熊江燕，鄭娟霞，王琤韡＊

（江西科技師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，南昌 330013）

烏骨雞別稱泰和雞、烏雞等，具有毛腳、烏皮、烏骨和烏肉等眾多特點(diǎn)，是傳統(tǒng)中醫(yī)藥認(rèn)為的我國特有的藥食兩用雞種。臨床試驗(yàn)證明，烏骨雞能提高機(jī)體腎上腺皮質(zhì)、垂體組織的機(jī)能，提高血細(xì)胞的含量并增強(qiáng)血紅素的相關(guān)性能，其主要原因在于其存在的黑色素，黑色素分為脫黑色素、真黑色素以及異黑色素三類，是一種在主體吲哚環(huán)四周連接著芳香化合物及烯烴化合物或基團(tuán)的化合物，烏骨雞體內(nèi)色素為真黑色素。烏骨雞黑色素具備眾多生理功效，如可以清除自由基達(dá)到抗氧化效果，并可以減緩機(jī)體衰老以及防紫外線、防誘變等[1-3]。且黑色素沉積越深，藥用價(jià)值越佳。黑色素以絡(luò)氨酸作底物通過一系列復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)合成，α-黑素細(xì)胞刺激素（α-MSH）是一類可與黑素細(xì)胞表面受體結(jié)合作用，促進(jìn)絡(luò)氨酸的合成分泌，并促進(jìn)黑素細(xì)胞產(chǎn)生樹突的神經(jīng)內(nèi)分泌激素。此外，α-MSH還能促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖，在黑色素合成過程中具有重要作用[4]。本文綜述了α-MSH 對(duì)黑色素合成的影響，以期為烏骨雞黑色素相關(guān)研究提供一定理論依據(jù)。

1 α-MSH概況

1.1 α-MSH的產(chǎn)生及結(jié)構(gòu)

阿黑皮素原（POMC）激素是α-MSH 的前體，垂體是初次檢測出含POMC 的部位，近年來研究者在免疫細(xì)胞、皮膚、腦等組織器官也檢測到存在POMC。POMC 主要在腦垂體分泌，促腎上腺皮質(zhì)素（ACTH）通過釋放因子誘導(dǎo)POMC mRNA在細(xì)胞和組織中表達(dá)，而后ACTH 在促腎上腺皮細(xì)胞中表達(dá)并發(fā)生水解作用，促腎上腺皮細(xì)胞位于垂體前葉，其反應(yīng)一條途徑水解為ACTH，另一條途徑水解產(chǎn)物先是β-促脂解素（LPH）而后經(jīng)轉(zhuǎn)化為β-內(nèi)啡肽最終生成β-MSH[5]。酶繼續(xù)催化ACTH，直至其降解為α-MSH（見圖1）。目前已知三類不同構(gòu)型的MSH神經(jīng)內(nèi)分泌激素，其表達(dá)與功能均不盡相同，包括α、β以及γMSH。其中由絲-酪-絲-蛋-谷-谷-苯丙-精-色-甘-賴-脯-纈等13 個(gè)氨基酸構(gòu)成的α-MSH 含量最高，這13 個(gè)氨基酸又來源于POMC分子中39個(gè)氨基酸的第1至13 位氨基酸，且研究發(fā)現(xiàn)，在促黑色素細(xì)胞中α-MSH 具備黑素活性的最小單位是其中的第4至10 位氨基酸[7]。當(dāng)α-MSH 的某幾位氨基酸被替換后，會(huì)產(chǎn)生多種與α-MSH 有著相同作用，而對(duì)受體親和性不同的α-MSH類似物。

1.2 α-MSH受體

在近年來α-MSH的研究中，發(fā)現(xiàn)并克隆出了5種α-MSH的受體（MCR家族），α-MSH在不同組織中通過其特異性以Ca2+依賴方式發(fā)揮作用。MCR家族均為G蛋白偶聯(lián)受體，該受體共同特點(diǎn)為其立體結(jié)構(gòu)中都有七個(gè)跨膜α 螺旋，包括MC1R-MC5R[8]。其中MC2R 是ACTH 的受體，分布于腎上腺皮質(zhì)，只對(duì)ACTH有親和力，能結(jié)合大部分的粗黑激素肽[9]，而其余受體均對(duì)MSH 表現(xiàn)出不同程度的親和力，且在腦內(nèi)均有表達(dá)。MC1R 主要分布在中性粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞及外周的黑素細(xì)胞，具有與α-MSH和ACTH同等的親和力；MC3R、MC4R的表達(dá)主要于腦組織進(jìn)行，且MC4R 對(duì)MSH 具 有 特 異 性；MC5R 則 結(jié) 合ACTH、α-MSH 主要分布在腎上腺、胃及脾臟等。研究發(fā)現(xiàn)，黑皮素類受體MC1R 對(duì)皮膚黑色素沉著有調(diào)控作用，其含有317 個(gè)氨基酸和7 個(gè)跨膜蛋白，且MC1R 的遺傳突變因子決定了MC1R 的功能，MC1R 在不同細(xì)胞上的表達(dá)存在差異。MC1R 可在黑素細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，當(dāng)MC1R 作為相關(guān)受體與α-MSH 進(jìn)行連接，MC1R 即可受到一定刺激而被活化，且和G 蛋白偶聯(lián)能提升環(huán)磷酸腺苷（cAMP）含量[10]。

圖1 α-MSH合成具體過程[6]

2 α-MSH與黑色素合成

黑色素的結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)一致，Raper 等最先提出其合成具體生化反應(yīng)過程，而后科學(xué)家們進(jìn)一步將簡單理論系統(tǒng)地完善[11]。第一步反應(yīng)是絡(luò)氨酸被決定該反應(yīng)速度的關(guān)鍵酶絡(luò)氨酸酶（TYR）催化，作用后產(chǎn)物氧化為多巴（Dopa），TYR 繼而使Dopa氧化為多巴醌（DQ），DQ通過多聚化反應(yīng)產(chǎn)生活性極高的無色多巴色素，多聚化反應(yīng)物包括DQ、無機(jī)離子、氨基化合物及還原劑等。而余下的DQ易將活性高的無色多巴色素催化氧化為多巴色素（DC），這一過程非?？焖賉12]。而后與多巴色素異構(gòu)酶反應(yīng)，反應(yīng)有羥化和脫羧兩條途徑，羥化產(chǎn)生5，6-二羥基吲哚羧酸（DHICA）可與自身或與醌、醇結(jié)合產(chǎn)生真黑素，而脫羧不會(huì)直接合成真黑色素，而是合成一個(gè)前體，反應(yīng)先產(chǎn)生5，6-二羥基吲哚（DHI），經(jīng)過TYR的作用即合成IQ，IQ 也稱5，6-吲哚醌。在黑色素合成過程中，體內(nèi)的細(xì)胞因子、各類激素及外界環(huán)境均會(huì)對(duì)其生物合成產(chǎn)生影響。研究證明，α-MSH可調(diào)控黑素細(xì)胞增生與合成，通過激活MC1R 后參與cAMP/PKA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。首先在α-黑素細(xì)胞刺激素作用下黑素細(xì)胞特異性連接MC1R，再通過G 蛋白耦聯(lián)環(huán)磷酸腺苷信號(hào)通路，一方面可激活腺苷酸增加cAMP含量并提高絡(luò)氨酸酶的分泌水平促進(jìn)合成黑色素的反應(yīng)效率。Busca等[13]表明，cAMP在促進(jìn)黑素生成的途徑中涉及到了磷酸化轉(zhuǎn)錄因子和蛋白激酶A，反應(yīng)過程可上調(diào)TYR 的表達(dá)水平，提高M(jìn)ITF含量，且反應(yīng)時(shí)優(yōu)先推進(jìn)真黑素的產(chǎn)生。而與此同時(shí)α-MSH 會(huì)使蛋白脂酶的C 細(xì)胞信號(hào)途徑激活，從而在黑素合成時(shí)調(diào)控信號(hào)通路與信號(hào)蛋白的多酶級(jí)聯(lián)作用。

3 α-MSH對(duì)黑色素合成的調(diào)控

3.1 介導(dǎo)紫外線的誘導(dǎo)作用

大量實(shí)驗(yàn)表明，紫外線（UV）在誘導(dǎo)黑色素沉積方面非常關(guān)鍵，主要通過cAMP 通道的關(guān)鍵調(diào)節(jié)物MC1R介導(dǎo)發(fā)揮作用。一方面α-MSH可以作為UV 誘導(dǎo)黑色素合成的旁分泌介導(dǎo)物，同時(shí)對(duì)UV對(duì)于黑素細(xì)胞樹突的影響有調(diào)節(jié)作用；另一方面UV 能促進(jìn)黑素細(xì)胞及角朊細(xì)胞上MC1R 的功能表達(dá)，從而增加α-MSH 與MC1R 的協(xié)同性[14]。此外，UV會(huì)介導(dǎo)黑素細(xì)胞停滯于G1期，而α-MSH可促使其克服，并引起G2期變長細(xì)胞數(shù)目變多，而G2時(shí)期的黑素細(xì)胞可分泌MC1R，促進(jìn)α-MSH的作用，并介導(dǎo)UV合成黑色素。黑素細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞在UV 誘導(dǎo)下均能刺激分泌α-MSH 和ACTH 等，從而促進(jìn)MC1RmRNA 的表達(dá)，上調(diào)細(xì)胞對(duì)POMC 相關(guān)肽的反應(yīng)性；同時(shí)MC1R 被α-MSH 及ACTH 激活后可擴(kuò)增UV 的生物信號(hào)。亦有學(xué)者分析，UV 照射可促進(jìn)α-MSH 與細(xì)胞表面的受體結(jié)合，提高絡(luò)氨酸酶的活性，此外UV照射能使α-MSH 細(xì)胞內(nèi)在結(jié)合位點(diǎn)下降而外在結(jié)合位點(diǎn)上升。其機(jī)制存在兩種可能，其一，UV加強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)MC1R 再分布于細(xì)胞外，阻止細(xì)胞表面受體內(nèi)在化；其二，紫外線能促進(jìn)α-MSH 及其它蛋白結(jié)合自身靶細(xì)胞的作用，且細(xì)胞經(jīng)UV 照射由于其內(nèi)在MC1R 閉合使得其與α-MSH、相關(guān)蛋白的結(jié)合受到阻礙，或者UV對(duì)細(xì)胞內(nèi)MC1R具有無特異性蛋白水解作用[15]。以上表明，α-MSH與MC1R 及UV 在參與調(diào)節(jié)合成黑色素時(shí)具有協(xié)同作用，且在角質(zhì)形成細(xì)胞及表皮細(xì)胞中不僅具備自分泌網(wǎng)絡(luò)，還具有旁分泌網(wǎng)絡(luò)，其調(diào)節(jié)機(jī)制同時(shí)擁有正反饋和負(fù)反饋。

3.2 促進(jìn)黑色素細(xì)胞增殖

合成黑色素的反應(yīng)在黑色素細(xì)胞黑素體中進(jìn)行，神經(jīng)嵴是黑素細(xì)胞生長發(fā)育的場所，成黑素細(xì)胞需先經(jīng)過神經(jīng)嵴再遷移至特定靶位點(diǎn)。就皮膚色素而言，成黑素細(xì)胞在表皮和發(fā)囊分化成熟，后黑色素細(xì)胞延伸形成樹突，合成黑色素所需的黑素體由樹突頂供給，黑素體進(jìn)入表皮細(xì)胞后產(chǎn)生黑色素[16]。近來研究表明，α-MSH能調(diào)控黑素細(xì)胞樹突增生，在黑素細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞之間樹突作為轉(zhuǎn)運(yùn)黑素小體的橋梁并刺激其加速，此外樹突伸長的黑素細(xì)胞具有更高的存活率，而接著經(jīng)反饋調(diào)節(jié)亦可促進(jìn)黑色素的分泌[17]。其機(jī)制普遍接受的是，α-MSH 可上調(diào)細(xì)胞內(nèi)能與GTP-結(jié)合蛋白R(shí)ho及Rac發(fā)生反應(yīng)的cAMP的含量，從而使黑素細(xì)胞肌動(dòng)蛋白纖維重新組合改善其無序性，促進(jìn)黑素細(xì)胞樹突形成，且與此同時(shí)，cAMP 還發(fā)揮了阻礙PI3K 信號(hào)通路傳導(dǎo)的作用[18]。亦有學(xué)者分析，對(duì)形成樹突及合成黑素細(xì)胞有促進(jìn)作用的因子活化下游信號(hào)，是首先結(jié)合有關(guān)糖蛋白到達(dá)細(xì)胞中再介導(dǎo)相關(guān)結(jié)合位點(diǎn)，進(jìn)而促進(jìn)黑素細(xì)胞的生長發(fā)育[19]。Hiramoto 等[20]研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)α-MSH 處理后TYR 活性有顯著提高，并提高了TPR1和TPR2蛋白表達(dá)水平，且α-MSH的劑量與黑色素細(xì)胞的增值率呈線性相關(guān)，隨α-MSH 濃度增加黑色素細(xì)胞的增值率先升高后下降。然而，Halaban[21]表明，當(dāng)含有促分裂劑，α-MSH 僅是在短時(shí)間內(nèi)促進(jìn)正常黑色素細(xì)胞基因的表達(dá)，而對(duì)增加黑素細(xì)胞的數(shù)量并無效果。

3.3 保護(hù)黑素細(xì)胞

α-MSH在促進(jìn)黑素合成的同時(shí)，也是一種具有抗炎性細(xì)胞因子效應(yīng)的內(nèi)源性神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)肽，能緩解細(xì)胞受到毒性的損傷，此外還可促使黑素細(xì)胞分泌NO以阻礙有害因子對(duì)細(xì)胞個(gè)體之間粘連的促進(jìn)作用。已知α-MSH 除與外周炎性細(xì)胞及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞表面的MCR 受體直接結(jié)合調(diào)節(jié)外周炎癥和控制中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥外，α-MSH還可在中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)炎癥的調(diào)節(jié)下，進(jìn)一步對(duì)外周神經(jīng)發(fā)揮抗炎效果。除通過調(diào)控炎癥保護(hù)黑素細(xì)胞外，α-MSH還能保護(hù)黑素細(xì)胞免受超氧化物的損害。由于絡(luò)氨酸酶合成黑色素底物需利用超氧化物，然表皮黑素細(xì)胞抗氧化酶水平較低，且產(chǎn)生的超氧化物較多，易受到氧化損害。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在羊駝黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基中添加含量有差異的α-MSH，結(jié)果顯示其與MC4R 作用后可下調(diào)NOS2 的水平，下調(diào)程度和α-MSH 含量呈線性關(guān)系[22]。α-MSH和NO均對(duì)黑色素產(chǎn)生有誘導(dǎo)作用，NO是一類活性分子，由黑素細(xì)胞經(jīng)α-MSH誘導(dǎo)產(chǎn)生，但NO同時(shí)與超氧化物反應(yīng)，產(chǎn)生的羥基基團(tuán)及過氧亞硝酸鹽會(huì)對(duì)細(xì)胞造成損害，可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[23]。而當(dāng)α-MSH分泌水平提高，可下調(diào)NOS2的產(chǎn)生，從而使NO含量減少，抑制細(xì)胞發(fā)生病變及死亡。

3.4 與刺鼠信號(hào)蛋白相互拮抗

刺鼠信號(hào)蛋白（ASIP）由乳頭狀細(xì)胞所分泌的信號(hào)蛋白，而乳頭狀細(xì)胞與黑色素細(xì)胞相鄰近，其編碼通過刺鼠基因位點(diǎn)完成，基因表達(dá)后可合成具有131個(gè)氨基酸的ASIP，而ASIP的表達(dá)可合成暗黑素[24]。因MC1R同時(shí)是α-MSH和刺鼠信號(hào)蛋白的受體，故對(duì)其親和力類似。Swope等[25]向培養(yǎng)液添加利用重組DNA 技術(shù)并除去其余雜質(zhì)與其它蛋白的ASIP 刺激黑素細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)ASIP可直接作用于受體MC1R，使培養(yǎng)液中cAMP含量降低，進(jìn)一步導(dǎo)致TYR 活性下調(diào)，其下調(diào)程度與ASIP 劑量呈明顯相關(guān)；此外，絡(luò)氨酸酶相關(guān)蛋白1、2活性受到抑制，且暗黑色素合成顯著增多，而真黑色素顯著降低，暗黑素約占總黑素的91%。由此可知，α-MSH對(duì)ASIP有拮抗作用，ASIP可與α-MSH競爭結(jié)合MC1R，降低cAMP的含量，進(jìn)而通過級(jí)聯(lián)反應(yīng)抑制真黑色素的合成，最終影響真黑素與褐黑素水平的比例，影響動(dòng)物皮膚的顏色和毛色。同時(shí)，刺鼠信號(hào)蛋白會(huì)阻礙α-MSH 和MC1R 的聯(lián)結(jié)反應(yīng)，同理α-MSH 對(duì)刺鼠信號(hào)蛋白和MC1R 之間的連接也有抑止作用，即刺鼠信號(hào)蛋白、α-黑素細(xì)胞刺激素及MC1R之間的聯(lián)結(jié)是相互排斥的。有學(xué)者推測其可能是受體結(jié)合某一配基后，該受體的立體異構(gòu)將會(huì)產(chǎn)生差異，從而阻礙了另一配基結(jié)合受體，這種排斥作用導(dǎo)致其生物學(xué)作用的發(fā)揮無法正常進(jìn)行。然而，即使ASIP刺激黑素細(xì)胞后弱化了TYR的表達(dá)，但TYR的合成分泌能力并沒有完全喪失，因?yàn)榘岛谒氐暮铣梢搽x不開TYR的催化作用，故從另一個(gè)角度看，ASIP結(jié)合受體MC1R后具有減弱α-MSH過度促進(jìn)黑色素合成的效果，使生成黑色素的類型發(fā)生變化，以減弱黑色素的沉積。

3.5 提高M(jìn)C1R、MITF和TYR基因表達(dá)量

MC1R 受體可被α-MSH 激活，TYR 是產(chǎn)生黑色素的反應(yīng)限速酶，而小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子（MITF）基因定位于3號(hào)染色體上，其表達(dá)過程有多個(gè)啟動(dòng)子共同調(diào)控，DNA可轉(zhuǎn)錄形成眾多蛋白異聚體復(fù)合物，其中MITF-M 對(duì)黑色素細(xì)胞質(zhì)的表達(dá)具有特異性[26]。于志慧等[27]研究發(fā)現(xiàn)，體外培養(yǎng)的TYR、MC1R 及MITF 基因表達(dá)水平隨α-MSH濃度增高而上升，且黑素細(xì)胞形成樹突與α-黑素細(xì)胞刺激素和MC1R的連接、參與TYR途徑及調(diào)控小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子等均密切相關(guān)。小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子和酪氨酸酶mRNA在皮膚中的表達(dá)量最高，而在肌肉組織中表達(dá)含量最低，其中腎臟表達(dá)含量又高于肌胃，肌胃高于肝臟，此結(jié)果大致與烏骨雞各組織黑色素沉積含量的規(guī)律相符合。在黑色素細(xì)胞生長過程中涉及轉(zhuǎn)錄因子MITF 的參與并發(fā)揮關(guān)鍵作用，α-MSH 刺激MC1R、MITF 的表達(dá)有上調(diào)cAMP 信號(hào)通路及MAPK 級(jí)聯(lián)反應(yīng)兩種方式，后者可推進(jìn)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子磷酸化后經(jīng)MITF轉(zhuǎn)錄因子作為媒介與轉(zhuǎn)導(dǎo)，最后作用于TYR基因家族的啟動(dòng)子特定區(qū)域，參與調(diào)控黑色素的合成。鄭嫩珠等[28]也指出促進(jìn)黑素生成的cAMP 途徑，這一連串反應(yīng)有磷酸化的轉(zhuǎn)錄因子和蛋白激酶A 的參與，促進(jìn)了MITF 及TYR 的合成與分泌。由此可知，α-MSH 在黑色素合成過程中刺激MC1R 與G 蛋白耦聯(lián)經(jīng)cAMP信號(hào)途徑，可上調(diào)MITF基因和蛋白表達(dá)水平，而MITF 在調(diào)節(jié)TYR 的合成與分泌過程中具有重要作用，進(jìn)而通過調(diào)控TYR在黑色素細(xì)胞的表達(dá)介導(dǎo)黑色素合成。

4 抑制α-MSH作用的因素

4.1 姜黃酮

芳香（ar）姜黃酮是一種天然的姜黃油，最初是從姜黃龍眼中分離出來的，幾個(gè)世紀(jì)以來在東南亞一直被用作藥物和食物。研究證明，芳香（ar）-姜黃酮對(duì)B16F10 黑色素瘤細(xì)胞中α-MSH和3-異丁基-1-甲氧基-氨酸（IBMX）誘導(dǎo)的黑色素生成和信號(hào)通路有抑制作用[29]。其結(jié)果顯示α-MSH 和（IBMX）可刺激B16F10 細(xì)胞中絡(luò)氨酸酶及其多種相關(guān)蛋白如TRP-1 的表達(dá)，而芳香（ar）-姜黃酮對(duì)其表達(dá)水平有抑制作用。且ar-姜黃酮可通過抑制α-MSH刺激的B16F10細(xì)胞中環(huán)腺苷酸反應(yīng)元件結(jié)合蛋白的活性，強(qiáng)烈抑制了α-MSH 和IBMX 誘導(dǎo)的微鄰苯二甲酸鹽相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子。Bonhee 等[30]指出，四氫姜黃素也可減弱α-MSH在B16F10細(xì)胞中對(duì)黑素合成的促進(jìn)作用，下調(diào)絡(luò)氨酸蛋白和MITF表達(dá)水平，并使絡(luò)氨酸酶活性降低。此外，與姜黃素相比，ar-姜黃酮具有更佳的抑制作用。

4.2 乙醇提取物

近年來，海洋自然資源因其成分多樣化和綠色安全特性，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用開發(fā)到藥物、食品及畜牧等行業(yè)。褐藻是已知的具有豐富化合物的藻類，從褐藻中提取的乙醇提取物（ESS）可顯著減少黑色素合成α-MSH 刺激B16F10 細(xì)胞。Mohammed等[31]分析，ESS可通過環(huán)磷腺苷小分子在細(xì)胞內(nèi)傳遞相關(guān)信息，下調(diào)CREB蛋白的表達(dá)，CREB 可參與介導(dǎo)的小鄰苯二甲酸基因的轉(zhuǎn)錄，調(diào)節(jié)其表達(dá)水平，從而減弱促黑素酶、TYR、TRP-1 的表達(dá)，同時(shí)抑制cAMP 的積累、抑制CREB 磷酸化。并且，EPK 是細(xì)胞外表達(dá)的調(diào)節(jié)信號(hào)傳導(dǎo)的相關(guān)酶，ESS 可使ERK 活化，而不能使Akt 和其它蛋白激酶得以活化，后者負(fù)責(zé)翻譯后降低MITF 表達(dá)水平。因此，ESS 減弱α-MSH刺激B16F10 細(xì)胞色素沉著過的是通過調(diào)制分子ERK信號(hào)通路[32]。

4.3 lpa-miR-nov-66

MicroRNAs(miRNAs)為一種參與調(diào)控生物體合成的內(nèi)部因素合成的非編碼核糖核酸，普遍分布于真核生物中，其中最新研究發(fā)現(xiàn)的miRNAs對(duì)機(jī)體分泌黑色素非常關(guān)鍵，在黑色素的產(chǎn)生及沉積為顆粒過程中亦發(fā)揮重要功能。姬凱元等[33]研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基中單獨(dú)添加α-MSH可降低內(nèi)源性lpa-miR-nov-66的表達(dá)水平?？扇苄曾B氨酸環(huán)化酶（sGC）對(duì)GTP 轉(zhuǎn)化為cGMP 有催化作用，是lpa-miR-nov-66 的靶基因之一，并提供了一個(gè)重要的第二信使cAMP 參與調(diào)解蛋白激酶、磷酸二脂酶和離子通道[34]。研究表明，lpa-miR-nov-66導(dǎo)入外源DNA 轉(zhuǎn)化后結(jié)合α-MSH 較于只用α-MSH 處理，TYRP2 的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平升高，而TYR、MITF 在編碼合成過程中的表達(dá)都較弱，使得cAMP的產(chǎn)量及黑色素合成含量下降。并得出結(jié)論，miRNAs 抑制α-MSH 在推進(jìn)合成黑色素的表達(dá)是通過調(diào)節(jié)黑色素細(xì)胞中重要的cAMP路徑實(shí)現(xiàn)的。

5 結(jié)語與展望

在烏骨雞體內(nèi)，α-MSH 可與MC1R 結(jié)合、介導(dǎo)黑色素合成相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)過程，通過與紫外線協(xié)同作用、促進(jìn)黑色素細(xì)胞增殖、保護(hù)黑素細(xì)胞、與刺鼠信號(hào)蛋白相互拮抗等多種途徑參與調(diào)控烏骨雞黑色素的合成，姜黃酮、乙醇提取物及l(fā)pa-miR-nov-66 等可抑制α-MSH 的促進(jìn)作用。而烏骨雞黑色素是滋補(bǔ)、防衰老及強(qiáng)身健體的物質(zhì)，研究α-MSH對(duì)烏骨雞黑色素合成機(jī)制的影響有利于促進(jìn)黑色素沉積，但目前烏骨雞黑色素的合成與作用機(jī)制尚未完全明確，對(duì)烏骨雞黑色素的加工水平還停留在酶解技術(shù)。若未來從其分子量、結(jié)構(gòu)及功能等分子理論水平著手對(duì)烏骨雞黑色素合成過程、沉積機(jī)制及提取技術(shù)開展更深入地研究，相信會(huì)更有利于發(fā)掘利用其入藥功效及食用價(jià)值。烏骨雞黑色素不僅可以用于別的黑色食品中為其提高色澤效果，而且還能加工成新興的具有保健功效的食品與飲料，推動(dòng)黑色食品的發(fā)展。