龍 偉 姚小華* 呂樂(lè)燕

（1. 中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院亞熱帶林業(yè)研究所，杭州 311400；2. 浙江省林木育種技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，杭州 311400；3. 浙江同濟(jì)科技職業(yè)學(xué)院，杭州 311231）

油茶（Camellia oleifera A.）作為我國(guó)傳統(tǒng)的木本油料樹(shù)種之一，具有悠久的栽培和食用歷史，其籽壓榨后所得茶油具有的營(yíng)養(yǎng)和保健功能被大眾認(rèn)可，促進(jìn)消費(fèi)群體數(shù)量和市場(chǎng)消費(fèi)量快速增加，從而帶動(dòng)油茶產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展［1～2］。隨著國(guó)家林業(yè)局于2017 年發(fā)布各省油茶主栽品種目錄［3］，助推優(yōu)良品種得到快速推廣，也使良種種苗需求急速提高。但因受遺傳特性影響，部分品種出圃率無(wú)法充分滿足市場(chǎng)需求，如被多省作為推薦品種的長(zhǎng)林53 號(hào)，當(dāng)年出圃率較低［4］，影響該品種的推廣應(yīng)用。因此如何提高該類生長(zhǎng)緩慢品種的生長(zhǎng)量，成為亟需解決的問(wèn)題，需要對(duì)油茶嫁接苗各個(gè)環(huán)節(jié)深入了解。

研究發(fā)現(xiàn)，影響嫁接愈合和生長(zhǎng)的因素較多，如油茶穗條質(zhì)量影響著嫁接后生長(zhǎng)及存活率，采穗部位和穗條芽位等對(duì)嫁接苗生長(zhǎng)有顯著影響［5～8］，而這些影響體現(xiàn)在砧穗理化差異，包括酚類、多酚氧化酶、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)、木質(zhì)素、水分以及內(nèi)源激素等［9～16］，對(duì)嫁接愈合有著顯著影響且為主要因素［17］。目前油茶嫁接繁殖方式主要以韓寧林［18］的芽苗砧嫁接，通過(guò)對(duì)穗條削兩面成楔形后插入莖段中間對(duì)剖的砧木內(nèi)；該過(guò)程對(duì)砧穗產(chǎn)生高強(qiáng)度切割，形成較大面積創(chuàng)傷，使砧穗剖面暴露于空氣易受到病菌和脫水的威脅。有研究顯示植物受創(chuàng)后將產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)形成對(duì)傷害或逆境時(shí)的自我防御機(jī)制，創(chuàng)傷部位分泌產(chǎn)生相應(yīng)產(chǎn)物抵御外界影響和促進(jìn)愈合生長(zhǎng)［19～22］，激素作為調(diào)節(jié)植物細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育的關(guān)鍵物質(zhì)，在該過(guò)程中起到重要的作用，推動(dòng)植物再生［23～24］。但植物激素不是獨(dú)立個(gè)體存在，存在著拮抗和合作關(guān)系，且作為信號(hào)分子調(diào)節(jié)自身和其他激素含量變化，形成串?dāng)_作用［25～26］。這些過(guò)程說(shuō)明創(chuàng)傷后，砧穗內(nèi)部發(fā)生一系列生化變化，且在生產(chǎn)中常將油茶穗條和砧木切割處理后進(jìn)行保濕放置待嫁接，在此期間可能產(chǎn)生較多影響嫁接愈合的相關(guān)物質(zhì)，但目前對(duì)于該階段的變化情況研究較少，其對(duì)嫁接愈合的影響還未清楚。在前期對(duì)長(zhǎng)林系列油茶種子及嫁接親和性的研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)林53 號(hào)接穗嫁接親和性較高，但嫁接后第一年生長(zhǎng)遲滯，而第二年快速生長(zhǎng)，與生長(zhǎng)旺盛的長(zhǎng)林18號(hào)等相比，說(shuō)明可能存在著影響嫁接生長(zhǎng)的內(nèi)在因素（未發(fā)表）；同時(shí)對(duì)半同胞砧木研究發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)林18號(hào)砧木形態(tài)均勻，親和性高，因此為探索影響嫁接生長(zhǎng)機(jī)制，對(duì)接穗和砧木互為砧穗情況下，模擬砧穗芽苗砧嫁接前處理方法和時(shí)間，對(duì)各階段內(nèi)源激素含量進(jìn)行測(cè)定，探討砧木和接穗受創(chuàng)后的激素含量變化，有助于進(jìn)一步摸清油茶砧穗嫁接愈合機(jī)理，從而為后續(xù)開(kāi)展砧穗嫁接愈合機(jī)制研究提供技術(shù)和理論支持。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)林位于浙江省金華市婺城區(qū)東方紅林場(chǎng)的國(guó)家油茶核心種質(zhì)（浙江）資源庫(kù)內(nèi)，于秋季選擇樹(shù)齡6年、健康無(wú)病害的國(guó)家審定良種長(zhǎng)林18號(hào)（下文簡(jiǎn)稱18號(hào)）和長(zhǎng)林53號(hào)（下文簡(jiǎn)稱53號(hào)）樹(shù)體采集成熟果實(shí)，經(jīng)剝離、篩選出大小均勻的種子，置于4℃冰箱，于冬季經(jīng)高錳酸鉀消毒后平鋪在厚20 cm沙床上，再鋪上15 cm厚河沙貯藏。待翌年3月下旬開(kāi)始按照1 次/周的頻率對(duì)沙床澆水催芽；5月份時(shí)，將砧木自沙床取出，清水沖洗干凈，濕毛巾包裹待用。同時(shí)在采果樹(shù)體上采集半木質(zhì)化時(shí)剪取芽位飽滿，選擇平均粗度在2.0～2.2 mm的春梢作為接穗，放入0℃冰盒內(nèi)，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理。

1.2 試驗(yàn)方法

穗條處理 截取穗條第二芽位至第三芽位間莖段，參照韓寧林［18］的芽苗砧嫁接方法對(duì)穗條處理削成楔形，將SCK（穗條未削面），穗條受創(chuàng)S0（0 min）、S10（10 min）、S40（40 min）后迅速投入液氮，待冷凍2 h后轉(zhuǎn)入到-80℃超低溫冰箱內(nèi)保存；每處理3個(gè)重復(fù)。

砧木處理 將砧木莖段截去上部，保留長(zhǎng)度2 cm，將ZCK（莖段未縱切）和砧木根系，莖段受創(chuàng)Z0（0 min）、Z10（10 min）后迅速投入液氮；砧木去除莖段和萌發(fā)種子后的根部整體投入液氨；上述砧木莖段和根部材料在液氮中冷凍2 h 后轉(zhuǎn)入-80℃超低溫冰箱內(nèi)保存；每次處理3個(gè)重復(fù)。

激素測(cè)定 參照杜維等［27］和Pan［28］方法。使用AB 公司Qtrap6500 質(zhì)譜儀，采用HPLC-MS/MS方法對(duì)植物激素進(jìn)行定量分析。對(duì)吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GA3）、玉米素（Zetin），反式玉米素（TZR）、水楊酸（SA）、茉莉酸（JA）和脫落酸（ABA）6種激素進(jìn)行測(cè)定。將試驗(yàn)材料在液氮中研磨至粉碎，準(zhǔn)確稱量約1.0 g新鮮樣品，向粉末中加入10 mL異丙醇/鹽酸提取緩沖液，同時(shí)加入8μL 1μg·mL-1的內(nèi)標(biāo)溶液4℃震蕩6 h；加入20 mL 二氯甲烷，4℃震蕩30 min；4℃，18 894 r·min-1離心5 min，取下層有機(jī)相；避光，以氮?dú)獯蹈捎袡C(jī)相，以400μL 甲醇（0.1%甲酸）溶解；過(guò)0.22 μm 濾膜，進(jìn)HPLC-MS/MS 檢測(cè)。色譜柱：poroshell 120 SB-C18 反相色譜柱（2.1×150，2.7 μm）；柱溫：30℃；流動(dòng)相：A∶B=（甲醇/0.1%甲酸）∶（水/0.1%甲酸）；洗脫梯度：0～1 min，A=20%；1～9 min，A 遞增至80%；9～10 min，A=80%；10～10.1 min，A 遞減至20%；10.1～15 min，A=20%，進(jìn)樣體積：2μL。質(zhì)譜條件氣簾氣：15 psi，噴霧電壓：4 500 v，霧化氣壓力：65 psi，輔助氣壓力：70 psi，霧化溫度：400 ℃。

1.3 數(shù)據(jù)分析

利用Excel 2010 版和SPSS19.0 對(duì)采集數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。在Excel 2010 中計(jì)算各性狀的平均數(shù)值規(guī)律。運(yùn)用SPSS 19.0 開(kāi)展單因素方差分析法（One-Way ANOVA）的LSD 和Duncan 檢驗(yàn)對(duì)激素?cái)?shù)值進(jìn)行方差分析，并進(jìn)行雙變量相關(guān)性分析。

2 結(jié)果和分析

2.1 穗條內(nèi)源激素含量的變化

穗條內(nèi)源激素含量在品種間存在差異（見(jiàn)圖1），18 號(hào)TZR、Zeatin 和SA 含量總體高于53 號(hào)。18 號(hào)的IAA、SA 和JA 含量在創(chuàng)傷后隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸降低，SCK 及各時(shí)間點(diǎn)間存在顯著差異；ABA 在創(chuàng)傷后下降后逐步上升，在S10 達(dá)最高值327.562 g·kg-1，SCK 及各時(shí)間點(diǎn)間存在顯著差異；TZR 在創(chuàng)傷后快速上升，在S10時(shí)達(dá)最高值1.589 g·kg-1后逐漸下降，總體受創(chuàng)后高于SCK；Zeatin 在SCK 與受創(chuàng)各時(shí)間點(diǎn)均存在顯著差異，S0～S40 間無(wú)顯著差異。53號(hào)IAA 在S0下降，S10和S40上升且與SCK間無(wú)顯著差異；ABA 含量S0 達(dá)最高值436.969 g·kg-1，S0 與S40 存在顯著差異；TZR 含量在S10 出現(xiàn)低值0.305 g·kg-1，SCK、S0、S40 間無(wú)顯著差異；Zeatin創(chuàng)傷后逐漸下降，S10達(dá)到低值0.087 g·kg-1；SA在S10達(dá)最低值2 638.151 g·kg-1后上升，SCK與S0，S10 與S40 間無(wú)顯著差異；JA 在SCK 和S0 較低，S10升至最高值1 995.614 g·kg-1。

2.2 砧木莖段嫁接部位內(nèi)源激素變化

砧木莖段作為植物旺盛的生長(zhǎng)部位，創(chuàng)傷前后品種間存在差異（見(jiàn)圖2）。IAA、Zeatin 和TZR在18 號(hào)和53 號(hào)間具有相似的變化，呈現(xiàn)Z0 降、Z10升趨勢(shì)，IAA、Zeatin在Z0與ZCK 和Z10存在顯著差異，除Zeatin 在Z10 高于CK，其他激素類型均低于ZCK。品種間18 號(hào)具有較高的ABA 和SA 含量；ABA 在各時(shí)期存在顯著差異，受創(chuàng)后含量下降至1.666 g·kg-1；TZR 在各時(shí)期間無(wú)顯著差異，Z10達(dá)最低值0.515 g·kg-1；SA 在Z0 與ZCK 和Z10 存在顯著差異；創(chuàng)傷后兩激素含量雖有所下降，但依然高于53 號(hào)，而JA 在砧木莖段ZCK 含量較低，創(chuàng)傷后Z10 時(shí)顯著提升，且53號(hào)具有較高的含量；53號(hào)的ABA和SA在Z0含量分被為1.666、12.910 g·kg-1，但隨后在Z10 開(kāi)始下降，ABA 的Z10 與ZCK 和Z0存在顯著差異，SA 的ZCK、Z0、Z10 三者間存在顯著差異。JA 在兩品種間變化趨勢(shì)相似均在Z10 達(dá)到高值，激素含量53 號(hào)高于18 號(hào)，Z10 與ZCK 和Z0間存在顯著差異。綜上表明品種間隨受創(chuàng)時(shí)間的延長(zhǎng)，內(nèi)源激素含量得到恢復(fù)；除JA 含量在53號(hào)較高外，其他激素含量18號(hào)高于53號(hào)。

2.3 砧木莖段和根部?jī)?nèi)源激素含量分析

砧木根部和莖段的內(nèi)源激素含量存在差異（見(jiàn)圖3）。IAA 和ABA 莖段高于根部；TZR、Zeatin和JA 根部高于莖段。18 號(hào)的SA 莖段高于根部，53 號(hào)為根部高于莖段，且在根部?jī)?nèi)含量較低。品種間18 號(hào)砧木內(nèi)源激素中的IAA、ABA、TZR、Zeatin和SA含量高于53號(hào)。

2.4 穗條受創(chuàng)后內(nèi)源激素相關(guān)性分析

創(chuàng)傷后品種間相關(guān)性在部分激素間存在明顯差異（見(jiàn)表1）。18 號(hào)穗條內(nèi)IAA 與SA（r0.01=0.977）和JA（r0.01=0.943）存在極顯著正相關(guān)，與TZR 存在顯著正相關(guān)（r0.05=0.700）；TZR 與Zeatin存在極顯著相關(guān)（r0.01=0.733），與SA和JA呈顯著相關(guān)；SA與JA存在極顯著相關(guān)（r0.01=0.962）。53 號(hào)IAA 與ABA（r0.05=-0.763）和SA（r0.01=-787）存在顯著負(fù)相關(guān)，與JA（r0.05=0.845）存在極顯著正相關(guān)，TZR 與Zeatin、SA 存在極顯著正相關(guān)，與JA（r0.01= -0.874）存在極顯著負(fù)相關(guān)；Zeatin 與SA（r0.01=-0.806）存在極顯著正相關(guān)，與JA（r0.01=-0.846）存在極顯著負(fù)相關(guān)，SA與JA（r0.01=-0.891）存在極顯著負(fù)相關(guān)。綜上表明18 號(hào)創(chuàng)傷后各激素間多為正向協(xié)同變化，生長(zhǎng)素含量受多種激素影響；53 號(hào)促進(jìn)細(xì)胞分裂激素與抗病菌類激素SA 協(xié)同正向變化，但受抗逆境激素ABA 和JA 的負(fù)調(diào)節(jié)，表明環(huán)境脅迫時(shí)可能影響到愈傷組織的形成。

2.5 砧木受創(chuàng)后內(nèi)源激素間相關(guān)性分析

表1 受創(chuàng)后穗條內(nèi)源激素間的相關(guān)性分析Table 1 The analysis of correlation among endogenous hormones in scions after wound

砧木莖段受創(chuàng)后內(nèi)源激素相關(guān)性結(jié)果顯示品種間存在差異（見(jiàn)表2）。18 號(hào)除IAA 與ABA 和SA，ABA 與JA 存在顯著正相關(guān)外，其他激素間存在極顯著正相關(guān)。53 號(hào)的IAA 與Zeatin（r0.01=0.918）存在極顯著相關(guān)，與TZR（r0.05=0.856）存在顯著相關(guān)；TZR與Zeatin（r0.01=0.937）和JA（r0.01=0.973）存在極顯著正相關(guān)，與SA（r0.05=0.845）存在顯著負(fù)相關(guān)；JA 與SA（r0.01=-0.915）存在極顯著負(fù)相關(guān)。綜上表明18 號(hào)受創(chuàng)后內(nèi)源激素間正向協(xié)同變化，促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)的同時(shí)抵御外界影響；53 號(hào)內(nèi)源激素間僅部分存在顯著或極顯著相關(guān)性，SA 與JA 和細(xì)胞分裂素類（TZR 和Zeatin）的負(fù)相關(guān)顯示出病菌侵害引發(fā)SA 含量增加時(shí)，將延滯細(xì)胞愈傷組織形成，降低抗逆境激素水平。

表2 砧木受創(chuàng)后內(nèi)源激素間的相關(guān)性分析Table 2 The analysis of correlation among endogenous hormones in rootstocks after wound

表3 砧木莖段和根部?jī)?nèi)源激素間相關(guān)性分析Table 3 The analysis of correlation among endogenous hormones in stem and roort of rootstocks

2.6 砧木莖段和根部?jī)?nèi)源激素間相關(guān)性分析

砧木根莖作為整體的內(nèi)源激素相關(guān)性在品種間總體相同，但SA 在品種間有所不同（見(jiàn)表3）。IAA 與ABA 存 在 極 顯 著 正 相 關(guān)，IAA 和ABA 與TZR、Zeatin和JA存在極顯著負(fù)相關(guān)，TZR與Zeatin和JA 存在極顯著正相關(guān)，Zeatin 與JA 存在極顯著正相關(guān)；18 號(hào)中SA 與IAA、ABA 存在極顯著正相關(guān)，與TZR、Zeatin 和JA 存在極顯著負(fù)相關(guān)；53 號(hào)為SA 與IAA、ABA 存在極顯著負(fù)相關(guān)，與TZR、Zeatin和JA存在極顯著正相關(guān)。以上表明未創(chuàng)傷時(shí)根莖激素間的協(xié)同或抑制水平，SA作為防御病菌侵害的激素可能影響著兩品種嫁接后的愈合和生長(zhǎng)。

2.7 穗條受創(chuàng)后內(nèi)源激素間比值分析

激素間既相互制約也相互促進(jìn)，品種間激素比值存在差異（見(jiàn)圖4）。兩品種的IAA/TZR、IAA/Zeatin 值較高；IAA/TZR 和IAA/Zeatin 在53號(hào)S0均下降，S10 時(shí)分別達(dá)到17.99 和63.42 高值后下降；而18 號(hào)在SCK 分別達(dá)最高值23.26 和31.04 后逐漸下降，S40 時(shí)達(dá)最低值。ABA 與TZR 和Zeatin 比值高于ABA/JA；ABA/Zeatin和ABA/TZR均在53號(hào)S10 時(shí)達(dá)最高值，分別為4 720.64 和1 346.88，且變化趨勢(shì)相同；18 號(hào)最高值分別在S10 和SCK，其值分別為1188.41 和1519.20，兩比值變化趨勢(shì)不同。品種間SA/JA 為53 號(hào)＞18 號(hào)，而在SA/ABA為；53 號(hào)SA/JA 在SCK 時(shí)最高，隨后下降，而SA/ABA 較為穩(wěn)定；18 號(hào)兩比值創(chuàng)傷后呈現(xiàn)相反趨勢(shì)，SA/JA 逐漸上升，在S40 時(shí)達(dá)最高值4.99，而SA/ABA 隨時(shí)間逐漸下降。TZR/SA 和TZR/JA 為18 號(hào)＞53 號(hào)，18 號(hào) 最 高 值 在SCK 為21914.51 和3797.86，隨創(chuàng)傷時(shí)間增加而降低。綜上表明53號(hào)創(chuàng)傷后IAA 和ABA 與其他激素比值高于18號(hào)，S10 為峰值。

2.8 砧木受創(chuàng)后內(nèi)源激素間比值分析

砧木受創(chuàng)后激素比值差異顯著（見(jiàn)圖5）。IAA 與ABA、TZR 和JA 比值在各時(shí)期變化較小，IAA/Zeatin值在品種間和處理間存在差異，Z0達(dá)到高值，18 號(hào)和53 號(hào)分別為61.07 和647.16。ABA與各激素比值在品種間變化趨勢(shì)不同，創(chuàng)傷后53號(hào)高于18 號(hào)；創(chuàng)傷后53 號(hào)ABA/Zeatin 值在Z0 達(dá)421.24，高 于ZCK 的10.20 和Z10 的30.98；18 號(hào)ABA/Zeatin 值在ZCK 最高為37.60，受創(chuàng)后Z0 和Z10 均低于該值，ABA 與TZR 和JA 的比值較低。SA/ABA 和SA/JA 值 在53 號(hào) 總 體 低 于18 號(hào)，SA/ABA＞SA/JA，兩比值在53號(hào)Z0達(dá)最高值，分別為6.56 和0.60，而18 號(hào)的兩激素比值在ZCK 達(dá)最高值19.09 和8.75 后，隨受創(chuàng)時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸降低。TZR/SA 和TZR/JA 值在品種間存在巨大差異，53號(hào)最高值分別為ZCK 的0.12 和0.03，18 號(hào)則分別為ZCK的105.37和Z10的50.72。以上表明砧木莖段創(chuàng)傷后產(chǎn)生的激素在種類和比值具有顯著差異，顯示出品種特性對(duì)植物應(yīng)激反應(yīng)的影響，這些因素可能使砧木在嫁接后產(chǎn)生明顯不同的嫁接愈合效果。

3 討論

本研究中穗條除SA 和JA 外，53 號(hào)受創(chuàng)前含量?jī)?yōu)于18 號(hào)；由于SA 和JA 分別作為抵御病菌和快速響應(yīng)逆境并激活干細(xì)胞修復(fù)受損細(xì)胞的激素［22，29～30］，說(shuō)明18 號(hào)自身防御能力較高；受創(chuàng)后53號(hào)ABA、SA、JA 含量占優(yōu)，顯示較強(qiáng)的應(yīng)激防御機(jī)制。由于IAA 作為信號(hào)感知、傳遞，進(jìn)而調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育的重要激素，脅迫環(huán)境提高IAA 含量，誘導(dǎo)原形成層細(xì)胞的生成［31～33］，有研究表明高濃度的生長(zhǎng)素，原形成層細(xì)胞在細(xì)胞分裂素降低后進(jìn)一步分化植物維管束系統(tǒng)的形成，而細(xì)胞分裂素是受創(chuàng)后愈傷組織形成的關(guān)鍵激素，激活多個(gè)發(fā)育調(diào)控因子［34］；受創(chuàng)后18 號(hào)在促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的激素含量及生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值具有優(yōu)勢(shì)，相較更有利于愈傷組織形成和分化。由于生產(chǎn)中18號(hào)生長(zhǎng)旺盛而53號(hào)遲滯生長(zhǎng)，激素間53號(hào)抗逆類激素與生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素間極顯著負(fù)相關(guān)，是否穗條較高的防御機(jī)制影響嫁接后器官分化和生長(zhǎng)還有待進(jìn)一步研究。18 號(hào)和53 號(hào)內(nèi)均測(cè)出IAA 分別為3.87 和3.52 mg·kg-1，但杜維等報(bào)道油茶枝條中未檢測(cè)到IAA［27］，可能品種因素影響枝條內(nèi)源激素含量。

砧木根部和莖段作為整體為嫁接后生長(zhǎng)提供支持，特別是根系為合成植物激素等物質(zhì)的源庫(kù)，與莖段間通過(guò)調(diào)控其輸出或輸入內(nèi)源激素來(lái)影響激素含量，進(jìn)行信息交流和協(xié)調(diào)生長(zhǎng)，使植株內(nèi)部相互促進(jìn)或抑制的內(nèi)源激素水平達(dá)到平衡［35～37］。本研究中兩品種的根莖激素相關(guān)性r0.01＞0.9說(shuō)明受創(chuàng)前內(nèi)源激素處于平衡狀態(tài)，且砧木莖段具有較高的IAA 和ABA，而根系內(nèi)則細(xì)胞分裂素（TZR 和Zeatin）和JA 占優(yōu)，除JA 外18 號(hào)總體高于53 號(hào)。細(xì)胞分裂素作為重要的根源信號(hào)分子，根系產(chǎn)生的細(xì)胞分裂素響應(yīng)脅迫傷害中發(fā)揮著重要作用［38］。砧木莖段受創(chuàng)后JA 在53號(hào)處于較高水平，其他激素18號(hào)總體依然高于53號(hào)，同時(shí)從ABA和SA 變化趨勢(shì)的差異，反映出JA 可能為53 號(hào)創(chuàng)傷脅迫的主要激素。由于內(nèi)源激素間存在拮抗和協(xié)同的作用，相較18號(hào)受創(chuàng)后各激素間密切的聯(lián)系，53 號(hào)激素含量間無(wú)顯著相關(guān)性，可能受到根系等其他因素影響。由于馮金玲等發(fā)現(xiàn)嫁接部位ABA/TZR、ZR/IAA 等激素比值影響嫁接口形成及形態(tài)建成方向［16］，砧木莖段內(nèi)IAA/TZR、IAA/Zeatin、ABA/Zeatin 在53 號(hào) 總 體 高 于18 號(hào)，而SA/ABA、SA/JA 和TZR/JA 比值18 號(hào)高于53 號(hào)，在砧穗貼合后激素利用與平衡影響嫁接部位愈傷組織形成和器官發(fā)育的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。生產(chǎn)中不僅使用砧木莖段進(jìn)行嫁接，也常用截取砧木根部嫁接繁殖，根部較高的細(xì)胞分裂素含量可能有利于嫁接愈合。

綜上所述，在創(chuàng)傷后砧穗產(chǎn)生一系列的應(yīng)激反應(yīng)，由于遺傳特性等因素的影響，對(duì)于逆境脅迫的響應(yīng)有所不同，產(chǎn)生的內(nèi)源激素含量存在差異；且隨著放置時(shí)間的延長(zhǎng)，砧穗不同特性的內(nèi)源激素含量降低或升高，因此需要根據(jù)品種特性，設(shè)置合理的嫁接時(shí)間；18 號(hào)應(yīng)在10 min 內(nèi)嫁接完成為宜，53 號(hào)嫁接時(shí)間不超過(guò)40 min。上述討論結(jié)果表明53 號(hào)穗條創(chuàng)傷后抗逆激素較高，且后續(xù)嫁接后存活率較高的情況下［4，6］，且由于維管束等器官的發(fā)育依賴于生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素類等激素的作用，品種間對(duì)于脅迫的響應(yīng)差異，可能影響后期生長(zhǎng)的因素在于嫁接部位用于營(yíng)養(yǎng)及生長(zhǎng)物質(zhì)傳輸?shù)木S管束等器官發(fā)育的滯后，抑制了芽位的萌發(fā)。因此有必要針對(duì)遲滯生長(zhǎng)中嫁接部位、根和接穗進(jìn)行一體研究，摸清油茶嫁接后砧穗愈合機(jī)理，從基因表達(dá)和生化角度進(jìn)行分析，為后續(xù)開(kāi)展精準(zhǔn)育苗提供技術(shù)支持。