李 娜， 王旭文， 劉艷之

(山西振東安特生物制藥有限公司，山西 晉中 030600)

膠體果膠鉍是一種新型膠體鉍制劑，具有保護(hù)胃腸黏膜、直接殺滅幽門螺桿菌和止血作用，可促進(jìn)潰瘍愈合、炎癥好轉(zhuǎn)，并可降低潰瘍的復(fù)發(fā)率。其作用機(jī)制在于本藥具有較強(qiáng)的膠體特性，在酸性介質(zhì)中形成高黏度溶膠，與潰瘍面及炎癥表面強(qiáng)力親和，形成有效的保護(hù)膜，隔離胃酸，增強(qiáng)胃黏膜的屏障作用，因此本藥對消化性潰瘍和慢性胃炎有較好的治療作用[1]。

大量藥理及臨床資料表明，鉍鹽類藥物對胃腸疾病的治療作用與其和受損傷胃腸黏膜的黏附性呈正相關(guān)，而黏附性又與藥物的膠體特性有關(guān)，膠體特性好的鉍鹽不僅能增強(qiáng)對胃腸黏膜的保護(hù)作用，同時也有利于殺滅幽門螺桿菌。黏度可反映出藥物的膠體特性，膠體果膠鉍黏度越大，在胃粘膜上形成的保護(hù)膜越牢固，對糜爛面和潰瘍灶保護(hù)作用越強(qiáng)；反之，黏度越小，在胃黏膜上形成的保護(hù)膜越薄弱，對糜爛面和潰瘍灶保護(hù)作用越弱[2]。

因此，膠體果膠鉍的膠體特性擬用黏度來進(jìn)行評價，以更好地控制其質(zhì)量。

本研究是將膠體果膠鉍加適量水分散后，再加人工胃液形成高黏度的穩(wěn)定溶膠，采用轉(zhuǎn)子型旋轉(zhuǎn)黏度計測定上述溶膠在37 ℃條件下的動力黏度，操作簡便快速，結(jié)果準(zhǔn)確。在模擬人體胃腸環(huán)境中測定動力黏度，更能體現(xiàn)出膠體果膠鉍在人體中的黏度情況，以體現(xiàn)出膠體果膠鉍或含膠體果膠鉍制劑的膠體特性。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

NDJ-8S微機(jī)型數(shù)字顯示旋轉(zhuǎn)黏度計，上海衡平儀器儀表廠；DC-0506W低溫恒溫槽，上海衡平儀器儀表廠。

1.2 試藥

膠體果膠鉍，山西振東安特生物制藥有限公司，批號：20180501、20180502、20180503；胃蛋白酶，上海阿拉丁生化科技股份有限公司，分析純，活力1:15000，批號：L1714086；鹽酸，西隴化工股份有限公司，分析純，批號：151204；試驗用水為純化水。

2 方法及結(jié)果

2.1 溶液的制備

樣品溶液的制備：取膠體果膠鉍4.0 g(以鉍計0.6 g)，精密稱定，置于500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，即得。

人工胃液的制備：取稀鹽酸16.4 mL，加水約800 mL，胃蛋白酶10 g，搖勻后，加水稀釋成1 000 mL，即得[3]。

稀鹽酸的制備：取鹽酸234 mL，加水稀釋至1 000 mL，即得。本液含HCl體積分?jǐn)?shù)為9.5%～10.5%[4]。

2.2 黏度測定方法各實驗條件的確定

2.2.1 測定溫度

中國藥典2015年版黏度測定溫度為20 ℃和25 ℃[5]，考慮到為評價膠體果膠鉍進(jìn)入人體內(nèi)的黏附力，因此測定溫度選用人體溫度37 ℃。

2.2.2 轉(zhuǎn)子及轉(zhuǎn)速

取20180501批膠體果膠鉍4.0 g，精密稱定，置于500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加水380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液。將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國藥典2015年版四部通則0633第三法)測定。旋轉(zhuǎn)黏度計分別選用1#、2#轉(zhuǎn)子，轉(zhuǎn)速6、12、30、60 r/min，結(jié)果見表1。

表1 不同轉(zhuǎn)子、轉(zhuǎn)速的動力黏度測定結(jié)果

使用旋轉(zhuǎn)黏度計測定動力黏度時，質(zhì)量分?jǐn)?shù)應(yīng)在10%～90%，且質(zhì)量分?jǐn)?shù)在50%附近時動力黏度值誤差較小。由表1可見，1#轉(zhuǎn)子、轉(zhuǎn)速6 r/min時，質(zhì)量分?jǐn)?shù)55.3%，最接近50%。因此，旋轉(zhuǎn)黏度計的轉(zhuǎn)子確定為1#、轉(zhuǎn)速確定為6 r/min。

2.2.3 溶劑

取20180501批膠體果膠鉍3份，每份各4.0 g，精密稱定，置500 mL燒杯中，依次加水100、120、140 mL，攪拌使其分散，再分別加人工胃液400、380、360 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國藥典2015年版四部通則0633第三法)測定，結(jié)果見表2。

表2 加水量考察測定結(jié)果

由表2可見，加水量為100、120、140 mL時百分比均在10%～90%，其中加水量為120 mL時樣品溶液的動力黏度值最高，因此分散樣品的加水量確定為120 mL。

2.2.4 樣品濃度

取20180501批膠體果膠鉍2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 g，精密稱定，分別置于500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法測定(中國藥典2015年版四部通則0633第三法)，結(jié)果見表3、圖1。

表3 不同濃度樣品溶液的動力黏度測定結(jié)果

圖1 樣品溶液的動力黏度曲線圖

由圖1可見，動力黏度隨樣品溶液濃度增加而增大。由表3可見，樣品溶液質(zhì)量濃度為0.004、0.006、0.008、0.010 g/mL時質(zhì)量分?jǐn)?shù)均在10%～90%，質(zhì)量濃度為0.012 g/mL時質(zhì)量分?jǐn)?shù)超出10%～90%。當(dāng)稱樣量為4.0 g即質(zhì)量濃度為0.008 g/mL時，質(zhì)量分?jǐn)?shù)48.0%，動力黏度值誤差較小，因此樣品溶液質(zhì)量濃度確定為0.008 g/mL，即樣品稱樣量4.0 g(以鉍計0.6 g)。

2.3 實驗結(jié)果

2.3.1 重復(fù)性實驗

取20180502批膠體果膠鉍6份，每份各4.0 g，精密稱定，分別置500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國藥典2015年版四部通則0633第三法)測定。6份樣品溶液，每份測定1次，動力黏度平均值為630.7 mPa·s，RSD為1.42%(n=6)，表明方法重復(fù)性良好。結(jié)果見表4。

表4 重復(fù)性測定結(jié)果

2.3.2 穩(wěn)定性實驗

取20180503批膠體果膠鉍4.0 g，精密稱定，置500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，分別于0、1、2、3、4、5、6 h依法(中國藥典2015年版四部通則0633第三法)測定，動力黏度平均值為622.8 mPa·s，RSD為1.45%(n=7)，表明樣品溶液在6 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。結(jié)果見表5。

表5 穩(wěn)定性考察測定結(jié)果

2.3.3 三批樣品測定結(jié)果

取20180501、20180502、20180503批膠體果膠鉍，各4.0 g，精密稱定，分別置于500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國藥典2015年版四部通則0633第三法)測定。每個樣品重復(fù)測6次，動力黏度平均值分別為557.6、634.0、627.3 mPa·s，RSD分別為1.45%、1.43%、1.41%(n=6)，表明儀器精密度良好。結(jié)果見表6。

3 動力黏度測定方法

綜合上述結(jié)果，確定膠體果膠鉍動力黏度測定方法：取膠體果膠鉍4.0 g(以鉍計0.6 g)，精密稱定，置500 mL燒杯中，加水120 mL，攪拌使分散，再加人工胃液380 mL，攪拌均勻，作為樣品溶液；將燒杯垂直固定于37 ℃恒溫水浴槽中，放置15 min后，依法(中國藥典2015年版四部通則0633第三法)測定。旋轉(zhuǎn)黏度計選用1#轉(zhuǎn)子、轉(zhuǎn)速6 r/min。

4 結(jié)果及討論

4.1 溶劑的選擇

膠體果膠鉍在乙醇等有機(jī)溶劑中不溶，在水中結(jié)塊，振搖后能均勻分散在水中。為評價膠體果膠鉍進(jìn)入人體內(nèi)的黏度情況，模擬人體胃腸環(huán)境，考慮用人工胃液，結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣品直接加人工胃液不溶，必需先加少量的水使其均勻分散，再加人工胃液，才能形成穩(wěn)定的溶膠，以測定其動力黏度。

表6 三批樣品的動力黏度測定結(jié)果

4.2 胃蛋白酶的選擇

使用不同生產(chǎn)廠家、不同活力的胃蛋白酶配制的人工胃液，測定樣品溶液的動力黏度值差別較大。分別考察了卡邁舒(上海)生物科技有限公司胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶15 000)、北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶12 000)、上海阿拉丁生化科技股份有限公司胃蛋白酶(活力1∶15 000)配制的人工胃液，在37 ℃條件下測定樣品溶液的動力黏度，結(jié)果顯示，卡邁舒胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶15 000)測定的黏度值不穩(wěn)定且隨放置時間延長而增大，奧博星胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶12 000)、阿拉丁胃蛋白酶(活力1∶15 000)測定的黏度值穩(wěn)定，考慮到奧博星胃蛋白酶(活力1∶10 000、1∶12 000))測的黏度值較阿拉丁胃蛋白酶(活力1∶15 000)數(shù)值低，誤差較大，因此選用阿拉丁胃蛋白酶(活力1∶15 000)。