馮璐，王貫，歐陽亮

（四川大學華西醫(yī)院生物治療國家重點實驗室，四川 成都610041）

溴 結(jié) 構(gòu) 域 蛋 白（bromodomain proteins，BRDs）包含大約110個氨基酸，具有高度保守的功能結(jié)構(gòu)域，可分為8大家族，其中溴結(jié)構(gòu)域和超 末 端（bromodomain and extra-terminal，BET）家族最受關(guān)注。BET家族由4種蛋白組成，即BRD2、BRD3、BRD4和睪丸特異性含溴結(jié)構(gòu)域蛋白（testis-specific bromodomain-containing protein，BRDT）。BRD4能解讀表觀遺傳密碼，識別乙?；慕M蛋白或非組蛋白，調(diào)控骨髓細胞瘤病毒癌 基 因（cellular-myelocytomatosis viral oncogene，C-MYC）、核因子κB（nuclear factor kappa B，NFκB）、Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1（kelch-like ECH associated protein 1，KEAP1）等多條信號通路，參與DNA的復制、轉(zhuǎn)錄以及細胞周期等過程[1-2]。BRD4的表達失調(diào)可導致白血病、乳腺癌、黑色素瘤等多種腫瘤的惡性發(fā)展。作為一個重要的抗腫瘤表觀遺傳學靶標，多種BRD4小分子抑制劑和降解劑均表現(xiàn)出較好的抗腫瘤作用，其中OTX015、I-BET762以及I-BET151等已進入不同的臨床試驗階段。本文重點綜述BRD4小分子抑制劑及其降解劑的研究進展，為開發(fā)BRD4的新型抑制劑和降解劑提供參考。

1 BRD4的蛋白結(jié)構(gòu)和信號通路

BRD4是BET家族重要的功能蛋白，能識別組蛋白中乙酰化的賴氨酸，在細胞周期、細胞分化和信號轉(zhuǎn)導過程中具有重要作用。BRD4的N末端包含2個串聯(lián)的高度保守的溴結(jié)構(gòu)域，即BD1和BD2[3]。BRD4的溴結(jié)構(gòu)域由4個反向平行排列的α螺旋組成，分別是αZ、αA、αB和αC。其中，αZ和αA、αB和αC之間形成了2個疏水loop環(huán)，能特異性地結(jié)合賴氨酸乙酰化物并辨別不同的蛋白復合物（見圖1a和1b）。BD1和BD2的環(huán)狀區(qū)域在序列和長度上略有差異，有助于提高BRD4與乙?；嚢彼峤Y(jié)合的特異性[4]。BRD4的C末端包含一個超末端（extra-terminal，ET）結(jié)構(gòu)域（見圖1c），該結(jié)構(gòu)域能與組蛋白修飾因子相互作用，主要負責調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄[4]。其中，溴結(jié)構(gòu)域是BRD4能夠特異性識別乙?；嚢彼岬闹匾獏^(qū)域，其BC環(huán)和ZA環(huán)在螺旋末端形成疏水空腔，在空腔中心，乙?；嚢彼崮軌蚺cAsn140形成分子間氫鍵，并與Tyr97通過水分子介導形成分子間氫鍵，構(gòu)成了抑制BRD4的重要位點。此外，BRD4的Trp81（W81）、Pro82（P82）和Phe83（F83）能夠形成一個疏水區(qū)，即WPF，對提高BRD4的親和力具有促進作用[5-6]（見圖1d）。

DNA合成中，BRD4能參與細胞進程，促進細胞周期向S期轉(zhuǎn)化，調(diào)控Aurora B激酶和E2F，影響G1相關(guān)基因的表達[13]。在DNA損傷反應通路中，BRD4能募集condensinⅡ，重塑染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，抑制DNA的損傷[14]。炎癥反應中，BRD4的溴結(jié)構(gòu)域能與乙?；腘F-κB p65（Rel A）結(jié)合，促進NF-κB的轉(zhuǎn)錄激活以及炎癥基因IL-2、IL-8、CCL-2的表達，增加其轉(zhuǎn)錄活性[15]。在氧化應激反應中，抑制BRD4能使KEAP1通路失調(diào)，抑制HMOX1的表達和活性氧（reactive oxygen species，ROS）的生成，使氧化應激條件下細胞活性增加，發(fā)揮抗腫瘤作用[16]。此外，ET結(jié)構(gòu)域能與NSD3、JMJD6、CHD4以及ATAD5結(jié)合，在染色質(zhì)組織中具有組裝和重組等重要作用[17-18]（見圖2）。

2 BRD4與腫瘤的發(fā)生發(fā)展

作為表觀遺傳閱讀器，BRD4能激活C-MYC等多種轉(zhuǎn)錄因子，從而調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄，影響細胞周期、增殖和凋亡等生理學過程，在腫瘤細胞的浸潤、轉(zhuǎn)移以及腫瘤的惡性發(fā)展中具有重要作用。研究表明BRD4的表達上調(diào)會導致多種下游基因功能紊亂，與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。Zuber等[19]發(fā)現(xiàn)在急性髓性白血?。╝cute myelogenous leukemia，AML）中BRD4表達失調(diào)，功能紊亂。2011年，Dawson等[20]發(fā)現(xiàn)置換染色質(zhì)中的BET蛋白能抑制BCL2、C-MYC和CDK等關(guān)鍵因子的表達，對混合譜系白血病（mixed lineage leukaemia，MLL）有治療作用。2016年，Andrieu等[21]在研究BRD4在三陰性乳腺癌中的作用時發(fā)現(xiàn)，BRD4小分子抑制劑在三陰性乳腺癌中的作用機制主要與Notch信號配體Jagged1（JAG1）/Notch信號受體1（notch receptor 1，Notch1）相關(guān)。在黑色素瘤模型中BRD4抑制劑能下調(diào)S期激酶相關(guān)蛋白2（s-phase kinase associated protein 2，SKP2）、細胞外信號調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal regulated kinase 1，ERK1）和C-MYC，抑制黑色素瘤細胞的增殖以及腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移[22]。Li等[23]發(fā)現(xiàn)BRD4抑制劑JQ1能抑制C-MYC，誘導G1細胞周期停滯，抑制凋亡蛋白BCL2樣蛋白11（Bcl-2-like protein 11，BCL2L11）的表達，從而抑制肝癌細胞生長，表現(xiàn)出抗肝癌作用。BRD4的高度表達與肺癌也密切相關(guān)，BRD4抑制劑能抑制抗凋亡蛋白BCL2，與BCL2抑制劑聯(lián)合使用能誘導小細胞肺癌細胞凋亡[24]。

綜上所述，BRD4的表達上調(diào)會導致其下游基因表達異常，在白血病、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、肺癌等腫瘤的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。BRD4是重要的調(diào)控表觀遺傳的腫瘤相關(guān)蛋白，并且其小分子抑制劑具有良好的抗腫瘤作用。因此，開發(fā)抑制BRD4的小分子化合物是該領(lǐng)域的研究方向之一，為腫瘤治療提供了新的選擇。

3 BRD4小分子抑制劑

BRD4小分子抑制劑能下調(diào)C-MYC等多種轉(zhuǎn)錄因子，具有良好的抗腫瘤效果。因此，尋找BRD4的小分子抑制劑具有重要意義：一方面為全面深入研究BRD4抑制劑在不同腫瘤中的作用機制提供新分子；另一方面為多種惡性腫瘤的治療提供候選化合物。BRD4小分子抑制劑與溴結(jié)構(gòu)域有高度的親和性，按照其結(jié)合方式可分為2類，即單價抑制劑和二價抑制劑。目前，BRD4小分子抑制劑的研究主要集中于單價抑制劑。單價BRD4抑制劑能與BD1或BD2結(jié)合，根據(jù)其化學結(jié)構(gòu)的特征主要分為：三氮唑類、異唑類、喹啉酮類、吡啶酮類以及四氫喹啉類等。二價抑制劑能同時與BD1和BD2結(jié)合，親和力較高。本文將針對2類BRD4小分子抑制劑的研究進行綜述。

3.1 單價抑制劑

3.1.1 三氮唑類JQ1（1）是通過高通量篩選發(fā)現(xiàn)的首個BRD4單價抑制劑，屬于三氮唑類化合物[7]。共晶結(jié)果表明，JQ1通過甲基三唑基團和Asn140形成了氫鍵，噻唑環(huán)伸展于疏水的ZA環(huán)，苯環(huán)位于WPF疏水區(qū)，完全占據(jù)了BRD4的乙?；嚢彼峤Y(jié)合位點（見圖3）。JQ1對BD1的IC50為77 nmol · L-1，平衡解離常數(shù)（Kd）為50 nmol · L-1。在多發(fā)性骨髓瘤模型中，JQ1能抑制轉(zhuǎn)錄因子C-MYC，表現(xiàn)出較強的抗腫瘤作用[25]。因此，JQ1的發(fā)現(xiàn)表明BRD4小分子抑制劑在腫瘤治療中具有較大的潛力。

為改善JQ1半衰期較短、用量和毒性較大的問題，研究人員對JQ1進行優(yōu)化，并報道了多種三氮唑類BRD4小分子抑制劑，如OTX015（2）、CPI203（3）和MS417（4）。其 中，OTX015能抑制BRD4和C-MYC，并已進入臨床試驗階段（NCT02698189/NCT02698176/NCT01713582/NCT02259114）[26-27]。CPI203的IC50為37 nmol · L-1，與來那度胺聯(lián)用能下調(diào)C-MYC和IRF4，誘導細胞凋亡[28]。MS417對BD1的IC50為30 nmol · L-1，Kd為36.1 nmol · L-1[29]。

2013年，葛蘭素史克公司通過表型篩選發(fā)現(xiàn)載脂蛋白A1（apolipoprotein A1，ApoA1）的調(diào)節(jié)劑化合物5對BRD4的pIC50為6.3，并且研究表明ApoA1的上調(diào)是由BET蛋白介導的[30]。隨后以化合物5為先導化合物，將氨基甲酸酯基團替換為酰胺，在2個苯環(huán)上分別引入氯原子和甲氧基，并用乙基取代芐基，發(fā)現(xiàn)了具有優(yōu)異理化性質(zhì)的I-BET762（GSK525762，6）?；衔?的pIC50為6.2，代謝穩(wěn)定性增強，溶解度提高，生物利用度良好，并與Asn140形成了關(guān)鍵的氫鍵（見圖4）。目前，I-BET762已進入臨床試驗階段（NCT01943851/NCT01587703/NCT02964507）[31]。此外，三氮唑類化合物7與JQ1的結(jié)合模式相似，并能下調(diào)IL-6的表達[32]。

對于清代文獻傳承而言，朱彝尊編撰、整理之著述，大大豐富了古代文獻的內(nèi)容。朱氏也以其繁富之著述，躋身清初文獻大家之列。其著述以編撰為主，因此對于保存前人著述，尤其是易代人物之著述，功不可沒。隨著時間的推移，許多古人著述或見解因水火兵燹而逐漸淪亡、散佚，幸而能于朱氏著述中，存其大體或部分片段，使今人尚得以管窺一二。執(zhí)此以論，朱彝尊對于保存、傳承文獻而言，可謂成就斐然。茲舉一例：《經(jīng)義考》卷二百一十一論語類“《古論語》”一條，引“譚貞默曰”：

異唑類BRD4小分子抑制劑研究最多的是I-BET151（8，NCT02630251）[34]。I-BET151的異唑的氧原子與Asn140形成了關(guān)鍵的氫鍵，2-甲基吡啶與WPF疏水區(qū)形成范德華力（見圖5）。I-BET151與BET家族的親和力高，Kd小于100 nmol · L-1。I-BET151能夠抑制BD1，IC50為790 nmol · L-1，在MLL-AF9和MLL-AF4小鼠模型中表現(xiàn)出顯著的抗白血病作用[35]。此外，I-BET151能降低炎癥因子IL-6的水平，具有抗炎作用。

2013年，Hay等[36]發(fā)現(xiàn)了選擇性的BRD4小分子抑制劑9，其IC50為790 nmol · L-1。2014年，Engelhardt等[37]發(fā)現(xiàn)化合物10能抑制BD1，其IC50為14 nmol · L-1。Aktoudianakis等[38]發(fā)現(xiàn)化合物11對BD1具有抑制活性，其IC50為12.9 nmol · L-1。此外，化合物11還能下調(diào)C-MYC，EC50為13.2 nmol · L-1。

2016年，Albrecht等[39]發(fā)現(xiàn)異唑類BRD4抑制劑CPI0610（12）抑制BD1的IC50為39 nmol · L-1，藥代動力學參數(shù)理想。Hewitt等[40]以CPI0610的結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)引入了乙酰胺取代的吡唑環(huán)，生成了化合物13。共晶結(jié)果表明，化合物13的二甲基異唑的氧與Asn140的氨基形成了氫鍵，氮原子與Tyr97的苯酚通過水分子相互作用，甲基與WPF疏水區(qū)相互作用。

3.1.3 喹啉酮類喹啉酮類的代表性化合物是輝瑞公司研發(fā)的PFI-1（14）[41]。PFI-1喹啉酮的羰基和氮能與Asn140形成氫鍵，羰基與Tyr97形成由水分子介導的氫鍵，磺酰胺的NH通過水分子介導與ZA環(huán)的Val87形成氫鍵（見圖6）。PFI-1對BD1的IC50為220 nmol · L-1，能抑制白血病細胞的增殖，影響白血病細胞周期，下調(diào)C-MYC，誘導白血病細胞凋亡和分化。但PFI-1藥代動力學特征差，半衰期短，生物利用度低，僅為32%。PFI-1還能顯著下調(diào)激酶Aurora B，Aurora B的活性與C-MYC的功能相關(guān)。

3.1.4 吡啶酮類2017，Mcdaniel等[43]發(fā)現(xiàn)ABBV-075（15，NCT02391480）與BRD4結(jié)合 的Ki為1.5 nmol · L-1，在AML小鼠模型中抗腫瘤活性和耐受性較好。ABBV-075能抑制腫瘤細胞的增殖，EC50為13 nmol · L-1。此外，ABBV-075藥代動力學特征良好，口服生物利用度為50%，半衰期（T1/2）為25 h。2017年，Wang等[44]基于NMR片段篩選發(fā)現(xiàn)了新型的吡啶酮類化合物16?；衔?6與BRD4的親和力高，Ki為1.5 nmol · L-1，EC50為5.6 nmol · L-1。共晶結(jié)果表明，化合物16的吡啶酮的羰基和BRD4溴結(jié)構(gòu)域BD2的Asn433形成了氫鍵，碳環(huán)位于WPF疏水區(qū)，磺酰胺和Asp381相互作用。

3.1.5 四氫喹啉類2014年，葛蘭素史克公司開發(fā)了一種新的、有選擇性的四氫喹啉類BRD4小分子抑制劑I-BET726（GSK1324726A，17）[45]。共晶結(jié)果表明，I-BET726的N1乙?；cAsn140的氨基形成第1個氫鍵，并通過水分子介導與Tyr97形成了第2個氫鍵（見圖7）。此外，I-BET726的N1乙?；募谆紦?jù)了水分子與Phe83所形成的口袋，C2甲基占據(jù)了ZA環(huán)中Leu110附近的疏水空腔，與Leu94直接接觸，氯苯基與WPF疏水區(qū)結(jié)合。I-BET726具有高度的選擇性和親和性，表面離子體共振實驗中的Kd為23 nmol · L-1，等溫滴定量熱法中的Kd為4.4 nmol · L-1。I-BET726能下調(diào)BCL2和骨髓細胞瘤病毒癌基因神經(jīng)母細胞瘤衍生同源基因MYCN，強烈抑制神經(jīng)細胞瘤細胞系的增殖，IC50為75 nmol · L-1[46]。

3.1.6 其他BRD4小分子單價抑制劑2016年，Li等[47]發(fā)現(xiàn)了新的苯二氮?酮類BRD4小分子抑制劑18。在白血病細胞中化合物18表現(xiàn)出顯著的抗增殖活性，并能通過線粒體途徑誘導細胞凋亡。分子對接表明，化合物18與Gln85形成了氫鍵，并與Phe83、Val87、Leu92、Cys136和Ile146形成了疏水作用。2017年，Ouyang等[48]發(fā)現(xiàn)在乳腺癌中自噬相關(guān)蛋白腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）顯著下調(diào)，并設(shè)計了一種高效的選擇性的BRD4小分子抑制劑19?；衔?9能阻斷BRD4與AMPK的相互作用，激活乳腺癌細胞中AMPK-雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）-UNC-51-樣激酶1（UNC-51-like kinase 1，ULK1）自噬通路，誘導自噬相關(guān)基因-5（autophagy related gene-5，ATG5）依賴的自噬相關(guān)細胞死亡。在乳腺癌小鼠和斑馬魚模型中，化合物19具有可觀的治療作用，為乳腺癌的治療提供了有希望的候選化合物。

3.2 二價抑制劑

目前針對BRD4已開發(fā)出多種小分子抑制劑，但主要集中于抑制單一的溴結(jié)構(gòu)域，選擇性不高，抗腫瘤效果也有限。而且BRD4小分子抑制劑出現(xiàn)了耐藥性的問題。為克服單價抑制劑的耐藥問題，發(fā)展了二價抑制劑，與單價抑制劑相比，二價抑制劑的親和力大，抑制效率高，是實現(xiàn)與目標蛋白有效結(jié)合的一種新策略。因此，也是研發(fā)BRD4小分子抑制劑研究熱點之一。

2016年，Bradbury等[49]對雄激素受體調(diào)節(jié)劑AZD3514（20）進行結(jié)構(gòu)優(yōu)化時，發(fā)現(xiàn)BRD4二價抑制劑21對BRD4的溴結(jié)構(gòu)域BD1和BD2有較強的抑制作用，pKd分別為7.2和6.1[49-50]。為提高化合物21與乙?；嚢彼岬慕Y(jié)合能力，在結(jié)構(gòu)中引入了三氮唑吡啶基團，得到了化合物22和23（AZD5153)。與化合物21相比，化合物22的抗增殖活性提高，抑制BD1和BD2的pKd分別為8.1和7.3。AZD5153的哌嗪環(huán)的羰基和三唑環(huán)的氮與Asn140形成了氫鍵（見圖8）。AZD5153的IC50為5 nmol · L-1，能顯著抑制C-MYC，藥代動力學特征良好，并已進入臨床試驗階段（NCT03205176）[51]。

2016年，Tanaka等[52]將2個JQ1分子用聚乙二醇鏈連接在一起，設(shè)計了一種分子內(nèi)的BRD4二價抑制劑MT1（24）。與JQ1相比，MT1能顯著延遲白血病的進展，抗腫瘤活性提高，主要與其對BRD4的二聚能力有關(guān)。此外，在濃度為100 nmol · L-1時MT1能顯著抑制C-MYC，上調(diào)環(huán)六亞甲基二乙酰胺誘導蛋白（hexamethylene bis-acetamide inducible 1，HEXIM）的表達。

4 BRD4蛋白降解劑

BRD4在多種惡性腫瘤的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中具有重要作用，是具有可觀前景的腫瘤治療靶標。但Winter等[53]認為小分子抑制劑會破壞目標蛋白的區(qū)域活性，而且研究表明BRD4抑制劑會導致BRD4蛋白在體內(nèi)大量積累，抑制效率降低。重要的是，BRD4小分子抑制劑的耐藥問題使其無法在臨床上發(fā)揮理想的腫瘤治療作用。因此，開發(fā)有效的多結(jié)構(gòu)域蛋白的小分子抑制劑具有較大挑戰(zhàn)性。2001年，Sakamoto等[54]提出了蛋白水解靶向嵌合體（proteolysis-targeting chimeras，PROTACs）的概念。PROTACs包含3個組成部分：目標蛋白特異性配體、E3泛素連接酶配體和連接配體的Linker。PROTACs通過設(shè)計雙功能分子靶向目標蛋白和E3泛素連接酶，從而促進E3連接酶將目標蛋白泛素化，并通過蛋白酶體降解。因此，與傳統(tǒng)的小分子抑制劑相比，PROTACs不僅能作用于非藥物靶點，降解目標蛋白，還能克服耐藥性問題，為臨床提供了一種新的思路。靶向BRD4的PROTACs主要分為2類：第一種是募集E3泛素連接酶Cereblon（CRBN）的蛋白降解劑，主要是基于沙利度胺衍生物的設(shè)計；另一種是募集E3泛素連接酶Von Hippel-Lindau（VHL）的蛋白降解劑，主要是基于VHL配體的設(shè)計。本文將對這2類BRD4蛋白降解劑進行綜述。

4.1 募集E3泛素連接酶CRBN的PROTAC

2015年，Winter等[53]將沙利度胺衍生物與BRD4抑制劑JQ1相連接，設(shè)計了一種募集CRBN的降解劑dBET1（25）。與JQ1相比，dBET1在體內(nèi)外均能選擇性地誘導BRD4的降解，在濃度低至100 nmol · L-1時可以完全降解MV4-11白血病細胞中的BRD4，并顯著抑制C-MYC的轉(zhuǎn)錄。在AML小鼠模型中，dBET1能降解BRD4，下調(diào)C-MYC，延緩小鼠白血病的進展。

2017年，Bai等[55]通過聚乙二醇的柔性鏈連接了來那度胺和BRD4抑制劑HJB97，設(shè)計了第2代BRD4的降解劑BETd-246（26）。BETd-246選擇性高，在三陰性乳腺癌細胞中IC50小于10 nmol · L-1，并能導致生長抑制和細胞凋亡。BETd-246誘導BRD4降解的關(guān)鍵下游因子是髓細胞白血病基因1（myeloid cell leukemia 1，MCL1）。Zhou等[56]對BETd-246進一步優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)與BETd-246相比，BETd-260（27）在乳腺癌MDA-MB-231和MDA-MB-468異種移植模型中的抗腫瘤活性提高。

基于CRBN配體的BRD4蛋白降解劑還包括ARV-825（28）和QCA-570（29）[57-58]。ARV-825對BD1和BD2的Kd分別為90和28 nmol · L-1，在半數(shù)降解濃度（DC50）小于1 nmol · L-1時能抑制細胞增殖，并誘導細胞凋亡。QCA-570可以有效地誘導BET蛋白的降解，在小鼠白血病異種移植模型中，能實現(xiàn)腫瘤完整和持久的消退，并且沒有明顯的毒性。ARV-771還能抑制雄激素受體（androgen receptor，AR）的表達水平，誘導腫瘤部分消退。此外，基于VHL配體的BRD4蛋白降解劑還有MZP-54（31）、MZ1（32）等，均能有效降解BRD4[60-61]。

4.2 募集E3泛素連接酶VHL的PROTAC

2016年，Raina等[59]發(fā)現(xiàn)ARV-771（30）在去勢抵抗性前列腺癌模型中表現(xiàn)出明顯的抗腫瘤作用，DC50小于50 nmol · L-1時能顯著誘導BRD4的降解，并且在IC50小于1 nmol · L-1時C-MYC蛋白降解完全。

5 結(jié)語與展望

BRD4參與細胞增殖、細胞凋亡、染色質(zhì)的組裝與重組、炎癥反應以及氧化應激等多種生理學過程，是基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵因子。雖然研究表明BRD4在白血病、乳腺癌、黑色素瘤等多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中具有關(guān)鍵作用，且部分BRD4抑制劑在惡性腫瘤的臨床試驗中取得了一定成效，但BRD4在不同腫瘤中的作用機制、耐藥機制仍需多組學的全面研究。BRD4單價抑制劑僅能抑制單一的溴結(jié)構(gòu)域，結(jié)構(gòu)改造較為單一，抑制效率和抗腫瘤效果受限。二價抑制劑雖提高了抑制效率和抗腫瘤效果，但主要是通過柔性Linker連接了2種單價抑制劑，相對分子質(zhì)量大，成藥性差。PROTAC的出現(xiàn)為解決BRD4小分子抑制劑的耐藥問題提供了新的策略。與小分子抑制劑相比，BRD4蛋白降解劑能降解靶蛋白，抗腫瘤活性更強。但BRD4蛋白降解劑分子量大，理化性質(zhì)較差，生物利用度低。因此，仍然有必要且存在較大的空間研發(fā)結(jié)構(gòu)多樣的BRD4的小分子抑制劑、PROTACs蛋白降解劑或雙靶抑制劑，一方面為研究BRD4的作用機制、耐藥機制提供不同化學類型的BRD4抑制劑；另一方面，為以BRD4為靶點的腫瘤治療帶來新希望。