王歡，王麗娜，顧偉海

軍軍醫(yī)大學(xué)中醫(yī)系，上海 200433

烏頭屬植物是被子植物亞門毛茛科中的一類重要植物，全球約有350種，多生長(zhǎng)于北半球溫帶，主要分布在亞洲，其次是歐洲和北美洲。我國(guó)約有200種，大多數(shù)產(chǎn)于四川西部、云南北部及西藏東部的高山地帶。烏頭屬藥物自古以來應(yīng)用廣泛，目前約76種烏頭屬植物可供藥用[1, 2]，其多具有回陽(yáng)救逆、散寒止痛之功效，適用于陽(yáng)氣虛衰之畏寒肢冷、慢性心動(dòng)過緩、慢性心力衰竭、慢性低血壓、休克、慢性腎病等病證。烏頭及其活性化合物具有廣泛的生物活性，包括抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用及能量代謝作用等[3, 4]。目前烏頭屬藥物改善機(jī)體免疫功能的效應(yīng)成為研究熱點(diǎn)。含烏頭屬藥物的復(fù)方、單味藥、藥物的活性單體對(duì)免疫系統(tǒng)均具有調(diào)節(jié)作用，能提高免疫力低下疾病的免疫反應(yīng)能力，同時(shí)抑制腫瘤免疫異常導(dǎo)致的免疫逃逸等，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)機(jī)體免疫的雙向調(diào)節(jié)作用[5]?，F(xiàn)就烏頭屬藥物對(duì)機(jī)體免疫功能調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展進(jìn)行以下綜述。

1 烏頭屬單藥對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)作用

免疫系統(tǒng)是一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，由免疫器官(包括骨髓、脾臟、淋巴結(jié)、胸腺等)、免疫細(xì)胞(包括淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等)，以及免疫活性物質(zhì)(如補(bǔ)體、免疫球蛋白、干擾素、白細(xì)胞介素等細(xì)胞因子)等組成，具有免疫監(jiān)視、防御、調(diào)控的作用。2015年版《中國(guó)藥典(一部)》收載的烏頭屬藥物有草烏、川烏和附子等六種。

1.1 附子及其炮制品對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)作用 附子始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有補(bǔ)火助陽(yáng)的功效，臨床中常用來治療冠心病、腎病、風(fēng)濕等多種疾病。通過采用兩種經(jīng)典的小鼠致痛模型，即冰醋酸扭體法和熱板致痛法，對(duì)附子不同炮制品的藥理作用進(jìn)行研究，結(jié)果證明附子不同炮制品均具有提高免疫力的作用，且各藥的作用效果隨著炮制方法的不同而存在不同程度的差異[6]。還有研究[7]發(fā)現(xiàn)，附子主要通過對(duì)刺激免疫應(yīng)答相關(guān)基因的調(diào)控，從而提高虛寒證模型大鼠的免疫應(yīng)答、防御應(yīng)答、炎癥應(yīng)答等能力，這可能是附子溫陽(yáng)作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。艾灸是中醫(yī)針灸療法中的灸法，隔物灸是對(duì)艾灸的發(fā)展應(yīng)用，隔附子灸是用于免疫力低下相關(guān)疾病的有效治療手段。通過對(duì)76例慢性腎小球腎炎患者的臨床研究發(fā)現(xiàn)，隔附子灸組與對(duì)照組相比較，隔附子灸組T細(xì)胞亞群CD4+顯著升高、CD8+顯著降低、CD4+/CD8+顯著改善；血清IL-6、IL-8含量顯著降低。對(duì)90例腎虛髓虧型膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎患者的研究表明，隔附子餅灸治療后，可以降低患者血清CRP、IL-1、IL-6的水平，且較對(duì)照組效果更明顯。從而改善患者免疫功能，進(jìn)一步改善患者臨床癥狀[5,8,9]。

1.2 烏頭及其炮制品對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)作用 烏頭始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有溫陽(yáng)散寒止痛的作用，對(duì)于各種因寒濕導(dǎo)致的疼痛作用明顯。烏頭注射液主要由烏頭加工而成，可以明顯抑制小鼠T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能，并能夠顯著抑制腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-l的功能，說明烏頭注射液對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)具有一定的調(diào)節(jié)作用[10]。通過建立小鼠免疫超常和免疫抑制模型，趙翡翠等[11]測(cè)定血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等T細(xì)胞亞群的變化和溶血素的含量，結(jié)果表明準(zhǔn)噶爾烏頭生品及炮制品濃縮液對(duì)小鼠模型的體液免疫和細(xì)胞免疫具有雙向調(diào)節(jié)作用。進(jìn)一步觀察新疆準(zhǔn)噶爾烏頭對(duì)佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠的作用發(fā)現(xiàn)，其可能是通過調(diào)節(jié)免疫機(jī)制、抑制IL-1β和皮質(zhì)醇等炎癥細(xì)胞因子從而發(fā)揮抗炎作用的[12,13]。對(duì)高烏頭等的抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究[14]發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組均可以改善其免疫功能，明顯抑制二甲苯致小鼠耳廓的腫脹率和冰醋酸致小鼠的扭體率。通過研究露蕊烏頭等對(duì)骨關(guān)節(jié)炎和佐劑致類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠的治療作用發(fā)現(xiàn)，其均有不同程度的抗炎作用，且該作用與抑制動(dòng)物模型的炎癥介質(zhì)前列腺素E和炎癥因子IL-6的釋放有關(guān)[15]。

2 烏頭屬中藥單體對(duì)機(jī)體免疫功能的影響

早在20世紀(jì)50年代我國(guó)研究學(xué)者就對(duì)烏頭屬的一些植物如雪上一枝蒿、高烏頭、狼毒烏頭等進(jìn)行了化學(xué)成分的研究。目前，已對(duì)80余種國(guó)產(chǎn)烏頭屬植物的化學(xué)成分進(jìn)行了研究報(bào)道[1]。烏頭屬藥用植物含有豐富的生物堿和黃酮類化合物，目前已發(fā)現(xiàn)含有400多種生物堿，主要為二萜類生物堿，其中許多具有廣泛的藥理活性。此外，還從中分離鑒定了各種多糖、游離脂肪酸、神經(jīng)酰胺類、皂苷類等其他化合物[3]。目前相對(duì)研究較多的是生物堿類和多糖類的藥理作用。

2.1 烏頭屬藥物生物堿對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)作用 烏頭屬藥物生物堿可調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的數(shù)量及活性、相關(guān)免疫因子的分泌等[16]。烏頭堿和新烏頭堿是存在于川烏、附子等植物中的主要有毒成分，也是發(fā)揮部分藥效的主要有效成分。用不同濃度的烏頭堿、新烏頭堿與巨噬細(xì)RAW264.7共培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)烏頭堿和次烏頭堿能明顯抑制巨噬細(xì)胞的活性和TNF-α的分泌，同時(shí)對(duì)巨噬細(xì)胞表達(dá)CD91、CD13也有明顯的抑制作用[17]。高烏甲素是從烏頭屬植物中提取的一種二萜類生物堿，即刺烏頭堿，又叫拉巴烏頭堿，現(xiàn)廣泛用于癌痛和術(shù)后鎮(zhèn)痛。多項(xiàng)臨床研究[18]表明，直腸癌患者術(shù)后用高烏甲素靜脈自控鎮(zhèn)痛可以升高血清C3、C4水平。胃癌根治術(shù)患者術(shù)后用高烏甲素止痛可以抑制血清IL-2、IL-6、IL-10及IFN-γ水平的升高，效果優(yōu)于芬太尼[19]。通過對(duì)上腹部手術(shù)患者術(shù)前、術(shù)后的比較發(fā)現(xiàn)，高烏甲素可以抑制T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量的減少，穩(wěn)定血清IgA、IgM、IgG水平，有利于患者免疫功能的恢復(fù)[20]。郭鴻等[21]把80例ICU膿毒癥患者分為常規(guī)治療組和高烏甲素組，后者在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用肌肉注射氫溴酸高烏甲素注射液4 mg/次，每天1～2次，連續(xù)3 d。結(jié)果與常規(guī)治療組比較，高烏甲素組IL-4、IL-10水平和T細(xì)胞亞群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均明顯上升，IL-6、TNF-α水平明顯下降，說明高烏甲素可以改善膿毒癥患者的免疫功能，降低炎癥反應(yīng)。

2.2 烏頭屬藥物多糖類對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)作用 除了二萜類生物堿外，多糖也是烏頭屬藥物的主要活性成分，如附子多糖。這些多糖可以促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖、巨噬細(xì)胞活化，調(diào)節(jié)免疫因子水平，增強(qiáng)細(xì)胞和體液免疫等[22]。附子黑順片是縱切片，由附子加工炮制而成，從中提取的附子黑順片多糖可以提高免疫低下模型小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)，促進(jìn)脾臟細(xì)胞和腹腔巨噬細(xì)胞的增殖，對(duì)固有免疫和適應(yīng)免疫均有增強(qiáng)作用[23]。通過體外分離肝癌患者外周血單核細(xì)胞，用不同濃度的附子多糖進(jìn)行干預(yù)，研究人員發(fā)現(xiàn)適當(dāng)濃度的附子多糖可以誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化為樹突狀細(xì)胞并表達(dá)成熟表型，從而活化T淋巴細(xì)胞激發(fā)腫瘤免疫[24]。Gao等[25,26]從烏頭、附子、草烏中分別提取了水溶性多糖，紅外光譜和化學(xué)分析表明這三種藥物的水溶性多糖成分均以淀粉、非淀粉型α-D葡聚糖、果膠多糖為主。通過環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫抑制模型小鼠的免疫實(shí)驗(yàn)(包括巨噬細(xì)胞吞噬、NK細(xì)胞活性、刀豆球蛋白A誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖、脂多糖誘導(dǎo)的B細(xì)胞增殖、綿羊紅細(xì)胞定量溶血和二硝基氟苯誘導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)等)表明，所有非淀粉型多糖，尤其是果膠多糖組分，不僅具有非特異性免疫、細(xì)胞免疫和體液免疫等顯著的免疫刺激活性，而且能恢復(fù)抗腫瘤藥物抑制免疫原性，具有作為免疫刺激調(diào)節(jié)劑的潛力。Zhao等[27]從附子中分離純化得到FPS-1多糖，并在免疫藥理學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)PS-1對(duì)刀豆球蛋白A和脂多糖分別誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖在體內(nèi)外均有明顯的促進(jìn)作用，對(duì)脾細(xì)胞抗體的產(chǎn)生也有明顯的促進(jìn)作用。Li等[28]從烏頭中成功分離純化出多糖ACP-a1，并研究了ACP-a1對(duì)H22荷瘤小鼠免疫功能的影響，結(jié)果表明ACP-a1能顯著提高荷瘤小鼠外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)，并促進(jìn)血清細(xì)胞因子IL-2、TNF-α和IFN-γ等的分泌，具有顯著的免疫調(diào)節(jié)活性。

3 含烏頭屬中藥復(fù)方對(duì)機(jī)體免疫功能的影響

中藥復(fù)方通過巧妙的配伍，具有多靶點(diǎn)多途徑的作用特點(diǎn)。臨床中應(yīng)用的復(fù)方，通過藥物的配伍應(yīng)用不僅可治療疾病，同時(shí)發(fā)揮減毒增效的作用，如烏頭湯、參附湯等，療效確切的復(fù)方已經(jīng)被制成中藥制劑在臨床中使用。

3.1 含烏頭中藥復(fù)方對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)作用 參附注射液是紅參、黑附片提取物，主要含人參皂甙、水溶性生物堿等，具有回陽(yáng)救逆，益氣固脫的作用。在對(duì)85例瑞芬太尼全麻的手術(shù)患者的臨床試驗(yàn)[29]中，發(fā)現(xiàn)參附注射液對(duì)患者皮膚神經(jīng)肽的表達(dá)也有一定的調(diào)節(jié)作用，從而發(fā)揮調(diào)節(jié)皮膚免疫功能的效果。在對(duì)30頭豬進(jìn)行缺血再灌注和復(fù)蘇后應(yīng)激反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[30]中發(fā)現(xiàn)，參附注射液組與腎上腺組、生理鹽水組比較，能顯著降低IL-6、IL-8、TNF-α等促炎因子水平，升高IL-4和IL-10等抗炎因子水平，并且能夠降低補(bǔ)體系統(tǒng)C3、C4、C5b-9的水平，表明參附注射液可以通過調(diào)節(jié)補(bǔ)體和細(xì)胞因子的表達(dá)，從而對(duì)復(fù)蘇后免疫功能障礙具有重要調(diào)節(jié)作用。有研究[31]通過建立裸鼠A549細(xì)胞株移植瘤模型，發(fā)現(xiàn)溫下腸腑方(烏頭、大黃、人參、當(dāng)歸)和順鉑聯(lián)合應(yīng)用組與單純化療組比較，在降低腫瘤重量的同時(shí)，還能明顯升高胸腺指數(shù)和脾指數(shù)，從而有效抑制化療引起的免疫器官萎縮。劉小平等[32]發(fā)現(xiàn)，加味芍甘附子湯可以通過抑制膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎模型大鼠血清IL-6、IL-10等炎性介質(zhì)的產(chǎn)生，下調(diào)IFN-γ、IL-17A表達(dá)，從而發(fā)揮治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎作用。

3.2 含附子中藥復(fù)方對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)作用 熊慧生等[33]對(duì)62例乳腺癌術(shù)后患者的研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)后化療加用附子白術(shù)湯(炮附子、白術(shù)、炙甘草、生姜、大棗)輔助治療的患者與術(shù)后單純化療的患者相比，治療后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK細(xì)胞較治療前升高更明顯，提示附子白術(shù)湯輔助治療有利于提高乳腺癌術(shù)后患者的機(jī)體免疫力。附子理中湯是補(bǔ)虛回陽(yáng)、溫中散寒的主要代表方劑，常用于脾胃虛寒證的治療。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[34]表明附子理中湯可以升高脾陽(yáng)虛模型大鼠的IL-2、IL-6、TNF-α水平，降低IL-10水平，升高胸腺指數(shù)、脾指數(shù)，提示可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫因子之間的效應(yīng)而改善大鼠免疫功能。武志娟等[35]對(duì)腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)附子理中湯可以降低大鼠血清中的TNF-α、IL-8、IgA、IgG水平，升高IL-10水平，并認(rèn)為附子理中湯可能是通過降低促炎因子，升高抗炎因子，進(jìn)而調(diào)整模型大鼠失衡的免疫狀態(tài)，以改善細(xì)胞免疫和體液免疫發(fā)揮作用的。對(duì)120例脾胃虛寒型晚期胃癌的臨床研究[36]結(jié)果表明，附子理中湯加減聯(lián)合化療與單純化療前后相比較，能夠顯著提高CD3+、CD4+、CD4+/CD8+細(xì)胞水平，改善患者免疫水平，提高患者生活質(zhì)量。另外，在對(duì)92例藥物性急性腎損傷患者的研究中，加味附子理中湯也有此類效果，顯著改善T淋巴細(xì)胞亞群的水平。有研究表明，麻黃細(xì)辛附子湯是通過促進(jìn)IFN-γ的分泌，抑制IL-13的分泌，從而糾正變應(yīng)性鼻炎機(jī)體Thl和Th2表達(dá)失衡而發(fā)揮療效的。

綜上所述，烏頭屬藥物對(duì)免疫系統(tǒng)具有很好的調(diào)節(jié)作用，且調(diào)節(jié)具有雙向性。通過藥物炮制及復(fù)方組合的方式減輕了烏頭屬的毒性，同時(shí)保留及增加了其原有的療效。但是，由于烏頭類藥物種類繁多，炮制方法尚不統(tǒng)一，其研究尚有待進(jìn)一步深入，且烏頭類藥物的臨床研究仍不足，制約了其在臨床的廣泛應(yīng)用。因此，在統(tǒng)一炮制方式及毒性檢測(cè)的基礎(chǔ)上，應(yīng)擴(kuò)大烏頭屬藥物在臨床上多種疾病、多臨床中心、更多樣本數(shù)的深入研究，以期為其臨床應(yīng)用提供更有力的理論基礎(chǔ)。