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伊犁馬對(duì)補(bǔ)喂α-酮異己酸的吸收及其某些相關(guān)代謝的研究

2021-01-25 06:45賴曉鶴張文杰艾畢肯楊開倫
中國飼料 2021年1期
關(guān)鍵詞:甲基血漿氨基酸

賴曉鶴,張文杰,韓 明,艾畢肯,劉 律,楊開倫

(新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,新疆肉乳用草食動(dòng)物營養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆烏魯木齊830052)

α-酮異己酸(KIC)是亮氨酸合成與分解的中間代謝產(chǎn)物,能夠與亮氨酸通過支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶(BCAT)進(jìn)行可逆的轉(zhuǎn)化,KIC也是肝臟生成β-羥基-β-甲基丁酸(HMB)的直接前體物質(zhì)。研究表明,KIC具有促進(jìn)肌肉蛋白質(zhì)合成(Van和Edwarda,2005)、抑制蛋白質(zhì)降解(Tischler 等,1982)、調(diào)節(jié)能量代謝(Moghei等,2016;Zhou 等,2010)及氮平衡(Sapir等,1983)等多種生理作用。在機(jī)體內(nèi)KIC能夠與亮氨酸相互轉(zhuǎn)化,但KIC在降低血漿游離氨基酸濃度、促進(jìn)骨骼肌蛋白質(zhì)合成和降低血漿中尿素氮濃度等方面更加有效(Duan等,2019)。

Duan等(2019)給仔豬通過飼糧補(bǔ)喂1.25%KIC-Ca發(fā)現(xiàn),其可促進(jìn)肌肉蛋白質(zhì)合成能力和抑制蛋白質(zhì)降解。給禁食仔雞補(bǔ)喂2.25 mg/kg的KIC能夠起到抑制肌原纖維蛋白降解的作用(Nakashima等,2007)。研究發(fā)現(xiàn),通過飼糧補(bǔ)喂1.25%的KIC-Ca能夠促進(jìn)仔豬肌肉組織中脂肪酸氧化,減少脂肪沉積(Duan等,2016)。桑丹等(2009)每天給綿羊分別補(bǔ)喂 0.5、1.0、1.5 g 的瘤胃保護(hù)性KIC-Ca發(fā)現(xiàn),其能夠調(diào)節(jié)氮平衡。每天補(bǔ)喂15 g的瘤胃保護(hù)性KIC-Ca能夠增加羔羊體重(Kuhlman等,1988)。 目前,KIC作為營養(yǎng)添加劑的研究較少,將KIC作為一種添加劑補(bǔ)喂伊犁馬,伊犁馬對(duì)KIC的吸收及其對(duì)體內(nèi)其他氨基酸會(huì)產(chǎn)生怎樣的影響鮮見報(bào)道。本試驗(yàn)選用1歲伊犁馬為研究對(duì)象,探究伊犁馬對(duì)飼糧中補(bǔ)喂不同水平α-酮異己酸的吸收及其某些相關(guān)代謝情況,為KIC在馬匹飼糧中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼糧組成 采取單因素多水平試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,挑選20匹年齡1歲,體重(295.25±25.15)kg的伊犁馬,分成4組,每組 5匹,分別為對(duì)照組、試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組、試驗(yàn)Ⅲ組。試驗(yàn)飼糧由精料補(bǔ)充料和干草組成。不同組馬匹所喂精料補(bǔ)充料不同。精料補(bǔ)充料配方及營養(yǎng)水平見表1,委托新疆伊犁州昭蘇縣駿力農(nóng)牧科技有限公司生產(chǎn)加工。在試驗(yàn)飼糧的基礎(chǔ)上,各試驗(yàn)組補(bǔ)喂不同水平的KIC,KIC以鈣鹽的形式進(jìn)行補(bǔ)喂(購自張家港市思普生化有限公司,純度為99%,有效濃度為87%)。玉米和次粉先按照1:1進(jìn)行混勻,混勻后與KIC鈣鹽按照1:1制作成顆粒料,將顆粒料分為兩份與精料補(bǔ)充料混合補(bǔ)喂。試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組每匹馬KIC有效補(bǔ)喂量分別為6、12、18 g/d。本試驗(yàn)中KIC的補(bǔ)喂量參考了Yarrow等(2007)在運(yùn)動(dòng)員上的應(yīng)用,選用低劑量0.02 g/kg的研究結(jié)果,進(jìn)行為期25 d的補(bǔ)喂試驗(yàn)。精料補(bǔ)充料和干草中氨基酸含量見表2。

表1 精料補(bǔ)充料配方及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))%

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)期間所有馬匹均在同一馬廄,單欄飼養(yǎng)。干草每天每匹馬(8±0.8)kg, 分別在 08:30、13:30、18:30 和 23:30 分 4 次飼喂。精料補(bǔ)充料每天每匹馬3 kg,分別于每天09:00和21:00分2次飼喂。先粗后精,先采食一定量干草,再補(bǔ)給精料補(bǔ)充料,待精料補(bǔ)充料采食完畢后,將馬匹趕入活動(dòng)圈,繼續(xù)采食一定量的干草,自由飲水。每天按時(shí)打掃馬廄,清除糞便,更換墊草。

表2 精料補(bǔ)充料和干草中氨基酸含量(干物質(zhì)基礎(chǔ))%

1.3 樣品采集及指標(biāo)的測定

1.3.1 血漿α-酮異己酸和β-羥基-β-甲基丁酸測定 在試驗(yàn)第25天采集血液,血液采集時(shí)間以補(bǔ)喂前 0 h 開始(8:30)以及補(bǔ)喂后的 1 h(10:00)、2 h(11:00)和 4 h(13:00),通過頸靜脈采集血液置于肝素鈉抗凝管中,以3500 r/min離心10 min,收集上清血漿,分裝于1.5 mL Eppendorf管中,分裝完畢后在-20℃冰箱中進(jìn)行凍存。

血漿α-酮異己酸和β-羥基-β-甲基丁酸濃度均由北京普瑞華盛生物科技有限公司采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行定量分析檢測。

1.3.2 血漿游離氨基酸測定 在試驗(yàn)第25天采集血液,通過頸靜脈于補(bǔ)喂后2 h(11:00)采集血液至肝素鈉抗凝管中,以3500 r/min離心10 min,收集上清血漿,分裝于1.5 mL Eppendorf管中,分裝完畢后在-20℃冰箱中進(jìn)行凍存。

血漿5-羥色胺濃度由北京華英生物技術(shù)研究所采用酶聯(lián)免疫吸附法測定;血漿游離氨基酸濃度由北京普瑞華盛生物科技有限公司采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行定量分析檢測。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析 數(shù)據(jù)采用Excel 2010進(jìn)行初步整理,試驗(yàn)結(jié)果以“平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn),差異顯著用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。采用正交多項(xiàng)式對(duì)比,檢驗(yàn)日糧中α-酮異己酸濃度增加的線性和二次效應(yīng)。以P<0.05為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn),P<0.01為差異極顯著水平,0.05<P<0.10為有差異趨勢(shì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 伊犁馬對(duì)α-酮異己酸的吸收 日糧α-酮異己酸補(bǔ)喂水平與伊犁馬血漿中α-酮異己酸濃度的關(guān)系見圖 1,當(dāng)補(bǔ)喂 0 g/horse·meal(指每匹馬每頓補(bǔ)喂的克數(shù),下同)的KIC(對(duì)照組)時(shí),血漿中KIC濃度最低;3 g/horse·meal(試驗(yàn)Ⅰ組)時(shí),血漿中 KIC 濃度升高。且當(dāng) 6 g/horse·meal(試驗(yàn)Ⅱ組)時(shí),血漿中KIC濃度最高。隨著KIC補(bǔ)喂水平的增加,血漿中KIC濃度的變化呈先上升后下降的趨勢(shì) (擬合方程為y=-0.0365x2+0.577+11.016,R2=0.9653)。結(jié)果顯示,補(bǔ)喂不同水平的KIC對(duì)伊犁馬血漿中KIC濃度無顯著影響。

圖1 日糧α-酮異己酸補(bǔ)喂水平與伊犁馬血漿中α-酮異己酸濃度的關(guān)系

補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿α-酮異己酸濃度的影響見表3。與對(duì)照組相比,補(bǔ)喂前(即0 h)各組間血漿KIC濃度差異不顯著(P>0.05)。與對(duì)照組相比,補(bǔ)喂后1 h試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組血漿KIC濃度分別提高了11.2%、7.86%和21.51%(P>0.05);補(bǔ)喂后2 h試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組血漿KIC濃度分別提高了8.66%、18.77%和8.84%,但均差異不顯著(P>0.05);補(bǔ)喂后4 h各試驗(yàn)組均差異不顯著(P>0.05)。3個(gè)試驗(yàn)組馬匹血漿KIC濃度都在補(bǔ)喂后1 h出現(xiàn)峰值。

表3 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿中α-酮異己酸濃度的影響 μmol/L

2.2 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿β-羥基-β-甲基丁酸濃度的影響 日糧α-酮異己酸補(bǔ)喂水平與伊犁馬血漿中β-羥基-β-甲基丁酸濃度的關(guān)系見圖2,當(dāng)KIC補(bǔ)喂水平為3 g/horse·meal(試驗(yàn)Ⅰ組)時(shí),血漿中HMB濃度最低;且當(dāng)6 g/horse·meal(試驗(yàn)Ⅱ組)時(shí),血漿中HMB 濃度最高。隨著KIC補(bǔ)喂水平的增加,血漿中HMB濃度的變化呈先下降后上升再下降的波浪趨勢(shì)。結(jié)果顯示,補(bǔ)喂不同水平的KIC對(duì)伊犁馬血漿中HMB濃度無顯著影響。

圖2 日糧α-酮異己酸補(bǔ)喂水平與伊犁馬血漿中β-羥基-β-甲基丁酸濃度的關(guān)系

補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿β-羥基-β-甲基丁酸濃度的影響見表4。與對(duì)照組相比,補(bǔ)喂前0 h各組間血漿HMB濃度差異不顯著 (P>0.05)。與對(duì)照組相比,補(bǔ)喂后1 h血漿HMB濃度各試驗(yàn)組均差異不顯著(P>0.05);補(bǔ)喂后2 h試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組血漿HMB濃度分別提高了5.84%、15.74%和14.97%(P>0.05);補(bǔ)喂后4 h各試驗(yàn)組分別提高了8.95%、18.93%和14.58%,但均差異不顯著(P > 0.05)。

表4 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿中β-羥基-β-甲基丁酸濃度的影響 μmol/L

2.3 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿游離氨基酸及其代謝物濃度的影響 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿游離氨基酸濃度的影響見表5。與對(duì)照組相比,各試驗(yàn)組血漿KIC濃度分別提高了8.66%、18.77%和8.84%,但均差異不顯著(P>0.05);各試驗(yàn)組血漿HMB濃度均差異不顯著 (P>0.05);試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組血漿亮氨酸濃度分別提高了22.40%和22.24%,且達(dá)到顯著水平(P<0.05);試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅲ組血漿異亮氨酸濃度降低了23.08%和32.34%,且達(dá)到極顯著水平(P<0.01);試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅲ組血漿纈氨酸濃度分別降低了15.75%和14.13%,且達(dá)到顯著水平(P<0.05);試驗(yàn)Ⅲ組血漿賴氨酸、甲硫氨酸、精氨酸和谷氨酰胺濃度分別降低了 28.43%、22.22%、21.81%和23.60%,且均達(dá)到顯著水平(P<0.05);各試驗(yàn)組血漿5-羥色胺濃度分別降低了7.5%、28.03%和10.28%,且試驗(yàn)Ⅱ組比試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅲ組分別降低了22.22%和24.68%,組間差異均達(dá)到極顯著水平(P<0.01);試驗(yàn)Ⅲ組血漿三甲基組氨酸濃度降低了18.74%,但差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)Ⅲ組血漿天冬酰胺濃度比試驗(yàn)Ⅱ組降低了26.50%,且組間差異達(dá)到顯著水平(P<0.05),試驗(yàn)Ⅱ組血漿支鏈氨基酸濃度比試驗(yàn)Ⅰ組降低了18.80%,且達(dá)到顯著水平(P<0.05)。

表5 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿氨基酸濃度的影響 μmol/L

3 討論

3.1 伊犁馬對(duì)α-酮異己酸的吸收 在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)KIC有3種來源,從含有KIC的食物中直接攝?。灰部梢灾苯訑z取KIC復(fù)合鹽或通過攝取亮氨酸代謝產(chǎn)生KIC,進(jìn)而提高血漿中KIC濃度。因此,本試驗(yàn)探究了日糧中補(bǔ)喂不同水平KIC與伊犁馬血漿中KIC濃度的關(guān)系。本試驗(yàn)中,隨著KIC補(bǔ)喂水平的增加,血漿中KIC濃度的變化呈先上升后下降的趨勢(shì)。且當(dāng)KIC補(bǔ)喂水平為6 g/horse·meal(試驗(yàn)Ⅱ組)時(shí),血漿中KIC濃度最高。結(jié)果表明,補(bǔ)喂不同水平的KIC對(duì)伊犁馬血漿中KIC濃度的影響不顯著。KIC作為中間代謝物,在血漿中濃度處于相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)。

測定動(dòng)物飼喂前后血漿中間代謝物濃度的變化是動(dòng)物營養(yǎng)消化代謝研究中常用的重要指標(biāo)。從肝臟釋放到血液中的KIC用于合成骨骼肌中的蛋白質(zhì)或形成丙氨酸和谷氨酰胺。肝外組織中,KIC與亮氨酸可以相互轉(zhuǎn)化,然后KIC可以重新合成亮氨酸或進(jìn)一步氧化。本試驗(yàn)中,補(bǔ)喂KIC 1 h后血漿KIC濃度各試驗(yàn)組均達(dá)到了峰值。說明通過補(bǔ)喂KIC提高了伊犁馬血漿中KIC濃度。本試驗(yàn)中,各試驗(yàn)組在補(bǔ)喂前及補(bǔ)喂后1、2、4 h血漿KIC濃度均呈先上升后下降趨勢(shì),KIC作為亮氨酸的中間代謝產(chǎn)物,在機(jī)體中的存留時(shí)間較短,通常會(huì)在肝臟組織中代謝或參與亮氨酸的相互轉(zhuǎn)化。KIC的半衰期極短,血液中的KIC的代謝進(jìn)行的很快(Giron等,2016),可能是因?yàn)镵IC的氧化速率很快,這就解釋了各組血漿中KIC的濃度在飼喂后1 h達(dá)到峰值,然后下降的原因。Duan等(2019)給仔豬補(bǔ)喂飼糧1.25%的KIC-Ca,1 h后血漿KIC濃度升高。Escobar等(2010) 發(fā)現(xiàn)給仔豬靜脈滴注 400 μmol/kg·h 的KIC,1 h后血漿KIC濃度升高,與本試驗(yàn)結(jié)果一致。本試驗(yàn)中,對(duì)照組血漿中KIC濃度的變化呈下降趨勢(shì),各試驗(yàn)組血漿KIC濃度的變化表現(xiàn)為“單峰”模式(在補(bǔ)喂后1 h血漿KIC濃度達(dá)到峰值),且試驗(yàn)Ⅲ組血漿KIC濃度的變化表現(xiàn)為“單峰”模式最明顯。

3.2 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿中β-羥基-β-甲基丁酸濃度的影響 機(jī)體內(nèi)源性產(chǎn)生的 β-羥基-β-甲基丁酸(HMB)的量很少(Zhong等,2019)。KIC在肝細(xì)胞溶質(zhì)中發(fā)生不可逆的氧化脫羧反應(yīng),大約5%的KIC通過KIC二氧化酶氧化生成HMB,生成的HMB大約有20%隨尿液排出體外 (Molfino等,2013)。本試驗(yàn)中,隨著KIC補(bǔ)喂水平的增加,血漿中HMB濃度的變化呈先下降后上升再下降的趨勢(shì),呈現(xiàn)出波浪狀。值得注意的是,伊犁馬中補(bǔ)喂低水平KIC(3 g/horse·meal)與未添加KIC相比,血漿中KIC濃度下降,可能是受到性別、個(gè)體差異和環(huán)境等外界因素的影響。當(dāng)KIC補(bǔ)喂水平為6 g/horse·meal(試驗(yàn)Ⅱ組)時(shí),血漿中HMB濃度最高。結(jié)果表明,補(bǔ)喂不同水平的KIC伊犁馬血漿中HMB濃度的變化不顯著。HMB作為KIC的代謝產(chǎn)物,通過內(nèi)源性添加KIC,不會(huì)影響血漿中HMB濃度。

無論是內(nèi)源性還是額外攝入的HMB,大約有30%的HMB被肌肉吸收 (Freund等,1978)。這就表明在高濃度時(shí),HMB代謝的主要場所是肌肉組織(Van 和 Nissen,1992)。 研究表明,HMB不僅能夠提高肌肉功能,還能提高脂肪代謝速率并降低蛋白質(zhì)分解速率,促進(jìn)組織細(xì)胞修復(fù),減輕肌肉損傷并延緩肌肉疲勞(Norton和Layman,2006)。補(bǔ)喂KIC提高了血漿KIC濃度,從而導(dǎo)致血漿HMB濃度有所升高。本試驗(yàn)中,對(duì)照組血漿HMB濃度的變化呈下降趨勢(shì),試驗(yàn)I組和試驗(yàn)Ⅲ組在補(bǔ)喂前及補(bǔ)喂后1、2、4 h血漿HMB濃度的變化呈先上升后下降趨勢(shì),但試驗(yàn)Ⅱ組血漿中HMB濃度呈上升趨勢(shì)。說明KIC在調(diào)節(jié)伊犁馬血漿HMB濃度中可能存在劑量效應(yīng)。Duan等(2019)給仔豬補(bǔ)喂1.25%KIC-Ca,1 h后血漿HMB濃度升高,與本試驗(yàn)結(jié)果一致。血漿KIC濃度的變化表現(xiàn)出的“單峰”模式,并沒有使血漿HMB濃度出現(xiàn)相同的趨勢(shì),說明通過補(bǔ)喂KIC,機(jī)體代謝產(chǎn)生的HMB是十分有限的。因此補(bǔ)喂KIC在一定程度上增加了血漿HMB濃度,且試驗(yàn)II組血漿HMB濃度較高。

3.3 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿游離氨基酸及其代謝物濃度的影響

3.3.1 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿亮氨酸及支鏈氨基酸濃度的影響 亮氨酸作為必需氨基酸之一,必須通過日糧攝入的方式來維持機(jī)體正常生長及生產(chǎn)活動(dòng)正常進(jìn)行(Wu,2014)。本試驗(yàn)中,通過給伊犁馬飼糧中補(bǔ)喂KIC可顯著提高血漿中亮氨酸濃度,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組血漿亮氨酸濃度分別提高了22.40%和22.24%。血漿亮氨酸濃度升高,導(dǎo)致血漿纈氨酸和異亮氨酸濃度顯著下降。由于三種氨基酸之間互為拮抗關(guān)系,亮氨酸增加必定會(huì)影響其他一種或兩種氨基酸在機(jī)體內(nèi)的吸收和利用 (Papet等,1988)。支鏈氨基酸對(duì)氨基酸與蛋白質(zhì)的代謝具有調(diào)節(jié)作用,尤其是亮氨酸可以通過激活雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號(hào)通路調(diào)節(jié)骨骼肌的蛋白質(zhì)合成(Wilkinson 等,2013;Suryawan 等,2011),而異亮氨酸和纈氨酸可以保證三種支鏈氨基酸之間的平衡(Suryawan 等,2013)。 Duan 等(2019)給仔豬補(bǔ)喂1.25%的KIC-Ca提高了血漿亮氨酸濃度,血漿纈氨酸、異亮氨酸濃度降低,與本試驗(yàn)結(jié)果一致。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)Ⅰ組與試驗(yàn)Ⅱ組相比,血漿中支鏈氨基酸濃度顯著下降。由于馬匹血漿中游離氨基酸濃度會(huì)受到性別、環(huán)境和溫度等因素影響 (Hackl等,2006),因此補(bǔ)喂不同水平的KIC對(duì)血漿支鏈氨基酸濃度的影響有待進(jìn)一步研究。

3.3.2 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿3-甲基組氨酸濃度的影響 3-甲基組氨酸是組氨酸通過蛋白質(zhì)合成甲基化后生成的氨基酸,主要存在于機(jī)體內(nèi)骨骼肌蛋白的肌球蛋白和肌纖蛋白中。骨骼肌中蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)主要包括:骨骼肌收縮蛋白、肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白的周轉(zhuǎn),會(huì)導(dǎo)致血漿中3-甲基組氨酸釋放,3-甲基組氨酸不能被機(jī)體重新利用合成蛋白,最終被排出體外(Rathmacher和Nissen,1998)。在一定程度上3-甲基組氨酸也可作為肌原纖維蛋白水解的指標(biāo)(桑丹等,2009)。本試驗(yàn)中,血漿中3-甲基組氨酸濃度無顯著變化,但整體呈下降趨勢(shì),且試驗(yàn)Ⅲ組血漿3-甲基組氨酸濃度降低了18.74%。研究發(fā)現(xiàn),給禁食的雛雞補(bǔ)喂2.25 mg/kg的KIC降低了血漿3-甲基組氨酸濃度(Nakashima 等,2007),Sapir等(1983)給術(shù)后患者每天靜脈滴注70 mmol的KIC-Na降低了血漿3-甲基組氨酸濃度,與本試驗(yàn)結(jié)果相似。由于本試驗(yàn)中KIC的補(bǔ)喂量分早晚兩次補(bǔ)喂,因此,伊犁馬血漿中3-甲基組氨酸濃度的變化可能與KIC的補(bǔ)喂量有關(guān)。本試驗(yàn)中沒有收集馬尿,進(jìn)而得到3-甲基組氨酸的排出量,因而沒有直接證據(jù)表明動(dòng)物機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)的降解情況。但從本試驗(yàn)中的馬匹增重情況可以得出,與對(duì)照組相比,各試驗(yàn)組的平均日增重有升高趨勢(shì)。因此,KIC可能有提高伊犁馬增重的趨勢(shì)。

3.3.3 補(bǔ)喂α-酮異己酸對(duì)伊犁馬血漿其他氨基酸及其代謝物濃度的影響 血漿游離氨基酸濃度反映了動(dòng)物攝入飼糧氨基酸的水平。谷氨酰胺是馬駒血漿中濃度最多的氨基酸 (Manso等,2009)。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)Ⅲ組降低了血漿谷氨酰胺、賴氨酸、甲硫氨酸濃度。說明補(bǔ)喂KIC可能會(huì)影響伊犁馬對(duì)某些氨基酸的吸收。賴氨酸和甲硫氨酸分別作為第一、第二限制性氨基酸,血漿賴氨酸和甲硫氨酸濃度降低,說明KIC維持了與限制性氨基酸的平衡,增加了伊犁馬對(duì)限制性氨基酸的吸收利用。血漿精氨酸濃度降低,推測血漿中的精氨酸可能是參與了機(jī)體其他氨基酸的合成。研究發(fā)現(xiàn),通過給仔豬靜脈滴注400 μmol/kg·h的 KIC可降低血漿精氨酸、谷氨酰胺濃度(Escobar等,2010);Duan 等(2019)也證實(shí)了仔豬補(bǔ)喂1.25%的KIC-Ca可降低血漿中精氨酸濃度,與本試驗(yàn)結(jié)果一致。因此,KIC可能促進(jìn)了機(jī)體蛋白質(zhì)或氨基酸的利用率。腦中游離色氨酸濃度的變化與支鏈氨基酸濃度有關(guān),因?yàn)橹ф湴被崮芨偁幰种粕彼嵩谘X屏障上的載體——白蛋白通道(Leite等,2010)。色氨酸是5-羥色胺的前體物質(zhì),大腦吸收過多血液運(yùn)輸傳遞的游離色氨酸會(huì)引起腦內(nèi)5-羥色胺增加,從而引起中樞疲勞(Davis等,2000)。本試驗(yàn)中血漿5-羥色胺濃度顯著下降。說明KIC可能在抑制機(jī)體中樞疲勞方面具有積極作用。本試驗(yàn)中,各組血漿天冬氨酸、天冬酰胺和精氨酸濃度的變化呈下降趨勢(shì),但試驗(yàn)Ⅱ組相比其他各試驗(yàn)組血漿天冬氨酸、天冬酰胺和精氨酸濃度較高。關(guān)于補(bǔ)喂不同水平的KIC對(duì)氨基酸代謝的影響有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明,補(bǔ)喂α-酮異己酸提高了伊犁馬血漿中α-酮異己酸濃度,且各試驗(yàn)組均在補(bǔ)喂后1 h達(dá)到峰值;提高了血漿亮氨酸濃度;降低了血漿中支鏈氨基酸和5-羥色胺的濃度。通過補(bǔ)喂不同水平的α-酮異己酸,改變了伊犁馬對(duì)某些氨基酸的吸收利用。

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