黃 峰，吳德玲，李 莉，劉紅娟，童小慧，王桐生，

(1.中國科學(xué)院合肥腫瘤醫(yī)院藥學(xué)中心，安徽 合肥 230031；2.中藥復(fù)方安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽 合肥 230012；3.安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥理學(xué)教研室，安徽 合肥 230012)

五子衍宗丸為臨床常用的經(jīng)典名方，唐朝《懸解錄》中記載的“五子守仙方”為該方的雛形，明清時(shí)期的《攝生眾妙方》《證治準(zhǔn)繩》《傅青主男科》等醫(yī)籍中均有收載[1]。該方由菟絲子(炒)、枸杞子、五味子(蒸)、覆盆子、車前子(鹽炒)組成[2]，具有補(bǔ)腎益精的功效，被譽(yù)為“種子第一方”，廣泛用于生殖系統(tǒng)疾病的治療，同時(shí)在中醫(yī)整體觀和“同病異治”治療原則的指導(dǎo)下，其臨床應(yīng)用涉及神經(jīng)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)疾病及腫瘤的治療。由于五子衍宗丸具有臨床療效顯著及安全性高的特點(diǎn)，目前研究較多，對其藥理作用及機(jī)制研究也日益深入，現(xiàn)將近年的研究進(jìn)展作一綜述。

1 藥理作用

1.1 調(diào)控下丘腦-垂體-性腺軸(hypothalamic-pituitary-gonadal axis，HPG)功能 HPG是調(diào)節(jié)生殖的高級中樞，下丘腦分泌的促性腺激素釋放激素(gonadotropin releasing hormone，GnRH)促進(jìn)腺垂體釋放卵泡刺激素(follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH)和黃體生成素(luteinizing hormone，LH)，F(xiàn)SH啟動精子的發(fā)生，調(diào)控精原細(xì)胞的分化和增殖，LH刺激間質(zhì)細(xì)胞合成睪酮(testosterone，T)，維持精子發(fā)生的過程；在卵泡發(fā)育期，F(xiàn)SH正反饋刺激雌激素的合成以及GnRH分泌，GnRH分泌增加刺激LH大量釋放，從而促進(jìn)排卵[3-4]。劉碧原[5]研究發(fā)現(xiàn)，五子衍宗丸可顯著提高肝郁證模型大鼠情緒反應(yīng)評分，增加血清GnRH水平，降低雌二醇含量，其機(jī)制可能為上調(diào)大鼠睪丸組織中蛋白激酶A表達(dá)水平。閆潤紅等[6]發(fā)現(xiàn)，少精癥模型大鼠服用五子衍宗丸后精子總數(shù)、存活率、活動度顯著增加，血清T、LH含量明顯提高，說明五子衍宗丸能夠糾正HPG分泌障礙，改善精子質(zhì)量。馮玉霞等[7]研究發(fā)現(xiàn)，五子衍宗丸能夠升高腎虛血瘀型大鼠雌二醇、孕激素水平，調(diào)控雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)表達(dá)，有利于子宮內(nèi)膜成熟及胚泡著床。He等[8]對20日齡雄性大鼠灌胃五子衍宗丸10 d，發(fā)現(xiàn)能顯著提高大鼠T水平，上調(diào)雄激素受體和Ki67表達(dá)，促進(jìn)生殖細(xì)胞的增殖與分化。鄒贇等[9]研究發(fā)現(xiàn)，五子衍宗丸對雄性AT1+/-小鼠的性激素水平有正向調(diào)節(jié)作用，可以明顯提高GnRH和FSH水平，且提高程度與干預(yù)時(shí)間呈正相關(guān)，改善雄性小鼠的生殖功能。

1.2 抗氧化應(yīng)激作用 采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，從五子衍宗丸中共獲得72個(gè)治療男性不育癥的活性成分、35個(gè)可能靶點(diǎn)，這些靶點(diǎn)主要集中在磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B，PI3K/Akt)、缺氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxia inducible factor-1，HIF-1)等信號通路，涉及氧化與抗氧化活性等生物學(xué)過程[10]。劉思佳等[11]采用43 ℃水浴構(gòu)建大鼠睪丸支持細(xì)胞熱應(yīng)激模型，發(fā)現(xiàn)五子衍宗丸通過減少活性氧(reactive oxygen species，ROS)生成、降低熱休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)表達(dá)，達(dá)到保護(hù)熱應(yīng)激作用。在氯化鎘或環(huán)磷酰胺造成的氧化損傷大鼠模型以及H2O2復(fù)制的支持細(xì)胞損傷模型中，五子衍宗丸均能提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)活性，降低丙二醛含量，增強(qiáng)抗氧化能力，改善生精功能和支持細(xì)胞分泌功能[12-13]。此外，五子衍宗丸能顯著升高糖尿病性白內(nèi)障(diabetic cataract，DC)模型小鼠晶狀體組織SOD、GSH-Px活性，明顯改善晶狀體混濁度，顯著降低血糖、糖化血紅蛋白指數(shù)以及葡萄糖、果糖、山梨醇含量，提示五子衍宗丸能減輕D-半乳糖所致的氧化損傷，抑制DC小鼠晶狀體組織異常活躍的多元醇通路[14]。

1.3 抗凋亡作用 李瑞雪等[15]研究表明，五子衍宗丸明顯下調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因Ern1、Casp12、Creb3l1，上調(diào)抗凋亡基因Birc5，抑制細(xì)胞凋亡。秦茂等[16]研究發(fā)現(xiàn)，五子衍宗丸能夠增加腎精虧虛證大鼠睪丸支持細(xì)胞波形蛋白、α-微管蛋白的表達(dá)，抑制生精細(xì)胞凋亡,改善生精功能。Hu等[17]研究表明，五子衍宗丸能夠下調(diào)微波輻射損傷雄性大鼠P53表達(dá)，干預(yù)Tip60介導(dǎo)的生殖細(xì)胞凋亡，恢復(fù)睪丸組織形態(tài)。李莉等[18]研究發(fā)現(xiàn)，五子衍宗丸治療少弱精子癥的機(jī)制可能與其抑制精子線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔異常開放，提高線粒體膜電位水平，降低生精細(xì)胞凋亡有關(guān)。

1.4 調(diào)節(jié)自噬作用 高云霄等[19]采用雷公藤多苷(20 mg/kg)復(fù)制生精障礙大鼠模型，發(fā)現(xiàn)五子衍宗丸能上調(diào)支持細(xì)胞自噬標(biāo)志蛋白輕鏈蛋白3(light chain protein 3，LC3)、溶酶體相關(guān)膜蛋白-2(lysosome associated membrane protein，LAMP-2)的表達(dá)水平，提示五子衍宗丸可通過提高支持細(xì)胞自噬水平改善生精功能。

1.5 調(diào)節(jié)免疫作用 張若楠等[20]研究五子衍宗丸對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)小鼠防治作用，發(fā)現(xiàn)其能夠降低EAE模型小鼠白細(xì)胞介素6(interleukin 6, IL-6)、IL-17、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)等炎癥因子水平，抑制Rho信號通路中Rho相關(guān)蛋白激酶Ⅱ(Rho-associated protein kinase，ROCKⅡ)、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亞基1(phosphorylated myosin phosphatase target subunit 1，P-MYPT1)、核因子κB(nuclear factor kappa-B，NF-κB)蛋白表達(dá)，通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力延緩疾病發(fā)生，保護(hù)神經(jīng)功能。研究表明，五子衍宗丸顯著提高腎精虧虛大鼠血清免疫球蛋白G、IL-2含量及CD4/CD8比值，降低IL-6水平，平衡T淋巴細(xì)胞免疫網(wǎng)絡(luò)[21]。此外，其還可調(diào)節(jié)無精癥小鼠TNF-α、IL-3、MKK4/7、PLA2、MKK3/6等基因表達(dá)，激活Fc epsilon RI通路，增強(qiáng)機(jī)體免疫力[22]。

1.6 抗衰老作用 王光勇等[23]發(fā)現(xiàn)五子衍宗方能夠改善D-半乳糖致衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶能力，增加血清SOD活力和腦、胸腺指數(shù)，降低MDA含量，提示其抗衰老作用與增強(qiáng)免疫和抗氧化作用密切相關(guān)。研究[24-25]表明，五子衍宗方能顯著改善自然衰老大鼠睪丸Sertoli細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，上調(diào)睪丸膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF)、干細(xì)胞因子(stem cell factor，SCF)、骨形態(tài)蛋白生成蛋白4(bone morphogenetic protein，BMP4)蛋白表達(dá)，降低p-P53、p21的蛋白水平，通過調(diào)節(jié)p53/p21和堿基切除修復(fù)(base excision repair，BER)通路減輕睪丸DNA損傷，并通過調(diào)節(jié)睪丸內(nèi)miR-let-7-Imp軸，促進(jìn)老齡大鼠精原干細(xì)胞的增殖。

2 臨床應(yīng)用研究進(jìn)展

2.1 治療男性生殖系統(tǒng)疾病

2.1.1 少弱精子癥 黃雯暉等[26]采用五子衍宗丸6 g、維生素E軟膠囊100 mg、硒酵母片100 μg治療少弱精子癥患者12周，結(jié)果顯示正常精子比例、精子密度、A級及A+B級比例均顯著增加，治療成功率(74.29%)明顯高于單獨(dú)使用維生素E和硒酵母片者(48.57%)。楊東等[27]按照隨機(jī)雙盲平行對照研究方法，比較五子衍宗丸與麒麟丸治療特發(fā)性少弱精子癥的療效及安全性，發(fā)現(xiàn)五子衍宗丸與麒麟丸均可顯著提高精子質(zhì)量，調(diào)節(jié)性激素水平，呈現(xiàn)時(shí)間-效應(yīng)提升的療效規(guī)律，無明顯不良反應(yīng)，用藥安全。李亦聰?shù)萚28]發(fā)現(xiàn)，少精、弱精的不育患者連續(xù)使用五子衍宗丸2個(gè)月，精子活力明顯增強(qiáng)，精液和精子中Caspase 3和Caspase 8水平降低。

2.1.2 精液液化不良 譚文舉等[29]采用五子衍宗丸治療精液液化不良，結(jié)果表明患者精漿前列腺特異性抗原、酸性磷酸酶含量均明顯提高，精液液化時(shí)間縮短，精液質(zhì)量得以改善。孫自學(xué)等[30]采用五子衍宗丸聯(lián)合翁瀝通膠囊和維生素C片，治療腎虛濕熱型精液液化不良患者，能顯著改善精液液化狀態(tài)，提高精子活動力和受孕率。

2.2 治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病 黎巍威等[31]研究發(fā)現(xiàn)，加味五子衍宗方可不同程度地提高輕度認(rèn)知功能障礙(mild cognitive impairment, MCI)患者的圖像自由回憶、指向記憶、聯(lián)想學(xué)習(xí)等能力，明顯減小海馬指數(shù)和顳角寬度，說明加味五子衍宗方可提高患者的記憶能力，延緩海馬萎縮，其機(jī)制可能與提高患者抗氧化應(yīng)激能力，調(diào)節(jié)血清β淀粉樣蛋白代謝功能有關(guān)。張慧和等[32]觀察五子衍宗湯治療腎虛髓減型帕金森病MCI患者的臨床療效，發(fā)現(xiàn)治療12周后五子衍宗湯聯(lián)合多奈哌齊組總有效率、蒙特利爾認(rèn)知評估量表(Montreal cognitive assessment scale，MoCA)、簡易智力狀態(tài)檢查量表(mini-mental state examination，MMSE)評分均明顯高于單用多奈哌齊治療組。

2.3 治療泌尿系統(tǒng)疾病 盧雨民[33]采用五子衍宗丸治療老年性夜尿增多癥10例,獲得較好療效。劉丹丹[34]以五子衍宗丸為基礎(chǔ)進(jìn)行化裁，治療老年性尿道綜合征31例，療效顯著。潘梅等[35]采用加味五子衍宗丸治療女性尿失禁，經(jīng)過1個(gè)療程用藥，患者排尿正常，無尿失禁現(xiàn)象。此外，五子衍宗丸對小兒遺尿癥、尿頻、腎病綜合征等疾病也有較好的療效[36]。

2.4 治療其他系統(tǒng)疾病 五子衍宗丸在臨床上尚用于治療肺腎氣(陽)虛型慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期[37],對復(fù)發(fā)性口腔潰瘍、斑禿、原發(fā)性血小板減少性紫癜等疾病[38]也有一定療效。

3 展望

五子衍宗丸作為補(bǔ)腎益精的千古名方，臨床使用歷史悠久。近年來的研究表明，五子衍宗丸對生殖系統(tǒng)疾病的療效確切，尤其是治療男性不育癥效果顯著，與西藥相結(jié)合應(yīng)用，彰顯出更高的有效性與安全性，具有廣闊的應(yīng)用和推廣前景。

五子衍宗丸本為補(bǔ)腎填精所設(shè)，在中醫(yī)辨證論治觀與“異病同治”思想的指導(dǎo)下，凡是腎虛精虧之證均可采用五子衍宗丸治療。因此，其臨床使用涉及神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)等疾病，拓展了應(yīng)用范圍。但在這些方面的應(yīng)用研究多為個(gè)案報(bào)道，缺乏大樣本的臨床隨機(jī)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，其有效性有待進(jìn)一步驗(yàn)證，而且由于中藥復(fù)方成分的復(fù)雜性，五子衍宗丸的有效物質(zhì)基礎(chǔ)仍不甚清楚，限制了對其機(jī)制的深入研究。

研究復(fù)方的化學(xué)成分對于藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)辨識及其機(jī)制探究至關(guān)重要，準(zhǔn)確表征五子衍宗丸中所含的化學(xué)成分，分析發(fā)揮特定功效的成分群組合規(guī)律及作用機(jī)制，將為五子衍宗丸在臨床廣泛應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)，為開發(fā)出既維持功效又用量更少的新成分組方提供思路。目前，藥物活性成分分離及分析水平不斷提高，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究方法也得以應(yīng)用，成分-靶標(biāo)-機(jī)制研究模式不斷成熟。采用血清藥物化學(xué)、代謝組學(xué)及系統(tǒng)藥理學(xué)方法，研究五子衍宗丸在治療不同系統(tǒng)疾病中具體作用機(jī)制和物質(zhì)基礎(chǔ)，歸納出內(nèi)在聯(lián)系，闡明中醫(yī)“補(bǔ)腎法”的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵將是未來研究的發(fā)展方向。