孫世坤 桑雷 王錦祥 陳冬金 陳巖鋒 謝喜平

（福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 350013）

養(yǎng)兔業(yè)是我國畜牧優(yōu)勢特色產(chǎn)業(yè)之一，閩西南黑兔作為福建省地方特色品種，在福建省龍巖市上杭縣和泉州市德化縣有很大的飼養(yǎng)量，黑兔年出欄量逾200 多萬只，位居全省前列。從2018 年開始，由于兔肉價格提升，越來越多的人從事養(yǎng)兔產(chǎn)業(yè)，地方家兔的養(yǎng)殖集約化程度也在不斷提高，成熟的母兔同期發(fā)情技術(shù)是目前工廠化生產(chǎn)的迫切需求。目前調(diào)控母兔同期發(fā)情的手段主要有激素調(diào)控，如使用前列腺素或孕馬血清促性腺激素等，有研究顯示，長期使用此類藥物容易損傷母兔的繁殖性能[1]。隨著科技的發(fā)展，人們生活水平不斷提高，健康問題越來越受到人們的重視，綠色無公害農(nóng)產(chǎn)品成為人們的關(guān)注重點(diǎn)。人們對食品品質(zhì)的要求也在不斷提高，綠色農(nóng)產(chǎn)品會更加受到人們的青睞，綠色養(yǎng)殖是今后養(yǎng)兔業(yè)發(fā)展的最好出路[2,3]。

動物生殖功能到環(huán)境條件的控制，如光周期、性腺類固醇、能量平衡和壓力。而光環(huán)境是影響動物繁殖的重要因素。有關(guān)GnRH 對家兔發(fā)情促進(jìn)作用的研究報道較多[4]。目前認(rèn)為，卵巢雌激素和黃體酮的分泌受到GnRH 和促性腺激素的調(diào)節(jié)。血漿中雌激素水平的改變與處于月經(jīng)循環(huán)的人GnRH 顯示出清楚的關(guān)系[5-7]。試驗(yàn)研究開展了LED 光源對閩西南黑兔同期發(fā)情效果和血清激素的影響，探討不同光質(zhì)能否影響閩西南黑兔下丘腦腦GnRH 的分泌。為闡明家兔的光-神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)提供理論依據(jù)，為綠色養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

試驗(yàn)選擇閩西南黑兔滿月母兔480 只，統(tǒng)一飼養(yǎng)，待母兔長到150 日齡后開始檢測。所有試驗(yàn)兔均由上杭通賢烏兔有限公司提供。

1.2 主要試驗(yàn)器材與試劑

上海紀(jì)寧生物科技有限公司兔用促性腺激素釋放激素ELISA 試劑盒。高速臺式離心機(jī)、酶標(biāo)儀、水浴鍋、移液器等。

1.3 試驗(yàn)方法

剛滿足試驗(yàn)月齡的兔子480 只，其中LED 燈照組160 只，節(jié)能燈光組160 只，自然光照組160 只，每組設(shè)4 個重復(fù)。光照總長為16h，光照時間設(shè)定為6:00～22:00。

1.4 飼養(yǎng)管理

所有試驗(yàn)兔統(tǒng)一飼養(yǎng)，試驗(yàn)兔籠使用樂豐籠具，兔籠備有飲水裝置，LED 燈和雙端熒光燈安裝于兔籠上方，兔籠內(nèi)光照強(qiáng)度保持在80～100Lv。通過定時器定時控制燈光開啟和關(guān)閉的時間，試驗(yàn)期間要對燈帶進(jìn)行定期檢查維修。對照組則接受自然光照。試驗(yàn)日糧均使用青島康大飼料科技有限公司生產(chǎn)提供的573 母兔料。

1.5 指標(biāo)測定

1.5.1 發(fā)情記錄記錄光照前1d、光照后第4 和8 天每只母兔發(fā)情情況（當(dāng)外陰出現(xiàn)粉紅色或紅色則記錄為發(fā)情）。

1.5.2 血樣采集

共分3 次采集血樣，分別為2019 年10 月8 日、10 月12日、10 月16 日，上午10:00 耳緣靜脈采血3ml 用于本試驗(yàn)。采集后的樣品在室溫下靜置30min 后5000 轉(zhuǎn)離心10min，分離血清，置于-20℃冰箱備用。

1.5.3 血清中GnRH 水平測定

通過購買的上海紀(jì)寧生物科技有限公司兔用促性腺激素釋放激素ELISA 試劑盒操作說明對血清樣本進(jìn)行檢測，最后使用酶標(biāo)儀測定血清中GnRH 含量。

1.6 數(shù)據(jù)處理

所得數(shù)據(jù)均用SPSS18.0 軟件分析，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤” 表示，P＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同光源對閩西南黑母兔血清GnRH 的影響

由圖1 可知，LED 燈光組和節(jié)能燈光組在光照前1d 血清中的GnRH 濃度為334.8 和299.07pg/ml，兩者差異不顯著，與自然光照組277.27pg/ml 差異也不顯著（P＞0.05）。在光照后第4 天，光照后第8 天3 組血清中GnRH 水平差異也不顯著。

圖1 LED 燈和節(jié)能燈光對閩西南黑母兔血清促性腺激素釋放激素（GnRH）水平的影響（單位：ng/ml）

2.2 不同光源對閩西南黑母兔發(fā)情率的影響

由圖2 可見，LED 燈和節(jié)能燈光組的發(fā)情率分別為45%和42.5%，兩者之間差異不顯著（P＞0.05），于自然光照組42.5%之間差異也不顯著（P＞0.05）。光照第4 天LED 燈和節(jié)能燈光組的發(fā)情率都為52.5%，差異不顯著。但與自然光照組12.5%相比，節(jié)能燈和LED 燈光組的發(fā)情率顯著高于自然光照組（P＜0.05）。光照第8 天，試驗(yàn)組發(fā)情率分別為95%和90%，兩者差異不顯著，但顯著高于對照組的52.5% （P＜0.05），以上數(shù)據(jù)表明，LED 燈和節(jié)能燈補(bǔ)光對閩西南黑母兔的發(fā)情率有明顯影響。

3 討論

閩西南黑兔屬于小型家兔，被國家畜禽遺傳資源目錄于2010 年收入其中，由于本身抗病力強(qiáng)，肉質(zhì)鮮美被黑兔產(chǎn)區(qū)的人民廣泛接受，認(rèn)為其具有保健滋補(bǔ)的藥用功能[2,3]。至2018年以來，黑兔養(yǎng)殖數(shù)量有突飛猛進(jìn)的增長，但關(guān)于黑兔的同期發(fā)情技術(shù)卻鮮少報道，因此，建立起一套閩西南黑兔同期發(fā)情技術(shù)很有必要，為福建省地方家兔規(guī)模養(yǎng)殖場提供理論數(shù)據(jù)支持。

本試驗(yàn)表明，LED 燈和節(jié)能燈補(bǔ)光兩者對比自然光照對閩西南黑母兔的同期發(fā)情有顯著影響，2014 年宋亞鵬[8]等通過比較LED 光源和節(jié)能燈光源對母兔同期發(fā)情影響進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)LED 光源能有效提高母兔發(fā)情率和受胎率；李士棟等[9]發(fā)現(xiàn)，氦氣燈光和LED 燈光照（通過增加光照強(qiáng)度和光照時間）兩種光都能影響伊高樂母兔發(fā)情，LED 燈光對母兔受胎率和產(chǎn)仔率效果更好；2017 年孟繁臣[10]結(jié)果表明，在配種前母兔血清中的褪黑激素水平差異明顯；在本研究中，我們所測定的閩西南黑母兔在150 日齡光照前1d、光照后第4 天和光照第8 天這3 個時間點(diǎn)血清中GnRh 激素水平并無顯著差異。母兔血清中GnRH 的變化與褪黑激素分泌變化相關(guān)，褪黑激素通過調(diào)節(jié)視交叉上核的下丘腦神經(jīng)元來調(diào)節(jié)動物的生殖活動。體外研究表明，褪黑激素對GnRH 釋放起抑制作用。但本試驗(yàn)的結(jié)果并沒有達(dá)到這個效果，（1）可能與光照作用的機(jī)理涉及丘腦下部的連接區(qū)域，由于光照調(diào)節(jié)在該部位激素結(jié)合量微小的緣故。（2）試驗(yàn)開展時間，季節(jié)變化對母兔繁殖周期的影響。（3）地方品種之間的差異。以上都需要進(jìn)一步研究。

圖2 LED 燈和節(jié)能燈光對閩西南黑母兔發(fā)情率的影響（單位：%）

綜上所述，LED 燈和節(jié)能燈光都能顯著影響閩西南黑兔的發(fā)情，LED 燈比節(jié)能燈更適合于閩西南黑母兔同期發(fā)情。