黃軼，閆振廣，張?zhí)煨瘢嵭?/p>

1.環(huán)境基準(zhǔn)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院 2.海洋環(huán)境與生態(tài)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中國(guó)海洋大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院

水質(zhì)基準(zhǔn)是指水環(huán)境中的污染物或有害因素對(duì)人體健康和水生態(tài)系統(tǒng)不產(chǎn)生有害效應(yīng)的最大劑量或水平[1]，是制定水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)依據(jù)[2]。水質(zhì)基準(zhǔn)的建立通常需要大量的水生毒性數(shù)據(jù)，但由于數(shù)據(jù)獲取時(shí)物種選擇、毒性終點(diǎn)、推導(dǎo)方法及毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估等的差異，會(huì)導(dǎo)致建立的水質(zhì)基準(zhǔn)定值不同[3-4]。其中，毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估具有較大的不確定性，是影響水質(zhì)基準(zhǔn)的重要因素。

早在20世紀(jì)90年代Klimisch等[5]就提出了毒性數(shù)據(jù)的質(zhì)量評(píng)估方法，該方法從可靠性和相關(guān)性2個(gè)方面對(duì)毒性數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估，可靠性指試驗(yàn)方法和過程是否遵循了標(biāo)準(zhǔn)方法，以及試驗(yàn)結(jié)果的呈現(xiàn)是否符合標(biāo)準(zhǔn)，而相關(guān)性則取決于評(píng)估的目的。在可靠性方面將毒性數(shù)據(jù)分為4個(gè)等級(jí)：1)無(wú)限性可靠，即數(shù)據(jù)來自公開文獻(xiàn)并且試驗(yàn)過程以及參數(shù)設(shè)計(jì)符合國(guó)際公認(rèn)的實(shí)驗(yàn)室作業(yè)規(guī)范(good laboratory practice，GLP)[6]；2)限制性可靠，即部分信息不符合GLP標(biāo)準(zhǔn)；3)不可靠，即試驗(yàn)方法及參數(shù)設(shè)計(jì)不符合GLP標(biāo)準(zhǔn)；4)不確定，即沒有具體的試驗(yàn)細(xì)節(jié)，數(shù)據(jù)來自摘要或二次引用文獻(xiàn)。根據(jù)GLP標(biāo)準(zhǔn)[6]進(jìn)行測(cè)試時(shí)，由于受到反應(yīng)程度及物質(zhì)中所含雜質(zhì)的影響，使用不同純度的物質(zhì)可能導(dǎo)致不同的試驗(yàn)結(jié)果。盡管使用不同純度物質(zhì)均可得到較高可靠性的試驗(yàn)結(jié)果，但只有不含反應(yīng)性雜質(zhì)的試驗(yàn)結(jié)果才可用于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。因此，相關(guān)性評(píng)估非常重要，但只有專家才能判斷哪種試驗(yàn)結(jié)果更具有相關(guān)性。目前，Klimisch方法[5]已在國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用，但由于其評(píng)價(jià)指標(biāo)不夠詳細(xì)，如沒有不同類別數(shù)據(jù)的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，數(shù)據(jù)相關(guān)性分析方面無(wú)相應(yīng)的解釋說明，因此不同人員評(píng)估時(shí)得到的評(píng)判結(jié)果不同[7-8]。Durda等[9]在Klimisch方法基礎(chǔ)上開發(fā)了兩階段的毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法，要求測(cè)試方法須由國(guó)家和國(guó)際測(cè)試機(jī)構(gòu)編制[10-15]，并將測(cè)試方法和數(shù)據(jù)驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)共同作為數(shù)據(jù)質(zhì)量審查的標(biāo)準(zhǔn)；該方法提出了30個(gè)評(píng)判依據(jù)，根據(jù)質(zhì)量等級(jí)將數(shù)據(jù)分為高、中、低、可靠和不可靠5個(gè)等級(jí)。此外，Markich等[16]通過修改AQUIRE數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)[17]開發(fā)了一套評(píng)分系統(tǒng)用于評(píng)估毒性數(shù)據(jù)，該系統(tǒng)設(shè)置了20個(gè)賦分題，將每個(gè)問題的分項(xiàng)得分相加得到總分，根據(jù)總分將數(shù)據(jù)分為高質(zhì)量、可接受和不可接受3種類型。2009年Schneider等[18]開發(fā)了ToxRTool軟件，其適用于各種類型的試驗(yàn)數(shù)據(jù)、研究報(bào)告以及同行評(píng)議的出版文獻(xiàn)，與Klimisch方法相同，其評(píng)判結(jié)果將數(shù)據(jù)分為無(wú)限性可靠、有限性可靠、不可靠和不確定4種類型。上述已建立的4種毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法在方法描述和結(jié)果表達(dá)方面仍不太完整[7,19]，?gerstrand等[7]對(duì)這4種方法進(jìn)行了對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)不同的評(píng)估方法會(huì)導(dǎo)致不同的評(píng)估結(jié)果。

2017年，原環(huán)境保護(hù)部發(fā)布的《淡水水生生物水質(zhì)基準(zhǔn)制定技術(shù)指南》[1]明確了對(duì)生態(tài)毒性數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估的必要性。筆者在介紹目前發(fā)達(dá)國(guó)家制定的生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法的基礎(chǔ)上，提出了適用于我國(guó)水質(zhì)基準(zhǔn)制定的生態(tài)毒性數(shù)據(jù)評(píng)估方法，以期為水質(zhì)基準(zhǔn)制定中生態(tài)毒性數(shù)據(jù)評(píng)估提供參考。

1 國(guó)外生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法

1.1 美國(guó)

2011年，美國(guó)國(guó)家環(huán)境保護(hù)局(US EPA)發(fā)布了水質(zhì)基準(zhǔn)研究中的《生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估指南》[20]，用于指導(dǎo)公開發(fā)表的生態(tài)毒理學(xué)數(shù)據(jù)的識(shí)別、選擇和獲取，內(nèi)容包括數(shù)據(jù)篩選、評(píng)估、分類和應(yīng)用。該指南提出的評(píng)估因素主要包括：1)受試物質(zhì)的特性；2)物種的年齡、性別、大小、生命階段和來源；3)每個(gè)處理組所包含物種的數(shù)量和處理組的數(shù)量；4)試驗(yàn)暴露的方法與途徑、暴露頻率及暴露時(shí)間；5)對(duì)照組；6)受試生物的表現(xiàn)和觀察；7)試驗(yàn)條件；8)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法。該指南也規(guī)定了需要參考的輔助因素，包括受試物質(zhì)特性、水質(zhì)條件、陰性對(duì)照與助溶劑對(duì)照、終點(diǎn)選擇?；谏鲜鲆蛩貙?duì)毒性數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估，最終將毒性數(shù)據(jù)分為定量數(shù)據(jù)、定性數(shù)據(jù)和無(wú)效數(shù)據(jù)3種類型。定量數(shù)據(jù)指可用于計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中風(fēng)險(xiǎn)熵值的數(shù)據(jù)；定性數(shù)據(jù)指不足以用于計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)熵值，但可用于支持風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)論的數(shù)據(jù)；無(wú)效數(shù)據(jù)指不符合科學(xué)要求，不能用于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的數(shù)據(jù)。

1.2 歐盟

歐盟發(fā)表了生態(tài)毒性數(shù)據(jù)報(bào)道與評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(criteria for reporting and evaluating ecotoxicity data，CRED)[21]，該評(píng)估方法是在現(xiàn)有評(píng)估和報(bào)告方法[5,7,9,22-26]的基礎(chǔ)上起草的，旨在提高生態(tài)毒性數(shù)據(jù)研究的可靠性和相關(guān)性，包括重現(xiàn)性、一致性和透明度，是一種定性評(píng)估方法。CRED包括20個(gè)可靠性標(biāo)準(zhǔn)和13個(gè)相關(guān)性標(biāo)準(zhǔn)，其中可靠性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容和分類方法與Klimisch方法基本相同，也將數(shù)據(jù)分為無(wú)限性可靠、有限性可靠、不可靠以及不確定4種類型，但在試驗(yàn)設(shè)計(jì)、試驗(yàn)試劑、受試生物、暴露條件和試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析方面，CRED給出了更加詳細(xì)的解釋與說明；為提高生態(tài)毒性數(shù)據(jù)在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中的應(yīng)用，CRED補(bǔ)充了試驗(yàn)生物和暴露環(huán)境與生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估相關(guān)性評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)，將數(shù)據(jù)相關(guān)性分為無(wú)限性可靠、有限性可靠、不可靠及不確定4個(gè)等級(jí)。Kase等[27]的研究表明，不同評(píng)估人員使用CRED進(jìn)行評(píng)估得到的結(jié)果高度一致，并且CRED比Klimisch方法更準(zhǔn)確和更容易理解。

1.3 澳大利亞和新西蘭

2018年，澳大利亞和新西蘭在前期研究[16,22,28-29]的基礎(chǔ)上，制定與發(fā)布了對(duì)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)研究中生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估的技術(shù)指南[30]。該指南中提出一種定量評(píng)估方法，對(duì)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估設(shè)置了20個(gè)問題，評(píng)估要素主要集中于試驗(yàn)設(shè)計(jì)、試驗(yàn)過程、水質(zhì)參數(shù)的影響、數(shù)據(jù)分析等方面。將每個(gè)問題的分項(xiàng)得分相加，得到總分即為每個(gè)數(shù)據(jù)的合計(jì)得分，然后將合計(jì)得分與滿分相除(合計(jì)得分滿分)。根據(jù)不同的數(shù)據(jù)類型和污染物，滿分可分成4種：金屬-水生動(dòng)物類數(shù)據(jù)的滿分為103分；非金屬-水生動(dòng)物類數(shù)據(jù)的滿分為94分；金屬-植物類數(shù)據(jù)的滿分為100分；非金屬-植物類數(shù)據(jù)的滿分為91分。最后根據(jù)評(píng)估結(jié)果將數(shù)據(jù)分為3類：合計(jì)得分滿分≤50%時(shí)，為不可接受數(shù)據(jù)；51%≤合計(jì)得分滿分≤79%時(shí)，為可接受數(shù)據(jù)；合計(jì)得分滿分≥80%時(shí)，為高質(zhì)量數(shù)據(jù)。

1.4 國(guó)外評(píng)估方法的比較與適用性分析

盡管美國(guó)和歐盟制定的毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)涉及各個(gè)方面，但其均屬于定性評(píng)估方法，在評(píng)估過程中會(huì)受到評(píng)估人員主觀性的影響，不同評(píng)估人員的評(píng)估結(jié)果可能不同，并且這2種毒性評(píng)估方法主要用于環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)的生態(tài)評(píng)價(jià)或化學(xué)品危害評(píng)估，與本研究水質(zhì)基準(zhǔn)制定中生態(tài)毒性數(shù)據(jù)評(píng)估的目的有所不同。澳大利亞和新西蘭毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法是為水質(zhì)基準(zhǔn)制定中毒性數(shù)據(jù)評(píng)估而制定的，但我國(guó)水質(zhì)基準(zhǔn)研究有其特殊性，不能直接采用澳大利亞和新西蘭毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法，因此需提出適用于我國(guó)水質(zhì)基準(zhǔn)制定的生態(tài)毒性數(shù)據(jù)評(píng)估方法。

2 我國(guó)生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法的建立

2.1 我國(guó)水質(zhì)基準(zhǔn)的要求

水質(zhì)基準(zhǔn)具有明顯的區(qū)域環(huán)境差異，包括水的理化性質(zhì)(溫度、溶解氧、pH、硬度、有機(jī)質(zhì)等)，水生生物的群落結(jié)構(gòu)，水污染程度和污染物的環(huán)境地球化學(xué)特征等[31-33]。在保護(hù)特定的水功能或生物時(shí)，水質(zhì)量控制往往局限于特定的環(huán)境條件。水體的理化性質(zhì)、生物多樣性和氣候因素會(huì)因水環(huán)境條件的不同而不同，從而影響水質(zhì)基準(zhǔn)對(duì)各種水生態(tài)系統(tǒng)的保護(hù)效果[33-34]。區(qū)域物種敏感性的差異是導(dǎo)致水質(zhì)基準(zhǔn)差異的最重要因素，如鮭魚科是美國(guó)的代表性魚類，而中國(guó)一半的淡水魚屬于鯉魚科[35]。因此，我國(guó)水質(zhì)基準(zhǔn)要結(jié)合我國(guó)環(huán)境特點(diǎn)和自然背景建立，明確我國(guó)與其他國(guó)家在生態(tài)環(huán)境特征、污染特征、生物區(qū)系等方面的差異。

2.2 我國(guó)生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法建議思路

我國(guó)《淡水水生生物水質(zhì)基準(zhǔn)制定技術(shù)指南》從數(shù)據(jù)的來源和可靠性2個(gè)方面制定了生態(tài)毒性數(shù)據(jù)的收集和篩選原則。數(shù)據(jù)的來源主要包括淡水水生生物毒性、水體理化參數(shù)、物質(zhì)固有的理化性質(zhì)和環(huán)境分布數(shù)據(jù)等。數(shù)據(jù)可靠性的判斷依據(jù)主要包括：1)是否使用國(guó)際、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試方法和行業(yè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，操作過程是否遵循良好的GLP標(biāo)準(zhǔn)；2)對(duì)于非標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試方法的試驗(yàn)，所用試驗(yàn)方法是否科學(xué)合理；3)試驗(yàn)過程和結(jié)果的描述是否詳細(xì)；4)文獻(xiàn)是否提供了原始數(shù)據(jù)。

為使生態(tài)毒性數(shù)據(jù)能夠科學(xué)、合理地應(yīng)用于水質(zhì)基準(zhǔn)制定中，筆者依據(jù)《淡水水生生物水質(zhì)基準(zhǔn)制定技術(shù)指南》毒性數(shù)據(jù)篩選原則，從數(shù)據(jù)來源、化學(xué)物質(zhì)、受試生物、試驗(yàn)過程和試驗(yàn)結(jié)果5個(gè)方面建立了我國(guó)生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法，技術(shù)路線如圖1所示。

圖1 生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估技術(shù)路線Fig.1 Technology roadmap of ecotoxicity data quality assessment

2.3 我國(guó)生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法細(xì)則

借鑒國(guó)外毒性數(shù)據(jù)的評(píng)估方法，提出適用于我國(guó)水質(zhì)基準(zhǔn)制定的生態(tài)毒性數(shù)據(jù)評(píng)估方法。為盡量避免評(píng)估過程的主觀性，采用定量方法進(jìn)行評(píng)估，建立的生態(tài)毒性數(shù)據(jù)評(píng)估的評(píng)分系統(tǒng)如表1所示。評(píng)分系統(tǒng)設(shè)置5個(gè)方面共25個(gè)問題，以便客觀、全面地進(jìn)行評(píng)估。除對(duì)每個(gè)問題進(jìn)行賦分外，還添加了數(shù)據(jù)無(wú)效項(xiàng)[20]。當(dāng)評(píng)估過程中出現(xiàn)無(wú)效的評(píng)判結(jié)果時(shí)，意味著該數(shù)據(jù)不能用于水質(zhì)基準(zhǔn)的制定，評(píng)估終止。提出的評(píng)估要素主要包括數(shù)據(jù)來源、化學(xué)物質(zhì)、受試生物、試驗(yàn)過程、試驗(yàn)結(jié)果5個(gè)方面，并根據(jù)總體賦分進(jìn)行質(zhì)量分級(jí)。

表1 生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估的評(píng)分系統(tǒng)

2.3.1數(shù)據(jù)來源

美國(guó)[36-37]、加拿大[38]、澳大利亞和新西蘭[39]等國(guó)提出的水質(zhì)基準(zhǔn)推導(dǎo)和生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)指南，以及我國(guó)發(fā)布的《淡水水生生物水質(zhì)基準(zhǔn)制定技術(shù)指南》均規(guī)定數(shù)據(jù)收集是水質(zhì)基準(zhǔn)制定的首要步驟，明確了數(shù)據(jù)來源在評(píng)估過程中的重要性。因此，設(shè)置以下4項(xiàng)賦分題：?jiǎn)栴}1為“數(shù)據(jù)是否來源于全文”；問題2為“文獻(xiàn)全文是否公開”，若數(shù)據(jù)來自摘要或二次引用文獻(xiàn)，由于無(wú)法得到全文，缺乏詳細(xì)的資料，因此數(shù)據(jù)無(wú)效；問題3為“是否是生物個(gè)體水平的數(shù)據(jù)”，生物個(gè)體水平數(shù)據(jù)的使用受到當(dāng)前水質(zhì)基準(zhǔn)方法學(xué)的限制，在現(xiàn)階段應(yīng)用其他水平(如分子、群體水平)的毒性數(shù)據(jù)推導(dǎo)水質(zhì)基準(zhǔn)不符合指南的要求；問題4為“是否屬于中國(guó)本土生物或相關(guān)物種的數(shù)據(jù)”，水質(zhì)基準(zhǔn)的首要目標(biāo)是保護(hù)本土物種，只有《淡水水生生物水質(zhì)基準(zhǔn)制定技術(shù)指南》中指出的中國(guó)本土物種或相關(guān)物種的毒性數(shù)據(jù)才可用于水質(zhì)基準(zhǔn)制定，因此不符合規(guī)定的毒性數(shù)據(jù)無(wú)效。

2.3.2化學(xué)物質(zhì)

在進(jìn)行毒性試驗(yàn)前了解測(cè)試物質(zhì)的理化性質(zhì)及其在相關(guān)環(huán)境中的行為十分必要，如測(cè)試物質(zhì)的濃度不應(yīng)超過在水中的最大溶解度，揮發(fā)性物質(zhì)與疏水性物質(zhì)的暴露條件應(yīng)不同，同時(shí)還應(yīng)考慮測(cè)試物質(zhì)可能發(fā)生的水解反應(yīng)。因此設(shè)置問題5“化學(xué)物質(zhì)名稱是否明確，化學(xué)物質(zhì)的形式是否恰當(dāng)”，個(gè)別化學(xué)物質(zhì)溶于水中，除目標(biāo)物質(zhì)外，還可能產(chǎn)生其他有毒因子，干擾被測(cè)物質(zhì)的毒性，因此有必要對(duì)化學(xué)物質(zhì)的名稱和形態(tài)進(jìn)行明確而恰當(dāng)?shù)慕缍āＲ话闱闆r下，測(cè)試物質(zhì)的純度應(yīng)為80%或更高，除非已知雜質(zhì)不會(huì)引起毒性效應(yīng)，也不會(huì)影響測(cè)試物質(zhì)的毒性。盡管經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(Organization for Economic Cooperation and Development，OECD)測(cè)試指南[11]中對(duì)測(cè)試物質(zhì)的純度只提到了適當(dāng)純度，但使用低純度物質(zhì)進(jìn)行研究的總體可靠性可能降低，因此設(shè)置問題6“所用化學(xué)試劑為分析純或可能的最高純度”，考慮到某些特定物質(zhì)很難獲得純度很高的試劑，問題中設(shè)置了“可能的最高純度”。

2.3.3受試生物

進(jìn)行數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估時(shí)，必須知道試驗(yàn)中使用了哪些生物體。為了使研究可靠，至少應(yīng)該知道受試生物的年齡或生命階段的名稱和信息。當(dāng)檢查荷爾蒙物質(zhì)時(shí)，生物體(如當(dāng)受試生物為魚類時(shí))的性別可能會(huì)影響結(jié)果；當(dāng)用魚或蟲做試驗(yàn)時(shí)，幼魚和幼蟲通常比成蟲更敏感。因此，在評(píng)估測(cè)試或比較不同測(cè)試的結(jié)果時(shí)，了解測(cè)試的生命階段十分重要。由此設(shè)置問題7“是否說明了受試生物的特征(如體長(zhǎng)、生物量、年齡等)”、問題9“對(duì)照組生物的非致死表現(xiàn)是否正常”，了解受試生物明確的生物學(xué)體征以及非致死表現(xiàn)的正常與否并不能直接否定數(shù)據(jù)質(zhì)量，但知道受試生物的年齡或生物階段可以提高研究成果的可靠程度。受試生物應(yīng)保持健康并適應(yīng)試驗(yàn)條件(如水的類型、溫度)，避免因條件變化而影響試驗(yàn)結(jié)果；試驗(yàn)條件(除非這是研究問題的一部分)或其他因素不應(yīng)使生物體受到影響，若試驗(yàn)條件使受試生物出現(xiàn)高死亡率時(shí)，研究結(jié)果就不可靠了。因此設(shè)置問題8“受試生物是否免于提前暴露在受試物質(zhì)中”，如果受試生物提前暴露于測(cè)試物質(zhì)中，由于群落對(duì)毒性脅迫的適應(yīng)，可能會(huì)影響受試生物對(duì)測(cè)試物質(zhì)的敏感性，使現(xiàn)場(chǎng)收集的受試生物進(jìn)行毒性試驗(yàn)的結(jié)果可能產(chǎn)生偏差，導(dǎo)致數(shù)據(jù)無(wú)效。

2.3.4試驗(yàn)過程

試驗(yàn)過程是數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估的重點(diǎn)，共包括12項(xiàng)賦分問題。試驗(yàn)中對(duì)照組的設(shè)置與受試生物物種和采用的方法指南有關(guān)，對(duì)照組一般分為助溶劑對(duì)照、陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照，因此設(shè)置與對(duì)照組相關(guān)的問題10～問題12。問題10為“是否設(shè)計(jì)了適宜的對(duì)照組(如空白對(duì)照和助溶劑對(duì)照等)”，問題11為“是否檢測(cè)了對(duì)照組的污染狀況”。一般情況下空白對(duì)照組的死亡率不超過20%的數(shù)據(jù)才可使用，如果在試驗(yàn)中增加了助溶劑對(duì)照組，則對(duì)照組的助溶劑濃度應(yīng)與試驗(yàn)中使用的最高助溶劑濃度相同，并且助溶劑對(duì)照組的死亡率最好與空白對(duì)照組的死亡率無(wú)顯著差異。問題12為“對(duì)照組和試驗(yàn)組是否包含重復(fù)”，當(dāng)研究的試驗(yàn)設(shè)計(jì)或執(zhí)行過程存在缺陷時(shí)，即使是統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯著也并不意味著研究是可靠的，因此各處理組都應(yīng)該設(shè)置重復(fù)。在試驗(yàn)中使用國(guó)際、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試方法和行業(yè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，操作過程遵循良好GLP可以盡可能地保證最新結(jié)果的再現(xiàn)性和可接受性，因此設(shè)置與具體試驗(yàn)過程相關(guān)的問題13～問題21。問題13為“試驗(yàn)過程是否符合測(cè)試方法標(biāo)準(zhǔn)”。使用國(guó)際、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試方法和行業(yè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)并不一定反映研究的可靠性，使用非指南方法進(jìn)行研究時(shí)，如果能提供足夠的試驗(yàn)設(shè)計(jì)細(xì)節(jié)，則其結(jié)果與使用指南的研究同樣可靠；但若在試驗(yàn)設(shè)計(jì)或結(jié)果解釋中存在缺陷，或結(jié)果引起懷疑，則研究不可靠。本評(píng)估方法設(shè)置該標(biāo)準(zhǔn)，目的是使評(píng)估過程更加公開、透明。美國(guó)[40-41]、歐盟[42-43]以及我國(guó)[44-45]都發(fā)布了毒性試驗(yàn)測(cè)定方法，對(duì)不同水質(zhì)、生物、化學(xué)品的測(cè)定方法以及毒性效應(yīng)測(cè)試終點(diǎn)的選擇提出了明確的規(guī)定：如淡水生物必須在淡水中進(jìn)行試驗(yàn)，咸水生物必須在咸水中進(jìn)行試驗(yàn)；一般情況下，藻類暴露試驗(yàn)不超過3～4 d，如果試驗(yàn)所用藻種生長(zhǎng)較慢，可延長(zhǎng)至7 d；大部分測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)建議魚類急性試驗(yàn)周期為96 h；急性毒性效應(yīng)測(cè)試終點(diǎn)〔主要包括半致死濃度(LC50)和半最大效應(yīng)濃度(EC50)〕宜使用暴露時(shí)間小于等于4 d的毒性數(shù)據(jù)，慢性毒性效應(yīng)測(cè)試終點(diǎn)〔主要包括無(wú)觀察效應(yīng)濃度(NOEC)和最低觀察效應(yīng)濃度(LOEC)〕宜使用暴露時(shí)間大于等于21 d的毒性數(shù)據(jù)。根據(jù)國(guó)際、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試方法設(shè)置該指標(biāo)下的賦分題，使毒性數(shù)據(jù)的評(píng)估結(jié)果更加可靠。其中問題16(是否有適宜的暴露時(shí)間)、問題17(是否有適宜的毒理學(xué)終點(diǎn))賦分分值最高，因?yàn)檫@2項(xiàng)要素直接影響了毒性值，從而影響了水質(zhì)基準(zhǔn)定值。

2.3.5試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)根據(jù)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并對(duì)統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行描述，以保證評(píng)估結(jié)果的可靠性。OECD評(píng)價(jià)指南[46]規(guī)定，用于生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)的毒理數(shù)據(jù)必須具有明顯的濃度-效應(yīng)關(guān)系，當(dāng)缺少濃度-效應(yīng)關(guān)系時(shí)，通過統(tǒng)計(jì)分析計(jì)算出的測(cè)試終點(diǎn)值為限制性可靠。因此設(shè)置問題22“是否表述了劑量-效應(yīng)關(guān)系”，若研究以驗(yàn)證劑量對(duì)毒性效應(yīng)無(wú)影響為目的，則不一定需要?jiǎng)┝?效應(yīng)關(guān)系來得出NOEC；但一般情況下，沒有觀察到劑量-效應(yīng)關(guān)系就無(wú)法獲得準(zhǔn)確的NOEC。問題23為“是否使用了正確的統(tǒng)計(jì)方法獲取數(shù)據(jù)”，問題24為“對(duì)于致死濃度(LC)最大效應(yīng)濃度(EC)，是否提供了誤差范圍；對(duì)于NOECLOEC，統(tǒng)計(jì)學(xué)上是否有顯著性(P≤0.05)”。統(tǒng)計(jì)分析的驗(yàn)證是數(shù)據(jù)評(píng)估過程的組成部分，因此，研究應(yīng)說明使用了哪些統(tǒng)計(jì)比較方法(如T檢驗(yàn)、方差分析、卡方檢驗(yàn))，并提供描述性統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。問題25為“水質(zhì)參數(shù)的監(jiān)測(cè)類別對(duì)于判斷水質(zhì)對(duì)物質(zhì)毒性的影響是否足夠”，水質(zhì)參數(shù)對(duì)于不同化學(xué)物質(zhì)的毒性有顯著影響，如pH會(huì)影響氨氮、五氯苯酚等的毒性，部分重金屬的毒性會(huì)隨著水質(zhì)參數(shù)的變化而變化。

2.3.6總體賦分

依據(jù)賦分標(biāo)準(zhǔn)將毒性數(shù)據(jù)獲得的分?jǐn)?shù)直接相加獲取得分，評(píng)分系統(tǒng)總體賦分為100分。根據(jù)評(píng)分結(jié)果將毒性數(shù)據(jù)分為3類：得分≥80分，為高質(zhì)量數(shù)據(jù)；得分60～80分，建議為可用數(shù)據(jù)；得分<60分，建議為不可用數(shù)據(jù)。

3 結(jié)語(yǔ)

保證毒性數(shù)據(jù)的質(zhì)量是制定高質(zhì)量水質(zhì)基準(zhǔn)的前提之一，由于研究目的、試驗(yàn)方法等差異較大，出版文獻(xiàn)中的許多毒性數(shù)據(jù)不符合水質(zhì)基準(zhǔn)制定的技術(shù)要求，不能用于水質(zhì)基準(zhǔn)的制定。本研究依據(jù)《淡水水生生物水質(zhì)基準(zhǔn)制定技術(shù)指南》毒性數(shù)據(jù)篩選原則，借鑒國(guó)外毒性數(shù)據(jù)的評(píng)估方法，從數(shù)據(jù)來源、化學(xué)物質(zhì)、受試生物、試驗(yàn)過程和試驗(yàn)結(jié)果5個(gè)方面建立了我國(guó)生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估方法，該方法可較全面地對(duì)毒性數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估，為水質(zhì)基準(zhǔn)研究中生態(tài)毒性數(shù)據(jù)質(zhì)量的評(píng)估提供了思路，同時(shí)也為進(jìn)一步豐富我國(guó)水質(zhì)基準(zhǔn)制定的技術(shù)方法提供了基礎(chǔ)。