崔永寧 張姍姍1 趙 凡1 格桑平措1 魏小豹 薛璟祺 王順利 張秀新 曾秀麗1

(西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院蔬菜研究所1，拉薩 850032)(農(nóng)業(yè)部青藏高原果樹科學(xué)觀測實(shí)驗(yàn)站2，拉薩 850032)(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所3，北京 100081)

牡丹(paeoniasuffruticosaAndr)屬毛茛科芍藥屬牡丹組灌木，具有很高的觀賞價(jià)值、保健和藥用價(jià)值，原產(chǎn)于中國。我國唐宋時(shí)期就有較成熟的觀賞牡丹栽培應(yīng)用技術(shù)。牡丹的丹皮具有清血、活血散瘀的藥用功能[1]。

牡丹籽油是一種新興的食用油，具有很好的抗衰老、抗菌的作用[2]，牡丹籽油中含有較高的不飽和脂肪酸，以亞油酸和亞麻酸為主。亞油酸和亞麻酸是人體健康必須的脂肪酸，在人體中不可合成只能從飲食中獲取。牡丹籽含油量較高，出油率高達(dá)27%～33%[3-5]，經(jīng)毒理學(xué)研究證實(shí)牡丹籽油食用安全性較高[6-9]。牡丹籽油的開發(fā)利用潛力極大。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

為避免西藏現(xiàn)有的極其稀少的牡丹資源被破壞，具體采樣地點(diǎn)不公布，用居群表示。選取拉薩、林芝和山南地區(qū)等地10個(gè)居群進(jìn)行研究(目前僅發(fā)現(xiàn)這三個(gè)地區(qū)有牡丹存在)，其中居群1、居群2、居群3、居群4和居群5選自林芝市(平均海拔3 100 m)，居群6選自拉薩市(平均海拔3 650 m)，居群7、居群8、居群9和居群10選自山南市(平均海拔3 700 m)；所選居群間距均大于20 km。每個(gè)居群選取15株蓇葖果數(shù)量超過3個(gè)的植株，每個(gè)植株采集3個(gè)蓇葖果，用網(wǎng)袋封裝，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)自然風(fēng)干，果莢自然開裂后收取種子，在烘箱中46 ℃烘干48 h后備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

牡丹籽油脂肪酸成分分析采用GC-MS法，儀器為GC/MS-QP5050A 氣質(zhì)聯(lián)用儀。色譜柱：Supelco SP-2560(100 m×0.25 mm×0.20 μm)；色譜柱溫度程序：100 ℃保持5 min，然后以4 ℃/min升溫至240 ℃，保持15 min；載氣：氦氣，純度≥99.999%，流速為1 mL/min；進(jìn)樣口溫度程序：250 ℃，進(jìn)樣方式：不分流，進(jìn)樣量1 μL；溶劑切除時(shí)間12.5 min，檢測器電壓：0.1 kV；GC-MS接口溫度：250 ℃。

牡丹籽脫殼，液氮冷凍研磨，過40目篩網(wǎng)，取500 mg粉末于10 mL離心管，加入3 mL三氯甲烷甲醇溶液(三氯甲烷∶甲醇=1∶2)，4 ℃搖晃1 h，補(bǔ)加1 mL三氯甲烷，加入1.8 mL 1 mol/L氯化鉀溶液，2 500 r/min，離心10 min。取出氯仿層，氮吹干，加入1 mL5%硫酸甲醇溶液，渦旋1 min，80 ℃水浴1 h，冷卻到室溫，加入1 mL去離子水終止反應(yīng)。加入5 mL色譜級正己烷，搖勻，靜止10 min，用微量注射器取0.1 mL上清液至1.5 mL樣品瓶，加入20 μL 4 mg/mL十七烷酸甲酯正己烷溶液，加入0.88 mL正己烷使體系為1 mL。上機(jī)檢測[10]。

2 結(jié)果與討論

2.1 不同居群牡丹籽油脂肪酸的定性分析

通過氣質(zhì)聯(lián)用色譜法(GC-MS)對拉薩、林芝和山南地區(qū)等地10個(gè)居群牡丹的混合種子進(jìn)行主要脂肪酸成分分析，如圖1所示，由GC-MS色譜圖的峰保留時(shí)間以及各相關(guān)的分子式可知，牡丹籽油的脂肪酸主要由棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸以及α-亞麻酸等組成，這與前人研究結(jié)果一致[11-14]。

注：PA為棕櫚酸，IS為十七烷酸(內(nèi)標(biāo))，SA為硬脂酸，OA為油酸，LA為亞油酸，ALA為α-亞麻酸。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限分析

根據(jù)西藏野生牡丹籽油脂肪酸的GC-MS色譜圖(圖1)，以不同質(zhì)量濃度混合標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(x)，標(biāo)準(zhǔn)品的色譜峰面積為縱坐標(biāo)(y)，進(jìn)行線性回歸分析，根據(jù)信噪比(RSN=3)，計(jì)算其最低檢測質(zhì)量濃度為檢出限，如表1所示。最終計(jì)算所得，相關(guān)系數(shù)都在0.99以上，由此可見在測定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，色譜圖的色譜峰面積與質(zhì)量濃度成良好的線性關(guān)系。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限

2.3 不同居群牡丹籽油主要脂肪酸定量分析

根據(jù)GC-MS法測試西藏不同居群野生牡丹籽油含量結(jié)果可知(表2)，牡丹籽油中主要飽和脂肪酸有棕櫚酸、硬脂酸等，占總飽和脂肪酸99%以上；不飽和脂肪酸有α-亞麻酸、油酸、亞油酸等，占總不飽和脂肪酸99%以上。其中西藏野生牡丹居群3、居群4和居群5牡丹籽油的油酸含量最高，分別為54.84、43.24、47.79 mg·g-1，較其他居群差異極顯著，但是居群1和居群2的牡丹籽油的油酸含量最低，為1.40 mg·g-1和0.16 mg·g-1，而其他居群的含量均在30 mg·g-1以上。對于亞油酸而言，居群6、居群7、居群8、居群9以及居群10含量最高，均在21.93 mg·g-1以上，較其他居群差異極顯著。對于α-亞麻酸而言亦是如此，居群6、居群7、居群8、居群9以及居群10含量最高，均在67.84 mg·g-1以上，其中居群8更是高達(dá)106.77 mg·g-1，差異極顯著。居群6、居群7、居群8、居群9以及居群10的總脂肪酸含量亦是比其他居群含量高，均在137.78 mg·g-1以上，差異極顯著。居群6、居群7、居群8、居群9以及居群10的不飽和脂肪酸占總脂肪酸的比例均在93%以上，這和毛程鑫等[15]研究結(jié)果一致。其中居群6的所有不飽和脂肪酸均比居群7、居群8、居群9以及居群10稍低一點(diǎn)，但是顯著高于其他居群。由此可見，隨著海拔的升高，各居群牡丹籽油的脂肪酸含量逐漸增多，這與前人隨著海拔增高、光照增強(qiáng)，從而果實(shí)含油率提高的研究結(jié)果一致[19]，也與種植地的地理環(huán)境和氣候條件對牡丹籽油脂肪酸含量有顯著性影響的研究結(jié)果一致[20,21]。

2.4 常見食用油和牡丹籽油主要脂肪酸含量對比分析

人體不能合成亞油酸和亞麻酸，必須從日常膳食中獲取，不飽和脂肪酸是構(gòu)成人體內(nèi)脂肪的不可缺少的脂肪酸[16-18]。常見食用油(表3)中油酸含量最高的為葵花籽油，亞油酸含量最高的為大豆油，α-亞麻酸含量最高的為亞麻籽油，總不飽和脂肪酸含量最高的為菜籽油。而居群10牡丹籽油的油酸含量高出葵花籽油4倍多，亞油酸含量居于9種常見食用油中間，和亞麻籽油的亞油酸含量相仿，但是α-亞麻酸的含量顯著高于亞麻籽油，總不飽和脂肪酸含量也顯著高于菜籽油。牡丹籽油的不飽和脂肪酸含量顯著高于常見食用植物油，其人體必需的兩種不飽和脂肪酸(油酸和α-亞麻酸)的含量顯著高于目前常見食用油，這和王順利等[22]的研究結(jié)果一致。

表3 常見食用油和牡丹籽油主要脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%

3 結(jié)論

西藏不同居群牡丹籽油的脂肪酸主要由棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸以及α-亞麻酸等組成；牡丹籽油的不飽和脂肪酸含量顯著高于常見食用植物油的含量，其人體必需的兩種不飽和脂肪酸(油酸和α-亞麻酸)的含量顯著高于目前常見食用油；其中居群1、居群2、居群3、居群4和居群5的不飽和脂肪酸(大于82%，小于92%)均低于居群6(93%)，而居群6的不飽和脂肪酸低于居群7、居群8、居群9以及居群10(96%)，即隨著海拔的升高各居群牡丹籽油的脂肪酸含量逐漸增多。山南地區(qū)的地理環(huán)境中，林芝和拉薩更適合西藏油用牡丹的發(fā)展和推廣。

本研究將根據(jù)牡丹籽油的碘值、過氧化值、酸價(jià)、皂化值等理化指標(biāo)進(jìn)一步對西藏牡丹籽油的優(yōu)異性進(jìn)行分析。