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“食品化學(xué)” 實(shí)驗(yàn)課程中粗蛋白測(cè)定實(shí)驗(yàn)教學(xué)探討
——以山東理工大學(xué)食品科學(xué)與工程專(zhuān)業(yè)為例

2020-12-19 02:54:24宋越冬李宏軍馬成業(yè)張東亮楊青青
農(nóng)產(chǎn)品加工 2020年22期
關(guān)鍵詞:食品化學(xué)微量樣品

宋越冬,李宏軍,馬成業(yè),張東亮,楊青青

(山東理工大學(xué)農(nóng)業(yè)工程與食品科學(xué)學(xué)院,山東淄博 255049)

“食品化學(xué)” 是食品科學(xué)與工程專(zhuān)業(yè)最主要的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課,也是骨干課程之一[1]。該課程主要從化學(xué)和分子水平角度講述與食品有關(guān)的化學(xué)知識(shí),包括碳水化合物、脂類(lèi)、蛋白質(zhì)和維生素等相關(guān)知識(shí),是一門(mén)理論聯(lián)系實(shí)際較強(qiáng)的課程[2]。該課程在山東理工大學(xué)開(kāi)設(shè)時(shí)間是第3 學(xué)期,總課時(shí)為56 個(gè),其中理論課40 個(gè)、實(shí)驗(yàn)課16 個(gè)。實(shí)驗(yàn)課由5 個(gè)實(shí)驗(yàn)構(gòu)成,粗蛋白的測(cè)定為最后一個(gè)實(shí)驗(yàn),教學(xué)課時(shí)為6 個(gè)。6 個(gè)課時(shí)的實(shí)驗(yàn),是山東理工大學(xué)食品科學(xué)與工程專(zhuān)業(yè)本科階段單個(gè)實(shí)驗(yàn)課時(shí)最長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn),足見(jiàn)實(shí)驗(yàn)的難度和重要性。實(shí)驗(yàn)的主要內(nèi)容由4 個(gè)部分組成,分別是樣品烘干、消化、蒸餾和滴定,4 個(gè)部分相對(duì)獨(dú)立又相輔相成,缺一不可,如果一個(gè)步驟出現(xiàn)失誤,則會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。由于是剛接觸專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn),學(xué)生的操作基礎(chǔ)相對(duì)薄弱,加之實(shí)驗(yàn)操作的復(fù)雜性和危險(xiǎn)性,使得實(shí)驗(yàn)中問(wèn)題頻出,導(dǎo)致一些不必要的誤差甚至是錯(cuò)誤結(jié)論。為了降低學(xué)生實(shí)驗(yàn)中操作失誤問(wèn)題、提高教學(xué)質(zhì)量,需要實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)對(duì)實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)方式不斷進(jìn)行探討,對(duì)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行合理規(guī)劃,對(duì)課時(shí)進(jìn)行科學(xué)分配,并對(duì)實(shí)驗(yàn)操作細(xì)節(jié)進(jìn)行規(guī)范,對(duì)容易出現(xiàn)的失誤要提前防范,從而讓學(xué)生養(yǎng)成科學(xué)實(shí)驗(yàn)態(tài)度和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)觀,為培養(yǎng)高素質(zhì)的應(yīng)用型人才奠定必要的實(shí)驗(yàn)操作基礎(chǔ)。

1 科學(xué)分配合理規(guī)劃做好充分的準(zhǔn)備

實(shí)驗(yàn)采用半微量凱氏定氮法[3]測(cè)食品中總蛋白的含量,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容較多,時(shí)間上要做到合理分配才能完成教學(xué)目標(biāo)。在山東理工大學(xué)食品科學(xué)與工程專(zhuān)業(yè),實(shí)驗(yàn)的分配方案為:第1 次實(shí)驗(yàn)為樣品的消化,課時(shí)數(shù)為2 課時(shí)(樣品烘干部分由實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師在開(kāi)課之前提前做完);等樣品消化之后進(jìn)行第2 次實(shí)驗(yàn),做蒸餾和滴定,課時(shí)數(shù)為4 課時(shí)。顯然,2 個(gè)課時(shí)消化是不能完成的,實(shí)際開(kāi)設(shè)實(shí)驗(yàn)的方法是消化的后半程由實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師完成,這樣就可以把更多的時(shí)間分配給蒸餾和滴定部分。

實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師在第1 次開(kāi)課之前,需要做好充分的準(zhǔn)備。準(zhǔn)備工作具體為樣品烘干部分準(zhǔn)備40 個(gè)小鋁盒,洗滌干凈后烘干,然后將要測(cè)試的樣品稱(chēng)量后在烘箱里烘干至恒質(zhì)量,放入干燥器內(nèi)備用;消化部分要準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)用的50 mL 消化管(每批次23 只,共8 批次),消化管要提前洗滌干凈并烘干,催化劑要磨細(xì)并按照比例混合好;蒸餾部分需提前準(zhǔn)備好滴定用的150 mL 的三角瓶(每批次200 個(gè),共8 批次),充分洗滌干凈并烘干,半微量凱氏定氮裝置5 套并按照要求提前組裝好,蒸餾燒瓶?jī)?nèi)要放置好防止爆沸的玻璃珠,裝入總體積2/3 的自來(lái)水并加入稀硫酸和甲基紅指示劑,并確保在一次實(shí)驗(yàn)內(nèi),蒸餾燒瓶中的液體保持紅色;滴定部分中每批次準(zhǔn)備好體積為1 mL 的微量滴定管5 只,提前洗滌干凈并裝配好置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)。除此之外,實(shí)驗(yàn)需要的試劑量較大,包括硼酸溶液、鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液和指示劑等,實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師需提前配制并分瓶備用??傊?,實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作量較大,需要提前做好準(zhǔn)備,方可以使得實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。

2 合理調(diào)整正確引導(dǎo)培養(yǎng)學(xué)生團(tuán)隊(duì)合作能力

在山東理工大學(xué)食品科學(xué)與工程專(zhuān)業(yè),實(shí)驗(yàn)課采取的2 人一小組的方式進(jìn)行。但是由于實(shí)驗(yàn)的特殊性,在開(kāi)課之前實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師要跟各班班長(zhǎng)協(xié)調(diào)好,對(duì)每批次的人數(shù)和性別做必要限制,規(guī)定每組人數(shù)由2 人調(diào)整為4 人,每組男生2 人。之所以這樣調(diào)整,主要是實(shí)驗(yàn)的蒸餾部分時(shí)間長(zhǎng)、溫度高,操作需要至少3 個(gè)人的相互配合,而多數(shù)女生在做這個(gè)實(shí)驗(yàn)時(shí)候,由于懼怕心理不敢操作,常常導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行。然而這種硬性的規(guī)定有時(shí)沒(méi)法執(zhí)行,因?yàn)槭称房茖W(xué)與工程專(zhuān)業(yè)女生較多,這時(shí)需要讓班長(zhǎng)協(xié)調(diào),確保每一小組有一個(gè)男生,以便實(shí)驗(yàn)正常開(kāi)設(shè)。上課時(shí)候,實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師要就這一安排做必要的解釋?zhuān)珜?dǎo)男生發(fā)揚(yáng)奉獻(xiàn)精神,在實(shí)驗(yàn)中多付出,女生也要做好輔助工作,發(fā)揮團(tuán)隊(duì)合作精神等。通過(guò)這些必要的安排,既能確保實(shí)驗(yàn)順利開(kāi)設(shè),又能有效增強(qiáng)學(xué)生團(tuán)隊(duì)合作能力,事實(shí)證明是可取的。

3 關(guān)鍵步驟親自示范以確保學(xué)生人身安全

消化和蒸餾是整個(gè)實(shí)驗(yàn)的重點(diǎn)部分,也是難點(diǎn),對(duì)學(xué)生操作技術(shù)要求較高,實(shí)驗(yàn)也有一定的危險(xiǎn)性,這就要求實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師要熟悉操作,并就實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能出現(xiàn)的問(wèn)題提前叮囑學(xué)生,關(guān)鍵步驟要親自示范,避免不必要事故的發(fā)生。

消化部分在講解原理時(shí)候,教師要就操作過(guò)程中可能出現(xiàn)的問(wèn)題提醒學(xué)生。具體為樣品稱(chēng)量后放進(jìn)消化管之前,要在消化管內(nèi)放2~3 粒干燥玻璃珠,然后催化劑,強(qiáng)調(diào)催化劑和樣品要混合均勻并示范振蕩手法;濃硫酸的加入,一定要注意安全,5 mL濃硫酸要均勻地把實(shí)驗(yàn)樣品全部浸潤(rùn),避免只加在消化管的一側(cè);消化開(kāi)始階段,強(qiáng)調(diào)升溫一定要均勻緩慢,防止升溫過(guò)快導(dǎo)致試樣漰出;步驟在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行,強(qiáng)調(diào)不可以隨意打開(kāi)通風(fēng)櫥,避免有毒氣體及濃硫酸對(duì)人體的傷害。

蒸餾部分是實(shí)驗(yàn)的重點(diǎn)和難點(diǎn),也是問(wèn)題出現(xiàn)最多的環(huán)節(jié),需要實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師對(duì)每個(gè)細(xì)節(jié)都要反復(fù)強(qiáng)調(diào)。實(shí)驗(yàn)第一步消化液定容,強(qiáng)調(diào)雖然已經(jīng)消化完成,但是消化液中含有濃硫酸,定容時(shí)候注意戴手套,避免出現(xiàn)消化液拋灑到實(shí)驗(yàn)臺(tái)及身體的情況;介紹半微量凱氏定氮裝置時(shí)候,重點(diǎn)跟學(xué)生強(qiáng)調(diào)用于封閉反應(yīng)室的磨口玻璃塞不用時(shí)要放置在實(shí)驗(yàn)臺(tái)中間的隔板上,避免掉落地上打碎,因?yàn)橐坏┐蛩檎籽b置就作廢;用于加熱的可調(diào)節(jié)電爐或者可調(diào)溫加熱套,檔位設(shè)定好后盡量不要再變換火力,避免由于火力變化導(dǎo)致燒瓶?jī)?nèi)蒸汽壓力不穩(wěn)出現(xiàn)回吸或者爆沸發(fā)生;要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)操作步驟進(jìn)行蒸餾,特別要注意不要把蒸餾裝置的進(jìn)氣口和出氣口同時(shí)密封,這是最重要的一點(diǎn),不然蒸餾燒瓶?jī)?nèi)沸水會(huì)把燒瓶塞給頂開(kāi),帶有硫酸的沸水會(huì)噴到外邊,后果不可想象,關(guān)于這點(diǎn)任課教師一定要反復(fù)強(qiáng)調(diào),并在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中時(shí)刻盯著各個(gè)小組,堅(jiān)決杜絕此類(lèi)情況發(fā)生。

蒸餾操作,每個(gè)小組指導(dǎo)教師都要示范一次。示范消化液的移取、反應(yīng)室樣品加入規(guī)范、接收瓶接收方法、反應(yīng)完全后廢液從反應(yīng)室排出、反應(yīng)室的洗滌、蒸餾燒瓶進(jìn)氣口和排氣口的開(kāi)關(guān)順序及開(kāi)關(guān)方法;強(qiáng)調(diào)試劑加入到反應(yīng)室時(shí)學(xué)生之間的合作跟配合的重要性;強(qiáng)調(diào)在測(cè)定過(guò)程中,不同樣品之間要留有不少于3 min 的間隔,以便于反應(yīng)內(nèi)室和外室氣壓平衡,避免出現(xiàn)反應(yīng)外室氣壓低于反應(yīng)內(nèi)室氣壓導(dǎo)致反應(yīng)液外溢。教師示范結(jié)束后,讓學(xué)生自己操作一個(gè)試樣,確認(rèn)所有操作無(wú)誤后,方可以由學(xué)生自己操作后續(xù)的其他試樣。這是整個(gè)實(shí)驗(yàn)最容易出現(xiàn)事故的步驟,需要指導(dǎo)教師繃緊神經(jīng),提防事故的發(fā)生。

滴定部分一般由女生完成。滴定部分的重點(diǎn)是怎樣把鹽酸溶液加入到1 mL 微量滴定管內(nèi),要避免有氣泡堵在U 型管中,教師要親自示范試劑加入方法,強(qiáng)調(diào)注意液面不能低于最大值,示范終點(diǎn)的判斷標(biāo)準(zhǔn),以便學(xué)生操作。

4 遵循原則循序漸進(jìn)給學(xué)生提供足夠練習(xí)機(jī)會(huì)

實(shí)驗(yàn)在課時(shí)分配上,側(cè)重于蒸餾和滴定,計(jì)劃課時(shí)為4 個(gè)。在實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備階段,實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師提供給學(xué)生的樣品不少于3 個(gè),樣品種類(lèi)要包括谷物(如面粉、玉米粉、高粱粉、小米面)、豆類(lèi)(如大豆粉、豆粕、花生碎、豌豆粉、綠豆面) 和脫水果蔬(如脫水茄子、辣椒、蘋(píng)果),目的是讓學(xué)生通過(guò)該實(shí)驗(yàn)加強(qiáng)對(duì)不同食材蛋白質(zhì)含量的感性認(rèn)識(shí)。在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始階段,由于學(xué)生不熟悉操作規(guī)程,會(huì)頻頻出現(xiàn)失誤,比如由于加樣的2 位學(xué)生相互配合欠協(xié)調(diào),手忙腳亂,導(dǎo)致產(chǎn)物從加樣口泄漏到空中;再比如由于內(nèi)外壓差過(guò)大,導(dǎo)致反應(yīng)室內(nèi)反應(yīng)物外溢,實(shí)驗(yàn)徹底失敗;亦或由于準(zhǔn)備工作不夠充分,配合不及時(shí),接收瓶未能及時(shí)將氨氣全部被硼酸吸收;諸如此類(lèi)的問(wèn)題導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)進(jìn)程緩慢,學(xué)生就會(huì)焦慮,這時(shí)教師就要適當(dāng)疏導(dǎo),強(qiáng)調(diào)失敗是在所難免的,讓學(xué)生明白熟能生巧,鼓勵(lì)學(xué)生繼續(xù)練習(xí);當(dāng)學(xué)生終于能完整做完一個(gè)試樣時(shí),教師要及時(shí)表?yè)P(yáng),讓學(xué)生有成就感,繼而會(huì)更加認(rèn)真完成后續(xù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)一個(gè)試樣的測(cè)定只需8~10 min 即可完成,實(shí)驗(yàn)時(shí)要求每小組做3 個(gè)樣品和1 個(gè)空白樣,每個(gè)樣品測(cè)試不少于3 次重復(fù),測(cè)樣數(shù)最低為12 個(gè);在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中,學(xué)生測(cè)樣數(shù)一般為20~25 個(gè),有的小組會(huì)甚至達(dá)到40 個(gè),主要是實(shí)驗(yàn)開(kāi)始階段,由于不熟悉操作要點(diǎn)導(dǎo)致失敗。這樣的實(shí)驗(yàn)安排,4 個(gè)課時(shí)時(shí)間會(huì)被充分利用。而通過(guò)實(shí)驗(yàn),學(xué)生能熟練掌握蒸餾的操作技術(shù),這樣在第5 學(xué)期食品分析實(shí)驗(yàn)——蒸餾法測(cè)食品中的水分、索氏提取法測(cè)食品中的脂肪時(shí)就會(huì)得心應(yīng)手。而微量滴定的練習(xí),也為后續(xù)食品分析實(shí)驗(yàn)——滴定法測(cè)還原糖、食品中總酸的測(cè)定等實(shí)驗(yàn)打下良好基礎(chǔ)。

5 實(shí)驗(yàn)結(jié)束要做好善后工作 讓學(xué)生養(yǎng)成良好習(xí)慣避免事故發(fā)生

半微量凱氏定氮法測(cè)蛋白,實(shí)驗(yàn)原理本質(zhì)是酸堿中和,產(chǎn)物是鹽。在該實(shí)驗(yàn)結(jié)束之時(shí),教師要跟學(xué)生強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物的回收問(wèn)題。剩余的消化液,由于有過(guò)量硫酸存在,所以要加適量的氫氧化鈉中和成中性再做處理,避免強(qiáng)酸對(duì)回收容器的腐蝕;而蒸餾殘液,其主要成分是鹽,但是由于催化劑有銅離子,所以屬于重金屬殘液,要求學(xué)生將殘液集中放入重金屬回收桶中;滴定殘液主要是硼酸鹽,可以直接放入普通廢液回收桶;實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),蒸餾燒瓶依然處于高溫狀態(tài),學(xué)生只需要斷電,避免沸騰的液體漰到瓶外。所有這些步驟,目的只有一個(gè),就是保證安全,避免事故的發(fā)生。

6 改革實(shí)驗(yàn)報(bào)告提交方式 增強(qiáng)學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)知識(shí)的掌握能力

本科實(shí)驗(yàn)教學(xué)由實(shí)驗(yàn)課堂操作和實(shí)驗(yàn)報(bào)告2 個(gè)部分組成。由于實(shí)驗(yàn)操作復(fù)雜、規(guī)范性強(qiáng)、時(shí)間長(zhǎng),為了加深學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的印象,實(shí)驗(yàn)報(bào)告改為電子提交。實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師在教務(wù)系統(tǒng)發(fā)布作業(yè),提交作業(yè)截止時(shí)間為實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的1 周,學(xué)生從系統(tǒng)提交自己的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。電子版報(bào)告跟紙質(zhì)版報(bào)告的區(qū)別主要是在實(shí)驗(yàn)步驟方面,具體為對(duì)于實(shí)驗(yàn)步驟,學(xué)生除跟紙質(zhì)版一樣有必要的文字?jǐn)⑹?,還要提供實(shí)驗(yàn)操作關(guān)鍵性的證據(jù),如消化、半微量凱氏定氮操作視頻、微量滴定終點(diǎn)的確定圖片等,學(xué)生也可以提供實(shí)驗(yàn)失敗的視頻或圖片,并就失敗原因做必要的分析。實(shí)踐證明,電子版實(shí)驗(yàn)報(bào)告更能增加學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的感性認(rèn)知,也有利于發(fā)揮學(xué)生的創(chuàng)造性;教師也可以從學(xué)生提供的圖片或視頻中發(fā)現(xiàn)存在的問(wèn)題,然后做相應(yīng)的批改,學(xué)生可以同步從平臺(tái)看到教師的批改,縮短了反饋時(shí)間,能加快師生信息交流速度,更有利于學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)知識(shí)的掌握。

7 結(jié)語(yǔ)

安全無(wú)小事,實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師要時(shí)刻繃緊安全弦。實(shí)驗(yàn)采用的微量凱氏定氮法是測(cè)定蛋白的國(guó)際法,具有其他方法不具有的精確性和應(yīng)用范圍廣的特點(diǎn),但是其危險(xiǎn)性較大,易出現(xiàn)爆裂等現(xiàn)象,給實(shí)驗(yàn)操作帶來(lái)了很多不確定性[4]。消化部分,是將加入了濃硫酸的物料加熱到340 ℃,時(shí)間長(zhǎng)達(dá)4~5 h,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量有毒氣體,還經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)物料漰出消化管的現(xiàn)象;蒸餾部分,要把加入了硫酸的自來(lái)水煮沸,學(xué)生要用蒸汽進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作,時(shí)間也長(zhǎng)達(dá)4 課時(shí),可以說(shuō)這是一個(gè)具有一定危險(xiǎn)性的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,然而又是一個(gè)能較好鍛煉學(xué)生動(dòng)手能力、顯著提升學(xué)生基本操作技能的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。開(kāi)設(shè)該實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師除具備專(zhuān)業(yè)知識(shí)外,還要具有耐心、細(xì)心和責(zé)任心,并能就實(shí)驗(yàn)中容易出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行總結(jié),就解決辦法進(jìn)行探討,才能在實(shí)驗(yàn)課開(kāi)課時(shí)候做到有的放矢,使得學(xué)生操作更具規(guī)范性,杜絕事故發(fā)生的可能性。在山東理工大學(xué)食品科學(xué)與工程專(zhuān)業(yè),該實(shí)驗(yàn)的開(kāi)設(shè)從未出現(xiàn)任何事故,也證明了這些教學(xué)措施的可取性,希望這些措施能為工科院校實(shí)驗(yàn)的開(kāi)設(shè)提供可以借鑒的經(jīng)驗(yàn)。

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