賀安祥，劉 曦，張康林，衡久紅，余華香，程 川

(甘孜州畜牧業(yè)科學(xué)研究所，四川 康定 626000)

0 引言

牦牛出血性敗血癥是高寒牧區(qū)牦牛常見病，雖然甘孜州高度重視該病的免疫預(yù)防工作，但該病在州內(nèi)發(fā)生仍很嚴(yán)重，是牦牛冬春死亡的重要原因，給廣大農(nóng)牧民造成了巨大的經(jīng)濟損失。為搞清甘孜州“牦牛出敗”的發(fā)病情況，2018年以來，甘孜州畜牧業(yè)科學(xué)研究所組成項目調(diào)查組開展了該病的疫情監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查等相關(guān)研究，以期能為該病的防控提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支撐。

1 牦牛出敗的病原體和發(fā)病特征

1.1 基本概念

1.1.1 巴氏桿菌屬致病菌

巴氏桿菌屬中是對各種家畜、家禽、野生動物有致病作用的細(xì)菌，主要包括多殺性巴氏桿菌、溶血性巴氏桿菌和嗜肺性巴氏桿菌等。其中，多殺性巴氏桿菌是本屬最重要的畜禽致病菌，其次是溶血性巴氏桿菌。多殺性巴氏桿菌能夠感染多種動物，引起的疾病主要有鳥類的禽霍亂，豬萎縮性鼻炎，有蹄類動物的出血性敗血癥，犢牛、綿羊、山羊和兔的肺炎。人對巴氏桿菌也有易感性，但人的巴氏桿菌病極為罕見，幾乎不發(fā)生敗血癥，僅有少量報道引起人的腦炎和傷口膿腫[1]。

1.1.2 牦牛出血性敗血癥

簡稱“牦牛出敗”，又稱牦牛巴氏桿菌病。是由多殺性巴氏桿菌引起的牦牛急性、熱性傳染病，以高溫、肺炎、急性胃腸炎及內(nèi)臟器官廣泛出血為特征。臨床可分為敗血型、水腫型和肺炎型3種。

1.2 發(fā)病特征

1.2.1 病原體

多殺性巴氏桿菌為兩端鈍圓，中間微凸，革蘭氏染色陰性的小球桿菌，多散在、無鞭毛、不能運動、不形成芽胞。病料組織或體液涂片用瑞氏染色、姬姆薩染色或美藍(lán)染色鏡檢，可見典型的兩極著色，所以又稱兩級桿菌。用印度墨汁等染料染色時，可看見清晰的莢膜。根據(jù)特異性莢膜(K)抗原分類，可分為A、B、D、E、F共5種血清型；按菌體脂多糖(LPS)抗原進(jìn)行分類，則可分為16個血清型。A型、B型或E型可以引發(fā)的牛出血性敗血癥，甘孜州內(nèi)以A型較常見。多殺性巴氏桿菌在48h內(nèi)可分解葡萄糖、果糖、單奶糖、蔗糖和甘露糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。一般不發(fā)酵乳糖、鼠李糖、菊糖、水楊苷和肌醇可產(chǎn)生硫化氫，能形成靛基質(zhì)，MR和VP試驗為陰性，接觸酶和氧化酶試驗為陽性。本菌對外界抵抗力不強， 在干燥環(huán)境中2～3 d死亡，在血液、排泄物或分泌物中可生存6～10 d，陽光直射下數(shù)分鐘死亡，高溫立即死亡。一般消毒液均能在短時間內(nèi)殺死該菌[1]。

豬、馬、牛、羊、兔及禽類等的巴氏桿菌病，分別由不同血清型的多殺性巴氏桿菌所引起，但在一定條件下，各種動物間可以交叉感染。

1.2.2 臨床癥狀

1)敗血型。表現(xiàn)精神沉郁，食欲減退或廢絕，體溫升高達(dá)41℃～42℃，心跳加快，鼻鏡干燥，反芻停止，腹痛，腹瀉，糞呈粥樣或水樣，混有黏液或血液，味惡臭，有時鼻孔內(nèi)和尿中有血，不久體溫下降，病程一般在12～24 h，常來不及查清病因就迅速死亡。

2)水腫型。除呈全身癥狀外，在頸部、咽喉部及胸前的皮下結(jié)締組織出現(xiàn)炎性水腫，初熱痛而發(fā)硬，后無熱，疼痛輕；舌及周圍組織高度腫脹，伸出齒外，呈暗紅色；眼紅腫流淚，呼吸高度困難，皮膚和黏膜普遍發(fā)紺，往往因窒息而死。病程多為12～36 h，在臨床上多見此類型。

3)肺炎型。表現(xiàn)為急性纖維素性胸膜肺炎癥狀，體溫高達(dá)39.5℃～41℃，呼吸困難，鼻流漿液或膿性鼻液，痛性濕咳，呼吸頻率加快；胸部叩診雙側(cè)肺有痛覺及實音區(qū)，聽診有支氣管呼吸音及水泡性雜音，有時有摩擦音；便秘，有時下痢，糞便帶血或黏膜。病程較長，可達(dá)3～7 d，常因衰竭而死亡。

1.2.3 病理變化

1)敗血型。呈敗血癥變化，即在黏膜、漿膜以及肺、舌、皮下組織和肌肉都有出血點；內(nèi)臟器官充血，肝臟和腎臟實質(zhì)變性；脾臟無變化或有小出血點；淋巴結(jié)充血，水腫；胸膜腔內(nèi)有大量滲出液。

2)水腫型。頸部、下頜及胸前皮下和肌肉組織呈現(xiàn)膠樣水腫，切開后水腫部結(jié)締組織有黃色透明液體流出并伴有出血；局部淋巴結(jié)水腫、出血；肝、腎、心臟等實質(zhì)器官發(fā)生變性和有出血點。

3)肺炎型。主要病變?yōu)榇笕~性纖維素性胸膜肺炎；胸腔內(nèi)有大量漿液性纖維素性滲出液，肺臟和胸膜覆有一層纖維素膜；肺臟間質(zhì)水腫增寬，有不同肝變期變化，肺切面呈大理石狀，出現(xiàn)壞死灶或膿腫。病程較長者見有肺充血、水腫；有時還有纖維素性腹膜炎，胃腸卡他性病變。

2 流行病學(xué)調(diào)查

2.1 基本情況

甘孜藏族自治州位于四川省西部，青藏主高原東南緣，是四川盆地向青藏高原的過渡帶，總幅員面積15.26萬km2。甘孜州是多民族聚居地區(qū)，其中藏族人口占總?cè)丝诘?8.7%。復(fù)雜的地形地貌形成了由山地亞熱帶到山地亞寒帶再至寒帶完整氣候帶。大部高原和山地表現(xiàn)為長冬無夏或春秋相連，極端最低氣溫達(dá)到-41.5℃，年均氣溫多數(shù)地區(qū)在8℃以下，丘狀高原地區(qū)和中部高山地區(qū)最高氣溫在30℃以下，大部分地區(qū)最低氣溫在-14℃以下。歷年平均有霜日數(shù)為180～228 d，無絕對無霜期。全州畜種資源豐富，主要有牛(牦牛、黃牛)、羊(藏綿羊、藏山羊)、馬、驢、騾、豬、雞、兔、蜂等。牦牛是甘孜州主要的地方畜種資源，主要分布在牧區(qū)草原和半農(nóng)半牧區(qū)高山峽谷地帶，是高原牧區(qū)農(nóng)牧民不可缺少的生產(chǎn)資料和生活資源。

2.2 流行病學(xué)調(diào)查[2]

2.2.1 流行歷史

“牦牛出敗”在甘孜州牧區(qū)常有散發(fā)，有時呈地方性流行，半農(nóng)半牧區(qū)零星發(fā)生，而農(nóng)區(qū)較少見。據(jù)資料記載，1925年該病曾流行于白玉縣昌臺牧區(qū)，死亡牦牛200余頭。1951年甘孜、爐霍、德格等地先后發(fā)生該病，引起牦牛大量死亡。1976-1978年全州疫病普查中，全州各縣共3 024個生產(chǎn)隊，1976年有427個生產(chǎn)隊發(fā)生疫情，共發(fā)病5 274頭、死亡2 847頭、占牦?？偹劳龅?.26%；1977年有370個生產(chǎn)隊發(fā)生疫情，共發(fā)病4 864頭、死亡2 735頭、占牦?？偹劳龅?.10%；1978年有225個生產(chǎn)隊發(fā)生疫情，共發(fā)病2 882頭、死亡1 751頭、占牦牛總死亡的1.56%。據(jù)調(diào)查，野生動物在該病傳播中的作用不可忽視，1984年色達(dá)縣5戶牧戶發(fā)病51頭、死亡29頭、致死率56.8%，1985年甘孜縣發(fā)病21頭、死亡13頭、致死率61.8%，兩縣都是由于有牛被狼咬傷而傳播的。自從1963年起，全州每年注射1～2次牛出敗氧化鋁菌苗，1989年“牦牛出敗”疫情基本上得到了控制。但2010年以來，牧區(qū)疫情有所反彈，2014-2015年，北部石渠、德格等縣發(fā)生局部流行和暴發(fā)，死亡牦牛上萬頭，究其原因主要是放松了預(yù)防工作，造成個別鄉(xiāng)村發(fā)生和流行此病。

2.2.2 流行特點

發(fā)病牛潛伏期一般為2～5 d，具有高致死率。該病在新疫區(qū)表現(xiàn)為暴發(fā)形式，老疫區(qū)多為散發(fā)或地方流行性，無明顯的季節(jié)性，但冬春氣候嚴(yán)酷，飼草料短缺等因素是該病主要的發(fā)病誘因。此外，氣候驟變、飼料突變、長途遷移、過度疲勞、寄生蟲病等，導(dǎo)致牦牛營養(yǎng)缺乏和應(yīng)激，機體抵抗力降低也常常誘發(fā)該病。

1)易感動物。牦牛最易感染，犏牛次之，且各種年齡階段的牛均能發(fā)病，而以1歲以上牦牛發(fā)病較多。

2)傳播途徑。健康牦牛的呼吸道、消化道內(nèi)常帶菌，與宿主呈共棲狀態(tài)。當(dāng)機體抵抗力降低，引起病菌迅速增殖，經(jīng)淋巴循環(huán)進(jìn)入血液，發(fā)生內(nèi)源性傳染。病牛的肺組織、胸腔滲出液和氣管分泌物等中存在大量病原菌，病牛通過排泄物、分泌物，以及咳嗽、噴嚏，向體外排出大量有毒力的病菌，在急性菌血癥時也可經(jīng)尿、乳汁排菌，污染圈舍、用具、飼料和飲水。健康牛經(jīng)消化道、呼吸道感染，也可經(jīng)損傷的皮膚、黏膜及吸血昆蟲的傳播發(fā)生感染。

3)發(fā)病率和發(fā)病季節(jié)調(diào)查。為掌握甘孜州牦牛出敗的發(fā)病情況，2018年4月-2020年6月，項目調(diào)查組在全州18個縣對2 164頭牦牛進(jìn)行了該病的發(fā)病情況調(diào)查，其中，發(fā)病率、致死率情況，如表1所示，不同季節(jié)發(fā)病情況，如表2所示。

表1 甘孜州“牦牛出敗”發(fā)病率、致死率情況統(tǒng)計表

表2 甘孜州“牦牛出敗”不同季節(jié)發(fā)病情況統(tǒng)計表

從調(diào)查結(jié)果看，甘孜州牦牛出敗的發(fā)病率9.15%、致死率38.89%。在不同季節(jié)，冷季(前年11月-次年4月)發(fā)病率9.93%、致死率43.44%；暖季(5-10月)發(fā)病率8.13%、致死率31.58%。

3 發(fā)病原因分析

3.1 免疫因素

甘孜州草原廣袤，基層獸醫(yī)特別是村防員數(shù)量少，技能素質(zhì)差，村獸防員注射疫苗時技術(shù)處理不當(dāng)，劑量不足、漏針、漏群、不及時，加之菌苗免疫期短，劑量大，疫苗貯存不當(dāng)及質(zhì)量問題等原因?qū)е旅庖呤《l(fā)生該病。

3.2 環(huán)境因素

甘孜州牧區(qū)海拔高，寒冷缺氧，氣候變化大，特別是冬春季節(jié)，飼草枯黃，加之積雪覆蓋，牦牛覓食困難，導(dǎo)致牦牛營養(yǎng)缺乏，體質(zhì)下降，抵抗力降低，往往引起內(nèi)源性感染而誘發(fā)該病。此外，牧區(qū)地廣人稀，野生動物如狼、巖羊、黃羊等分布廣泛而活動頻繁，野生動物的活動區(qū)域和家養(yǎng)牦牛、“放生”牦牛有交集，有可能引起交叉感染由野生動物傳播該病。

3.3 人為因素

牧民普遍科學(xué)素養(yǎng)低，防疫意識差，對病死牛尸體不處理或處理不當(dāng)，病牛也多不采取隔離措施，使其排泄物、分泌物、飛沫等排出病菌，污染草場、飲水、圈舍以及周圍環(huán)境，導(dǎo)致牦牛感染發(fā)病。

4 防治對策

4.1 加強飼養(yǎng)管理

加強對牦牛的飼養(yǎng)管理，在枯草和寒冷期適當(dāng)補飼，增強牛群的抵抗力，減少內(nèi)源性感染的發(fā)生。保持圈舍及環(huán)境衛(wèi)生，盡量避免擁擠、受寒和過度勞累，不到低洼、潮濕地方放牧。此外，要加強基層獸醫(yī)專業(yè)技術(shù)隊伍建設(shè)，積極開展基層獸防員防治知識和技能培訓(xùn)。

4.2 免疫接種

疫苗應(yīng)符合《獸用生物制品管理辦法》《動物防疫條件審查辦法》相關(guān)規(guī)定，具有生產(chǎn)許可證和批準(zhǔn)文號，并且是適合本地區(qū)菌株的牛多殺性巴氏桿菌病疫苗?？蛇x用巴氏桿菌病滅活苗、凍干活菌苗及細(xì)菌亞單位苗進(jìn)行預(yù)防接種。具體免疫時間根據(jù)各地區(qū)流行情況而定，散發(fā)地區(qū)1年免疫1次，多發(fā)地區(qū)每年春、秋2季免疫2次。接種劑量為體重100 kg以下的牛注射4 mL，100 kg以上的牛注射6 mL。免疫接種可有效地預(yù)防該病的發(fā)生。發(fā)生疫情時，對疫區(qū)內(nèi)假定健康牛群應(yīng)進(jìn)行緊急接種。

4.3 消毒和無害化處理

定期對牦牛圈舍、生產(chǎn)用具及周圍環(huán)境進(jìn)行清潔消毒。特別是疫情發(fā)生后，要對病牛的圈舍、器具以及可能污染的場地進(jìn)行嚴(yán)格消毒。病死牛的尸體、糞尿及污染物應(yīng)嚴(yán)格按《GB/T16548畜禽病害肉尸及其產(chǎn)品無害化處理規(guī)程》規(guī)定處理。

4.4 疫情報告和處置

發(fā)現(xiàn)該病或者疑似病例，應(yīng)及時向當(dāng)?shù)孬F醫(yī)主管部門、動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)、動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)報告。由縣級以上地方人民政府獸醫(yī)主管部門劃定疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)，禁止病牛和疑似病牛及其產(chǎn)品輸出疫區(qū)，禁止非相關(guān)人員、車輛、動物等進(jìn)入疫區(qū)。同時，要對染疫、疑似染疫動物采取隔離等控制措施，防止動物疫情擴散。發(fā)病后盡早確診，對隔離疫區(qū)內(nèi)病牛和疑似病牛進(jìn)行嚴(yán)格隔離。對發(fā)病的牛群進(jìn)行藥物治療，通過控制傳染源，將疫情控制在最小的范內(nèi)。

4.5 治療

對牦牛巴氏桿菌病應(yīng)按照早發(fā)現(xiàn)、早治療的原則，采用抗菌消炎，配合對癥支持療法?？咕祝缙诳蛇x用對本菌敏感的抗菌素，如青霉素、鏈霉素、紅霉素、四環(huán)素、林可霉素、頭孢噻呋、氟喹諾酮類及磺胺類等藥物，有條件配合應(yīng)用高免血清效果更好。同時，依據(jù)病牛臨診表現(xiàn)，采用解熱、鎮(zhèn)痛、強心、補液、解毒等對癥支持療法。該病晚期和重癥病例療效不佳。另外，采用中藥療法配合治療，臨床上也取得了較好效果，下面推薦2個臨床處方。

1)中獸醫(yī)經(jīng)驗方。加減普濟消毒飲：大黃、薄荷、玄參、柴胡、桔梗、連翹、荊芥、板藍(lán)根各60 g，酒黃芩、甘草、馬勃、牛蒡子、青黛、陳皮各30 g，滑石120 g，酒黃連25 g，升麻20 g。水煎候溫灌服(成牛用量)。

2)藏獸醫(yī)經(jīng)驗方。寒廣散：寒水石2 500 g，廣木香1 000 g，干姜、訶子各250 g，大黃2 000 g，土堿3 000 g，共碾為細(xì)末，按牛的體質(zhì)強弱，用此品6～21 g，加水一次灌服。