鄧秀娥*,吳先偉,夏 玨,賈彥娟,郝江華,汪艦笛,李 琴,李曉紅
(甘肅省人民醫(yī)院,甘肅 蘭州 730000)
HPV隸屬于一種無包膜的小DNA病毒,強(qiáng)嗜上皮性、高組織性與宿主特異性等是其主要特征,可誘導(dǎo)人類皮膚與黏膜異常增生過程?,F(xiàn)已知HPV有百余種,其中30多種能夠從被感染的生殖道組織內(nèi)分離。臨床依照病毒致癌性大小將其分為低、高危型兩種,近些年有報道支持HPV66、70、53等可能也是癌相關(guān)型[1]。高危型HPV與浸潤性宮頸癌之間存在相關(guān)性,HPV DNA經(jīng)常是非整倍體,基本不能自行消退,逆轉(zhuǎn)情況極為罕見。自上個世紀(jì)中期,世界上很多國家女性HPV的感染率有逐年上升趨勢,既往也有諸多流行病學(xué)、分子生物學(xué)研究證實(shí)[2/3]。盡管當(dāng)下國內(nèi)關(guān)于HPV感染報道的文獻(xiàn)較多,但關(guān)于宮頸HPV感染較完整、系統(tǒng)的流行病資料偏少,鑒于此本文利用HPV-DNA芯片技術(shù),對取自某地區(qū)200例程度有別宮頸病變患者HPV感染檢測并解讀其亞型分布情況,具體內(nèi)容如下。
選擇于2017.6~2019.4,期間前來我院就診并接受切除術(shù)治療的200例宮頸病變患者為研究對象,年齡范圍20~70歲,平均為(42.3±8.5)歲;樣本類型:宮頸脫落細(xì)胞102例,石蠟組織98例。本次研究通過醫(yī)院倫理委員會審批通過,患者及其家屬知情同意。
(1)采集標(biāo)本:采集以上婦女的宮頸脫落細(xì)胞,把標(biāo)本制作成細(xì)胞懸液存管于低溫環(huán)境中(4℃冰箱),要求于3d內(nèi)完成檢測。石蠟組織樣本取自醫(yī)院病理科。
(2)儀器與試劑:GPMTW 2600基因芯片分型檢測系統(tǒng)及配套DNA提取試劑盒、雜交緩沖液、基因分型分析儀與PCR儀、核酸快速雜交檢測系統(tǒng)(能檢測出HPV的24種不同亞型)。
(3)結(jié)合前人相關(guān)報道提獲樣本核酸,明確PCR具體擴(kuò)增條件、變性雜交、分析HPV基因分型、判斷檢測結(jié)果等。
采用基因芯片分型、核酸分子雜交檢測系統(tǒng)檢測納入本次試驗(yàn)研究的200例程度不同的宮頸病變樣本,剔除低危型HPV70后,其他23種亞型共計檢出者例,占有率為53.5%(107/200),其中包括高危型88例,占陽性標(biāo)本的82.2%(88/107);低危型33例,占30.8%(33/107);單一感染91例,占86.9%(93/107);混合型13例,占13.1%(14/107)。在88例高危型HPV感染者中,HPV16、39、58、52、18與66是最常見的六種亞型,共計53例,在高危型樣本總量中所占比例為60.2%(53/88);而在33例低危型中,HPV11、6、54、44是位居前四的亞型,共計29例,占87.9%(29/33)。具體見表1。
表1 107例HPV感染亞型分布情況的統(tǒng)計表
HPV總感染率在兩個年齡區(qū)段分布表現(xiàn)出高峰樣態(tài),分別是20~28歲與50~70歲年齡段。其中20~28歲年齡段HPV總感染率偏高于29~49歲年齡段(P>0.05)。剔除29~49歲年齡段,其他兩年齡段樣本HPV陽性檢出率均高于50.0%。20~28歲年齡段低危型陽性檢出率(52.1%)明顯高于其他兩個年齡分段(P<0.05)。不同年齡段高危型HPV檢出率均高于70.0%,差異不顯著(P>0.05);不同年齡分段單一、混合感染率差異均不明顯(P>0.05)。具體見表2。
表2 不同年齡HPV感染情況統(tǒng)計[n(%)]
確定HPV感染在地域、年齡及基因分型方面的特點(diǎn),能夠?yàn)镠PV感染所致疾病的預(yù)防、治療以及疫苗研發(fā)提供較可靠的憑據(jù)[4]。本次研究中在基因芯片技術(shù)的協(xié)助下,對某地區(qū)200例宮頸病變程度不同的患者HPV感染情況進(jìn)行檢測、調(diào)查分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),除HPV70之外的其他23種不同HPV亞型均有檢出。HPV16、39、58、52、18與66是高危型內(nèi)最常見的六種亞型,在高危型樣本總量中所占比例為60.2%(53/88);而在33例低危型中,HPV11、6、54、44是位居前四的亞型,共計29例,占87.9%(29/33)。另外,本次調(diào)查區(qū)域婦女HPV混合感染率偏高,為13.1%,這間接的提示多價疫苗用于接種本地區(qū)婦女可能具有更高的臨床意義。
對HPV感染的年齡分布做出分析,發(fā)現(xiàn)存在兩個年齡分布高峰,即20~28歲與50~70歲年齡段。中20~28歲年齡段HPV總感染率偏高于29~49歲年齡段,除29~49歲年齡段,其他兩年齡段樣本HPV陽性檢出率均高于50.0%,這表明本地區(qū)高危群體HPV感染多出現(xiàn)在年齡低于30歲及高于50歲的女性群體中。不同年齡段女性HPV感染率有別,這可能與初次性生活年齡及個人思想觀念有關(guān),HPV感染率和初次性生活大小存在負(fù)相關(guān)性,而和性生活方式開放程度存在正相關(guān)性[5]。婦女過50歲以后,因自身免疫機(jī)能降低等,故而形成了本地區(qū)乃至我國HPV感染的第二個高峰期。這提示20~28歲年輕人與50~70歲婦女為HPV感染篩查的重點(diǎn)群體。若能在癌前病變時段盡早確診,并接受有效監(jiān)測與治療,則有益于降低宮頸癌發(fā)生率。