盧 麗,郭 衛(wèi),陳麗萍,吳正香,黃 歡,劉小佳,田興國(guó)
(貴州理工學(xué)院食品藥品制造工程學(xué)院,貴州 貴陽(yáng) 550003)
萊克多巴胺的醫(yī)學(xué)作用是治療充血性心力衰竭癥、肌肉萎縮癥和支氣管擴(kuò)張平滑肌松弛的有效試劑[1],可減少脂肪蓄積、增長(zhǎng)肌肉等,是一種通過(guò)人工新合成的腎上腺素能受體興奮劑。但現(xiàn)在卻作為一種新型瘦肉精被一些養(yǎng)殖場(chǎng)非法用作飼料添加劑,以期減少動(dòng)物體內(nèi)脂肪,增強(qiáng)豬或火雞等多種動(dòng)物的肌肉生長(zhǎng)[2]??茖W(xué)表明,一旦人們食用含有β-受體激動(dòng)劑的肉類(lèi),會(huì)使人體會(huì)出現(xiàn)心率過(guò)快、四肢麻木、肌肉顫動(dòng)、心律失常等各種不良中毒反應(yīng),中毒癥狀與某些動(dòng)物癥狀類(lèi)似,情節(jié)嚴(yán)重者甚至可能引發(fā)高血壓、心臟病甚至死亡。
當(dāng)今,量子點(diǎn)(QDots)是一種用于標(biāo)記活細(xì)胞中膜蛋白的一類(lèi)熒光探針,被越來(lái)越頻繁地用于神經(jīng)元受體和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的熒光成像[3]。由于食品檢測(cè)要求越來(lái)越高,基于量子點(diǎn)的熒光檢測(cè)方法正好能夠彌補(bǔ)傳統(tǒng)檢測(cè)方法中存在的不足,如檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、靈敏度不高、樣品前處理繁瑣等缺點(diǎn),因此得到廣泛應(yīng)用。
由于萊克多巴胺作為一種醫(yī)藥原料的特殊性,在全世界各地對(duì)它都有不同的規(guī)定,例如中國(guó)臺(tái)灣,禁止使用萊克多巴胺,但在中國(guó)國(guó)內(nèi)的某些地方,萊克多巴胺卻又出現(xiàn)不同的使用規(guī)定,只要用量符合標(biāo)準(zhǔn),便可以使用。用量一旦超出了國(guó)家的規(guī)定,人食用了添加萊克多巴胺的肉類(lèi)后會(huì)進(jìn)入人體,從而引起多種嚴(yán)重不良危害。
任欣等人研究了萊克多巴胺對(duì)成年大鼠睪丸類(lèi)固醇激素合成急性調(diào)控蛋白(StAR)基因mRNA表達(dá)的影響[4],測(cè)定了萊克多巴胺急性給藥14 天后對(duì)成年大鼠睪丸StAR基因的表達(dá)影響。得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)論是大鼠體重及睪丸重量的變化一次性給藥后大鼠體重與對(duì)照組相比明顯增加,由此次實(shí)驗(yàn)可以表明,萊克多巴胺對(duì)人體的身體情況的影響主要是刺激人體的激素分泌,造成人身體環(huán)境的破壞而導(dǎo)致身體不能得到正常的代謝生長(zhǎng)。
石靜飛等人研究沙丁胺醇和萊克多巴胺在動(dòng)物體內(nèi)的代謝及組織殘留。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,沙丁胺醇(Salbutamol,SAL)和萊克多巴胺(Ractopamine,RCT)都屬于β-腎上腺素受體激動(dòng)劑,具備普遍的生理作用,可用做各種家禽的飼料添加劑,并且明顯加快食品動(dòng)物的生長(zhǎng),促進(jìn)飼料轉(zhuǎn)化率,增大肌肉/脂肪比率從而提高瘦肉率。當(dāng)人食用含有此類(lèi)物質(zhì)殘留的肉類(lèi)后,會(huì)引發(fā)多種病癥[5]。
這是一種通過(guò)接口技術(shù)將色譜分離裝置與各種檢測(cè)設(shè)備連接起來(lái)的新型分析技術(shù)[6]。由于醫(yī)藥行業(yè)的快速發(fā)展,此法對(duì)藥物殘留的檢測(cè)分析以及在疾病治療過(guò)程控制中顯示出較為重要的作用[7]。但是它存在著許多的缺點(diǎn),如使用的儀器十分昂貴,且需要具備專(zhuān)業(yè)知識(shí)的技術(shù)人員來(lái)操作和保養(yǎng)。而且不同的離子對(duì)試劑干擾目標(biāo)化合物的檢測(cè)效果不同,因此需要離子對(duì)試劑有對(duì)PSTS(外周結(jié)合蛋白)進(jìn)行高效的反相色譜測(cè)定[8]。最重要的是此法并不能準(zhǔn)確的確定結(jié)構(gòu),若需要準(zhǔn)確的確定物質(zhì)結(jié)構(gòu),還需要做很多其它的檢測(cè),如核磁共振 H譜、 C譜等。
酶聯(lián)免疫法是一種利用免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ),結(jié)合酶對(duì)底物的高催化性與抗原的高特異性的一種的技術(shù)。為了保證最后結(jié)果的正確性,需要在一個(gè)以微量的聚苯乙烯為固定相的板孔中,進(jìn)行滴定測(cè)定。需要檢測(cè)的酶標(biāo)物加入其中并進(jìn)行孵育,在這個(gè)過(guò)程要一直進(jìn)行洗滌操作以消除多余的反應(yīng)材料。刑雷等人通過(guò)研究得出,在檢測(cè)來(lái)客多巴胺殘留的實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)觀察顏色的變化可進(jìn)行定性分析和定量分析[9],這個(gè)方法有相當(dāng)高的靈敏性,極強(qiáng)的特異性等特點(diǎn),但是只能測(cè)定具備免疫活性的物質(zhì),且對(duì)低含量的物質(zhì)測(cè)定不準(zhǔn)確,需要質(zhì)量控制措施來(lái)保證結(jié)果的可靠性。
熒光免疫分析法有兩種不同的測(cè)定方式,分別是直接法、間接法。其中,直接法是利用抗原的特異性,將特定的熒光抗體放入需要檢測(cè)的樣品上,就會(huì)產(chǎn)生結(jié)合。而間接法測(cè)定的卻是抗原加抗體,其具有兩種不同的抗體作用,第一種特定抗體只是特異性結(jié)合抗原,第二種抗體只結(jié)合第一種抗體[10],(且靈敏度較高,只需一種熒光抗體便可檢測(cè)不同的抗原[11]。量子點(diǎn)的熒光發(fā)射光譜較狹窄和斯托克斯位移較長(zhǎng)以及優(yōu)異的光學(xué)性能,強(qiáng)度比傳統(tǒng)有機(jī)熒光強(qiáng)度高數(shù)十倍。熒光免疫分析方法用量子點(diǎn)作為探針,很大程度的提高農(nóng)獸藥殘留的檢測(cè)靈敏度[12],因此利用此法測(cè)定萊克多巴胺的殘留相比上述幾種方法具有較大的優(yōu)點(diǎn)。
萊克多巴胺的殘留會(huì)給人帶來(lái)危害,嚴(yán)重者會(huì)引發(fā)癌癥等,根據(jù)目前研究表明,量子點(diǎn)的熒光免疫分析法具有高靈敏度高準(zhǔn)確度且消耗時(shí)間短的特點(diǎn),是檢測(cè)食品中殘留的萊克多巴胺較為理想的一種方法。