吳立茵

（遼寧省葫蘆島市綏中縣農(nóng)業(yè)事務(wù)服務(wù)中心，遼寧 葫蘆島 125200）

禽彎曲桿菌主要是由空腸彎曲桿菌引起的一種細(xì)菌性傳染病。彎曲桿菌病曾被稱之為弧菌性肝炎。本文針對(duì)鴕鳥彎曲桿菌病進(jìn)行臨床初診和實(shí)驗(yàn)室檢疫的闡釋。

1 流行病學(xué)

Blakemore等（1939）首先對(duì)幼雞感染本病病變進(jìn)行了描述，Delaplane等（1955）最早分離出本病原菌并對(duì)其進(jìn)行了復(fù)制?，F(xiàn)已知除雞、火雞、鴨等家禽外，包括鴿、鷓鴣、鵪鶉、雉雞和部分狩獵鳥能感染本病。還從某些海鳥及水禽體中分離到了彎曲桿菌，鴕鳥患彎曲桿菌病也見有資料報(bào)道。本病主要傳染源為病鳥，通過所排出帶菌的糞便所污染的飼料、飲水構(gòu)成本病的主要傳播途徑?，F(xiàn)已從與污染環(huán)境有接觸的家蠅、蟑螂等昆蟲以及野生鳥類（麻雀）體中分離出空腸彎曲桿菌，并證明對(duì)易感動(dòng)物具有感染性。另據(jù)介紹，從5日齡～4周齡間的幼年鴕鳥對(duì)本病有較強(qiáng)的易感性。

2 臨床癥狀

幼齡鴕鳥在良好的飼養(yǎng)條件下病程往往是緩慢的，個(gè)別情況下也可能出現(xiàn)急性死亡（據(jù)報(bào)道，死亡率可高達(dá)40%），這取決于受感染鳥的體況、日齡、感染細(xì)菌的數(shù)量和菌株的毒力等因素。病鳥表現(xiàn)精神沉郁，不愿活動(dòng)，間歇性或持續(xù)性腹瀉，食欲不振、生長發(fā)育受阻，體重逐漸下降，排綠色尿液，后期多因脫水、極度衰竭而死亡。

3 病理學(xué)檢疫

3.1 病理剖檢變化

病程稍長死后的幼鳥可見尸體消瘦，腿部肌肉消耗、干燥呈深紫紅色，皮膚干燥、彈性降低，部分病例肝臟出現(xiàn)點(diǎn)狀壞死及出血點(diǎn)。受感染的腸管擴(kuò)張，腸壁變薄、腸腔內(nèi)有多量黏液或水樣液體蓄積。部分病例還可能伴有心包積液及局限性心肌炎等病理變化。

3.2 病理組織學(xué)變化

肝表現(xiàn)漿膜水腫，病變區(qū)肝細(xì)胞索排列紊亂，肝靜脈竇間隙內(nèi)有淋巴細(xì)胞和顆粒性白細(xì)胞浸潤，使用硝酸銀浸漬處理，可發(fā)現(xiàn)膽小管增生、肥厚。受感染腸道固有層充血，單核細(xì)胞浸潤，有不等量的菌體存在。腸黏膜充血腫脹和白細(xì)胞浸潤，上皮細(xì)胞間出現(xiàn)大量杯狀細(xì)胞。腺泡和排泄管擴(kuò)張，黏液腺分泌亢進(jìn)，分泌黏液中有數(shù)量不等的白細(xì)胞、紅細(xì)胞，脫落的被復(fù)上皮薪液腺及其排泄管的上皮細(xì)胞聚集，并可檢出彎曲桿菌的存在。

4 病原學(xué)檢疫

4.1 病料采集及處理

鴕鳥全身感染時(shí)，可從肝、心、心包液、膽汁和血液中采集病料，制成細(xì)胞懸浮液進(jìn)行病原體分離。也可使用無菌拭子直接由泄殖腔中采集糞便，或在剖檢時(shí)無菌采集泄殖腔、空腸或盲腸內(nèi)容物作為樣品。為抑制糞便等病料中雜菌的生長，應(yīng)在選擇性培養(yǎng)基中添加桿菌肽、新霉素、三甲氧芐二氨嘧啶、先鋒霉素Ⅰ和黏菌素抗微等生物藥物。

4.2 菌體形態(tài)觀察

彎曲桿菌的菌體可直接用感染病鳥膽汁制成涂片用相差顯微鏡進(jìn)行觀察，還可取盲腸內(nèi)容物用堿性品紅代替藏紅復(fù)染的改良革蘭氏染色法制成抹片檢查。彎曲桿菌為革蘭氏陰性，形態(tài)為逗點(diǎn)形、S型及螺旋狀的桿菌，在老齡培養(yǎng)物中，本菌呈球形，能運(yùn)動(dòng)，通常有單根鞭毛。

4.3 雞胚接種

取所制備含有抑菌物質(zhì)的組織懸浮液0.1～0.2 mL注入5～8日齡雞胚卵黃囊內(nèi)或尿囊腔。彎曲桿菌可使被接種雞胚3～5 d發(fā)生死亡，取其卵黃或尿囊液制成抹片染色，或直接用相差顯微鏡進(jìn)行檢查，能觀察到本菌的存在。死胚表現(xiàn)血管充血和肝出現(xiàn)局灶性病變。

4.4 細(xì)胞培養(yǎng)

彎曲桿菌可在Hela細(xì)胞和人上皮細(xì)胞中生長繁殖。定位于細(xì)胞內(nèi)部的侵襲性菌株，可通過固定、染色后，在電子顯微鏡下被發(fā)現(xiàn)。

4.5 分離培養(yǎng)

選擇及增菌培養(yǎng)：彎曲桿菌為微嗜氧菌，在含5%的氧氣、10%的二氧化碳和85%氮?dú)猓?2℃（最低37℃）的培養(yǎng)環(huán)境下生長良好?？墒褂煤志镔|(zhì)的布魯氏瓊脂，基礎(chǔ)血瓊脂等作為選擇性培養(yǎng)基。國外使用肉湯增菌培養(yǎng)基（BEM）可明顯提高本菌檢出率，其配方如下：2號(hào)營養(yǎng)肉湯（Oxoid）1 000 mL、3號(hào)瓊脂（Oxoid）0.75 g、硫酸鐵0.5 g、偏重亞硫酸鈉0.5 g、丙酮酸鈉0.5 g、酵母浸膏（Difco）1.0 g、3號(hào)膽鹽（Dirco）1.5 g、Skirrow's抗生素添加劑（Oxoid）1瓶、脫纖人血50 mL。配制方法為將前7種成分混合，121℃高壓15 min滅菌（最終pH 7.4），涼至50℃加入后兩種成分，分裝備用。操作方法是取10 g樣品與50 mL BEM混合，制成勻漿，于微含氧環(huán)境中42℃培養(yǎng)24 h后，取增菌培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接于固體選擇培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24～72 h觀察菌落。

細(xì)菌培養(yǎng)性狀：菌落不溶血，呈半透明或灰色、扁平狀，具有融合生長的傾向；在少數(shù)情況下，可生長出隆起、無光澤、邊緣不整齊、不透明呈棕灰色的菌落。

生化特性：彎曲桿菌不發(fā)酵糖類，均能還原亞硒酸鹽，氧化酶和過氧化氫酶陰性，吲哚陰性?？漳c彎曲桿菌對(duì)萘啶酮酸敏感，水解馬尿酸鹽。

5 血清學(xué)檢疫

使用兔制備的抗血清及被動(dòng)血凝技術(shù)對(duì)菌體O抗原進(jìn)行分型，已確定了空腸彎曲桿菌的60個(gè)血清型（Penner方法）；但此血清型方法，僅限于對(duì)流行病調(diào)查時(shí)用于進(jìn)行菌體鑒定，而用于本病臨床實(shí)驗(yàn)室檢疫似乎意義不大。