制之一。高血糖持續(xù)性誘導的代謝異?？纱賶乃佬约毎蛲鐾緩?，加快糖尿病腎病的病程進展。正常腎細胞的過度凋亡或焦亡誘導的腎細胞減少是腎纖維化發(fā)展的關鍵機制[80]。Meta分析表明在常規(guī)治療的基礎上聯(lián)合應用補腎活血湯可降低血肌酐水平，而其與腎損傷程度密切相關。本研究發(fā)現(xiàn)所富集的通路中磷脂酰肌醇-3-羥激酶/蛋白激酶B-哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（phosphatidylinositol-3- hydroxykinase/protein kinase-mammalian target of rapamycin，PI3K-AKT-mTOR）分子轉導途徑、Apoptosis通路、TNF分子轉導通路均是重要的細胞凋亡機制，補腎活血湯中的多種成分可抑制腎細胞凋亡，延緩糖尿病腎病病程。

血糖、血脂代謝紊亂是最為公認的糖尿病腎病的發(fā)病機制。本研究發(fā)現(xiàn)AGE-RAGE分子轉導途徑、多元醇通路、鞘脂信號轉導途徑、色氨酸代謝等生物過程是典型的血糖、血脂代謝紊亂的關鍵途徑，這提示補腎活血湯可調控機體血糖、血脂水平，在一定程度上糾正代謝紊亂，延緩糖尿病腎病病情。事實上這也與Meta分析的結果中，血糖血脂相關指標的統(tǒng)計學差異基本一致。

3.4 不足與局限性

本研究所納入的研究文獻，存在一定的發(fā)表偏倚；部分研究未報道明確隨機分組的方式，所有的研究均未報道分配隱藏的情況，有可能具有實施偏倚與測量偏倚等風險；所有的文獻都采用單中心的研究模式，且總體樣本量均在120以下，缺乏多中心、大隊列的隨機對照試驗研究，說明盡管基于目前的證據，試驗組的總體療效優(yōu)于對照組，但是受到納入研究整體水平和數量的限制，上述結論仍需后續(xù)的高質量文獻進行進一步驗證。此外，網絡藥理學屬于基于虛擬策略的初探技術，其優(yōu)點主要是給予研究者相關的分子研究方向，即一定的提示作用。由于是一種計算與預測的學科，因此其必然存在一定的假陽性，所以后續(xù)仍需要分子生物學的實驗進行進一步的驗證；除此之外，隨著數據庫的不斷更新和新研究的出現(xiàn)，網絡藥理學的結果也會不斷變化，需要即時更新；且本研究在檢索成分時沒有對相關文獻整合篩選，這是日后研究需要補充和完善的。

4 結論

本研究整合Meta分析和網絡藥理學研究技術，對補腎活血湯治療糖尿病腎病的臨床療效進行了評價，并對潛在干預機制進行分析。結果顯示，所納入19篇隨機對照試驗中，在有效率、血糖、血脂以及腎功能指標方面，治療組優(yōu)于對照組，具有統(tǒng)計學差異（＜0.05）；通過在線數據庫共得到559個化學成分和2306個潛在靶標，其中201個成分、145個靶標和185條通路與干預的糖尿病腎病極為密切，主要涉及AGE-RAGE信號通路、胰島素抵抗、TNF信號通路、MAPK信號通路等分子事件?；诂F(xiàn)有證據表明，西醫(yī)常規(guī)治療基礎上加用補腎活血湯能提高糖尿病腎病的臨床療效，并在降糖、調脂和保護腎功能方面具有一定優(yōu)勢，但整體證據級別較低，仍需大規(guī)模、多中心的隨機對照試驗進行進一步支持；補腎活血湯干預糖尿病腎病是多成分、多靶標共同作用的綜合性結果，其主要通過干預氧化應激、炎癥反應、多元醇通路、胰島素途徑、糖脂代謝、細胞凋亡等途徑達到治療糖尿病腎病的目的。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] Shimizu M, Furuichi K, Yokoyama H,. Kidney lesions in diabetic patients with normoalbuminuric renal insufficiency [J]., 2014, 18(2): 305-312.

[2] Radcliffe N J, Seah J M, Clarke M,. Clinical predictive factors in diabetic kidney disease progression [J]., 2017, 8(1): 6-18.

[3] 陳蘭. 五味消渴方對糖尿病腎病氣陰兩虛夾瘀證患者VEGF、Hcy表達的影響 [D]. 南寧: 廣西中醫(yī)藥大學, 2019.

[4] 胡維, 黃娟, 熊丹. 補腎活血湯對糖尿病腎病患者的療效及血清CRP水平的影響 [J]. 解放軍預防醫(yī)學雜志, 2018, 36(12): 1610-1611.

[5] 梁洪. 用補腎活血湯治療糖尿病腎病的效果觀察 [J]. 當代醫(yī)藥論叢, 2015, 13(22): 17-18.

[6] 中華醫(yī)學會內分泌學分會. 中國成人糖尿病腎臟病臨床診斷的專家共識 [J]. 中華內分泌代謝雜志, 2015(10): 379-385.

[7] Higgins J P T. Cochrane handbook for systematic reviews of interventions [EB/OL]. [2011-03-01]. http://handbook. cochrane.org.

[8] 蔡豐穗. 補腎活血湯治療糖尿病腎病的臨床觀察 [J]. 國際醫(yī)藥衛(wèi)生導報, 2009, 15(3): 67-69.

[9] 高曉婧, 馬秀寧, 宿德民. 補腎活血湯治療早期糖尿病腎病的療效觀察及其對血液流變學的影響 [J]. 中國中醫(yī)藥科技, 2019, 26(6): 879-880.

[10] 郭春芳, 馬秀艷. 補腎活血法治療糖尿病腎病療效觀察 [J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥, 2015, 11(9): 88-89.

[11] 賴延青, 盧蓁. 補腎活血方聯(lián)合厄貝沙坦對早期糖尿病腎病患者尿微量白蛋白的影響 [J]. 贛南醫(yī)學院學報, 2010, 30(4): 594-595.

[12] 劉香紅, 楊晨. 補腎活血方治療早期糖尿病腎病蛋白尿56例臨床觀察 [J]. 中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志, 2014, 20(7): 998-999.

[13] 秦艷, 龐秀花. 補腎活血方治療早期糖尿病腎病39例 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2012, 18(15): 311-313.

[14] 沈軍. 補腎活血法治療糖尿病腎病的臨床研究 [J]. 醫(yī)學信息, 2013(16): 162-163.

[15] 司福全, 周世芬, 崔宇辰, 等. 補腎活血法對糖尿病腎病尿白蛋白排泄率及血流動力學的干預作用 [J]. 遼寧中醫(yī)雜志, 2010, 37(6): 979-980.

[16] 涂衛(wèi)民. 補腎活血湯聯(lián)合西藥治療糖尿病腎病隨機對照臨床研究 [J]. 實用中醫(yī)內科雜志, 2012, 26(13): 43-44.

[17] 王安興, 田遠. 糖尿病腎病應用補腎活血湯配合鹽酸貝那普利治療的效果研究 [J]. 健康必讀, 2017(32): 8.

[18] 徐好利. 補腎活血湯治療糖尿病腎病60例 [J]. 陜西中醫(yī), 2010, 31(8): 963-965.

[19] 許成群. 補腎活血湯治療早期糖尿病腎病46例 [J]. 陜西中醫(yī)學院學報, 2008, 31(4): 24-25.

[20] 姚新星. 補腎活血法治療糖尿病腎病臨床期的效果觀察 [J]. 世界最新醫(yī)學信息文摘, 2015, 15(92): 119.

[21] 袁沙沙, 張勉之. 補腎活血法治療糖尿病腎病50例療效觀察 [J]. 天津中醫(yī)藥, 2011, 28(2): 110-111.

[22] 張進進, 鄭仲華. 補腎活血方口服和保留灌腸聯(lián)合西藥治療糖尿病腎病30例 [J]. 中醫(yī)研究, 2017, 30(12): 28-30.

[23] 張新麗, 靳鋒, 丁文君, 等. 補腎活血方聯(lián)合纈沙坦膠囊治療糖尿病腎病III期30例 [J]. 西部中醫(yī)藥, 2017, 30(10): 99-102.

[24] 朱思著. 補腎活皿湯治療糖尿病腎病對價值腎功能和尿蛋白的影響觀察 [J]. 糖尿病天地, 2018(15): 45.

[25] 房國偉. 補腎活血湯治療早中期2型糠尿病腎病氣虛血瘀證的臨床研究 [D]. 濟南: 山東中醫(yī)藥大學, 2017.

[26] 孫毅. 補腎活血法治療糖尿病腎病的臨床研究 [D]. 天津: 天津醫(yī)科大學, 2012.

[27] 鄢海燕, 鄒純才. 瓜蔞中三萜及其苷類成分的網絡藥理學研究 [J]. 國際藥學研究雜志, 2018, 45(4): 288-294.

[28] 楊釋岑, 劉志強, 劉和波, 等. 利用網絡藥理學方法研究交泰丸治療糖尿病的作用機制 [J]. 中國藥房, 2018, 29(19): 2656-2661.

[29] Fiseha T, Tamir Z. Urinary markers of tubular injury in early diabetic nephropathy [J]., 2016, 2016: 4647685.

[30] Mishra R, Emancipator S N, Kern T,. High glucose evokes an intrinsic proapoptotic signaling pathway in mesangial cells [J]., 2005, 67(1): 82-93.

[31] Toth-Manikowski S, Atta M G. Diabetic kidney disease: Pathophysiology and therapeutic targets [J]., 2015, 2015: 697010.

[32] Keshari K R, Wilson D M, Sai V,. Noninvasiveimaging of diabetes-induced renal oxidative stress and response to therapy using hyperpolarized13C dehydroascorbate magnetic resonance [J]., 2015, 64(2): 344-352.

[33] Tiwari A K, Prasad P, Thelma B K,. Oxidative stress pathway genes and chronic renal insufficiency in Asian Indians with type 2 diabetes [J]., 2009, 23(2): 102-111.

[34] Himmelfarb J, McMonagle E, Freedman S,. Oxidative stress is increased in critically ill patients with acute renal failure [J]., 2004, 15(9): 2449-2456.

[35] Hasegawa G, Nakano K, Sawada M,. Possible role of tumor necrosis factor and interleukin-1 in the development of diabetic nephropathy [J]., 1991, 40(6): 1007-1012.

[36] Ozcan U, Cao Q, Yilmaz E,. Endoplasmicstress links obesity, insulin action, and type 2 diabetes [J]., 2004, 306(5695): 457-461.

[37] Mishra R, Emancipator S N, Kern T,. High glucose evokes an intrinsic proapoptotic signaling pathway in mesangial cells [J]., 2005, 67(1): 82-93.

[38] Toth-Manikowski S, Atta M G. Diabetic kidney disease: Pathophysiology and therapeutic targets [J]., 2015, 2015: 697010.

[39] Crook E D, Patel S R. Diabetic nephropathy in African-American patients [J]., 2004, 4(6): 455-461.

[40] Crook E D, Wofford P, Oliver B. Advanced diabetic nephropathy disproportionately affects African-American females: Cross-sectional analysis and determinants of renal survival in an academic renal clinic [J]., 2003, 13(1): 28-33.

[41] 陳建. 腎臟病辨病專方治療[M]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2000: 133-136.

[42] 呂仁和, 趙進喜, 王越. 糖尿病腎病臨床研究述評 [J]. 北京中醫(yī)藥大學學報, 1994, 17(2): 2-6

[43] 邵啟慧. 滋腎活血法在治療消渴兼證中的運用 [J]. 遼寧中醫(yī)雜志, 1986, 13(5): 19-21.

[44] 屠伯言, 俞中康, 鄭敏宇, 等. 糖尿病腎病用補腎活血法治療的臨床和實驗研究 [J]. 上海中醫(yī)藥雜志, 1991, 25(1): 1-4.

[45] 任愛華, 闞方旭. 糖尿病腎病三焦辨治 [J]. 山東中醫(yī)雜志, 2000, 19(6): 328-329.

[46] 沈欣, 羅斌. 論腎虛痰瘀與糖尿病腎病的關系 [J]. 中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志, 2010, 16(1): 17.

[47] 王雅寧, 劉云啟, 高金祥, 等. 黃芪甲苷對糖尿病KKAy小鼠腎組織TGF-β1, SMAD2/3及α-SMA表達的影響 [J]. 重慶醫(yī)學, 2017, 46(5): 596-599.

[48] 李銀, 于曉云, 劉洪濤, 等. 聯(lián)用黃芪注射液和川芎嗪注射液對糖尿病腎病血脂血液流變性和腎功能影響的觀察 [J]. 中國中西醫(yī)結合急救雜志, 1999(12): 568-569.

[49] Zhou X J, Sun X B, Gong X X,. Astragaloside IV fromameliorates renal interstitial fibrosis by inhibiting inflammation via TLR4/NF-кBand[J]., 2017, 42: 18-24.

[50] Chen X, Wang D D, Wei T,. Effects of astragalosides fromon high glucose-induced proliferation and extracellular matrix accumulation in glomerular mesangial cells [J]., 2016, 11(6): 2561-2566.

[51] Kim H J, Vaziri N D. Contribution of impaired Nrf2-Keap1 pathway to oxidative stress and inflammation in chronic renal failure [J]., 2010, 298(3): F662-F671.

[52] He K Q, Li W Z, Chai X Q,. Astragaloside IV prevents kidney injury caused by iatrogenic hyperinsulinemia in a streptozotocin?induced diabetic rat model [J]., 2018, 41(2): 1078-1088.

[53] Zhou W, Chen Y, Zhang X Y. Astragaloside IV alleviates lipopolysaccharide-induced acute kidney injury through down-regulating cytokines, CCR5 and p-ERK, and elevating anti-oxidative ability [J]., 2017, 23: 1413-1420.

[54] Yao X M, Liu Y J, Wang Y M,. Astragaloside IV prevents high glucose-induced podocyte apoptosis via downregulation of TRPC6[J]., 2016, 13(6): 5149-5156.

[55] Guo H, Wang Y, Zhang X,. Astragaloside IV protects against podocyte injury via SERCA2-dependent ER stress reduction and AMPKα-regulated autophagy induction in streptozotocin-induced diabetic nephropathy [J]., 2017, 7(1): 6852.

[56] 劉長青, 黃書佳, 蔣典. 黃芪甲苷聯(lián)合氯沙坦對糖尿病大鼠腎組織PI3K/Akt/NF-κB通路的影響 [J]. 中南藥學, 2019, 17(10): 1626-1630.

[57] 季天嬌, 王中元, 朱云峰, 等. 黃芪甲苷調節(jié)PI3K/Akt/FoxO1通路抑制糖尿病大鼠肝糖異生 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2020, 26(1): 78-86.

[58] 何東元, 陳建國, 陳宜方, 等. 黃芪甲苷抑制p-130Cas表達緩解糖尿病腎病的作用機制研究 [J]. 浙江醫(yī)學, 2018, 40(14): 1532-153.

[59] 王文娟. 丹參酮IIA磺酸鈉對糖尿病腎病患者血液流變學狀態(tài)的影響 [J]. 河南醫(yī)學高等專科學校學報, 2019, 31(3): 326-328.

[60] 王玲, 吳秋楓. 丹參多酚酸對2型糖尿病腎病大鼠腎小管間質激活素A表達的影響研究 [J]. 環(huán)球中醫(yī)藥, 2017, 10(11): 1312-1317.

[61] 李翠芹, 賀浪沖. 白細胞膜色譜模型建立與白術中TLT4受體拮抗活性成分篩選研究 [J]. 中國科學 (C輯): 生命科學, 2005, 35(6): 545-550.

[62] Li C Q, He L C, Dong H Y,. Screening for the anti-inflammatory activity of fractions and compounds fromKoidz. [J]., 2007, 114(2): 212-217.

[63] 鄧剛民, 許津. 茯苓素: 一種潛在的醛固酮拮抗劑 [J]. 中國抗生素雜志, 1992, 17(1): 34-37.

[64] 孫蘭, 林楠, 李家春, 等. 桂枝茯苓膠囊治療原發(fā)性痛經的實驗研究 [J]. 中醫(yī)藥導報, 2014, 20(3): 15-17.

[65] 何云. 山藥多糖降血糖作用的實驗研究 [J]. 華北煤炭醫(yī)學院學報, 2008, 10(4): 448-449.

[66] 楊宏莉, 張宏馨, 李蘭會, 等. 山藥多糖對2型糖尿病大鼠降糖機理的研究 [J]. 河北農業(yè)大學學報, 2010, 33(3): 100-103.

[67] 李道中, 彭代銀, 徐先祥, 等. 菟絲子多糖降糖作用機制研究 [J]. 中華中醫(yī)藥學刊, 2008, 26(12): 2717-2718.

[68] 于瑩, 張功, 韓濤, 等. 基于網絡藥理學與分子對接方法研究菟絲子對2型糖尿病的作用研究 [J]. 中國臨床藥理學雜志, 2020, 309(7): 87-91.

[69] Lu Q, Qiu T Q, Yang H. Ligustilide inhibits vascular smooth muscle cells proliferation [J]., 2006, 542(1/3): 136-140.

[70] Lee L M, Liu C F, Yang P P. Effect of tetramethylpyrazine on lipid peroxidation in streptozotocin-induced diabetic mice [J]., 2002, 30(4): 601-608.

[71] 陳秋, 夏永鵬, 邱宗蔭. 蛻皮甾酮對HepG2細胞葡萄糖消耗的影響 [J]. 中國藥理學通報, 2005, 21(11): 1358-1362.

[72] 陳秋, 夏永鵬, 邱宗蔭. 蛻皮甾酮對胰島素抵抗細胞模型胰島素敏感性和糖代謝的影響 [J]. 中國藥理學通報, 2006, 22(4): 460-464.

[73] 周曉茂, 薛偕華. 24-乙酰澤瀉醇A對Ox-LDL誘導的大鼠血管平滑肌細胞基質金屬蛋白酶-9表達的影響 [J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥, 2015, 11(4): 7-9.

[74] 周曉茂, 魏偉, 陳彤, 等. 24-乙酰澤瀉醇A對ox-LDL誘導大鼠VSMC表型轉化的影響及其與ERK1/2通路的關系 [J]. 中國動脈硬化雜志, 2015, 23(4): 342-346.

[75] Bruno G, Merletti F, Biggeri A,. Progression to overt nephropathy in type 2 diabetes: The casale monferrato study [J]., 2003, 26(7): 2150-2155.

[76] Festa A, D'Agostino R, Howard G,. Inflammation and microalbuminuria in nondiabetic and type 2 diabetic subjects: The insulin resistance atherosclerosis study [J]., 2000, 58(4): 1703-1710.

[77] Navarro J F, Mora C, Mac?éa M,. Inflammatory parameters are independently associated with urinary albumin in type 2 diabetes mellitus [J]., 2003, 42(1): 53-61.

[78] Donate-Correa J, Martín-Nú?ez E, Muros-De-fuentes M,. Inflammatory cytokines in diabetic nephropathy [J]., 2015, 2015: 948417.

[79] Moriwaki Y, Yamamoto T, Shibutani Y,. Elevated levels of interleukin-18 and tumor necrosis factor-alpha in serum of patients with type 2 diabetes mellitus: Relationship with diabetic nephropathy [J]., 2003, 52(5): 605-608.

[80] 張敏杰, 劉暢, 方翼. 糖尿病腎病腎組織的自噬與凋亡及炎癥的相互關系 [J]. 中國臨床藥理學雜志, 2017, 33(19): 1972-1975.

Integrated Meta analysis and network pharmacology to investigate clinical evaluation and potential mechanism of Bushen Huoxue Decoction in treatment of diabetic nephropathy

WANG Qian, HE Tao, ZHOU Jia-li, LIU Ning, TANG Shuang, LIU Chuan-xin, HUANG Jian-mei

School of Traditional Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China

Meta analysis and network pharmacology were integrated to evaluate the clinical effect of Bushen Huoxue Decoction (補腎活血湯) in the treatment of diabetic nephropathy.First of all, through Meta analysis, the Chinese and English literature on the treatment of diabetic nephropathy RCTs by Bushen Huoxue Decoction was searched comprehensively. Based on the criteria of inclusion and exclusion, the quantitative literature was determined, and the statistical analysis of the included data was carried out by Review Manager. Secondly, based on the network pharmacology, the chemical components were screened out, the target of action, the target of disease, the common target and other related information in Bushen Huoxue Decoction. Then, based on the bioinformatics technology, the key pathway was annotated, and the potential mechanism of Bushen Huoxue Decoction in the intervention of diabetic nephropathy was discussed.A total of 1502 subjects were included in 19 RCTs literature. The results of Meta-analysis showed that the treatment group was superior to the control group in terms of effective rate, blood glucose, blood lipid, and renal function index (< 0.05); A total of 559 chemical components and 2306 potential targets were obtained through online database, including 201 components, 145 targets, and 185 channels, which were closely related to intervention of diabetic nephropathy. It was mainly involved in advanced glycation end products/AGEs receptor (AGE-RAGE) signaling pathway, insulin resistance, tumor necrosis factor (TNF) signaling pathway, mitogen activated protein kinase (MAPK) signaling, and other molecular events.Conventional western medicine plus Bushen Huoxue Decoction can improve the clinical effect of diabetic nephropathy and show some advantages in reducing blood sugar, lipid, and protecting renal function, but the overall level of evidence is low, still need large-scale, multi-center RCT for further support; Bushen Huoxue Decoction dry pre diabetic nephropathy is a comprehensive result of multi-component, multi-target interaction, the treatment of diabetic nephropathy is mainly achieved by the intervention of oxidative stress, inflammatory response, polyol pathway, insulin pathway, apoptosis and other ways. This study is a research attempt based on the combination of Meta analysis and network pharmacology, and also provides reference for clinical evaluation and mechanism research of other drugs.

Bushen Huoxue Decoction; diabetic nephropathy; Meta analysis; network pharmacology; clinical assessment; potential mechanism of action

R285

A

0253 - 2670(2021)06 - 1692 - 14

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.06.019

2020-09-20

國家自然科學基金資助項目（81774014）

王 倩（1997—），女，蒙古族，內蒙古錫林郭勒盟人，碩士研究生，研究方向為中藥質量控制與體內分析。E-mail: wq970722@163.com

劉傳鑫，男，博士，研究方向為糖尿病及臨床用藥風險。E-mail: 15222003775@163.com

黃建梅，女，教授、博士生導師，研究方向為中藥質量控制及藥物代謝。E-mail: huangjm@bucm.edu.cn

[責任編輯 潘明佳]