陳 羽 張毅敏 葉柳青

中國科學院大學附屬腫瘤醫(yī)院（浙江省腫瘤醫(yī)院）中國科學院基礎醫(yī)學與腫瘤研究所，浙江杭州 310022

結腸癌是一種常見的消化道惡性腫瘤，好發(fā)于直腸與乙狀結腸交界處，以中老年人群多見。目前，結腸癌高居胃腸道腫瘤發(fā)病率第3 位，并且是我國致死率最高的癌癥之一，已嚴重危害到人類的生命健康[1-2]。有研究報道，纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)IB）與惡性腫瘤具有一定的相關性，對腫瘤的病情判斷和預后評估具有積極的作用[3]；而炎癥指標中性粒細胞與淋巴細胞比值（neutrophil to lymphocyte ratio，NLR）與癌癥的發(fā)生、發(fā)展也有密切聯(lián)系[4-5]。本研究旨在探討外周血NLR、FIB 及腫瘤指標CA199、CEA 的聯(lián)合檢測結果對結腸癌患者術前診斷的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取浙江省腫瘤醫(yī)院2019年1～6月的174 例首診結腸癌患者作為結腸癌組，其中男101例，女73例；年齡28～84 歲，平均（60.39±11.68）歲。選取同期的82例結腸良性病變患者作為對照組，其中男53 例，女29 例；年齡26～78 歲，平均（59.79±11.85）歲。兩組患者的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。納入標準：所有病例均為首診患者，未經(jīng)過治療；所有病例最后均經(jīng)病理學檢查確診。排除標準：采樣前已經(jīng)過治療的患者；合并其他惡性腫瘤的患者（原發(fā)性結腸癌轉移患者除外）；合并急性感染的患者；合并遺傳性凝血功能障礙的患者；病理類型不明的患者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理學委員會批準，患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法和儀器

血液標本均在患者治療前空腹采集。纖維蛋白原由美國沃芬公司生產(chǎn)的ACL TOP 700 系統(tǒng)及其原裝試劑以凝固法檢測，CA199、CEA 由西門子公司生產(chǎn)的CentaurXP 系統(tǒng)及其原裝試劑以化學發(fā)光法檢測，外周血中性粒細胞與淋巴細胞計數(shù)由邁瑞南京生物技術有限公司提供的邁瑞全自動血細胞分析流水線CAL8000 及其原裝試劑以核酸熒光法檢測。

1.3 觀察指標

比較結腸癌患者和結腸良性病變者的外周血NLR、FIB、CA199、CEA 水平。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。采用Kolmogorov-Smirnov Z 檢驗進行正態(tài)性檢驗，計量資料因呈偏態(tài)分布，故采用中位數(shù)（四分位數(shù)）[M（P25，P75）]表示，兩組間比較采用Wilcoxon 檢驗；采用ROC 曲線分析NLR、FIB、CA199、CEA 單項及聯(lián)合檢測的診斷效能，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組NLR、FIB、CA199、CEA 水平的比較

結腸癌組患者的NLR、FIB 及CA199、CEA 水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）（表1）。

2.2 外周血NLR、FIB、CA199、CEA 單項及聯(lián)合檢測的ROC 曲線下面積（AUC）比較

CEA、CA199、FIB、NLR 單項診斷結腸癌的AUC較接近，分別為0.666、0.759、0.716、0.735；CEA、CA199聯(lián)合檢測的AUC 為0.763，稍高于各單項的AUC；而FIB、NLR 與CEA、CA199 四項聯(lián)合檢測的AUC 達0.831（圖1，封四）。

圖1 CEA、CA199、FIB、NLR 單項及聯(lián)合檢測診斷結腸癌的ROC 曲線（見內文第147 頁）

表1 兩組血清NLR、FIB 和腫瘤標志物CA199、CEA 表達水平的比較[M（P25，P75）]

2.3 外周血NLR、FIB、CA199、CEA 單項及聯(lián)合檢測的診斷效能分析

CA199、CEA 聯(lián)合聯(lián)測的靈敏度和準確度高于CA199、CEA 單項檢測，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；NLR、FIB、CA199、CEA 四項聯(lián)合檢測的靈敏度和準確度均高于單項檢測或CA199、CEA 兩項聯(lián)合聯(lián)測，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）（表2）。

3 討論

隨著社會的發(fā)展和人們飲食習慣的改變，我國結腸癌的發(fā)病率呈明顯上升趨勢[6]。其具有起病隱匿、進展迅速、預后較差等特點，正威脅到越來越多的中老年人的身體健康[7]。由于結腸癌早期癥狀不典型等，在我國約60%的結腸癌患者確診時已到中晚期[8]。研究顯示，結腸癌的預后與患者的診治時機有密切關系，在結腸癌早期即進行治療，患者的5年生存率可達90%以上，而在中晚期時才進行治療，患者的5年生存率僅為5%[9]。因此，實現(xiàn)結腸癌的早期診斷尤為重要。

結腸癌的診斷主要有侵入性和非侵入性檢查兩種。侵入性檢查診斷率高，但患者易產(chǎn)生不適，且有一定的操作風險。非侵入性檢查包括計算機斷層掃描（computed tomography，CT）等影像學檢查與外周血腫瘤標志物檢測等。影像學檢查對結腸癌的診斷效能很高，但價格較高，且有一定的輻射。外周血腫瘤標志物檢測因不需要腸道準備、費用相對便宜、操作簡便，更易被患者接受。CEA、CA199 是目前在結腸癌診療中應用最廣泛的腫瘤標志物[10]，通過分析發(fā)現(xiàn)，CEA、CA199 對結腸癌的檢測靈敏度較低，分別為25.29%和43.68%，作為結腸癌的早期輔助診斷指標，有一定的局限性。因此，急需更靈敏且具有較高診斷效能的新型標志物。

表2 外周血NLR、FIB、CA199、CEA 單項及聯(lián)合檢測對結直腸癌的診斷效能分析（%）

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與體內微環(huán)境密切相關。FIB作為凝血因子，是血黏度的主要決定因素，同時也是急性期蛋白的組成成分之一[11]，與血液環(huán)境密切相關，在循環(huán)腫瘤細胞（CTC）外滲和遠處轉移的發(fā)展中起著至關重要的作用[12]。因此，有學者認為，F(xiàn)IB 可能是一種新的癌癥診斷指標，可為癌癥的早期診斷提供依據(jù)[13-14]。此外，腫瘤微環(huán)境中往往有炎癥細胞浸潤，如中性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞等，這些細胞通過分泌細胞因子等途徑與腫瘤相互作用，形成復雜的腫瘤微環(huán)境，對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展產(chǎn)生影響[15]。研究顯示，中性粒細胞參與增強腫瘤細胞的侵襲和轉移、血管生成和細胞外基質重塑，同時抑制抗腫瘤免疫監(jiān)視[16]。淋巴細胞則是腫瘤免疫微環(huán)境的重要組成部分，許多細胞亞群在腫瘤免疫中發(fā)揮著巨大作用。NLR 將中性粒細胞和淋巴細胞計數(shù)結合，無疑是理想的用于預測癌癥病程進展的炎癥指標，因此被越來越多地應用于腫瘤診斷、治療的研究[17]。通過分析發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)IB 有不遜于CEA、CA199 的診斷效能，但都表現(xiàn)為高特異度、低靈敏度，而NLR 則表現(xiàn)為高靈敏度、低特異度，聯(lián)合檢測可以改善傳統(tǒng)腫瘤標志物診斷靈敏度偏低的問題。將NLR、FIB 與CA199、CEA 聯(lián)合檢測應用于結腸癌高危人群篩查后，其靈敏度大大提升，較傳統(tǒng)的腫瘤標志物CA199、CEA 單項或聯(lián)合檢測均高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），這對結腸癌的早期診斷有積極意義。在提高靈敏度的同時，聯(lián)合檢測的準確度并沒有下降，反而有了大幅提升，達75.39%，高于任何單項及CA199、CEA 聯(lián)合聯(lián)測的準確度，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示NLR、FIB 與CA199、CEA 的聯(lián)合檢測對于結腸癌的診斷效率有很大意義。此外，F(xiàn)IB 和NLR 作為中老年人群體檢常做的項目，具有價格便宜、結果穩(wěn)定、易于連續(xù)監(jiān)測等優(yōu)勢。

綜上所述，NLR、FIB 作為簡單易得的外周血檢驗結果，單項檢測結腸癌時，有不遜于傳統(tǒng)腫瘤標志物的診斷效能；而NLR、FIB、CA199、CEA 的聯(lián)合檢測可大大提高對結腸癌的診斷效能，對患者的早期診斷及改善預后有積極作用。