陳 強，蘇藝萍，徐 偉，李 煌，褚克丹，黃近丹，沙 玫*，林珠燦*

（1.福建中醫(yī)藥大學藥學院，福建 福州350122；2.福建省測試技術研究所，福建 福州350003）

藤茶，原植物為葡萄科（Vitaceae）蛇葡萄屬Ampelopsis Michx.的顯齒蛇葡萄Ampelopsis grossedentata（Hand-Mazz）W.T.Wang［1］，又名甜茶、龍須茶、白茶、霉茶等，主要分布于我國湖南、湖北、廣西、福建等長江以南地區(qū)，是近年來研究較多的藥食兩用植物資源之一?，F(xiàn)代研究表明：藤茶的主要藥效成分為黃酮類化合物，如二氫楊梅素、楊梅素、沒食子酸等，具有抗炎、抗腫瘤、降血糖等藥理作用［2-4］。目前對藤茶的研究主要集中在藤茶中黃酮類成分的提取、分離、純化［5-6］以及藥理作用［7-8］等方面，對于藤茶的質(zhì)量控制主要是對黃酮類成分的控制［9］，評價指標比較單一，不能完全反映藤茶的質(zhì)量優(yōu)劣，對于藤茶中無機元素的測定也未見有報道。中藥中的無機元素對中藥的藥效有一定的影響，而有些重金屬如果超出限量范圍會影響中藥的用藥安全。因此，對中藥中的無機元素和重金屬元素進行分析可為保證中藥的藥效及用藥安全提供更多的依據(jù)［10］。本實驗采用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）方法對7個產(chǎn)地的藤茶中17種無機元素進行測定，樣品來源涵蓋我國藤茶主要產(chǎn)地，可反映我國不同主產(chǎn)地藤茶無機元素含量的基本情況，其結(jié)果可為藤茶質(zhì)量標準的建立與質(zhì)量控制、安全性評價以及資源的綜合開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材 料

1.1 儀器Nexion 2000電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（上海珀金埃爾默儀器有限公司）；ME204E電子天平（上海梅特勒-托利多儀器有限公司）；DHG-9246A電熱恒溫鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）；ETHOS One型微波消解儀（美國CEM公司）。

1.2 試藥汞（Hg，批號：GBW€080124）、砷［As，批號：CBW（E）080117］標準溶液購自中國計量科學研究院；鋇（Ba，批號：BWB2128-2016）、鍶（Sr，批號：BWB2155-2016）標準溶液購自北京北方偉業(yè)計量技術研究院；鈣［Ca，批號：GSBG62012-90（2001）］、鉀［K，批號：GSBG62011-90（1901）］、鋅［Zn，批號：GSBG62025-90（3001）］、鎂［Mg，批號：GSBG62025-90（1201）］標準溶液購自國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院；鈷（Cd，批號：GSB04-1721-2004）、鉻［Cr，批 號：GSB04-1723-2004（a）］、銅（Cu，批 號：GSB04-1725-2004）、鐵（Fe，批 號：GSB04-1726-2004）、錳（Mn，批號：GSB04-1736-2004）、鈉（Na，批號：GSB04-1738-2004）、磷（P，批號：GSB04-1741-2004a）、鉛（Pb，批號：GSB04-1742-2004）、硒（Se，批號：GSB04-1751-2004）標準溶液購自國家有色金屬及電子材料分析測試中心。以上標準溶液濃度均為1 000μg/mL。硝酸（分析純，批號：20180911，國藥集團化學試劑有限公司）。藤茶購于不同產(chǎn)地，藤茶產(chǎn)地信息見表1。

表1 藤茶產(chǎn)地信息

藤茶樣品經(jīng)福建中醫(yī)藥大學藥學院黃澤豪副教授鑒定為葡萄科蛇葡萄屬顯齒蛇葡萄Ampelopsis grossedentata（Hand-Mazz）W.T.Wang的嫩莖葉。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液制備 將不同產(chǎn)地的藤茶樣品粉碎成粉狀，精密稱取0.2 g樣品于消解管內(nèi)，加入5 mL硝酸，擰緊消解管，于微波消解儀消解，取出冷卻后轉(zhuǎn)移消化液于容量瓶中并定容至50 mL，再稀釋100倍，供ICP-MS上機測定用。

2.2 標準貯備溶液制備 精密量取多元素（16種，Hg除外）標準溶液適量，用5%硝酸溶液稀釋成每1 mL含16種無機元素1μg的混合標準貯備溶液；另取Hg標準溶液適量，用2%硝酸溶液稀釋成每1 mL含Hg 1μg的標準貯備溶液。

2.3 標準溶液制備 精密量取上述16種無機元素混合標準貯備溶液適量，加5%硝酸溶液分別制成5、10、50、200、500 ng/mL的混合標準溶液；精密量取上述Hg標準貯備溶液適量，加5%硝酸溶液稀釋成0.5、2、5、10、15 ng/mL的標準溶液。

2.4 ICP-MS儀器設定參數(shù) 見表2。

表2 ICP-MS儀器設定參數(shù)

2.5 方法學驗證

2.5.1 標準曲線的建立 按“2.4”項下儀器設定參數(shù)對5個濃度的標準溶液進行測定。以標準溶液質(zhì)量濃度為橫坐標（x），待測元素分析峰信號值為縱坐標（y），繪制標準曲線，得各元素標準溶液的回歸方程、相關系數(shù)和線性范圍，測定結(jié)果見表3。

表3 各元素線性回歸方程

2.5.2 精密度試驗 吸取各標準溶液，進樣6次，分別計算17種無機元素峰強度的RSD，結(jié)果見表4，RSD為0.95%～2.01%，結(jié)果表明儀器的精密度良好。

2.5.3 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，每隔0.5 h測定1次，重復6次，分別計算17種無機元素峰強度的RSD，結(jié)果見表4。RSD為0.95%～1.92%，結(jié)果表明供試品溶液在3 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.5.4 重復性試驗 取同一供試品溶液6份，按“2.1”項下方法制備供試品溶液，按“2.4”項下儀器設定參數(shù)測定，計算各元素的含量RSD，結(jié)果見表4。RSD為0.98%～1.89%，結(jié)果表明本方法重復性良好。

2.5.5 加樣回收率試驗 稱取樣品（湖北恩施）6份，每份0.2 g，分別精密加入約相當于樣品中17種元素含量100%的標準貯備溶液，按“2.1”項下方法制備供試品溶液，按“2.4”項下儀器設定參數(shù)測定，計算各元素平均加樣回收率以及RSD，結(jié)果見表4。平均加樣回收率為95.89%～104.77%，RSD為0.99%～2.52%。

2.6 樣品測定 取不同產(chǎn)地的藤茶樣品，按“2.1”項下方法制備供試品溶液，按“2.4”項下儀器設定參數(shù)測定不同產(chǎn)地藤茶樣品中無機元素的含量，結(jié)果見表5～表7。

2.7 不同產(chǎn)地藤茶Fe、Zn、Se每日攝入量 對于Fe、Zn、Se三種元素，中國居民膳食營養(yǎng)素推薦每日攝入量（RNI）分別為12～20、7.5～12.5、0.06 mg，中國居民膳食營養(yǎng)素每日最高可耐受攝入量（UL）分別為42、40、4 mg［11］。

在湖南省中藥材質(zhì)量標準（2009年版）中，藤茶每天的推薦劑量為15～30 g［12］，藤茶Fe、Zn、Se攝入量＝Fe、Zn、Se含量×藤茶每天推薦劑量。按照本實驗檢測的Fe、Zn、Se含量計算出不同產(chǎn)地藤茶Fe、Zn、Se每日攝入量均低于RNI，更遠遠低于UL，見表8。

表4 精密度、重復性、穩(wěn)定性和加樣回收率試驗結(jié)果

表5 不同產(chǎn)地藤茶樣品常量元素的含量mg/kg

表6 不同產(chǎn)地藤茶樣品微量元素的含量mg/kg

表7 不同產(chǎn)地藤茶樣品重金屬元素的含量mg/kg

表8 不同產(chǎn)地藤茶Fe、Zn、Se每日攝入量mg

3 討 論

7個產(chǎn)地藤茶樣品中的Fe、Mn、Se、Zn、Cr、Ni、Sr、Ca、Na、Mg、K、P的元素含量分別為74.933～426.996、204.455～1519.669、0.046～0.111、12.363～31.544、0.561～3.260、1.513～4.404、11.771～79.253、1 900.487～5 527.380、3.181～10.463、1 137.086～1 888.278、4 692.059～16 108.966、940.305～3 681.988 mg/kg。其中，K、Ca、P的含量相對較高，三者含量大小順序因產(chǎn)地不同而異：湖北、湖南、云南為K＞P＞Ca；江西、廣東、廣西為K＞Ca＞P；福建為Ca＞K＞P。其他元素的含量順序為Mg＞Mn＞Fe＞Sr＞Zn＞Na＞Ni＞Cr＞Se。研究結(jié)果顯示：藤茶中含有多種無機元素，可以有效補充人體所需的常量元素與微量元素；不同產(chǎn)地無機元素種類沒有明顯差異，但含量差異較大。這可能與不同地方的地理環(huán)境、溫度、濕度、土壤等因素有關。

此外，研究結(jié)果顯示：藤茶中的元素種類及含量豐富，含有諸多人體必需的微量元素，如Fe、Zn、Se等；7個藤茶主產(chǎn)地樣品中，福建產(chǎn)藤茶的Fe、Zn、Se元素的含量較高。

Fe是骨髓造血系統(tǒng)的主要原料；Zn存在于眾多酶系統(tǒng)中，是核酸、蛋白質(zhì)、碳水化合物合成的必需物質(zhì)，也是免疫器官胸腺發(fā)育的重要營養(yǎng)素，具有促進人體生長發(fā)育、增強免疫、維持正常味覺、促進傷口愈合、促進維生素A的吸收與代謝等作用［13］；Se是谷胱甘肽過氧化酶（GSH-Px）組成成分，是重要的自由基清除劑，具有抗氧化、增強免疫、抗腫瘤、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的合成、調(diào)節(jié)維生素的吸收與利用等重要生理作用［14］。7個產(chǎn)地藤茶中Fe、Zn、Se含量豐富，且不超過中國居民膳食營養(yǎng)素最高可耐受攝入量。由表8數(shù)據(jù)可見，7個產(chǎn)地藤茶樣品中Fe、Zn、Se 3種微量元素含量均在推薦劑量范圍內(nèi)。2013年國家衛(wèi)健委已將藤茶（顯齒蛇葡萄Ampelopsis grossedentata（Hand-Mazz）W.T.Wang的嫩莖葉）列入新資源食品目錄，食用藤茶可為人體所需的Fe、Zn、Se提供有益的補充。

Pb、Cd、Hg、Cu、As在體內(nèi)蓄積至一定量時，可引起免疫系統(tǒng)障礙和多種生理功能損害，影響中藥用藥安全，屬于需要控制限量的重金屬元素。依照《中華人民共和國藥典（一部）》［15］（2015年版）以及《中國綠色行業(yè)標準》中對于中藥材以及中草藥的重金屬限量標準：重金屬總量不多于20 mg/kg，其中Cu元素不多于20.0 mg/kg，Pb元素不多于5.0 mg/kg，As元素不多于2.0 mg/kg，Cd元素不多于0.3 mg/kg，Hg元素不多于0.2 mg/kg。各產(chǎn)地藤茶樣品5種重金屬元素總含量均符合限量要求，湖北、江西、云南、廣東、福建、廣西藤茶樣品As、Cd、Cu、Hg、Pb含量均符合限量要求，湖南產(chǎn)地樣品Cd含量（0.325 mg/kg）略超限量要求（Cd≤0.3 mg/kg）。因此應注意加強無害種植，保證藤茶的質(zhì)量問題。

本實驗首次建立了不同產(chǎn)地藤茶樣品中17種無機元素的ICP～MS測定方法，可為藤茶藥材標準建立、質(zhì)量控制、安全性評價以及資源綜合開發(fā)利用提供科學的參考依據(jù)。