史雪萍，呂祥娟，周小桐，畢慧娟，沈華躍，王述柏*

（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東青島 266109；2.煙臺(tái)大地牧業(yè)股份有限公司，山東煙臺(tái) 265100）

我國(guó)鵪鶉養(yǎng)殖歷史悠久，多年來(lái)飼養(yǎng)量約占世界總量20%[1-2]。鵪鶉生長(zhǎng)快、性成熟早（40～45 日齡）、繁殖力強(qiáng)（年產(chǎn)蛋量300 個(gè)以上），飼料報(bào)酬和養(yǎng)殖效益高[1]。鶉蛋、肉營(yíng)養(yǎng)豐富、藥用價(jià)值高，在我國(guó)素有“動(dòng)物人參”之美譽(yù)[3]。目前雞和水禽在我國(guó)的養(yǎng)殖規(guī)模巨大，面臨產(chǎn)能過(guò)剩問(wèn)題，因此鵪鶉養(yǎng)殖在調(diào)整畜牧業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)、豐富人們生活等方面具有重要意義。野生鵪鶉經(jīng)人工馴化后失去了就巢性，人工孵化成為現(xiàn)代鵪鶉養(yǎng)殖的重要生產(chǎn)環(huán)節(jié)，但迄今有關(guān)鵪鶉的孵化技術(shù)研究較少。入孵前種蛋的管理是孵化工作流程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，種蛋管理期間應(yīng)提供合適的儲(chǔ)存條件，保持胚胎不受凍、不發(fā)育，保持入孵前種蛋理化性質(zhì)的穩(wěn)定以滿足胚胎發(fā)育的需要[4]。保存條件是否適宜直接影響種蛋的質(zhì)量及胚胎活力，進(jìn)而影響孵化成績(jī)。目前我國(guó)有關(guān)鵪鶉種蛋的適宜保存條件鮮見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在研究鵪鶉種蛋的適宜保存溫度、濕度、時(shí)間及胚胎發(fā)育的臨界溫度，為生產(chǎn)中對(duì)鵪鶉種蛋進(jìn)行合理保存從而提高孵化成績(jī)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 鵪鶉種蛋為3 月齡朝鮮龍城系鵪鶉所產(chǎn)新鮮種蛋（產(chǎn)后1 d），購(gòu)自濟(jì)寧嘉祥縣某鵪鶉養(yǎng)殖廠。

1.2 試驗(yàn)設(shè)備及儀器 孵化機(jī)（山東省德州科裕孵化設(shè)備有限公司，CFS）、出雛機(jī)（德州市德城區(qū)新源孵化設(shè)備廠，XYB-2）、人工氣候培養(yǎng)箱（廣東省醫(yī)療器械廠，LRH-250-GS Ⅱ）、電子天平（奧豪斯儀器上海有限公司，NV222ZH，精確度0.01 g）、數(shù)顯游標(biāo)卡尺（上海九量五金工具有限公司，150，精確度0.01mm）等。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 保存溫度對(duì)孵化成績(jī)的影響 選擇蛋重10～13 g的種蛋2 400 枚，按照蛋重均等原則分為6 組，每組設(shè)8 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50 枚蛋，蛋重均值（11.44±0.11）g，組間差異不顯著。保存于人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)。1～6 組的保存溫度分別為5、10、15、20、25、30℃，各組保存濕度均為65%，保存期均為5 d。

孵化操作程序：種蛋入孵前，置孵化室內(nèi)預(yù)熱12 h，孵化室溫度23～25℃、相對(duì)濕度60%～70%；預(yù)熱后上蛋，采用福爾馬林熏蒸法（28 mL/m3福爾馬林、14 g/m3高錳酸鉀）消毒20 min。采用整批入孵變溫孵化法孵化種蛋。

孵化參數(shù)設(shè)定：孵化溫度1～3 d 為38.5℃，4～14 d為38℃，15～17 d 為37.5℃；孵化濕度1～4 d 為65%，5～10 d 為60%，11～17 d 為70%；孵化開(kāi)始后，每隔2 h翻蛋1 次，翻蛋角度90°，15 d 落盤后停止翻蛋。

1.3.2 保存濕度對(duì)孵化成績(jī)的影響 選擇蛋重10～13 g的種蛋2 000 枚，按照蛋重均等原則分為5 個(gè)組，每組設(shè)8 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50 枚，蛋重均值（11.45±0.12）g，組間差異不顯著。保存于人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)。1～5 組的保存濕度分別為40%、50%、60%、70%、80%，保存溫度均為18℃，保存期均為 5 d。孵化操作程序和孵化參數(shù)設(shè)定同1.3.1。

1.3.3 保存時(shí)間對(duì)孵化成績(jī)的影響 選擇蛋重10～13 g的種蛋1 200 枚，按照蛋重均等原則分為3 個(gè)組，每組設(shè)8 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50 枚，蛋重均值（10.90±0.17）g，組間差異不顯著。保存于人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)。1～3 組的保存時(shí)間分別為3、7、11 d，保存溫度均為15℃，相對(duì)濕度均為70%。孵化操作程序和孵化參數(shù)設(shè)定同1.3.1。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.4.1 出雛期的觀察與處理 種蛋落盤后，每日觀察每組每個(gè)重復(fù)的出殼時(shí)間、雛鵪鶉的精神狀態(tài)、外貌有無(wú)畸形或缺陷，記錄健康雛鶉數(shù)、殘雛數(shù)；對(duì)每組每個(gè)重復(fù)的出殼鵪鶉逐只稱體重，計(jì)算每個(gè)重復(fù)的平均體重；未出殼的胚蛋逐只打開(kāi)檢查，記錄每個(gè)重復(fù)的死亡胚胎數(shù)、未受精蛋數(shù)和受精蛋數(shù)量。

1.4.2 孵化成績(jī)指標(biāo)計(jì)算方法 根據(jù)孵化記錄，匯總每組每個(gè)重復(fù)的受精蛋數(shù)、無(wú)精蛋數(shù)、死胚數(shù)、出殼鶉只數(shù)、健康鶉只數(shù)、殘雛數(shù)，計(jì)算種蛋受精率、受精蛋孵化率、入孵蛋孵化率、健雛率、每個(gè)重復(fù)平均初生重、初生重占蛋重百分比，各指標(biāo)計(jì)算公式：

受精率=受精蛋數(shù)/入孵蛋數(shù)×100%

受精蛋孵化率=出殼雛鶉數(shù)/受精蛋數(shù)×100%

入孵蛋孵化率=出殼雛鶉數(shù)/入孵蛋數(shù)×100%

健雛率=健康雛鶉數(shù)/出殼雛鶉數(shù)×100%

每重復(fù)平均初生重=∑每重復(fù)出殼鶉體重（g）/每重復(fù)雛鶉只數(shù)

初生重占蛋重百分比=初生重/蛋重×100%

1.5 胚胎發(fā)育臨界溫度研究

1.5.1 鵪鶉種蛋胚盤發(fā)育隨溫度變化的初步觀察 選擇蛋重10～13 g 的種蛋440 枚，按照蛋重均等原則分為11 個(gè)組，每組40 枚，每重復(fù)1 枚，每天觀測(cè)8 枚，連續(xù)觀察測(cè)量5 d。種蛋先采用福爾馬林熏蒸消毒（方法同1.3.1），然后開(kāi)始觀察在不同溫度下的胚胎發(fā)育情況。1～11 組溫度處理分別為20.0、21.0、22.0、23.0、24.0、25.0、26.0、27.0、28.0、29.0、30.0℃。保存期間各組相對(duì)濕度均設(shè)為65%。每天每組隨機(jī)取8 枚種蛋采用游標(biāo)卡尺測(cè)量胚盤直徑，每個(gè)胚盤均測(cè)量3 個(gè)不同位點(diǎn)，結(jié)果取平均值。另取8 枚種蛋，于試驗(yàn)開(kāi)始前（0 d）檢測(cè)每枚種蛋胚盤直徑，作為對(duì)照組。初步確定可引起胚胎開(kāi)始發(fā)育的溫度。

1.5.2 鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育臨界溫度的精確測(cè)定 根據(jù)1.5.1 的觀察結(jié)果初步確定能使胚胎開(kāi)始發(fā)育的大致溫度為21～23℃，在此范圍內(nèi)設(shè)置7 個(gè)溫度梯度水平，進(jìn)一步觀察不同溫度下的胚盤發(fā)育情況。選擇蛋重10～13 g的種蛋280 枚，按照蛋重均等原則分為7 個(gè)組，每組40 枚，每重復(fù)1 枚，每天觀測(cè)8 枚，連續(xù)觀察測(cè)量5 d。1～7 組溫度分別為21.8、22.0、22.2、22.4、22.6、22.8、23.0℃。保存期間各組相對(duì)濕度均為65%。胚盤直徑測(cè)量方法同1.5.1。另取8 枚種蛋，于試驗(yàn)開(kāi)始前（0 d）檢測(cè)每枚種蛋胚盤直徑，作為對(duì)照組。

1.5.3 結(jié)果判定 比較分析同一處理溫度隨時(shí)間延長(zhǎng)（0～5 d）胚盤直徑的變化，若胚盤直徑開(kāi)始顯著增大即為能引起胚胎發(fā)育的溫度（也稱臨界溫度）。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 軟件進(jìn)行初步整理，采用SPSS17.0 軟件One-Way ANOVA 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，采用LSD 法進(jìn)行組間差異顯著性檢驗(yàn)，結(jié)果用平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。P＜0.05 表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 保存溫度對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響 由表1 可知，各組蛋重和受精率無(wú)顯著差異。15℃組入孵蛋孵化率和受精蛋孵化率最高，且15、20、25℃組顯著高于5、10、30℃組，10℃組顯著高于30℃組。15℃組健雛率和初生重最高，但組間均無(wú)顯著差異，初生重占蛋重百分比各組間亦無(wú)顯著差異。

種蛋保存溫度與受精蛋孵化率的二次回歸分析方程為y=-0.0321x2+1.1039x+81.587（R2=0.931 7）。極 值計(jì)算結(jié)果：保存溫度17.2℃，受精蛋孵化率可達(dá)到最佳值91.08%。種蛋保存溫度與入孵蛋孵化率的回歸分析方程為y=-0.048x2+1.6253x+70.973（R2=0.915 5）。極值計(jì)算結(jié)果：保存溫度16.9℃，入孵蛋孵化率可達(dá)到最佳值84.73%。

2.2 保存濕度對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響 由表2 可知，各組蛋重和受精率無(wú)顯著差異。70%組入孵蛋孵化率和受精蛋孵化率最高，顯著高于40%、80% 組。各組間的健雛率、初生重、初生重占蛋重百分比均差異不顯著。

種蛋保存濕度與受精蛋孵化率的回歸分析方程為y=-0.003x2+0.3608x+81.122（R2=0.545 9）。極值計(jì)算結(jié)果：保存濕度為60.13%，受精蛋孵化率可達(dá)到最佳值為91.97%。種蛋保存濕度與入孵蛋孵化率的回歸分析方程為y=-0.005x2+0.6505x+64.081（R2=0.817 2）。極值計(jì)算結(jié)果：保存濕度為65.05%，入孵蛋孵化率可達(dá)到最佳值為85.24% 。

2.3 保存時(shí)間對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響 由表3 可知，各組蛋重和受精率無(wú)顯著差異。保存3 d 組入孵蛋孵化率和受精蛋孵化率最高，3、7 d 組極顯著高于11 d 組。各組健雛率、初生重和初生重占蛋重百分比無(wú)顯著差異。

種蛋保存時(shí)間與受精蛋孵化率的線性回歸分析方程為y=-0.9663x+92.004（R2=0.920 7），與入孵蛋孵化率的線性回歸分析方程為y=-0.9875x+84.922（R2=0.945）?？梢?jiàn)，種蛋保存時(shí)間與受精蛋孵化率、入孵蛋孵化率呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。

2.4 鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度檢測(cè)結(jié)果 由表4 可知，隨保存時(shí)間延長(zhǎng)（0～5 d），20～22℃處理組的胚盤直徑無(wú)顯著變化，23℃處理組的胚盤直徑呈逐漸增大趨勢(shì)，第3～5 天顯著高于第0～2 天；24℃處理組的胚盤直徑呈明顯增大趨勢(shì)，第1～5 天顯著高于第0 天，第4～5 天極顯著高于第0～2 天；25～30℃處理組的胚盤直徑增大趨勢(shì)更加明顯，第1～5 天極顯著高于第0 天。

表1 保存溫度對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響

表2 保存濕度對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響

表3 保存時(shí)間對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響

表4 20～30℃保存種蛋的胚盤直徑隨保存時(shí)間延長(zhǎng)的變化 mm

表5 21.8～23℃保存的種蛋隨保存時(shí)間延長(zhǎng)胚盤直徑的變化 mm

由表5 可知，隨保存時(shí)間延長(zhǎng)（0～5 d），21.8～22.8℃處理組的胚盤直徑無(wú)顯著變化，23.0℃處理組的胚盤直徑呈明顯增大趨勢(shì)，第3、4、5 天極顯著高于第0、1、2 天。

3 討 論

3.1 保存溫度對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響 禽蛋保存期間溫度的設(shè)置原則是使胚胎發(fā)育暫停，同時(shí)保持胚胎和種蛋品質(zhì)處于最佳狀態(tài)[5]。種蛋長(zhǎng)期保存時(shí)，低溫環(huán)境可抑制微生物生長(zhǎng)繁殖、延緩濃蛋白變稀[6]。岳根華等[7]研究表明，朝鮮鵪鶉種蛋在低溫（2～10℃、15～26℃）環(huán)境下保存6 d，孵化率無(wú)明顯下降，在高溫（28～37.5℃）環(huán)境下保存時(shí)間不宜超過(guò)3 d，否則孵化率顯著下降。本研究結(jié)果亦表明，鵪鶉種蛋保存溫度在15～25℃的受精蛋孵化率和入孵蛋孵化率顯著優(yōu)于低溫（5、10℃）和高溫（30℃）保存，回歸分析結(jié)果顯示鵪鶉種蛋保存溫度在16.9～17.2℃可獲得最高孵化率。

3.2 保存濕度對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響 種蛋保存期間，蛋內(nèi)水分會(huì)通過(guò)蛋殼氣孔蒸發(fā)散失，環(huán)境濕度低則失水速度快，種蛋失水過(guò)多對(duì)胚胎發(fā)育不利[5]，反之，濕度過(guò)高（大于80%）利于細(xì)菌及霉菌的生長(zhǎng)，影響種蛋質(zhì)量[8]。有關(guān)鵪鶉種蛋保存期間環(huán)境濕度對(duì)種蛋孵化成績(jī)的影響研究報(bào)道較少。對(duì)其他禽類的研究顯示，珍珠雞種蛋保存期適宜濕度范圍為70%～75%[9]，雞種蛋保存期適宜濕度范圍為75%～85%[10]。楊寧[11]認(rèn)為禽蛋保存期間適宜濕度為75%～80%。本試驗(yàn)結(jié)果表明，鵪鶉種蛋保存期間相對(duì)濕度70% 組孵化率最高，低濕度（40%）組和高濕度（80%）組孵化率均低，回歸分析結(jié)果顯示獲得最優(yōu)孵化率的適宜保存濕度為65%?？梢?jiàn)，朝鮮鵪鶉種蛋保存期間的適宜相對(duì)濕度為65%～70%，低于上述文獻(xiàn)報(bào)道的雞等其他禽類的適宜值，這可能與鵪鶉種蛋蛋殼和蛋殼膜致密性強(qiáng)不易失水，從而能耐受低濕度環(huán)境有關(guān)。

3.3 保存時(shí)間對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響 有關(guān)保存時(shí)間對(duì)鵪鶉種蛋孵化成績(jī)的影響研究報(bào)道較少。李延杰[12]認(rèn)為鵪鶉種蛋存放時(shí)間夏季不超過(guò)5 d，春秋季不超過(guò)7 d，冬季不超過(guò)10 d。對(duì)雞蛋的研究顯示，AA+肉種雞種蛋保存時(shí)間最好不超過(guò)10 d[13]，否則孵化率會(huì)極顯著下降；保存溫度17～18℃的雞種蛋，保存時(shí)間以小于5 d 為宜[14]。賈汝敏等[15]研究表明，保存時(shí)間長(zhǎng)的種蛋，蛋殼外表面的膠護(hù)膜被破壞，使蛋內(nèi)水分蒸發(fā)和微生物侵入造成種蛋孵化率降低。本試驗(yàn)結(jié)果表明，鵪鶉種蛋保存時(shí)間與孵化率呈負(fù)相關(guān)，在15℃、相對(duì)濕度70%的保存條件下，保存3～7 d 可獲得較高孵化率?？梢?jiàn)，鵪鶉種蛋的適宜保存時(shí)間與雞蛋基本一致。

3.4 鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度 種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度是確定其保存溫度的重要依據(jù)，種蛋保存期間溫度不宜高于胚胎發(fā)育臨界溫度[16]。溫度達(dá)到或超過(guò)胚胎發(fā)育的臨界溫度胚胎即開(kāi)始緩慢發(fā)育，溫度低于臨界溫度胚胎發(fā)育則被抑制。禽類胚胎位于蛋黃膜下面，易于觀察，胚胎開(kāi)始發(fā)育的眼觀變化特征為胚盤直徑增大。鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度未見(jiàn)報(bào)道。關(guān)于雞胚發(fā)育的臨界溫度報(bào)道結(jié)果不盡一致，付興周[16]認(rèn)為是23.9℃，何曉芳等[8]認(rèn)為是26～27℃。本試驗(yàn)結(jié)果表明，鵪鶉種蛋的最低發(fā)育溫度為23℃，23.0℃以下的胚胎未見(jiàn)胚盤顯著增長(zhǎng)，因此確定鵪鶉種蛋胚胎發(fā)育的臨界溫度為23.0℃，低于雞胚發(fā)育臨界溫度，這可能與鵪鶉蛋蛋重小、蛋殼薄、熱量易于傳遞入蛋內(nèi)有關(guān)，確切機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，鵪鶉種蛋的最佳保存溫度為15℃，適宜范圍為15～20℃；最佳保存濕度為70%，適宜范圍為65%～70%；適宜保存時(shí)間為3～7 d；胚胎發(fā)育的臨界溫度為23℃。